寄生沙棘木蠹蛾的白僵菌菌株特性及其胞外蛋白酶、几丁质酶的活性

［目的］ 明确寄生沙棘木蠹蛾的白僵菌不同菌株的生物学特性,以筛选优良菌种加以利用。［方法］ 测定温湿度对分离自沙棘木蠹蛾幼虫和蛹的5株白僵菌菌株分生孢子萌发的影响,并采用平板测定法和Lowry及DNS测定法对白僵菌各菌株胞外蛋白酶和几丁质酶活性进行测定。［结果］ 白僵菌SJ 01、SJ 02、SJ 03、SJ 04、SJ 05菌株在15～35 ℃范围内均可萌发,15、20 ℃和35 ℃时孢子萌发率相对较低,25 ℃时5株菌株萌发率均高,为90％～98％。相对湿度为41％、50％和61％时,各菌株均不萌发;76％和80％时,SJ 05的萌发率明显高于其他菌株,分别达60％和80％。50 ℃高温胁迫24 min和30 min后,各菌株萌发率均显著降低,几乎不萌发。胁迫12 min和18 min后,SJ 05的萌发率较其他菌株高,表明其抗高温性强。5株菌株均可产生胞外蛋白酶和几丁质酶,其中SJ 05菌株胞外蛋白酶产量为55.3 U/mL,几丁质酶产量为137.9 U/mL,其蛋白酶和几丁质酶活性均显著高于其他菌株。［结论］ SJ 05菌株具有较强的耐热性,一定的抗低湿能力,较高的蛋白酶和几丁质酶活性,为最优菌株。     

白僵菌的致病力与菌株生长特性及几丁质酶活性的关系

将辽宁、河南、山东等地采集到的70个寄生于桃小食心虫的球孢白僵菌菌株以3龄桃小食心虫进行筛选,得到了46-1,46-2和37-3三个致病率分别为96.7％、92.8％和93.3％的优良菌株。以四个代表高,中、低致病率的菌株46-1、46-2、7-1(43.3％)和66(33.3％),测定其菌丝的生长量,产孢量和几丁质酶活性的结果显示菌株的致病力与菌丝生长量、几丁质酶活性、菌株产孢量呈显著的正相关。     

12株虫生真菌对家白蚁致病性的初步研究

本试验选用虫生真菌拟青霉、绿僵菌等１２个菌株对家白蚁进行室内致病性测试，结果发现，在６．０×１０７孢子／ｍＬ的灭菌水孢子悬浮液处理下，４个菌株具有较强的致病性：金龟子绿僵菌３７＃致病率为１００％，烟曲霉６１＃致病率为９６．７％，玫烟色拟青霉９０＃致病率为８６．７％，蝉拟青霉２０＃致病率为８４．４％，其它菌株致病率在１６．７％～７８．９％之间，对照不发病     

玉米螟白僵菌147号和9号菌株防治玉米螟田间试验

1984年,利用玉米螟白僵菌菌株147号(法国菌株)和9号(中国菌株)制成颗粒剂,在吉林省白城进行防治玉米螟的田间试验。施用一次,使用孢子量6×10~(13)/公顷,对防治1～2两代玉米螟的效果,依次降低虫量为96.62—95.2％和84.28～75.55％,提高田间僵虫率依次为72.77～83.6％和29.21～50.70％。147号菌株防治第一代王米螟效果高于9号菌株,可能是残效期较短,不适应异地气候条件之故。两个菌株混合使用增效不明显。     

昆虫病原线虫共生细菌发酵液对棉铃虫和菜青虫的口服毒性

研究了昆虫病原线虫共生细菌4个种和1组未定名种28个菌株发酵液对棉铃虫、菜青虫幼虫的致死、抑制生长和拒食作用。嗜线虫致病杆菌对棉铃虫幼虫具有较高的口服毒性，含20％(V／W)嗜线虫致病杆菌CBl2、CB6、CB5、CB28菌株发酵液的人工饲料饲喂棉铃虫初孵幼虫6天后，幼虫校正死亡率分别为97．7％、88．7％、88．4％和88．4％，饲喂棉铃虫3龄幼虫5天后，相对生长抑制率分别为96.4％、95．1％、95．6％和93．8％，上述菌株发酵原液涂抹白菜叶片饲喂5龄棉铃虫幼虫24h后相对拒食率分别为87．6％、83．6％、91．4％和89．8％；光杆状菌CBl、cBl52菌株、嗜线虫致病杆菌CB19菌株和波氏致病杆菌CB32菌株发酵原液涂抹白菜叶片饲喂菜青虫24h后，相对拒食率分别为82．7％、77．2％、75．8％和75．0％。     

球孢白僵菌不同分离株的生物学特性的研究

为了明确不同白僵菌菌株的生物学特征,对15株白僵菌菌株的ITS片段进行测序分析,并对这些菌株的菌落生长速率、产孢量、孢子萌发率、单芽管孢子萌发比例、单芽管平均长度和长芽管平均长度等多项生物学指标进行测定。结果表明,单芽管孢子萌发比例变化范围在11．91％～96．03％;单芽管平均长度和双芽管平均长度分别为6．28-21．43μm和10．338～19．902μm;各菌株间孢子萌发率差异很大,变化范围22．09％-86．32％。对菌株的培养特性（孢子萌发率、产孢量和菌落生长速率）与孢子萌发特性（单芽管孢子萌发比例、芽管总平均长度和芽管整齐度）这两个主因子进行典型相关分析,两性状集团总体相关不显著（P=0．341）,而孢子萌发率与单芽管孢子萌发比例相关显著,菌落生长速率与芽管总平均长度呈显著相关。     

鄂、湘、赣、滇、黔、川六省稻瘟病菌有性态的研究

作者对湖北，湖南、江西、云南、贵州和四川六省水稻栽培区１８４个稻瘟病菌Ｍａｇｎａｐｏｒｔｈｇｒｉｓｅａ Ｂａｒｒ菌株（其中３２个采自马唐草）的能育性和交配型进行了测定。结果表明：不同菌株间能育性差别很大，四川和贵州两省菌株有性态的形成率分别为５３％和５０％，而湖北的菌株全部表现不育，测得的所有可育菌株皆属交配型Ａ，杂草菌株有性态子实体形态结构与水稻菌株的十分相似。     

肖氏松茎象白僵菌病的初步研究

从自然罹病的肖氏松茎象僵虫尸体上分离，筛选出的GⅡ号白僵菌菌株，室内测定表现出了较好的培养性状和很高致病能力。在20℃保湿条件下，每头用5ml(1亿个孢子／ml)孢子液体表接种，20d白僵菌率80％，25d达100％。其菌丝生长速率、单位面积产孢量、活孢率、白僵率等性状指标分别比马尾松毛虫优良白僵菌菌株高11．26％、15．31％、12．40％、40．0％。具有一定的专化性和较大的开发应用潜力。本文并对该菌株的菌粉生产工艺和林间防治、应用进行了探讨。     

小麦孢囊线虫病生防真菌08F04菌株的鉴定及防效测定

小麦禾谷孢囊线虫病已成为我国黄淮麦区的重要病害,目前生产上尚缺乏有效的防控方法。菌株08F04是作者从禾谷孢囊线虫孢囊上分离的1株寄生真菌。本研究通过形态学和分子生物学方法,将其鉴定为球孢白僵菌Beauveriabassiana（Bals．）Vuill。2011和2012年对该菌株进行了盆栽和田间防效试验,菌株08F04麦粒砂培养物6％（w／W）土壤处理的盆栽试验孢囊减退率分别达到65．03％和50．95％;田间试验中,菌剂08F0420g·m-2沟施处理土壤,2011年在许昌和荥阳的孢囊减退率分别为58．28％和32．13％,2012年分别达到58．49％和44．50％。结果表明,菌株08F04是防治小麦禾谷孢囊线虫病具有较大潜在开发价值的生防菌株。     

桃小食心虫病原菌—球孢白僵菌TST05菌株生物学特性研究

[目的]研究从自然染病的桃小食心虫幼虫上分离的球孢白僵菌TST05菌株的生物学特性.[方法]测定不同培养基、外界不同温度和湿度对该菌株菌丝营养生长及孢子萌发的影响.[结果]该菌株在PDA、PPDA、SDAY、SMAY 4种培养基上均生长良好,菌落厚而致密,产孢量均大于3.95×107孢子/mL;菌株适应的温度和湿度范围宽,15～30℃之间,RH 30 ％～100％之间孢子均可萌发、生长和产孢.随着温度接近25℃、湿度增大,孢子的萌发率、菌落的生长速率和产孢量都显著增加.15℃、RH 100％时产孢量为1.32× 107孢子/mL;25℃、RH 30％时,产孢量也能达到1.37×107孢子/mL;25℃、RH 100％时产孢量达到6.19×107孢子/mL.15℃、RH 100％孢子萌发率为52.28％;25℃、RH＞80％时,孢子萌发率都能达到90％以上.[结论]TST05菌株能适应北方干旱低温条件,可开发成为防治桃小食心虫的生物制剂.     

七种化学杀虫剂与球孢白僵菌TST05菌株的相容性研究

本文测定了7种常用化学杀虫剂高效氯氰菊酯、高氯甲维盐、辛硫磷、高效氯氟氰菊酯、阿维菌素、阿维杀虫单、虫酰肼对球孢白僵菌TST05菌株菌丝生长及孢子萌发、生长及产孢的影响,以研究化学药剂与球孢白僵菌TST05菌株的相容性,为化学杀虫剂和白僵菌制剂混合应用提供依据.结果表明,在田间常用浓度下,7种杀虫剂对该菌株的菌丝生长抑制率为27.93％～38.74％.虫酰肼组的孢子萌发率为33.19％,几乎不形成菌落,产孢量仅为0.05×106个/mL;而其余6种杀虫剂组的孢子萌发率为50.34％～70.62％,能形成较致密的菌落,产孢量为(2.51～3.58)×106个/mL.杀虫剂对该菌株的抑制作用随着浓度的降低而减小,田间浓度再稀释5倍后,各处理组孢子萌发率升高到72.08％～84.92％;产孢量为(3.01～9.61)×106个/mL.在田间浓度下,虫酰肼与该菌株不相容;其余6种杀虫剂的相客性较好.并且相客性随着杀虫剂浓度的降低而提高.     

氯嘧磺隆高效降解细菌的分离与筛选

从北京市、河北省一些农田和农药厂排污口活性污泥中分离得到7株具有明显降解氯嘧磺隆作用的降解细菌,这些菌株能够以氯嘧磺隆为唯一氮源生长,对氯嘧磺隆的降解率为65．85％至94．78％不等。其中F-1和E-1两株菌为本试验的最高效率的降解菌,在40ml培养基、细菌起始浓度7.6×10^7cfu／ml、30℃恒温、180r／min条件下培养72h,F-1菌株对底物氯嘧磺隆50mg／L的降解效率为67．5％;E-1菌株对底物氯嘧磺隆10mg／L的降解率为94．78％。     

番茄晚疫病菌对甲霜灵的抗性

摘要为了掌握我国番茄晚疫病菌对甲霜灵抗性的发生和分布状况，1999～2001年，陆续从全国16个省市的主要番茄产区采集晚疫病样本400余个，分离、纯化出番茄晚疫病菌株183个;采取离体和活体生测法对所有菌株进行了抗甲霜灵的测定。结果表明：我国番茄晚疫病菌对甲霜灵的抗性由北向南逐渐增强，北方地区以中等抗性菌株和敏感性菌株为主，南方地区则以抗性菌株和中等抗性菌株为主。其中东北、西北地区无抗性菌株，中抗和敏感菌株分别为33．3％、66．7％和36．1％、63．9％；华北、华东地区抗性、中抗和敏感菌株分别为5．6％、44．4％、50．0％和38．6％、36．8％、4．6％；华中和西南地区抗性菌株分别占55．6％和44．2％，中抗和敏感菌株则各占33．3％、历．8％和11．1％、18．8％；华南地区无敏感菌株，抗性菌株达66．7％，中抗菌株为33．3％。     

萝卜软腐病生防菌株Hy11的筛选、鉴定及定殖特性

为探讨银杏内生细菌对萝卜软腐病的防病作用,通过块根接种和温室盆栽试验筛选对萝卜软腐菌Pectobacterium carotovorum subsp.carotovorum具有高效抑制作用的生防菌株,共获得8株拮抗作用较强的内生细菌,其中菌株Hy11抑菌作用明显.对生防菌株Hy11进行了形态观察、生理生化特性测定、16S rDNA和gyrB基因序列分析,并应用绿色荧光蛋白基因标记菌株Hy11,研究该菌株在萝卜体内的定殖动态.结果显示,该菌株对萝卜软腐病具有较好的防效,对萝卜块根和幼苗的防治效果分别为77.9％和66.7％;对萝卜幼苗的促生率达113.28％.经鉴定,菌株Hy11为解淀粉芽胞杆菌Bacillus amyloliquefaciens.标记菌株Hy11-gfp在喷雾接种银杏叶片后0～3 d种群数量呈急剧下降趋势,10d后保持相对稳定;其在萝卜的根、茎和叶中均能够定殖,在根中的定殖数量最高可达1.2×104 CFU/g.     

抗黄瓜灰霉病菌生防放线菌的筛选及其抑菌机理的初步研究

从济南周围地区10多种作物田采集到土样20份。经室内分离、纯化,获得生防菌菌株85株。采用平板对峙培养、含细菌培养等方法,筛选出对黄瓜灰霉病原菌具有一定拮抗作用的菌株。通过平板对峙培养法筛选出3个对黄瓜灰霉病菌有明显拮抗作用的菌株：RB-2,RB-3,RB-9。其中,菌株RB-3抑菌能力最强,抑菌圈直径达15．8mm。通过放线菌发酵液对孢子萌发的影响,显微镜观察抑菌作用表明,拮抗菌RB-9对抑制菌丝生长、孢子萌发、生长抑制作用最强,孢子萌发率仅为1．25％;其次为RB-2,孢子萌发率为7．28％;RB-3的发酵液影响最小,孢子萌发率为10．59％。后期针对不同温度、不同pH条件下对放线菌发酵液的抑菌活性作了初步的实验研究。     

淡紫拟青霉MCWA18菌株对南方根结线虫的寄生和防治作用

试用双温测定法,室内测定淡紫拟青霉ＭＣＷＡ１８菌株对南方根结线虫卵的寄生效果,测定结果表明,供试菌株对南方根结线虫卵的相对寄生率为９２．６％。在温室盆栽试验中,用剂量为５ｇ／ｍ２和１０ｇ／ｍ２固体菌剂处理,９３日后番茄根围土壤中南方根结线虫二龄幼虫的群体密度比对照分别降低６２．３％和６６．９％,番茄株高分别增加１７．２％和４９．６％,地上部鲜重分别增加１００％和１４５．９％,ＭＣＷＡ１８菌剂防病和促生效果均高于剂量为４．５ｇ／ｍ２益舒宝处理。     

采收时间对蜡蚧轮枝菌分生孢子的萌发及致病力的影响

将蜡蚧轮枝菌Vp菌株在PDA培养基上23℃黑暗培养,分别于第5、15、20、25、30天后采收。将不同时间采收的分生孢子置于2％葡萄糖培养液内培养,16 h后检测其萌发率,结果表明,采收于第5天和第15天的分生孢子萌发率分别达到89.76％和94.98％,显著高于采收于第25天(30.27％)和第30天(6.12％)的孢子的萌发率;在PDA培养基培养5 d和15 d的分生孢子在相同浓度下对温室白粉虱的致病力分别达到83.40％和74.44％,显著高于培养了30 d的分生孢子的致病力(8.76％)。     

咪唑乙烟酸高效降解菌降解性能的研究

研究了丙酸杆菌属（Propionibacterium）、海球菌属（Marinococcus）和酸单胞杆菌属（Acidomonas）单一菌株和混合菌株对咪唑烟酸的降解能力及环境条件对降解活性的影响。结果表明,混合菌株处理的咪唑乙烟酸,在第90天时的降解率高达87.20％,明显优于单一菌株。此外,外界环境条件对降解菌的活性也有显著的影响,在培养温度为25～30 ℃,土壤湿度为田间最大持水量的50%,咪唑乙烟酸残留浓度为100 μg/kg,最佳接菌量为5 mL/kg时,3株降解菌的降解活性最强,对咪唑乙烟酸的降解率最高。     

棉铃虫病原真菌研究初报

本项研究涉及的A、B两株棉铃虫病原真菌对棉铃虫有较强的致病力，根据A菌株的形态特征及培养性状，参考有关文献，初步鉴定为Paecilomyces heloithis Brown et Smith（棉铃虫拟青霉）。B菌株与A菌株是否为同种，有待于进一步研究。试验表明，A、B两个菌株对蔗糖、葡萄糖都能利用，黑暗条件有利于菌丝的生长，连续光照则促进子实体的分化和形成。A菌株分生孢子比B菌株更易萌发，经24h测定A菌株的孢子萌发率为41．4％，而B菌株孢子无萌发。     

淡紫拟青霉诱变菌株的RAPD分析

选用6个随机引物对淡紫拟青霉IPC菌株及其15株突变菌株的全基因组DNA进行随机多态性扩增,共扩增出114条250～2500bp的DNA片段,多态检测率为83．3％。利用UPGMA方法对扩增的DNA片段聚类分析,结果表明：供试菌株具有丰富的遗传多样性,应用RAPD技术可以快速准确地鉴定菌株是否突变及突变程度;参照突变菌株表型特性上的改变,该方法可以作为确定其遗传性上是否发生分化的依据。