蜜蜂中肠酪素酶与孢子虫病的关系

蜜蜂中肠酪素酶与蜜蜂中肠围食膜的形成有关，而围食膜的致密度又决定了蜜蜂微孢子虫能否侵入蜜蜂中肠上皮细胞。取蜜蜂中肠测定其酪素酶的活力，得知对意大利蜂而言，酶的活力越高，孢子虫病发病率越低；反之，则发病率高，且酶活力随季节变化。     

1株抗猪链球菌细菌素产生菌的筛选与鉴定

本试验从健康未断奶的仔猪粪便中分离出一株对猪链球菌有较好抑制作用的菌株1～6,排除有机酸、过氧化氢、菌体细胞等的干扰后仍有抑菌活性;用蛋白酶K处理后, 其抑菌活性消失;进一步硫酸铵沉淀、透析处理后, 其抑菌活性显著增强, 因此确定该抑菌活性物质为蛋白类物质, 进而确定菌株1～6为细菌素产生菌.通过个体及菌落形态、生理生化试验、16S rRNA基因序列同源性比较, 结果证明1~6菌株为屎肠球菌.     

EM制剂对蜜蜂中肠酪蛋白酶活性的影响

EM是多种微生物复合而成的一种多功能菌群,抑制致病菌的侵入和定植,维持正常生态平衡。EM试剂影响蜜蜂中肠酪蛋白酶的活性,而蜜蜂中肠酪蛋白酶活性与蜜蜂中肠围食膜的形成有关,而围食膜的致密度对阻止微孢子虫侵入蜜蜂中肠细胞起决定性作用。本实验通过饲喂蜜蜂一定时间的EM试剂,测定蜜蜂中肠酪蛋白酶的活力。结果得出:饲喂EM试剂后蜜蜂抗微孢子虫的机理是中肠酪蛋白酶活力明显提高,这是抗病力提高的原因;另外,饲喂一定时间后,蜜蜂中肠酪蛋白酶活力能维持在一定的高水平。     

东方蜜蜂微孢子虫感染西方蜜蜂工蜂中肠的蛋白质组学分析

通过分析西方蜜蜂工蜂感染东方蜜蜂微孢子虫Vairimorpha ceranae(Nosema ceranae)后,中肠蛋白质组的差异,探讨病原与中肠细胞的互作机制。给西方蜜蜂5日龄工蜂自由取食含10⁴个·μL^-1的孢子蔗糖液48 h后,在30℃恒温饲养18 d(23日龄)。结果表明,感染组工蜂存活率仅为34.81%,显著低于对照组的71.85%(P<0.05),感染后工蜂中肠蛋白浓度显著下降(P<0.05),但两组的平均单只日均糖液消耗量没有显著差异(P>0.05)。通过串联质谱标签(TMT)定量蛋白分析系统比较了感染组与对照组工蜂的中肠蛋白质组差异,发现差异显著的蛋白共565个,其中感染中肠显著上调的蛋白有301个,显著下调的蛋白有264个。差异蛋白GO富集分析显示,感染对中肠细胞的细胞进程、能量代谢、细胞形态、蛋白质复合物、分子结合和催化活性等有显著影响;KEGG通路注释发现富集到氨酰-tRNA生物合成、内质网中的蛋白质加工、不同类型的N-聚糖生物合成显著上调,部分抗氧化相关的蛋白显著上调;而显著下调蛋白富集到氨基酸代谢...     

中华蜜蜂与意大利蜜蜂中肠消化酶活性差异性探讨

本试验对中华蜜蜂(A.c.cerana Fab.)和意大利蜜蜂(A.m.ligustica Spinola)的成年工蜂、幼虫中肠内蛋白酶、淀粉酶、蔗糖酶的活性进行了比较.试验结果显示:中华蜜蜂、意大利蜜蜂幼虫之间三种酶活性差异均不显著;而中华蜜蜂、意大利蜜蜂的成蜂间蛋白酶活性差异显著(P＜0.05),意大利蜜蜂高于中华蜜蜂;淀粉酶和蔗糖酶的活性分别为差异显著(P＜0.05)、差异极显著(P＜0.01),中华蜜蜂高于意大利蜜蜂;同一蜂种内,成年蜂中肠液内的三种酶活性,均高于大、小幼虫,且差异极显著(P＜0.01).     

一株羊源肠出血性大肠杆菌的分离与鉴定

肠出血性大肠杆菌是一种严重危害畜禽养殖的革兰氏阴性杆菌,扬州大学动物医院接诊一例羊急性肠出血伴有严重腹泻引起的急性死亡的病例,经过剖检、分离培养、革兰氏染色、生化鉴定后确诊为肠出血性大肠杆菌。     

抗氯霉素单克隆抗体的制备与鉴定

本文用人工合成的氯霉素 -牛血清白蛋白 (CAP- BSA)免疫 BAL B/ C小鼠 ,通过杂交瘤技术建立了 2株分泌抗氯霉素的单克隆抗体 (Mc Ab)的杂交瘤细胞 1D1 0 和 5 E6 。经间接酶联免疫吸附试验 (ci EL ISA)检测细胞培养上清效价为 1∶ 5 12 ,诱生腹水的效价可达 1× 10 8。两株单克隆抗体的亚型为 Ig G1 ,杂交瘤染色体数目为 84～ 96条。该细胞株体外传代和冻存复苏后抗体分泌稳定。ci EL ISA检测显示其与常见抗生素及结构类似物的交叉反应小 ,其灵敏度为 0 .1ng/ ml,IC50 为 2 .38ng/ m l,这表明该单抗具有较大的应用价值     

一株鸡源屎肠球菌的分离及鉴定

为丰富可用作禽用微生态制剂的肠道益生菌株,研究选择7日龄健康雏鸡肠道内容物,利用KF链球菌琼脂培养基分离培养目标分离菌株,通过形态特征和培养特性、生理生化及16S r DNA分子鉴定法,最终确定1株分离菌为屎肠球菌,命名为HEW-A527,为后续禽类益生菌的益生功能及微生态制剂研究提供理论依据。     

一株产细菌素乳酸菌的分离和鉴定

从市售3种酸乳中分离得到4株乳酸菌,通过发酵液的抑菌试验确定S1菌株为细菌素产生菌,综合S1菌株的形态学特征、生理生化特征,将其初步鉴定为乳酸乳球菌（Lactococcus lactis）。在排除过氧化氢和有机酸对指示菌的抑制作用后,确定该菌株产生的抑菌物质为细菌素。该细菌素对大肠杆菌具有较好的抑制作用。     

一株致仔猪关节炎粪肠球菌的鉴定

对1株分离自关节炎病仔猪的肠球菌进行鉴定。选用常规方法进行染色特性、培养特性观察以及药物敏感性和致病试验,然后利用Vitek-32全自动细菌鉴定系统进行生化特性鉴定,并用PCR方法扩增分离株的16 S rRNA基因,克隆并测序,与GenBank上登录的相关菌株及3个粪肠球菌标准菌株进行16 SrRNA序列比较、同源性分析并构建系统发育树。结果显示,该分离株形态及染色特性与肠球菌一致,对仔猪具有一定的致病性,并对临床常用的7种药物产生了耐受性;Vitek-32生化鉴定和16 S rRNA基因同源性分析及比对结果均显示其为粪肠球菌(E.faecalis)。试验证实了粪肠球菌可导致仔猪关节炎。     

EM制剂对蜜蜂中肠围食膜厚度的影响

围食膜(Peritrophic matrix,PM)是昆虫中肠的特有非细胞结构,它具有保护中肠上皮细胞,阻止病原物的侵染等多种功能.对意大利蜜蜂中肠围食膜的结构研究对于了解蜜蜂抗病性,蜜蜂寿命的长短以及一些病原微生物的入侵都是十分重要的.使用H.E.染色法对意大利蜜蜂中肠进行染色,伊红主要染细胞质,苏木色精染细胞核,染色后通过显微镜观察中肠围食膜的厚度和致密度.通过石蜡切片观察,发现饲喂EM生物制剂的蜜蜂中肠围食膜厚度和致密度有一定的增加.     

不同越冬饲料对蜜蜂中肠消化酶活性、组织发育状态以及抗氧化酶基因表达的影响

本试验旨在研究不同越冬饲料对蜜蜂中肠消化酶活性、组织发育状态以及抗氧化酶基因表达的影响,以便为广大蜂农选择越冬饲料提供参考。在2015年10月底选取群势相当的本地意大利蜜蜂(Apis mellifera L.)越冬蜂群(群内无储备越冬饲料脾)9群(5框蜂/群),随机分为3个试验组(3群/组),从11月2号开始分别以蜂蜜(蜂蜜组)、果葡糖浆(果葡糖浆组)和白砂糖水(白砂糖∶水=2∶1,蔗糖组)为越冬饲料进行饲喂,饲喂至11月下旬蜂群进入越冬期。整个试验期为2015年10月底至2016年3月初。分别于越冬前(11月初)、越冬中期(1月初)和越冬后(3月初)采集蜜蜂中肠,测定中肠消化酶(淀粉酶、蔗糖酶和蛋白酶)活性,在越冬中期采集蜜蜂中肠用于中肠组织发育状态和抗氧化酶基因[超氧化物歧化酶1(Sod1)、超氧化物歧化酶2(Sod2)和过氧化氢酶(CAT)]相对表达量等指标的检测。结果表明:在越冬中期,果葡糖浆组和蜂蜜组的蜜蜂中肠内淀粉酶活性显著高于蔗糖组(P0.05)。在越冬中期和越冬后,饲喂不同越冬饲料的蜜蜂中肠内蔗糖酶活性差异不显著(P0.05)。在越冬中期,果葡糖浆组的蜜蜂中肠内蛋白酶活性显著高于蔗糖组和蜂蜜组(P0.05)。蜂蜜组和蔗糖组的蜜蜂中肠肠壁厚度极显著大于果葡糖浆组(P0.01),且蜂蜜组和蔗糖组的蜜蜂中肠隐窝深度也极显著大于果葡糖浆组(P0.01)。在越冬中期,蔗糖组的蜜蜂中肠Sod1基因的相对表达量显著高于蜂蜜组和果葡糖浆组(P0.05)。由此得出,蜂蜜能够提高越冬蜂中肠消化酶活性,蜂蜜和白砂糖有利于越冬蜂中肠组织的发育,而且白砂糖能够提高越冬蜂中肠抗氧化酶基因的表达。因此,蜂蜜和白砂糖比果葡糖浆更适合作为蜜蜂的越冬饲料。     

一株鸡源性肠球菌的鉴定及耐药机制分析

本试验旨在鉴定一株从肉鸡体内分离的广谱耐药菌,并从分子生物学角度对该株细菌的耐药机理进行探讨。根据《常见细菌系统鉴定手册》标准对该菌进行培养特性、生化试验鉴定,设计1对16S rDNA通用引物扩增其16S rDNA并测序鉴定;根据该菌的药物敏感性试验结果设计了12对引物扩增其基因组上耐药基因。细菌培养特性和生化试验结果显示该菌为一株肠球菌,PCR扩增出大小为1465 bp的目的片段,药敏试验显示该株细菌耐受多种抗生素,PCR扩增其耐药基因发现存在ant(6)-iv、OXA-10、tetM、CTX-M-1、TEM基因。最终鉴定该株细菌为一株肠球菌,耐药基因的存在是其产生耐药性的原因之一。     

中华蜜蜂与意大利蜜蜂卵的辨认与监督

在大部分膜翅目昆虫里,亲属辨认与监督不仅对个体有利,而且对群体也至关重要.在意大利蜜蜂蜂群里,工蜂就会对工蜂卵和蜂王卵进行辨认与监督,使群体快速繁衍.以中华蜜蜂和意大利蜜蜂为实验材料,研究了工蜂对受精卵的辨认与监督特性.结果表明,在中华蜜蜂蜂群中,工蜂在2 h之内把意大利蜜蜂的卵全部清理,而中华蜜蜂的卵至少有80%被保留;在意大利蜜蜂蜂群中,工蜂会在4 h之内基本把中华蜜蜂的卵全部清理,但意大利蜜蜂的卵至少还有90%被保留.     

一株黑叶猴源鸟肠球菌的分离鉴定及耐药分析

黑叶猴是我国一级重点保护动物,2018年11月贵州某动物园中黑叶猴出现死亡,为调查其原因,本研究采集病死黑叶猴的肺脏样品进行细菌分离纯化,并对分离菌进行革兰氏染色镜检、生化鉴定、16SrRNA基因序列鉴定、小鼠致病性试验及分离株的药敏试验和耐药基因检测.结果显示:经形态观察、培养特性鉴定以及16SrRNA的PCR鉴定,...     

1株高产乳酸粪肠球菌的筛选、鉴定及益生性能的研究北大核心

研究旨在获得能够高产乳酸的畜源益生菌。试验从新鲜仔猪粪便中筛选得到一批乳酸菌,根据碳酸钙透明圈结果和乳酸含量测定结果得到1株高产乳酸菌株SWS50,对其进行形态特征、生理生化特征、分子生物学结果及系统发育树等鉴定,并进行抑菌试验、抗逆性试验和胃肠道模拟试验。结果显示,菌株SWS50为粪肠球菌,培养48 h后乳酸产量最高可达117.9 mmol/L;菌株SWS50对金黄色葡萄球菌和沙门氏菌表现出较强的抑制作用;菌株SWS50具有较高的抗胆盐能力和耐酸能力,在人工肠液中基本可正常生长,存活率较高。研究表明,菌株SWS50具有较强的抗逆特性和一定的胃肠道存活能力,可发展为畜禽领域应用的潜力益生菌。     

4株鸭源肠球菌的鉴定和致病性

对临床分离的4株鸭源肠球菌郑1株、郑2株、郑3株、北京株和1株粪肠球菌参考菌株进行了系统鉴定,并用SDS-PAGE和Western-blot技术对各菌株细胞壁蛋白图谱进行比较分析。结果5个菌株的形态、染色、生理生化特性均与粪肠球菌特性一致;它们均对青霉素、万古霉素和庆大霉素敏感而对四环素耐药;5个菌株人工感染雏鸭及小白鼠均有致病性,但各菌株间致病力存在差异,北京株最强,参考株最弱,其余3株介于北京株和参考株之间;各菌株的细胞壁蛋白经SDS-PAGE在相对分子质量33 370~131 690之间均显示数十条蛋白带,其中郑2株和北京株在相对分子质量66 840处均有1条染色较深的蛋白带,而用Western-blot分析显示抗北京株胞壁蛋白抗体只能检测到北京株相对分子质量为66 840的抗原蛋白。以上结果表明,这5个被检菌株为致病性粪肠球菌,且致病性以北京株最强。     

一株母猪产道益生性粪肠球菌的分离鉴定

产道作为母猪生殖系统的重要器官组织,与繁殖性能密切相关.本试验无菌采集江西省某养殖场窝产14头母猪产道中段阴道分泌物进行传统细菌分离培养,初步筛选出4株细菌,挑选其中一株通过生化反应和16S rDNA序列分析方法进行鉴定,同时进行抗生素抵抗能力试验和牛津杯法体外抑制试验.生化鉴定结果表明该菌可降解果糖、乳糖、半乳糖等,...     

蜜蜂白垩病病原的分离与鉴定

为了解伊犁河谷蜜蜂白垩病的流行情况及研究快速诊断方法,本试验开展了该病的流行病学调查,并将50份疑似样品处理后采用分离培养法、镜检法及PCR法对病原菌进行了分离与鉴定。结果5份为阳性,阳性率10%,培养基菌落颜色呈白色,较致密,中央凸起,老化菌落颜色呈浅棕色至棕色;镜检可见树枝状分枝的有隔菌丝,二叉分枝间距较大,菌丝体呈疏松的蛛网状,用乳酸棉监染色液染色后菌丝为蓝色;PCR反应结果为阳性,阳性结果测序后所得序列用Blast软件比对,与球囊菌属的蜜蜂球囊菌基因序列相似性最高,达到99%。上述结果表明,从伊犁河谷病蜂中分离的病原菌为蜜蜂白垩病病原。