饲料型四倍体刺槐幼胚离体培养挽救技术研究

遗传变异丰富、具有重要遗传育种价值的饲料型四倍体刺槐幼胚自然败育率很高,研究其离体培养挽救技术具有重要的遗传育种学意义。以处于不同发育时期的饲料型四倍体刺槐幼胚为材料,进行了其离体培养促萌试验,试验结果表明:胚珠的适宜离体培养时期为花后30 d,萌动率47.7%;胚珠的适宜萌动培养基为Nitsch 6-BA 0.5 mg/L IBA 2 mg/L GA30.5 mg/L;筛选出的最佳愈伤组织诱导培养基上得到的愈伤组织诱导率为38.6%,并初步诱导出了不定芽;愈伤组织切片表明,饲料型四倍体刺槐幼胚愈伤组织的增殖生长以内起源为主。     

蔷薇属植物远缘杂交组合的幼胚拯救

蔷薇属植物的远缘杂交是月季品种改良的主要途径,为获得蔷薇属植物远缘杂交植株,以‘白雪山’（Rosa hybrida‘white mountain’）为母本,粉红香水月季（R.odoratavar.erubescens）、‘湖中月’（R.hybrida‘huzhongyue’）、‘紫红香’（R.hybrida‘zihongxiang’）、‘香粉蝶’（R.hybrida‘xiangfendie’）为父本杂交。于杂交后15～40天每5天取幼胚离体培养,并借助石蜡切片技术观察各时段幼胚发育情况。结果表明,正常培养条件下,在MS＋6-BA1.0 mg/L＋NAA0.05 mg/L培养基上,‘白雪山’、‘湖中月’、‘白雪山’ב香粉蝶’、‘白雪山’ב紫红香’可直接萌发并成苗,但成苗率较低,‘白雪山’×粉红香水月季在该培养基上无法萌发。对35天‘白雪山’×粉红香水月季杂交幼胚进行（10±2）℃、光强1 600～2 000 lx预处理后,在相同培养基上可获得杂交幼胚。加入GA3后可提高各幼胚萌发率,各类型幼胚萌发的最适浓度不同。     

慈竹种子胚的组织培养

以慈竹的成熟胚为外植体，在含有6-BA2．0mg·L^-1＋NAA0．3mg·L^-1＋蔗糖3％＋0．7％琼脂的MS培养基上诱导丛芽。将这种丛芽培养于含有6-BA4．0mg·L^-1＋NAA0．3mg·L^-1＋KT0．5mg·L^-1＋蔗糖3％＋0．7％琼脂的MS增殖培养基可分化出丛生芽。生根培养基为含NAA2．0mg·L^-1＋IBA2．0mg·L^-1蔗糖2％＋0．7％琼脂的1／2MS培养基。     

自交新高梨叶片的培养繁殖技术

以新高梨人工自交授粉所获种子经胚培养产生的试管苗为试材,采用正交试验设计,研究了基本培养基、TDZ、IAA和6-BA四因素及其组合对该自交种叶片不定芽再生的影响.结果表明,基本培养基的种类在愈伤组织分化出芽的过程中起着主导作用,而6-BA和IAA分别在诱导愈伤组织和诱导丛生芽阶段起主要作用.通过综合平衡法得出最佳培养基配方为NN69 0.5 mg*L-1 TDZ 0.3 mg*L-1 IAA;最佳接种试材为出芽后无菌培养15～30 d的叶片;最佳接种方式为叶基部向上插入接种.     

马尾松幼胚胚性愈伤组织诱导的研究

利用马尾松未成熟胚为外植体,在预备实验的基础上,通过对不同时期不同家系马尾松幼胚的采集、接种,诱导产生胚性愈伤组织,计算实验数据,利用SPSS13进行数据分析。结果表明:以LP为基本培养基,最易诱导出胚性愈伤组织的采种时期是4月中旬至5月下旬;在这一时期不同家系对诱导率影响的差异不显著;随着幼胚成长,胚性愈伤组织的诱导率也逐步下降;马尾松幼胚的胚性愈伤组织诱导过程需在暗培养条件下进行;在初步试验中,诱导胚性愈伤组织最佳的是第③号激素处理。     

白花泡桐优树组织培养幼化技术研究

为了探索白花泡桐的幼化技术,以13个白花泡桐优树为试验材料,通过组织培养法对白花泡桐优树材料的幼化技术进行了研究。结果表明:嫁接嫩芽为最适合的外植体;MS+BA 4.0 mg.L-1+NAA 0.3mg.L-1为初代芽诱导最佳培养基;1/2 MS+BA4.0 mg.L-1+NAA0.3 mg.L-1为继代培养幼化的最合适的培养基;12个白花泡桐优树材料成功得到幼化。1/2 MS+NAA0.1 mg.L-1或1/2 MS+IBA0.1 mg.L-1+NAA0.1 mg.L-1为最理想的生根培养基。炼苗在室内进行,炼苗一个月后大棚壮苗,成活率可达95%以上。     

不同美国黄松成熟胚对组织培养的反应

以美国黄松成熟胚为外植体在GD 6—BA0．5mg／L培养基进行离体培养诱导不定芽,附加20g／kg蔗糖、0．6g／kg琼脂,pH为5．8,研究不同成熟胚对组织培养的反应。试验结果表明,不同成熟胚的生理状态对组织培养具有重要的影响。     

桃幼胚及幼胚子叶再生的研究

以玉露桃和湖景蜜露桃幼胚及幼胚子叶为试材,研究基本培养基类型、激素、损伤方式等因素对再生的影响。结果表明:培养基是影响幼胚诱导愈伤组织的最重要因素,MS适合供试材料诱导愈伤组织;激素诱导愈伤组织因品种而异,NAA1.0mg·L-1对45d、0.5mg·L-1对55d玉露,BA0.5mg·L-1对55d湖景蜜露效果较好,在试验浓度范围内2,4-D对供试幼胚均无明显效果;幼胚的发育状态是影响诱导愈伤组织的另一因素,玉露桃45d愈伤组织诱导率最高,达96.6%,而55d诱导率为81.6%。愈伤组织可在MS 0.05mg·L-1NAA 1.0mg·L-1BA培养基上分化成芽,再生芽在1/2MS 1.0mg·L-1IBA培养基上生根。幼胚子叶不定芽再生培养基的激素配比为NAA0.50mg·L-1 BA10.0mg·L-1、NAA0.05mg·L-1 TDZ3.0mg·L-1;带胚芽子叶纵向刻伤再生率高;不定梢(芽)在1/2MS 2%蔗糖 7.5g·L-1琼脂 IBA1.0mg·L-1 Ad20mg·L-1的培养基上能生根。     

牡丹江玉米自交系幼胚愈伤组织诱导的研究

以牡丹江地区4个不同基因型玉米幼胚为材料,对影响诱导愈伤组织的几个重要因素进行研究。结果表明,对于同基因型的玉米愈伤组织的诱导,不同培养基诱导出胚性愈伤组织有明显的差异;玉米幼胚的愈伤组织诱导是较普遍的,但不同基因型诱导率是不同的;培养基中的激素配比对胚性愈伤组织诱导率有很大影响,2,4-D是非常有效的诱导愈伤的激素;幼胚的大小影响玉米愈伤组织的诱导,但盾片的放置位置并不影响其诱导。     

翠冠梨茎段组织培养的研究

以翠冠梨茎段为外植体进行组织培养研究,筛选出了较为适合该品种离体繁殖的基本培养基为1/2M S,并通过无芽茎段培养获得了愈伤组织,通过有芽茎段培养获得了无菌苗.     

枇杷离体胚萌芽与丛生芽诱导的研究

采用枇杷胚为外植体，以1／2MS为基本培养基，采用正交试验法研究 了不同浓度的激素对胚芽的影响，筛选出了最佳萌芽培养基1／2MS＋6－BA2．0mg/L LAA0.5mg/L NAA0.0mg/L。同时也比较了时间对萌芽的影响。丛生芽诱导与增值以MS＋6－BA2.0mg/L NAA0.2mg/L为较好培养基，并且高浓度的6－BA不利于无根苗健康生长，而NAA对此无影响。     

杂种落叶松未成熟胚的体细胞胚发生和植株再生

以未成熟合子胚为外植体,建立杂种落叶松胚性愈伤组织诱导和植株再生体系.从日本落叶松5×长白落叶松77.3和日本落叶松5×兴安落叶松9两个家系诱导出胚性愈伤组织,授粉后65天左右采集的合子胚在添加0.5 mg·L-1 2,4-D+0.5 mg·L-1 6-BA+0.5 mg·L-1 KT的S培养基上胚性愈伤组织诱导率最高,为10%.从胚性愈伤组织中筛选出3个具有稳定分化能力的胚性细胞系,其中授粉后65天采集的日本落叶松5×长白落叶松77-3合子胚诱导的胚性细胞系的每克胚性愈伤组织形成的体胚数、体胚萌发率、植株再生率最高,分别为18.1个,77.O%,28.1%.再生植株的移栽成活率为41.8%.     

刺槐未成熟合子胚的体细胞胚胎发生和植株再生

以刺槐不同胚龄的未成熟合子胚为外植体,采用混合正交试验设计,研究幼胚胚龄和不同外源激素种类及质量浓度对刺槐胚性愈伤组织的诱导和体细胞胚分化、萌发的影响.结果表明:开花后8周(55天左右)是胚性愈伤组织和体胚诱导的最佳外植体取材时期;MS+2,4-D 5.0 mg·L-1 +BA0.5 mg·L-1是诱导胚性愈伤组织的最佳培养基,出愈率最高为95.42％±0.02％;MS +NAA0.5 mg·L-1 +BA0.5 mg·L-1+谷氨酰胺250 mg·L-1+水解酪蛋白500 mg·L-1是体细胞胚诱导和分化的最佳培养基,直接体细胞胚发生率最高为92.40％±0.12％,通过愈伤组织诱导体细胞胚发生的频率最高为90.73％ ±0.49％.一旦形成球形胚,将培养物转接到不含任何生长调节剂的MS培养基上,体细胞胚经成熟萌发可进一步形成完整小植株.     

桂花幼胚培养及愈伤组织增殖诱导

采用不同培养基对桂花胚的培养进行了试验研究,结果表明:MS 1-1.5 mg.L-16-BA有利于桂花幼胚的萌发;MS 2 mg.L-16-BA 0.3 mg.L-12,4-D有利于幼胚苗的幼叶愈伤组织的诱导,诱导率高,且质地致密;B5 1.5 mg.L-16-BA 0.05 mg.L-1NAA有利于幼胚苗基部产生的愈伤组织的增值诱导,所形成的新愈伤组织呈淡绿色,且质地致密,生长很好,并能分化出根。     

大果榉未成熟胚愈伤组织的诱导和植株再生

将大果榉的未成熟胚培养在不同植物激素种类和浓度的术本植物培养基(WPM)上产生愈伤组织,然后将愈伤组织接种在芽的诱导培养基上形成不定芽,不定芽在生根培养基上生根形成完整植株．结果表明:大果榉愈伤组织诱导的适合培养基为WPM附加BA 1．0 mg·L-1+NAA 1．0 mg·L-1,诱导事为59．1％;不定芽的分化培养基为在WPM+NAA 0．5 mg·L-1+6．BA 2．0 mg·L-1,不定芽的诱导率为71．1％,在WPM+BA2．5 mg·L-1+NAA1．0 mg·L-1的培养基种芽分化的平均数未为5．21±1．02;生根培养基以WPM+0．1 mg·L-1 IBA的效果量好,生根率可达63．33％,平均最多生根条数为．再生植株在温室适应培养的存活率为92％．     

香樟未成熟合子胚体胚发生及植株再生研究

以香樟的未成熟幼胚为外植体进行诱导体胚发生影响因素的研究.成功地从香樟幼胚中诱导出胚状体并获得再生植株,MS为基本培养基,蔗糖是最佳的碳源.经2年对初生胚的继代培养,获得胚性愈伤组织;胚性愈伤组织经体胚诱导、体胚成熟、体胚萌发3个过程的诱导后能够获得再生植株.