石河子地区仔猪猪瘟母源抗体监测及免疫效果分析

本文采用正向间接血凝试验的方法 ,对石河子地区具有代表性的规模化养猪场进行了猪瘟母源抗体血清检测,对其所产仔猪在7、14、21、30、37、44日龄进行跟踪采血检测其猪瘟母源抗体水平,以此了解石河子地区猪场猪瘟母源抗体水平和保护期,并确定合理的首免日龄,为预防猪瘟制定适宜的免疫程序提供依据。     

猪瘟胶体金免疫层析快速诊断法的建立及应用

笔者运用胶体金免疫层析技术,建立一种操作简单、灵敏度高、特异性好,能区分强弱毒感染,适合临床诊断的检测猪瘟病毒的方法。本试验利用大肠杆菌表达猪瘟病毒E2蛋白作为弱毒抗原,利用PK15细胞培养纯化后的猪瘟病毒强毒用作强毒抗原,研制了胶体金免疫层析猪瘟病毒抗体检测试纸条。结果显示,经过37℃破坏,该试验方法制备的试纸条仍具有很好的稳定性;与间接血凝法、美国IDEXX酶免试剂比较,发现该试纸条灵敏度在一定程度上优于前者;用多种病毒、病原菌阳性血清考核,显示该试纸条亦具有较高特异性。该试纸条的研制为猪瘟的快速诊断提供了一种更加实用的方法。     

猪场免疫程序制定参考

1.仔猪①猪瘟。采用超前免疫法,出生仔猪吃奶前注射猪瘟疫苗,2头份/头,2小时后再吃奶;35日龄二免,4头份/头(建议使用哈尔滨兽医研究所生产的猪瘟兔化弱毒苗)。②肺炎支原体。1周龄     

规模化猪场仔猪猪瘟母源抗体效价动态检测

仔猪猪瘟母源抗体的存在,可使仔猪在一定时间内被动地得到保护,但又给免疫接种带来影响。试验采用IHA法对哺乳母猪及其所产未进行猪瘟疫苗超前免疫的初生仔猪进行了猪瘟抗体检测,结果显示,26头母猪在整个哺乳期的抗体效价均达标,并且处于较高水平,被检仔猪在出生后15~20日龄时母源抗体水平达到最高值,随后保持相对稳定,20日龄后开始逐渐回落,至35日龄时母源抗体水平低于保护临界值。鉴于此,该养猪场在不进行猪瘟超前免疫的情况下,猪瘟疫苗首免日期应安排在30~35日龄之间。     

湖南省猪瘟流行情况的血清学调查

采用ELISA对湖南省规模猪场送检的953份血清进行了猪瘟抗体的检测,对305个病例（场次）进行了猪瘟抗原的检测。结果表明未免疫猪的抗体阳性率仅为2%,免疫猪的抗体阳性率为55.59%;305个病例（场次）其猪瘟抗原的阳性率为61.97%。     

浅析猪瘟免疫失败的原因

猪瘟是一种重要的传染病,具有高度传染性和高死亡率。近些年来,由于贯彻综合性防治措施,猪瘟的发病率及死亡率显著下降。然而,在高密度免疫接种情况下,免疫猪发生猪瘟的情况仍时有发生。接种了猪瘟疫苗为什么还发生猪瘟?针     

猪瘟重组蛋白E2的兔体免疫保护试验

鉴于猪瘟病毒不能使家兔发病,但能使之产生免疫原性,而且猪瘟兔化弱度苗能在兔体的定型热反应.本研究选用家兔为试验模型,将自制的亚单位疫苗用弗氏佐剂乳化后免疫家兔,持续一定的免疫周期后,用猪瘟活疫苗(Ⅱ)攻击免疫及对照试验家兔.根据T淋巴细胞增殖试验、阻断ELISA及攻毒保护试验对所制备的抗原进行了全面的评价.结果表明,该免疫原具有良好的免疫原性,而且能保护免疫家兔为4/4.可以进行下一步的开发和利用价值.以期该疫苗能为猪瘟的防治做出贡献.     

高致病性猪蓝耳病、猪口蹄疫、猪瘟综合防控技术应用

高致病性猪蓝耳病、猪口蹄疫和猪瘟是目前危害我国养猪业的几种最为重大的生猪疫病,为我国一类动物疫病。三年来,农三师应用综合防控技术对高致病性猪蓝耳病、猪口蹄疫、猪瘟进行了防疫实践,取得了显著的防治效果。     

巧治猪瘟和猪哮喘

猪瘟一旦发病,传染快、死亡率高。一般发病至死亡过程仅数小时,慢性猪瘟在两日左右也即死亡,一经患病损失惨重。以往在生产中仅以预防为主,单一用药不见成效。     

浅谈非洲猪瘟的诊断与防控

正非洲猪瘟是由非洲猪瘟病毒所引起的一种急性致死性传染病,其临诊特征为病程短,病死率高,病猪高热稽瘤,皮肤发绀,淋巴结和内脏器官严重出血。本病症状类似猪瘟,但更为急剧,诊断比较困难,难以消灭。1921年首次发现于肯尼亚,并一直流行于非洲,后来传播到欧洲和美洲,近年来我国也有发生。2018年8月,我国首次在辽宁省沈阳市确诊发生第一例非洲猪瘟,     

分泌抗猪瘟病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

采用单克隆抗体制备技术,建立了分泌抗猪瘟病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株,液氮保存4年后复苏,细胞在HAT选择培养基中生长旺盛,分泌抗体稳定,分别命名为YNF1,YNF2,YNF3,YNF4,杂交瘤细胞染色体数介于96~115条。细胞培养上清和腹水的单抗间接ELISA效价分别为1∶80~1∶160和1∶5 000~1∶10 000。在间接ELISA和夹心ELISA检测中单抗与猪瘟病毒呈特异性反应,与正常的猪、兔肾组织提取液及其血清Ig无交叉。抗体蛋白属IgG类,亚类及轻链分别为IgG1/λ,IgG2a/κ,IgG2a/λ,IgG1/λ。结果表明,4株杂交瘤是分泌抗猪瘟病毒单克隆抗体的细胞株,可长期传代无限分泌单抗,是进一步研究猪瘟病毒和开发敏感、特异、快速诊断猪瘟试剂盒和试纸探针的免疫学特异性试剂来源。     

PEDV亚单位疫苗免疫增强剂的筛选

为了研究PEDV的新型亚单位疫苗,提高PEDV亚单位疫苗的免疫原性,选取免疫增强剂CVC1302、CVC1303与国家兽用生物制品工程技术研究中心构建的可溶性表达PEDV S蛋白核心表位COE的重组蛋白(p QZCOE-LTB)混合乳化制成疫苗,免疫4周龄的ICR小鼠,首免14 d后加免1次,随后采集首免14(加强免疫前),21,28,55 d的小鼠血清,分别用琼扩试验的方法定性检测血清IgG抗体以及用ELISA试剂盒定量检测小鼠血清IgG抗体滴度动态变化,肠组织sIgA抗体滴度。结果表明,重组蛋白与CVC1303配合使用免疫小鼠能产生显著高于灭活苗(CV777)阳性对照组的IgG和sIgA抗体水平,说明CVC1303免疫增强剂能有效增强该重组蛋白的免疫原性,提高亚单位疫苗免疫效果。     

鸡传染性鼻炎二价油苗免疫鸡群抗体动态研究

应用阻断ELISA (B ELISA)、血凝抑制试验 (HI)和血清平板凝集试验 (SPA)方法 ,检测了鸡群用鸡传染性鼻炎A、C二价油乳剂灭活疫苗免疫后 0～ 390d的血清阻断ELISA、HI和平板凝集抗体消长情况 ,并绘制了相应抗体曲线。结果表明 ,鸡体按规定免疫程序免疫后 ,A型B ELISA抗体和HI抗体在测定期内一直保持比较高的水平 ,C型B ELISA抗体首免 5 0～ 180d、SPA抗体在首免后 5 0～ 60d达到高峰 ,此后抗体缓慢下降 ,但各种抗体至少可持续 390d以上。结果进一步显示了二价苗良好的免疫原性以及B ELISA和SPA较好的敏感性 ,为二价苗、各种诊断方法或其试剂盒产品的进一步应用提供了参考。     

非洲猪瘟的防控措施

正非洲猪瘟是由非洲猪瘟病毒引起的一种急性、烈性、高度接触性传染病,严重危害着全球养猪业。我国将非洲猪瘟列为一类动物疫病,是烈性外来疫病,其强毒力毒株对生猪致病率高,致死率100%。一、临床症状及剖检变化该病超急性型临床症状:猪只无预兆猝死。急性型临床症状:主要表现是各年龄段猪高死亡率;高热(40~42℃)稽留3天左右;食欲不振,身体虚弱,躺下并蜷缩,四肢潮红,皮下出血,眼、鼻部有明显分泌     

生猪重大疫病“三苗两点注射”免疫方法和优点

生猪重大疫病"三苗两点注射"免疫方法,是指将国家要求强制免疫的猪瘟、高致病性猪蓝耳病两种疫苗同时用猪瘟疫苗稀释液或高致病性猪蓝耳病疫苗稀释液按1∶1∶1的比例稀释后一次性注射到猪一侧颈部肌肉内,另一侧颈部同步注射猪O型口蹄疫合成肽疫苗的免疫方法。1.操作要点一是稀释疫苗。疫苗稀释前应恢复到     

五株食源性致病菌特异性卵黄抗体的研制

目的：确定制备用作食品添加剂的引起食品中毒常见的5种致病菌的高免卵黄抗体的技术参数。方法：以食品中常见的由该实验室分离和鉴定的沙门氏菌,金黄色葡萄球菌,溶血性链球菌,副溶血弧菌,变形杆菌五株地方性致病菌株的等量混合菌液用油佐剂乳化后免疫新开产的蛋鸡,收集高免蛋,利用水稀释法制备多克隆卵黄抗体,并用超滤法对其进行浓缩。结果：免疫后高免蛋收集的最佳时间为三免后第2~8周,水稀释法最佳稀释比例为1:6,pH值为5.2,通过超滤IgY浓度提高了6.48倍,IgY的纯度由原来的24.6%提高到42.3%。结论：通过上     

河南猪群猪瘟的感染及防治研究

[目的] 为了找出河南省猪瘟的流行病学规律,研究猪瘟强毒株感染情况,查实规模化猪场猪瘟免疫情况。[方法] 使用ELISA方法和革兰氏染色方法对301份病猪的样本进行猪瘟强毒抗原及细菌感染情况的检测,分析了猪瘟在河南省猪群的感染、流行范围情况及同细菌病的混合感染情况;对猪瘟阳性猪场采取综合防治措施并对采取措施后没有效果的猪场进行了蓝耳病和圆环病毒病的检测,确定混合感染情况。[结果] 猪瘟在河南省流行广泛;猪瘟病毒的平均检出率为26.25%;细菌感染占猪瘟病毒总阳性样本的25.31%;蓝耳病和圆环病毒病与猪瘟有不同程度的混合感染;综合性防治措施实施后对大部分猪厂效果明显;但对混合感染的猪群效果不好;[结论] 猪瘟与细菌、蓝耳病、圆环病毒病等混合感染是造成猪瘟难以根治的主要原因;综合防治措施的实施是净化猪瘟的重要手段。     

淘汰猪瘟抗体不合格种猪对母猪繁殖性能和仔猪生长性能的影响研究

应用Herdchek猪瘟抗体检测试剂盒对3个规模化猪场送检的1865份血清样品进行猪瘟抗体的测定,淘汰加强免疫后猪瘟抗体不合格（阻断率＜50%）的种猪,观察并记录淘汰猪瘟抗体不合格种猪后猪场种猪繁殖性能和小猪生产性能指标的变化情况。结果显示：3个猪场（A、B、C）淘汰加强免疫后猪瘟抗体不合格种猪后,平均窝产仔数分别提高了0.29头（P<0.05）、0.40头（P<0.01）、0.39头（P<0.01）;平均窝产活仔数分别提高了0.54头（P<0.01）、0.35头（P<0.01）、0.62头（P<0.01）;平均窝产断奶仔猪数分别增加了0.65头（P<0.01）、0.71头（P<0.01）、0.81头（P<0.01）;3个猪场（A、B、C ）30-60日龄小猪增重差异均极显著（P<0.01）;3个猪场（A、B、C）的母猪受胎率、仔猪断奶成活率和30-60日龄小猪成活率均有不同程度的提高,但差异均不显著（P＞0.05）。由此表明：淘汰加强免疫后猪瘟抗体不合格种猪后可以显著提高猪场母猪繁殖性能和小猪的生产性能。     

阳城县加强运猪车辆监管,有效控制疫病传播

正非洲猪瘟具有发病率高、死亡率高等特点,严重危害生猪产业的健康发展。据农业农村部统计,因生猪调运车辆和贩运人员携带病毒,未经彻底消毒进入其他猪场引发的疫情,占到目前我国所发生非洲猪瘟疫情的四成以上,在各种传播途径中占比最高,已成为非洲猪瘟传播的主要风险点。尤其在当前新冠病毒从进口冷链动物产品频频检出的情况下,把好动物及其产品在生产、加工、包装、贮藏、运输到销售各个环节的消毒检疫检验关,意义更为重大。     

非洲猪瘟病毒LNA引物PCR检测方法的建立及优化

为了建立一种便捷、快速且精准的非洲猪瘟病毒的检测方法,本研究根据GenBank中公布的ASFV p72基因序列,设计了一对特异性引物,并对引物中的适当碱基进行锁核酸修饰,通过优化退火温度、引物浓度,建立了非洲猪瘟病毒的锁核酸修饰引物PCR检测方法。结果表明,该方法具有良好的敏感性和特异性,检测灵敏度可以达到3×10¹ copies/uL,比常规引物PCR方法的灵敏度提高了100倍,比real-time PCR方法的灵敏度提高了10倍,对猪瘟病毒、猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病毒等病原基因组均无扩增,特异性良好。72份临床样品的检测结果与OIE推荐的qPCR方法检测结果一致,符合率为100%。本研究成功建立了非洲猪瘟病毒的LNA引物PCR检测方法,方法的特异性强、敏感性高,操作简单,为非洲猪瘟病毒的检测提供了一种新的、更加敏感的检测技术。