拮抗细菌Bs-03菌株鉴定及抑菌活性测定

在土壤有益微生物的分离、筛选中获得一株拮抗细菌Bs-03,抑菌谱测定结果表明该菌对供试的多种植物病原真菌具有较强的抑菌活性,表现较为广谱的抑菌活性。通过对菌株的培养性状、形态特征、生理生化特性等试验项目,初步鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。采用平板对峙培养法测定Bs-03菌株抑菌活性,结果表明Bs-03对供试的14种植物病原真菌,除花生白绢病菌外,都具有抑菌活性。其中对核桃炭疽病菌、苹果轮纹病菌、黄瓜灰霉病菌、冬枣黑斑病菌效果最好,与其他处理在P0.05水平上具有显著性差异。该菌具有较好的开发应用前景。     

油茶炭疽病拮抗放线菌的筛选及其抑菌谱研究

从土样中分离到109株放线菌,采用对峙培养法、发酵产物活性测定及离体接种试验进行拮抗菌的筛选,结果表明:以油茶炭疽病菌作为指示菌,通过平板对峙培养初步筛选出抑菌效果较好的F1、F5、F9、F10、F22、F23、F38、F53 8个菌株,其抑菌带宽度在12.5～20.5 mm,占分离到放线菌总数的7.3%,其中F10抑菌效果最强;复筛表明8个菌株对供试的7种植物病原菌均有抑制作用,F9、F10对油茶炭疽病菌、油茶根腐病菌抑菌效果明显。菌株发酵产物的抑菌活性测定表明8个菌株的发酵液能完全抑制油茶炭疽病菌的生长,效果明显;发酵滤液抑菌率为5.6%～38.8%,效果不明显,抑菌率超过30.0%的只有F9、F10 2个菌株;发酵灭活液均无抑菌活性。离体接种试验表明F9、F10 2个菌株无伤接种防治效果达80%,而刺伤接种防治效果只有10%～20%,但发病程度轻。     

森林假单胞菌抑菌物稳定性及其成分分析

森林假单胞菌Pseudomonas silvicola菌株T1-3-2对杉木炭疽病具有较强的防治效果,为将其研发为林木炭疽病的生防制剂,需进一步探明该菌抑菌谱、抑菌物质稳定性以及主要成分等,以补充完善该菌的生防理论。文章通过平板对峙法、菌丝生长速率法、液相色谱/线性离子阱-静电场轨道阱高分辨质谱法(UPLC/LTQ-Orbitrapa MS)和气相色谱-质谱法(GC-MS)分析了该菌的抑菌谱、抑菌物质的稳定性以及主要成分。结果表明,菌株T1-3-2对9株供试病原真菌均具有较好的抑菌活性,尤其对包括杉木炭疽病菌Colletotrichum gloeosporioides在内的多种林木炭疽病菌表现出较强的抑菌作用,抑制率均达到65%以上;其代谢产物粗提物对杉木炭疽病菌的孢子萌发和菌丝生长具有明显抑制作用;温度≤70℃、酸碱度以及紫外辐射对粗提物抑菌效果均无显著影响,但高温处理(T> 70℃)对抑菌效果影响显著;粗提物主要含有14种化合物,其中包含假单胞菌常见的4种吩嗪类抑菌物质,即吩嗪、1,6-二羟基吩嗪、10-乙酰基-3,7-二羟基吩嗪和绿脓菌素;挥发性气体(VOCs)中包含:苯类...     

枣树越冬期内生真菌的分离鉴定及抑菌研究

为了明确越冬期枣树组织中内生真菌的种类和分布情况,并从中筛选出对枣缩果病病原有拮抗作用的内生菌株,从越冬期健康枣树的树皮、枣股、枝条中分离获得内生真菌225株,共鉴定出12个真菌属,其优势属为茎点霉属、链格孢属、毛壳菌属和镰刀菌属。研究结果表明:越冬期健康枣树组织中内生真菌分布普遍,种类丰富;不同品种、不同部位中内生真菌的种类和数量都有差异。室内平板对峙实验结果表明:在225株内生真菌中,有25株内生真菌对枣缩果病病原茎点霉菌1-2有抑制作用,最高抑菌率为85.45%;有14株内生真菌对病原壳梭孢菌1-5有抑制效果,最高抑菌率为76.00%;内生真菌F7和F8对两种病原菌均有抑菌效果,而且均有明显的抑菌带,这说明上述两株菌均可产生抗菌代谢物质。     

入侵植物黄顶菊内生细菌对苹果轮纹病菌的拮抗筛选

以衡水湖外来入侵植物黄顶菊Flaveria bidentis为材料,对其不同部位内生细菌分离、纯化,用分离到的内生菌与苹果轮纹病菌Botryosphaeria dothidea进行对峙培养。结果表明:从黄顶菊根、茎、叶、花中分别分离到4,4,4,2株共计14株内生细菌;对峙培养筛选出5株(茎1、茎2、茎4、花1、花2)对苹果轮纹病菌抑制作用明显的细菌,5菌株之间的抑菌差异性不显著;菌株茎4抑制效果最好,真菌菌落直径为(39.96±2.66)mm,抑菌率为33.21%。     

茶多酚对8种植物病原真菌的抑制作用

为了明确茶多酚对8种植物病原真菌的抑制作用,本研究采用菌丝体生长速率法测定了茶多酚对隐地疫霉病菌(Phytophthora cryptogea)、油茶叶枯病菌(Pestalopsis apiculatus)、八角炭疽病菌(Colletotrichum horii)、油菜菌核病菌(Sclerotinia sclerotiorum)、油茶炭疽病菌(Colletotrichum fructicola)、水稻纹枯病菌(Rhizoctorzia solani)、桉树梢枯病菌可可毛色二孢(Lasiodiplodia theobromae)和香蕉枯萎病菌(Fusarium oxysporum)的抑菌作用。结果显示,茶多酚对这些病原菌均有不同程度的抑制作用,抑制作用最好的是Colletotrichum horii,EC50值为12.84 mg/mL,其次是Phytophthora cryptogea,EC50值为16.01 mg/mL,抑制效果最差的是Lasiodiplodia theobromae,EC50值达到了104.35mg/mL。     

核桃内生真菌G8菌株的分离鉴定及抑菌活性

从核桃根部分离得到一株真菌,编号为G8,对其进行生物学观察,初步鉴定为葡萄壳小圆孢菌,并对其进行了复侵染研究,确定其为核桃内生真菌.对此菌株进行液体发酵,研究其发酵液及其萃取物的抑菌活性.结果表明：（1）发酵液的提取物对28种植物病原真菌均有不同程度的抑制作用,各萃取相粗提物在40mg·mL^-1时,乙酸乙酯萃取物的抑制效果最好,其次为正丁醇萃取物,萃余物最弱,但正丁醇萃取物对水稻纹枯、杨树溃疡、小麦雪腐病原菌的抑制率大于其它两相.（2）不同质量浓度的乙酸乙酯萃取物对11个病原真菌的活性实验结果表明：对苹果轮纹、苹果腐烂、小麦根腐、稻瘟4种病原菌的抑制率为100%,对苜蓿炭疽、小麦赤霉、番茄早疫、苹果炭疽和玉米小斑5种病原菌的抑制率表现出极显著差异,对玉米大斑和辣椒疫霉2种病原菌的抑制率无显著差异.（3）乙酸乙酯萃取物对5种细菌的抑菌试验表明,对蜡状芽孢杆菌和马铃薯芽孢杆菌2种细菌表现为抗药性,但不同质量浓度处理间差异不显著.     

西双版纳热区木霉的分离及抑菌活性初步研究

对采自西双版纳热区枯枝落叶上的木霉进行分离,共获得19株木霉(Trichoderma spp.)。抑菌活性测定结果表明,19株木霉的发酵液对3种病原真菌(Sclerotinia sclerotiorum,Botrytiscinerea Pers.,Colletotrichum sp.)均具有不同程度的抑制作用,其中菌株SWFC1291对3种病原真菌的抑菌率均超过了80%;SWFC1511对Botrytiscinerea Pers.的抑菌率达90%。19株木霉中,SWFC2470对红酵母(Rhodotorulasp.)的抑制效果较好,抑菌圈直径达到了2.65cm;SWFC2397,SWFC2470,SWFC3499和SWFC3568这4株菌对大肠杆菌(Escherichia coli)的抑制作用明显,其中SWFC3568的抑菌圈达到了1.60 cm。SWFC1925和SWFC2470两个菌株对红酵母和大肠杆菌均具有抑菌活性,其中SWFC2470菌株对两种菌的抑制作用较强。     

毛白杨内生真菌的分离与拮抗菌的筛选

采自保定市不同地点不同部位的毛白杨的新鲜组织,利用常规的内生真菌分离方法,以PDA培养基为分离培养基,从毛白杨根、茎、叶中分离得到14株内生真菌。以杨树腐烂病菌、苹果腐烂病菌、梨黑斑病菌、黑根霉、毛霉、灰霉为供试病原菌种,对14个菌株进行了杀菌活性筛选,发现G01、G02、ZD103等3个菌株对不同的供试病原菌有不同的抗菌活性。对3个菌株采用经典的真菌鉴定方法判断G02与ZD103为Trichodermasp.木霉属,而G01菌株由于其不产孢故不能用上述方法鉴定,暂定为未知属。     

作物病原真菌的拮抗菌筛选及其活性物质初步鉴定

从湖北、安徽等地的水稻、小麦、豇豆、西瓜等种植区采集土壤,进行了微生物分离和培养。采用对峙培养法,筛选到20株对11种重要作物病原真菌,如水稻稻瘟菌、小麦赤霉菌、豇豆根腐菌、西瓜枯萎菌等,具有不同拮抗活性的细菌,其中2株具有广谱抗真菌活性。利用高效液相色谱和质谱对其中一株菌株的代谢产物进行了制备和结构初步鉴定,发现其主要活性成分为多烯类物质,分子量为803.67。继续深入研究抗菌物质结构和抑菌机理,将有助于新型生物源杀菌剂的开发。     

Antifungal constituent from Gordonia dassanayakei.

The hexane extract of the stem bark of Gordonia dassanayakei showed high antifungal activity against plant pathogenic fungi Curvularia sp., Colletotrichum gloeosporioides, Rhizoctonia solani, Corynespora cassiicola, and Fusarium sp. A compound responsible for the antifungal activity was isolated and identified as 3-formyl-2,4-dihydroxy-6-methylbenzoic acid 3-hydroxy-4-(methoxycarbonyl)-2,5-dimethylphenyl ester (1).     

莰烯醛肟及其烃基醚衍生物的合成与抑菌活性研究

由莰烯醛(1)与羟胺盐酸盐反应合成了莰烯醛肟(2),继而与卤代烃反应合成了5种莰烯醛肟烃基醚衍生物,分别为:莰烯醛肟乙基醚(3a)、莰烯醛肟正丙基醚(3b)、莰烯醛肟正丁基醚(3c)、莰烯醛肟正戊基醚(3d)和莰烯醛肟苄基醚(3e)。通过红外光谱、质谱和核磁共振等仪器分析手段对产物结构进行了确认。在此基础上,采用菌丝生长速率法,评价了莰烯醛肟及其烃基醚衍生物对12种植物病原真菌的生长抑制作用,结果表明:产物对12种植物病原真菌皆有一定抑制作用,其中莰烯醛肟的抑菌活性最优,并且对油茶炭疽病的抑制效果最好,EC 50为39.25 mg/L,对水稻纹枯病菌、猕猴桃果实拟茎点霉、玉米赤霉病菌和毛竹枯梢病病原菌的EC 50为40~50 mg/L;在质量浓度为500 mg/L时,莰烯醛肟对水稻纹枯病菌等9种植物病原真菌完全抑制,对松枯梢病菌和七叶树壳孢菌的抑制率达97%以上,当药液浓度降低时,莰烯醛肟对大部分病原菌的抑制率仍然超过百菌清500 mg/L时的抑制率。虽然莰烯醛肟烃基醚衍生物的抑菌活性较莰烯醛肟有所降低,但对毛竹枯梢病菌、梨链格孢菌和玉米赤霉病菌的抑制率皆高于(或等于)百菌清。     

Endohyphal bacteria from fungal endophytes of the Mediterranean cypress (Cupressus sempervirens) exhibit in vitro bioactivity

Endohyphal organisms of endophytic fungi can induce, or promote, beneficial effects of their respective host fungi to the host plant that harbours them. The Cupressaceae plant family (Coniferales) hosts highly bioactive endophytic fungi. Here, we show that a fraction of such endophytic fungi harbours bioactive endohyphal bacteria with a non‐obligatory symbiotic lifestyle. Indeed, 5 of 16 (31.25%) endophytic fungi of Cupressus sempervirens harboured endofungal bacterial strains of Bacillaceae (G⁺, Bacilli) and Sphingomonadaceae (G^?, α‐Proteobacteria), that is Bacillus pumilus (from the fungi Leptosphaeria CSE₂₁₁ and Pyrenochaeta CSE₁₃₄), Bacillus subtilis (from the fungi Leptosphaeria CSE₂₁₂ and Ascorhizoctonia CSE₁₄₈) and Sphingomonas paucimobilis (from the fungus Ascorhizoctonia CSE₁₉₅). Notably, each endophytic fungal species contained only one endofungal bacterial species that was stably maintained in symbiosis over several rounds of subculturing. Moreover, we investigated whether cypress endofungal bacteria (CEB) could benefit their host fungus competing with other fungi and bacteria or the host plant against the invading microorganisms. In vitro assays indicated that CEB possessed antagonistic activity against cypress endophytic and pathogenic microbiome. Also, CEB metabolites and volatile compounds (VOCs) exhibited antifungal and antibacterial activity against the target microbiome. Bioactivity of CEB was less than that of the endophytic microbiome of Cupressaceae, on which we reported earlier. In conclusion, our work is the first to document endohyphal bacteria of fungal endophytes of C. sempervirens and the bioactivity of such endohyphal symbionts. These findings implicate a complicated interrelationship among host plant, endophytic microbiome and endofungal bacteria, which might be of high importance for evolutionary, as well as environmental and agricultural studies. Eventually, endohyphal bacteria may be introduced as a novel source for lead molecule discovery.     

木霉菌株T88对7种病原真菌的拮抗作用

将木霉菌株Ｔ８８与７种常见的林果病原真菌进行平板对峙培养及显微观察,结果表明木霉菌株Ｔ８８对立枯丝核菌Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａｓｏｌａｎｉ等供试的７种病原真菌都有明显的拮抗作用,可观察到Ｔ８８对病原菌菌丝的缠绕、使细胞质变稀薄、菌丝消解或穿透等现象,以及对齐整小核菌Ｓｃｌｅｒｏｔｉｕｍｒｏｌｆｓｉ的菌核的重寄生作用,使其发生腐烂,并抑制了白绢病菌菌核的萌发。     

木霉菌株T88对7种病原真菌的拮抗作用

将木霉菌株T     

绿色木霉代谢产物抗菌活性研究

对绿色木霉产生的代谢产物进行了抑菌活性的初步研究,生测结果表明：离体条件下发酵液对尖孢镰刀菌、棒盘孢、茄链格孢、出芽短梗霉、灰葡萄孢均有较强的抑制作用,其对以上不同病原菌的抑制率分别为76．6％、86．5％、94．8％、91．4％、86．3％,抑菌活性成分在80℃以下较为稳定,pH值在6-7之间抑菌效果最好。     

喜树叶乙醇提取物对植物病原菌的抗菌活性研究

采用菌丝生长速率法研究了喜树叶乙醇提取物对所选15种植物病原菌的抗菌活性,并对筛选出抑菌效果较明显的11种植物病原菌做了不同浓度的抑菌效果试验。其结果表明,随着提取物浓度的升高,对各种植物病原菌的抑制率呈上升趋势,且对黄瓜菌核病菌、苹果腐烂病菌和番茄灰霉病菌抑制作用较强,EC50分别为193．6675、198．1948和256．4144μg/mL,各样品对植物病原菌的毒力随着浓度的升高而增强。     

黔东南州猕猴桃真菌病害种类和病原鉴定

黔东南州的猕猴桃Actinidia chinensis产业对当地的经济发展起重要作用.为减少病害危害保证产品质量,对其野生猕猴桃和红心猕猴桃的病害发生情况进行调查研究,采用组织分离法对野生猕猴桃(wild species of Actinidia chinensis)和红心猕猴桃(cultivated species ...     

Variation of endophytic cork oak‐associated fungal communities in relation to plant health and water stress

The main objective of this study was to obtain more comprehensive knowledge about the effect of water stress on endophytic fungal communities in asymptomatic and declining cork oak trees. Six asymptomatic and six declining cork oak trees were randomly selected in a natural cork oak forest located in Sardinia, Italy. In February 2003, the soil around three asymptomatic and three declining trees was covered with a circular plastic film to reduce rain water supply with the intention to induce water stress. The remaining six trees served as controls. Predawn xylematic water potential (PWP) was used as water status indicator and measured seasonally. Between July 2003 and June 2004, fungal endophytes were isolated every 2–4 months from twigs, branches and woody tissues. Significant differences in PWP between covered and control trees were detected mainly in autumn. Gas exchange was greatest in asymptomatic control plants. All tissues were colonized by endophytic fungi. Nineteen fungal species were isolated from 1620 plant fragments. Biscogniauxia mediterranea was the most frequently isolated fungus. Its isolation frequency was significantly higher in declining covered trees than in control trees (p < 0.05). Presence of this fungus in asymptomatic control trees was significantly higher in winter than in summer. Water stress seems to reduce species diversity of the endophytic mycobiota in cork oak and to promote proliferation of some potentially pathogenic endophytes.     

解淀粉芽孢杆菌TF28抗菌粗蛋白的初步研究

解淀粉芽孢杆菌TF28是从大豆根部分离得到的一株具有广谱高效拮抗作用的内生细菌,其发酵上清液经20％～40％硫酸铵盐析后获得抗菌粗蛋白。为明确该粗蛋白的理化性质,研究了温度、pH值、UV照射和蛋白酶对其稳定性的影响。结果表明：该粗蛋白具有一定的热稳定性,100℃处理30rain后抑茵活性仍为原有抑菌活性的85．9％;且在较广pH（3～11）范围内比较稳定,活性均能保持在95％以上;对紫外线、胰蛋白酶不敏感,对蛋白酶K具有一定的耐受性。初步研究了抗茵粗蛋白的抑菌作用,结果显示,对所测定的12种病原真菌均有抑制作用,其中对大豆根腐病菌和水稻恶苗病菌的抑制作用尤为明显。其对水稻恶苗病菌病原茵孢子的萌发起到抑制作用,有效抑制中浓度（EC50）为138．32μg／mL。此外,该抗茵粗蛋白能破坏病原茵菌丝结构导致畸形。