苯并咪唑氨基甲酸酯类药物抗猪囊尾蚴的作用靶点

 【目的】研究苯并咪唑氨基甲酸酯类抗囊药物对猪带绦虫囊尾蚴的作用靶点，为药物的类型衍化和新药开发提供理论依据。【方法】测定体外培养的和猪体内的囊尾蚴于阿苯哒唑和奥芬哒唑分别作用后能量代谢途径物质含量及其关键酶活性变化。【结果】阿苯哒唑和奥芬哒唑对体外培养猪六钩蚴、未成熟期和成熟期猪囊尾蚴，以及体内发育未成熟期和成熟期猪囊尾蚴的糖无氧分解途径、丙酮酸羧化支路与逆向三羧酸循环途径均有一定程度抑制作用，代偿性促进糖异生及蛋白质、脂类和核酸分解途径，葡萄糖吸收受阻。阿苯哒唑和奥芬哒唑体外非竞争性抑制延胡索酸还原酶复合体活性。【结论】并咪唑氨基甲酸酯类抗囊药物非竞争性抑制猪囊尾蚴FR复合体活性，抑制葡萄糖的摄取。     

The Target of Benzimidazole Carbamate Against Cysticerci cellulosae

To study the target of benzimidazole carbamate drugs against Cysticerci cellulosae and give a theoretical basis for type evolution and new drug design, the changes of key enzyme activities and metabolite contents in the pathway of energy metabolism in C. cellulosae in vitro and in vivo were tested with albendazole and oxfendazole, respectively. Both albendazole and oxfendazole inhibited the pathways of anaerobic glycolysis, partial inversed tricarboxylic acid cycle of Taenia Solium oncosphere, immature and mature Cysticerci in vitro, and immature and mature Cysticerci in vivo to a certain degree, and enhanced fat decomposing, amino acid decomposing, xanthine decomposing metabolism, and on the other hand, the absorption of glucose was hindered; furthermore, both albendazole and oxfendazole inhibited the activities of the fumaric reductase （FR） complex noncompetently in vitro. Benzimidazole carbamate drugs could inhibit the activities of FR complex noncompetently and hinder the absorption of glucose.     

Effects of Monoclonal Antibody Against Adipocyte-Specific Membrane Protein on Lipid Metabolism in Pigs

This study was to investigate the regulation of monoclonal antibodies against adipocyte membrane proteins （McAb） on lipid metabolism in pigs. Forty Landrace x Saba pigs were randomly divided into eight groups; the control group was given 10 mL saline and the treat groups were given monoclonal antibody against adipocyte-specific membrane protein with 0.1, 0.5, and 1.0 mg kg-I body weight at 15 and 60 kg body weight, respectively, by intraperitoneal injection. The results showed that McAb could increase, significantly, serum lipoprotein lipase activity and reduce serum nonesterified fatty acid （NEFA） content. Meanwhile, McAb increased content of serum lipid, triglyceride （TG）, cholesterol （CHO）, high density lipoprotein （HDL）, and low density lipoprotein （LDL） both at 15 and 60 kg body weight. However, McAb affected more significantly the lipid metabolism at 15 kg body weight than at 60 kg body weight. Moreover, this effect of McAb on lipid metabolism exhibited dose-dependent effect. These results suggested that this monoclonal antibody increased lipase activity, promoted lipolysis, and utilization of lipid so that McAb could be applied to restrain excessive fat deposition in porcine production through the regulation of fat metabolism.     

抗脂肪细胞特异膜蛋白单克隆抗体对猪内分泌代谢的影响*

 通过动物试验测定抗脂肪细胞特异膜蛋白单克隆抗体对猪内分泌代谢的影响。结果表明：给15kg仔猪阶段腹腔注射0.1,0.5和1.0mg/kg体重抗体后，血浆Ins含量不同程度降低，注射1.0mg/kg体重抗体Ins含量与对照组差异显著（P＜0.05）；血浆T₃,T₄,GH,IGF-I含量不同程度提高，注射1.0mg/kg体重抗体这些指标的含量与对照组差异显著（P＜0.05）；给60kg肥育猪腹腔注射抗体后，血浆Ins,T₃,T₄,GH,IGF-I的变化趋势与仔猪相同，但变化幅度不如仔猪明显。表明抗脂肪细胞特异膜蛋白单克隆抗体可降低血浆Ins含量，提高血浆T₃,T₄,GH,IGF-I水平，对猪内分泌代谢有明显调节作用。     

建立猪囊尾蚴细胞系的研究

为建立具有免疫原性的猪囊尾蚴细胞系,试验对猪囊尾蚴细胞进行了体外培养,并将建立的细胞系命名为猪囊尾蚴CC-97免疫细胞系。猪囊尾蚴细胞原代培养30d后形成单层细胞,然后将单层细胞以1：2分种率传代培养,相隔7d传代一次,连传24代。结果表明：光镜下观察发现,细胞系由3种类型细胞组成,以椭圆形细胞占优势,梨形、球形细胞数量接近。放射自显影法测定细胞分裂情况,3H—TdR显示细胞生长指数,结果均表明,细胞对数增殖期长达7d,细胞从12h开始倍增分裂,第四、五天相继达到倍增分裂高峰,细胞增殖率达11倍,增量达6．32X10^（9）／L,后来达到1：37的分种率,细胞数为3．7X10^（10）／L;细胞周期约为32h,细胞系以二倍体细胞为主,染色体有10对2条,细胞蛋白质组分有30个区带,酯酶同工酶谱显示一条区带,分子量约32kDa;细胞系经荧光抗体检测表明,与猪囊尾蚴具有同源性,致肿瘤性与外源污染检验均为阴性。结果提示,建立的猪囊尾蚴细胞系是一个形态均一、生长旺盛、遗传性稳定、免疫原性高、无污染、无致肿瘤性、与猪囊尾蚴同源的生物学新品系。     

三种桃砧木的离体快繁技术研究

以红花山桃、筑波5号、光核桃茎段为外植体,研究了不同消毒方法、取材时间对外植体萌芽率的影响,不同基本培养基、不同激素种类和浓度对腋芽增殖及生根的影响.外植体消毒和取材时间试验结果表明,3种砧木以75%酒精浸洗30s,0.1%HgCl2+吐温浸洗7 min,清水冲洗6次,外植体萌芽率最高;外植体的取材时间对萌芽率影响较大,红花山桃、筑波5号分别于3～4月份和4～5月取材时,萌芽率较高,而光核桃在3～6月取材时萌发率均无显著差异.增殖培养条件筛选发现:红花山桃和光核桃的最佳增殖培养基类似,在LP+6-BA1.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L培养条件下增殖系数较高,且试管苗生长健壮;而筑波5号的最佳增殖培养基为MS+6-BA 2.0mg/L+IBA 0.2 mg/L;3种砧木在筛选出的培养条件下,均随着继代次数的增加增殖系数增加.生根培养条件筛选发现,红花山桃和光核桃的生根条件为1/2MS+IAA 1.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L,但筑波5号生根困难.     

大豆异黄酮对人工瘤胃代谢的影响

采用静态人工瘤胃体外培养方法,研究不同质量浓度的2种大豆异黄酮(大豆黄酮和染料木素) 对瘤胃微生物代谢的影响.结果表明:当培养液中大豆异黄酮为100 mg·L-1时,大豆黄酮能使瘤胃液中氨氮含最升高2.2 mg·L-1(P<0.05) ,微生物蛋白含量提高20.0 Ixg·mL-1(P<0.05) ,总挥发性脂肪酸浓度上升2.7 mmol·L-1(P<0.05) ,丙酸/乙酸值为0.74,表明大豆黄酬能促进瘤胃微生物的氮代谢与糖代谢.100 mg·L-1的染料木素使瘤胃液中微生物蛋白含量提高36.8 μg-mL-1(P<0.01) ,乙酸比例升高11.4%(P<0.01) ,丙酸比例下降7.4%(P<0.01) ,丁酸比例下降10.2%(P<0.05) ,表明染料木素促进了瘤胃微生物的氮代谢,瘤胃发酵类型有向乙酸型转变的趋势.     

猪体内囊尾蚴发育过程中能量代谢酶组织化学观察

采用酶组织化学技术半定量观察猪体内囊尾蚴发育过程中乳酸脱氢酶 (L DH)、琥珀酸脱氢酶 (SDH)、谷氨酸脱氢酶 (GDH)、三磷酸腺苷酶 (ATPase)、酸性磷酸酶 (ACP)、碱性磷酸酶 (AKP)、6 -磷酸葡萄糖酶 (G6 Pase)、黄嘌呤氧化酶 (XOD)、脂酶 (FE)活性的变化。结果表明 ,随虫体发育 SDH,FE,ACP,AKP,ATPase活性升高 ,L DH,GDH,XOD无明显变化 ,未显示 G6 Pase活性。结果揭示随虫体生长发育糖类与脂类分解产生能量的代谢通路及物质转运途径增强 ,乳酸酵解、氨基酸分解、核苷酸分解途径无明显变化 ,虫体可能不具有糖异生作用。     

甜菜碱盐酸盐对人工瘤胃发酵参数的影响

采用人工瘤胃体外发酵方法对培养液中甜菜碱盐酸盐不同质量浓度(0、16.7和33.4 mg.L-1)下,各时间段(3、6、12、18和24 h)的体外产气量、pH值、干物质降解率、氨态氮(NH3-N)、挥发性脂肪酸(VFA)、乳酸和菌体蛋白含量的测定,探讨甜菜碱盐酸盐对人工瘤胃发酵功能的影响。结果显示:培养液中甜菜碱盐酸盐的质量浓度为33.4 mg.L-1时,瘤胃液中乙酸、丙酸、丁酸、总VFA的浓度显著升高(P<0.01),干物质降解率显著提高(P<0.01),乳酸浓度显著降低(P<0.05);而甜菜碱盐酸盐对瘤胃液pH值、产气量、菌体蛋白含量、NH3-N浓度无显著影响。结论:甜菜碱盐酸盐可改善人工瘤胃发酵性能。     

草莓瘦果离体培养对种子发芽率的影响

以草莓栽培品种“硕香”和黄毛草莓、森林草莓、西藏草莓等野生种的瘦果进行离体培养试验 ,结果表明 :采用切开瘦果的方法进行离体培养可提高种子发芽率 ,且在培养 10d后发芽率即达到最高值 ;不同激素浓度配比的MS培养基对草莓种子发芽率影响不大 ;栽培品种在培养基上作离体培养优于在湿滤纸上的培养 ;草莓离体培养的发芽率与基因型有关 ,栽培品种与野生种存在显著差异 ;用花后 2 1d的鲜果作切开瘦果离体培养时发芽率即接近 10 0 % ,花后 7d果实的瘦果培养也获得了少量再生植株     

激素对2种红豆杉离体胚培养的影响

研究了不同浓度的6-BA、GA3、和BR 3种激素对红豆杉离体胚培养的影响,并建立了2种红豆杉的离体胚培养和植株再生系统。结果表明,6-BA对2种红豆杉种胚的萌发促进作用最大,BR次之,GA3最小。南方红豆杉种胚萌发的最佳激素组合为1.5 mg/L 6-BA 1.7×103ng/L BR 2 mg/L GA3。短叶红豆杉种胚萌发的最佳激素组合为1.0 mg/L 6-BA 1.7×103ng/L BR 4 mg/L GA3。     

不同培养基组分对带叶兜兰离体培养效果的影响

【目的】探讨适宜带叶兜兰(Paphiopedilumhirsutissimum)离体培养的培养基组分,为规模化生产带叶兜兰组培苗提供技术支持。【方法】以带叶兜兰组培苗为外植体,筛选适合其丛生芽诱导、增殖和壮苗生长的基本培养基、附加物种类和生长激素组合。【结果】初步筛选出较适宜带叶兜兰丛生芽诱导的培养基为1/2MS+3.0 mg/L BA+0.1 mg/L NAA+80.0 g/L香蕉汁+2.0 g/L活性炭,其诱导率较高,为36.1%,且丛生芽诱导出芽较多;丛生芽增殖培养基为1/2MS+0.1 mg/L TDZ+3.0 mg/L 2,4-D+80.0 g/L香蕉汁+2.0 g/L活性炭,其增殖系数为2.02,芽生长较快;壮苗生长最适宜培养基为1.0 g/L花宝1号+1.0 g/L花宝2号+MS培养基的有机、微量成分+1.0 mg/L NAA+2.0 g/L活性炭+80.0 g/L香蕉汁+1.5 g/L蛋白胨,其幼苗生长较好,生物量大,生根率达75.5%。【结论】在1/2MS+3.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+2.0 g/L活性炭培养基中添加香蕉汁较适宜带叶兜兰丛生芽诱导和增殖培养;在1/2MS+80.0 g/L香蕉汁培养基中添加0.1 mg/L TDZ+3.0 mg/L 2,4-D对带叶兜兰的增殖效果较佳;花宝改良培养基适宜带叶兜兰壮苗培养,结合添加NAA和活性炭培养效果更佳,但活性炭浓度不宜过高。     

受精液中添加β-ME、BSA和咖啡因对猪卵母细胞体外受精后早期发育的影响

进行受精液中添加不同浓度的β-ME、BSA和咖啡因对猪卵母细胞体外受精及其早期发育的影响试验。结果表明,在受精液中添加β-ME(2、10、50μmol/L)对猪卵母细胞体外受精后的早期发育无显著促进作用,当添加浓度过高(250μmol/L)时对早期胚胎发育反而不利;在受精液中添加咖啡因(1、2、4mmol/L)对猪卵母细胞体外受精后的早期发育无显著的促进作用;在受精液中添加BSA(0.1%、0.2%、0.4%、0.8%)对猪卵母细胞体外受精后的早期发育有一定的促进作用,并以添加0.4%BSA的效果最好。     

土壤做培养基支撑物对栒子试管苗生根培养的影响

以沙壤土和粘壤土分别做培养基支撑物进行栒子试管苗生根培养,试管苗的生根率、根长均明显高于琼脂支撑培养对照组。在沙壤土或粘壤土支撑培养条件下,培养基中不添加大量元素,可以显著提高栒子试管苗的生根率、根长等指标。以粘壤土做培养基支撑物,培养基中不添加微量元素和有机物,与添加者相比,生根率及根长无明显差异;培养基中添加蔗糖后,其生根率、根长等指标均明显高于未加蔗糖的处理,且培养基含蔗糖为1.5%的处理试管苗生根率达到93.3%,并显著高于含蔗糖为0.75%的处理。该研究结果可降低栒子试管苗成本,并为简化其移栽程序奠定基础。     

6-BA和NAA对槟榔幼胚离体培养的影响

以“热研1号”槟榔幼胚为外植体,研究不同浓度配比的6 - BA和NAA对槟榔胚离体培养苗的生长影响.结果表明,6 - BA质量浓度为2mg·L-1时胚苗生长最快且芽、根整体发育较整齐;NAA质量浓度为0.5 mg·L-1时,根的生长情况最好,小苗整齐一致.这结果为槟榔组织培养及资源保存和利用提供了技术手段.     

培养基的保存温度对牛卵母细胞体外受精的影响

研究了培养基保存温度对牛卵母细胞体外受精的影响。结果表明,基础培养基中激素不同添加时间对牛卵母细胞体外成熟率、牛体外受精胚胎卵裂率及囊胚率差异不显著(P0.05);提前添加激素在4℃不能长期保存,而在-20℃能长期冷冻保存,并不会对牛卵母细胞体外受精胚胎的发育产生太大的影响。     

不同光源处理对非洲菊组培苗生长的影响

以非洲菊瑞扣为材料,普通荧光灯为对照,研究发光二极管(LED)和冷阴极荧光灯(CCFL)处理对其组培苗生长的影响。结果表明:在红光/蓝光=7/3(光质比)的情况下,LED光源处理下,组培苗地下部、整株鲜质量,叶绿素a、叶绿素b、总叶绿素含量,可溶性蛋白含量及根系活力均高于其他处理;LED和CCFL光源处理下,组培苗叶长显著高于对照;在根长方面,CCFL光源处理下出现最大值,LED次之,均显著高于对照;LED和对照处理下,根数、地上部鲜质量、地下部干质量均显著高于CCFL处理;CCFL处理下,叶片下表皮气孔面积显著大于其他处理,在气孔密度方面,LED处理略显优势。综合比较,LED光源是用于非洲菊组织培养的最佳光源。     

扁桃试管苗生根培养的研究

采用几种离体生根技术对扁桃栽培品种Bulgaria 1进行试验，在所有情况下，黑暗预处理2周是必需的。100mg/L IBA浸渍60min后在无生长调节物质的1/2MS培养基上暗中培养2周对扁桃品种Bulgaria 1、Nonpareil、Fritz、Prize及Neplus生根效果最好。试管苗基部遮光处理可以取代黑暗预培养的生根效果，但生根率略低，而根上部分生长更健壮。     

大岩桐离体培养技术研究

以大岩桐带芽嫩茎为外植体,探讨不同外源激素水平对其不定芽分化、增殖与不定根形成的影响。结果表明:MS 噻二唑苯基脲(TDZ)1.0~2.0 mg/L IBA 0.1~0.3 mg/L培养基不定芽分化、增殖效果好,分化率达83.3%以上,增殖系数达6.0以上;1/2MS IAA 0.4 mg/L或1/2MS NAA 0.4 mg/L或1/2MS IBA 0.8 mg/L的生根效果好,生根率可达95.6%以上;在泥炭∶珍珠岩=1∶2的基质中驯苗,成活率可达95.3%。     

植物生长调节剂对珙桐种胚离体培养的影响

珙桐处于濒危状态的主要原因是繁殖很困难，不论是种子繁殖还是营养繁殖都不易成功。为了抢救和保护我国这一特有的珍贵资源，寻求加速育苗的方法，探索了如何有效地利用植物生长调节荆来加速珙桐种子繁殖。以珙桐种胚为材料，设置细胞分裂素(6-BA)、赤霉素(GA)、生长素(IAA)3个因子各5个水平，采用二次通用旋转回归组合设计的试验方法，结果表明：(1)6-BA对种子解萌起解抑作用；(2)IAA对完成种子形态后熟有作用；(3)GA对解除种子生理后熟至关重要。