苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白基因工程研究进展

概述苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白的结构、功能及其基因分类,综述苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白的基因工程研究及应用。     

苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白基因的研究进展

从Bt基因的分类、结构和特性、杀虫机理、在农业上的应用及昆虫对Bt产生抗性的机制等方面进行了论述。     

苏云金杆菌杀虫晶体蛋白基因crylA的克隆及特征分析

苏云金芽孢杆菌猝倒亚种(Bacillus tburingiensis subsp sotto)对鳞翅目幼虫有高毒力。根据crylA类基因序列设计特异引物，应用PCR技术从该茁株中扩增得到一大小约为3．6kL的DNA片段。将获得的片段克隆至pGEM7zf中并转化大肠杆菌DH5α。在ABI PRISM377自动测序仪上对其5’及3’端进行部分测字，结果表明其核苷酸序列与crylA基因高度同源。     

一株高毒苏云金杆菌的晶体蛋白组成及RAPD分析

筛选得到一株对摇蚊幼虫高毒的苏云金芽孢杆菌以色列亚种菌株(命名为SZ6),利用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和RAPD技术分析了其晶体蛋白和总DNA组成,结果表明:在晶体蛋白提纯中,固体培养基培养的菌株晶体蛋白比液体摇瓶培养的更易用双液相法提纯;晶体蛋白亚基在分子量上和标准菌株的晶体蛋白没有显著差异,都含有4条多肽(分子量分别为135、128、72和27KD),但RAPD分析结果显示,该毒株在DNA组成上,于多个位点处存在与标准菌株不同的结构。     

苏云金杆菌杀虫晶体蛋白基因cry1A的克隆及特征分析

苏云金芽孢杆菌猝倒亚种(Bacillus thuringiensis subsp.sotto)对鳞翅目幼虫有高毒力.根据cry1A类基因序列设计特异引物,应用PCR技术从该菌株中扩增得到一大小约为3.6kb的DNA片段.将获得的片段克隆至pGEM7zf中并转化大肠杆菌DH5α.在ABI PRISM377自动测序仪上对其5′及3′端进行部分测序,结果表明其核苷酸序列与cry1A基因高度同源.     

苏云金芽胞杆菌及其杀虫晶体蛋白基因资源的研究进展

介绍了苏云金芽胞杆菌的一般特性、分类鉴定与分布以及其杀虫晶体蛋白基因的分类、在苏云金芽胞杆菌中的定位及鉴定方法,并对苏云金芽胞杆菌及其基因资源的应用前景作了展望.     

苏云金芽胞杆菌BRC-HZP7杀虫晶体蛋白多样性分析

分离自武夷山土壤的苏云金芽胞杆菌BRC-HZP7菌株对小菜蛾和甜菜夜蛾幼虫有较好的毒杀作用.对该菌株进行了生理生化测定、cry基因的PCR-RFLP检测,以及通过SDS-PAGE检测晶体蛋白,并对蛋白点进行肽段指纹图谱鉴定.结果表明该菌株含有cry1Aa、cry1 Ba、cry1 Ia、cry2Ab、cry2Ac、cr...     

亚致死剂量苏云金杆菌蜡螟亚种晶体蛋白对大蜡螟幼虫肠道消化…

本文研究了亚致死剂量苏云金杆菌蜡螟亚种晶体蛋白对大蜡螟幼虫肠道消化酶（蛋白酶、胰蛋白酶、淀粉酶）活性的影响。结果表明，经晶体蛋白处理后大蜡螟幼虫肠道蛋白酶和胰蛋白酶比活力均下降。电泳分析表明，演粉酶两种同功酶的活力均增强，蛋白酶各同功酶活力均下降。     

苏云金芽孢杆菌达姆斯塔特亚种新菌株Btd61的鉴定及其晶体蛋白基因型的初步分析

用选择性培养基从舞毒蛾（Ｌｙｍａｎｔｒｉａｄｉｓｐａｒ）死虫体中分离到苏云金芽孢杆菌新菌株Ｂ－６１，经分类鉴定属苏云金芽孢杆菌达姆斯塔特亚种（Ｂａｃｉｌｌｕｓｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓｓｕｂｓｐ．ｄａｒｍｓｔａｄｉｅｎｓｉｓ），简称Ｂｔｄ６１．该菌株有８种质粒，４种晶体蛋白，合成二锥体小晶体和不规则大晶体２种伴孢晶体颗粒，对大蜡螟（Ｇａｌｅｒｉａｍｅｌｏｎｅｌａ）和舞毒蛾皆具强毒性．Ｂｔｄ６１携带Ｂ１型的溶原性噬菌体，但又对Ｂ１型的Ｔｂ１０噬菌体有抗性．Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交实验结果表明Ｂｔｄ６１所含的晶体蛋白基因属ｃｒｙⅠ基因型     

转苏云金杆菌杀虫晶体蛋白基因抗虫水稻的GUS和PCR辅助选择

报道了转基因抗虫水稻克螟稻1号（Ts-9)与非转基因恢复系川恢949、H97810－17及保持系212B等杂交F3代的GUS和PCR检测。GUS检测的结果，Ts-9与非转基因川恢949、97810－17杂交F2代有较多的GUS阳性植株。GUS阴性植株与阳性植株的分离比约为2：1。用设计合成的一对引物进行PCR扩增的结果，大部分GUS检测呈阳性的植株及一个保持系212B与Ts-9杂交F3代植株获得了大小约1200bp的PCR产物，即cryIA(b)基因片段。试验结果表明PCR是比GUS叶片染色更为灵敏、准确、方便的检测方法。     

苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白基因cry1E的改造

利用ＰＣＲ片段延伸连接技术将ｃｒｙ１Ｅ的原启动子准确地更换与ｃｒｙ３Ａ启动子,重组ｃｒｙ１Ｅ经载体ＰＨＴ３１５克隆至枯草芽胞杆菌无芽胞突变株ＩＳ８和苏云金杆菌以色列亚种无晶体突变株４Ｑ７,获得重组菌３Ａ１ＥＢｓ和３Ａ１ＥＢｔ。聚丙烯酰胺凝胶电泳和生物测定表明,克隆改造后的ｃｒｙ１Ｅ可表达,表达的Ｃｒｙ１Ｅ对海灰翅夜蛾有毒。     

苏云金芽孢杆菌杀虫蛋白基因定位研究进展

苏云金芽孢杆菌是目前应用最广泛的杀虫微生物,其活性成分主要是杀虫晶体蛋白、营养期杀虫蛋白和几丁质酶等,本文对编码这些蛋白的基因的定位作一综述,有助于进一步研究基因结构、功能、表达和调控.     

枯草芽孢杆菌和苏云金芽孢杆菌的共培养及其对生物活性物质产生的影响

研究了枯草芽孢杆菌Bs5 5和Bs90菌株分别与苏云金芽孢杆菌Bt1和Bt2菌株在共培养条件下的菌体生长、抗菌活性物质脂肽类化合物和杀虫活性物质伴孢晶体蛋白的产生状况。结果表明 ,Bs5 5与Bt共培养的菌体生长和脂肽类化合物的产生与单独培养的Bs5 5相似 ,未检测到伴孢晶体蛋白 ,但有Bt特异性蛋白存在 ;Bs90与Bt共培养的菌体生长和脂肽类化合物的产生与单独培养的Bs90有相对较大的差别 ,检测到伴孢晶体蛋白。说明Bs与Bt可以共生 ,组合适当时可以产生各自的生物活性物质     

植物Bt抗虫基因工程研究进展

本文概述了苏云金芽孢杆菌的分类,杀虫蛋白的特性,杀虫蛋白与基因型之间的关系,Bt杀虫蛋白基因在植物抗虫基因工程中的应用;讨论了它在植物Bt抗虫基因工程研究中存在的问题及其解决的途径,并提出了今后可能发展的方向。     

γ-氨基丁酸代谢旁路阻断对苏云金芽胞杆菌芽胞形成和晶体蛋白产量的影响

γ-氨基丁酸旁路(GABA shunt)普遍存在于原核和真核生物体中,对于动物、植物和微生物具有不同的生理功能.苏云金芽胞杆菌gab基因簇中gabT和gabD基因所编码的γ-氨基丁酸转氨酶和琥珀酸半醛脱氢酶参与GABA shunt.在前期研究获得的苏云金芽胞杆菌HD-73菌株gabT、gabR(gab基因簇中的调控基因)和gabD基因缺失突变菌株的基础上,从菌株生长、芽胞产量和晶体蛋白产量等方面研究GABA shunt阻断对Bt芽胞和晶体形成的影响.结果表明,GABA shunt阻断对芽胞产量有一定影响,但对Bt生长和晶体蛋白产量无明显影响     

苏云金芽孢杆菌伴孢晶体的研究进展

伴胞晶体是苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,简称Bt)在芽孢形成过程中产生的一种蛋白晶体。作为生物杀虫农药之一,伴胞晶体/Bt由于具有高效、广谱、环保及生物安全等优势,在农林业中得到广泛应用。介绍了伴胞晶体的最新分类、命名情况,综述了其结构、杀虫机理及应用方面的研究进展,并对Bt生物农药的发展前景进行了展望。     

苏云金杆菌液体剂型的研制

用凯松ＣＧ和尼泊金甲酯作复合防腐剂,吐温－２０作湿润展着剂,木质素磺酸钠和山梨醇作紫外光防护剂,人工甜味剂作昆虫食欲促进剂,油酸作杀虫增效剂,研制出了高效、稳定的苏云金杆菌液体剂型。在一年的正常存放试验中,液剂效价保持率８９％。加速降解试验表明,４５℃条件存放２５ｄ,液剂效价保持率为７３％。在紫外光照射下,当新研制的剂型效价保持率为９０．２％时,对照保持率仅为３６．６％。     

苏云金芽胞杆菌剂型研究进展

苏云金芽胞杆菌是目前世界上应用最广的微生物杀虫剂,剂型加工与药效发挥有直接关系.综述了近十年来国内外剂型的研究进展.