玫烟色拟青霉孢子萌发和附着胞形成的影响因子研究

用不同种类、不同浓度的培养液离体培养玫烟色拟青霉孢子,观察其萌发过程,结果显示,玫烟色拟青霉孢子萌发可以产生单极芽管和双极芽管,而且芽管顶端膨大可形成附着胞,附着胞形态以球形和棍棒状为主;不同培养液中,孢子萌发和附着胞形成率不同,其中0.1%的菜青虫体壁浸出液(CL)培养液中孢子萌发率和附着胞形成率最高,分别达到79.01%和18.69%。不同基质对玫烟色拟青霉孢子萌发和附着胞形成的影响也不同,蝉翅较适合玫烟色拟青霉孢子萌发和附着胞形成。     

惰性载体对玫烟色拟青霉产孢和孢子活力的影响

玫烟色拟青霉Paecilomyces fumosorose础地理分布广泛,昆虫寄主多样,能侵染多种昆虫,包括同翅目、鳞翅目、鞘翅目、膜翅目等,是一种重要的昆虫病原真菌。近年来国外有关其生物学、分类、生化和应用的研究报道显著增多,但国内研究较少。虽然该菌寄主广泛,但国内外对其研究主要作为粉虱、蚜虫等刺吸式口器害虫的微生物防治因子。在自然界致病的鳞翅目幼虫虫尸上分离到1株玫烟色拟青霉,其对蚜虫、粉虱等刺吸式口器害虫有较高毒力。本试验利用惰性载体辅以农（副）产品为材料,对其在不同载体上生长、产孢量及对分生孢子存活的影响进行研究,对于开发和利用这一生物防治资源具有较为重要的意义。     

影响虫生真菌玫烟色似青霉孢子萌发的因素探析

采用凹玻片悬滴法测定了温度、湿度、紫外照射及化学农药对玫烟色拟青霉孢子萌发的影响。结果表明,玫烟色拟青霉孢子萌发的适宜温区为20￣28℃,相对湿度在90%以上,紫外照射对该菌孢子萌发有很大影响。随紫外照射时间的延长,孢子萌发率明显降低。当照射时间为60min时,24h的孢子萌发率为54.2%,当照射时间达180min后,24h的孢子萌发率仅为5.4%,同时部分孢子的萌发时间显著被延长。不同杀虫剂及同一杀虫剂的不同浓度,对玫烟色拟青霉分生孢子萌发的影响不同。20%氰戊菊酯、22%蚜虱灵、5%的抑太保、25%灭幼脲四种供试农药的三种浓度对玫烟色拟青霉分生孢子萌发的影响均很小,因此这四种杀虫剂可作为玫烟色拟青霉混用的首选药剂;此外10%吡虫啉和绿荣的1/2常规浓度和1/4常规浓度对该菌分生孢子萌发的影响也较小,因此也可作为玫烟色拟青霉的复配药剂。     

玫烟色拟青霉生物学特性的研究

对玫烟色拟青霉PF9606与温度、pH、营养条件及光照的关系进行了研究,结果表明,菌丝生长的温度范围为10~32℃,最适温度为25~28℃;最适pH值为6~7;产孢的温度范围为10~30℃,最适温度为20~25℃;最适培养基为SDA和SMA。     

几种农药对玫烟色拟青霉致病力的影响

玫烟色拟青霉孢子粉与8种常用农药相容性的测定结果显示:普力克、啶虫脒、高效氯氰菊酯和吡虫啉4种农药与玫烟色拟青霉的相容性较好,在常规使用浓度下孢子的萌发率均在75%以上;随着培养液中三唑酮、百菌清和阿维菌素浓度的增加,玫烟色拟青霉分生孢子的萌发率下降.在第10 d,农药与玫烟色拟青霉的3种混合物中高效氯氰菊酯对3龄小菜蛾、啶虫脒对3龄蚜虫和吡虫啉对2龄烟粉虱的致死率分别为90.43%、92.34%和93.72%,但阿维菌素与玫烟色拟青霉的混合物对3龄小菜蛾的致死率仅为64.24%,与单独使用玫烟色拟青霉的致死率87.35%相比差异显著.因此,啶虫脒、高效氯氰菊酯和吡虫啉3种农药在常规使用浓度下可与玫烟色拟青霉混合使用.在使用玫烟色拟青霉3 d后喷施普力克和百菌清对2龄烟粉虱的防治效果没有影响,但喷施杀毒矾与三唑酮对2龄烟粉虱的致死率分别为39.37%和43.31%.     

玫烟色拟青霉侵染对菜青虫营养生理变化的影响

通过介绍对3、4龄菜青虫感染玫烟色拟青霉后,取食量及体重增加量均明显低于对照。接种72h,2×107孢子/ml和2×108孢子/ml两种浓度处理的3龄菜青虫的取食量分别比对照降低18.3%和31.7%,4龄菜青虫的取食量分别比对照降低9.8%和16.4%,且高剂量的影响明显高于低剂量的影响。     

昆虫病原真菌玫烟色拟青霉的研究进展

玫烟色拟青霉Paecilomyces fumosoroseus是一种重要的昆虫病原真菌。通过对国内外已有的研究报道的综述,介绍玫烟色拟青霉在自然界的分布与寄主、致病力及影响因子、发生与流行、毒素的产生及该菌目前的生产及应用状况,旨在了解当前玫烟色拟青霉的研究与应用现状。     

玫烟色拟青霉代谢产物对烟蚜的毒杀活性

用萨氏培养液培养玫烟色拟青霉菌菌株sw03085获得代谢产物，以生物检测方法为导向，研究代谢产物的杀虫活性、热稳定性、安全性和溶解性．结果表明：玫烟色拟青霉菌sw03085菌株能够产生杀虫活性物质；活性物质易溶于甲醇、丙酮、乙酸乙酯，能部分溶解于氯仿，是一种中等极性的物质；活性物质对植物没有明显伤害作用；活性物质对低温和高温都不敏感，具有较强的稳定性；活性物质对蚜虫和粉虱毒杀活性较高，对小蠹虫、菜青虫、刺蛾和铜绿金龟活性低，表现出一定的选择性、     

玫烟色拟青霉的形态特征和分生孢子萌发环境条件的研究

通过对玫烟色拟青霉QH-4分离株的形态特征和培养条件的观察,初步鉴定该菌株为拟青霉属;研究不同营养物质、pH值、温度及光照等条件对玫烟色拟青霉QH-4分生孢子萌发条件的影响,试验结果表明:营养条件对玫烟色拟青霉QH-4分生孢子的萌发无显著影响;分生孢子在pH值为5~11条件下都可萌发,但偏酸(pH=5)和偏碱(pH=11)的情况下,孢子的萌发率比较低,与pH值为6、7、8和9时相比有显著性差异;玫烟色拟青霉分生孢子萌发的最适温度为25~27℃;持续的光照有利于玫烟色拟青霉分生孢子的萌发。     

玫烟色拟青霉对烟粉虱种群的控制作用

在大田网室内评价了不同孢子含量的玫烟色拟青霉Paecilomyces fumosoroseus对烟粉虱种群的控制效果.结果表明,各处理区玫烟色拟青霉对烟粉虱当代的种群干扰作用控制指数(IIPC)分别为0.802 0、0.673 2、0.641 3、0.538 9和0.418 6,对烟粉虱下一代的IIPC分别为0.482 6、0.346 9、0.330 8、0.134 8和0.101 7.玫烟色拟青霉对烟粉虱种群的控制作用主要表现为累积效应,连续2代都使用玫烟色拟青霉对烟粉虱的种群控制效果比只在1代上使用的效果好;同一世代内连续2次使用1.0×106 mL-1的处理区对烟粉虱种群的控制效果更好.     

玫烟色拟青霉对烟粉虱的致病力测定

用1.0×107 mL-1的玫烟色拟青霉Paecilomyces fumosoroseus分生孢子悬浮液侵染烟粉虱Bemisia tabaci的1龄、2龄、3龄、4龄若虫和伪蛹,其累计死亡率分别为81.28%、91.40%、39.26%、24.67%和7.91%,差异显著,其中以烟粉虱的2龄若虫对玫烟色拟青霉最敏感,累计死亡率最高.用1.0×105、5.0×105、1.0×106、5.0×106、1.0×107、5.0×107、1.0×108 mL-1的玫烟色拟青霉孢子悬浮液分别处理烟粉虱2龄若虫,以5.0×107 mL-1的效果最佳,在第10、12、14 d时的累计校正死亡率分别高达89.33%、92.58%和92.69%.不同孢子含量的玫烟色拟青霉对烟粉虱的LC50值差异显著,对烟粉虱的LT50值存在一定的差异.在处理后第2～6 d番茄、节瓜、黄瓜、茄子上玫烟色拟青霉对烟粉虱的累计校正死亡率差异不显著,在第8～14 d 4种寄主植物上烟粉虱的累计校正死亡率差异显著.     

玫烟色拟青霉的培养及固体培养基筛选

本文记述了玫烟色拟青霉（Paecilomyces fumosoroseus)在6种不同固体培养基上进行三级扩大培养的方法及培养性状，其中以麦麸和米糠混合的固体培养基产孢量可达283亿／g，该菌在这种培养基上产孢量大，容易生长，且该培养基经济实用，容易得到，判断该培养基为优良培养基。     

玫烟色拟青霉液体发酵代谢特性的研究

通过对玫烟色拟青霉进行液体培养,结果表明:随培养时间的延长,培养液中的糖含量、酸碱度、菌丝生物量和产孢量均发生明显的变化。接种24-48h,菌丝生物量和产孢量均增长较慢;接种48-120h,菌丝生物量和产孢量增长最快;接种120h,菌丝生物量达22.43mg/ml,产孢量达11.8×107孢子/ml。培养液中Ph值和糖含量随培养时间的延长逐渐降低,接种72h,营养液的Ph值由初始6.4降到5.16,菌丝快速生长和孢子大量繁殖的时期是糖消耗最大的时期,因此接种72小时后,适当调节酸碱度,对玫烟色拟青霉菌丝生长和产孢均有利。     

玫烟色拟青霉营养需求及培养条件研究

通过平皿中测定碳源、氯源、微量元素、温度和pH值对玫烟色拟青霉9867菌株生长和产孢的影响．结果表明：最佳碳源、氮源、微量元素分别为玉米粉、酵母膏、铜;最适温度为26℃;最适pH为6～7。     

玫烟色拟青霉Pf9606菌株的紫外诱变选育

采用紫外照射孢子悬液和原生质体对玫烟色拟青霉Pf9606菌株进行了诱变,并对正突变菌株菌落生长、产孢量及毒力进行了测定。结果表明:筛选出的UV-22、UVP-39两菌株的产孢量分别为对照的1.58倍和1.37倍,毒力分别比对照提高14.03%和11.00%。比较UV-22和UVP-39两正突变菌株可知,玫烟色拟青霉Pf9606孢子悬液的诱变效果好于原生质体的诱变效果。     

玫烟色拟青霉固体培养基筛选及培养条件研究

玫烟色拟青霉IfB01菌株在25℃、RH85％下分别在4种单一培养基(大米、黄豆粉、玉米粉、小麦粉)和3种复合培养基(小麦粉∶麦麸1∶1、黄豆粉∶麦麸1∶1、玉米粉∶麦麸1∶1)培养,以产孢量为指标筛选出较佳的基础培养基配方.通过正交试验验证加入不同浓度的碳源、氮源优化的基础培养基,筛选较佳的固体培养基配方为:玉米粉培养基+0.2％KNO3+0.1％葡萄糖+水(1∶1.5=物料∶水质量比);通过单因素试验,确定菌株较佳的培养条件是28℃、光照黑暗交替培养14h∶10h、产孢前期湿度为80％、产孢后期湿度为50％.     

环境因子对玫烟色棒束孢IF-1106菌株孢子萌发的影响

为了了解环境因子对玫烟色棒束孢分生孢子萌发的影响,采用凹玻片悬滴等方法研究了温度、湿度、光周期、初始pH值、紫外照射、高温胁迫及吐温-80浓度对玫烟色棒束孢IF-1106菌株孢子萌发的影响。结果表明:玫烟色棒束孢孢子萌发的最适温度为26℃左右,适温为23~32℃,玫烟色棒束孢分生孢子萌发对湿度的要求较高,低于85%分生孢子不萌发。黑暗促进孢子萌发,光照抑制孢子萌发,但光暗交替时,随着光照时间的延长,孢子萌发率升高。孢子萌发最适pH值为5~7,用0.05%~1%的吐温-80配制孢子悬浮液。经过48℃高温和紫外线照射处理后,玫烟色棒束孢孢子的萌发都受到很大程度的抑制。因此玫烟色棒束孢IF-1106菌株分生孢子萌发最适条件为温度26℃,相对湿度95%以上,初始pH值为6,全黑暗培养。     

菜青虫感染玫烟色拟青霉后营养生理变化的研究

菜青虫被玫烟色拟青霉PF9606菌株侵染后,幼虫的取食量及体重增加量均明显低于对照。接种72h,2×107孢子/ml和2×108孢子/ml两种浓度处理的3龄菜青虫的取食量分别比对照降低18.3%和31.7%,4龄菜青虫的取食量分别比对照降低9.8%和16.4%,且高剂量的影响明显高于低剂量的影响。     

玫烟色拟青霉培养性状与产孢特性初步研究

描述了在不同接种方法和培养方式下，玫烟色拟青霉的培养性状和产孢特性．增大接种量，通气条件好的组合方式，能形成大量绒状菌丝，第8天即可大量产生孢子；接种量小，通气条件差，气生菌丝大量生长，孢子产量低．说明在满足营养、温度和光照的前提下，接种量与通气条件是玫烟色拟青霉孢子形成的重要条件。     

限制性内切酶介导的玫烟色拟青霉原生质转化体系构建

丝孢类害虫生防真菌的生态适应性和环境抗逆性决定着生防菌剂的田间适用性,兼具多个抗逆性状的菌株一般只能通过相关功能基因的遗传操作和定向选育而获得,但这类真菌遗传操作的可行方法目前相当有限.本文利用限制性内切酶介导插入法将含有草丁膦抗性标记的Bar基因的质粒pAN52-1N-Bar转入玫烟色拟青霉Pfr116菌株的原生质体中,转化效率约为6～13个转化子μg-1质粒DNA.通过对Pfr116菌株突变转化子的基因组DNA进行PCR产物检测及基因组DNA单酶切片段的Southern杂交分析,证明Bar基因已整合到随机抽取的转化子基因组中,且都在基因组上单位点插入,转化子对草丁膦的抗性具有遗传稳定性.由此构建的原生质体转化体系具有低拷贝、转化率较高,遗传稳定强的特点,不失为一种丝孢类生防真菌遗传操作的有效方法.