不同蛋白酶水解面筋蛋白制备谷氨酰胺结合肽的比较研究

选取食品级胰蛋白酶、胃蛋白酶、Protamex^TM复合蛋白酶、Alcalase碱性蛋白酶3．0T、Neutrase中性蛋白酶1．5MG和Flavourzyme^TM复合风味蛋白酶1000MG以确定蛋白酶对酰氨基的水解能力。单酶在适宜的条件下水解面筋蛋白4h后取样。试验采用双（1，1-三氟乙酸基）碘苯（BTI）保护肽中结合Gln，通过高效液相色谱测定肽中Glu含量间接测定Gln，分析水解液中氨基氮的含量，并计算平均肽链长度。结果发现胰蛋白酶、胃蛋白酶和Pro—tamex^TM复合蛋白酶对酰氨基的水解能力较小，对酰氨基的破坏率分别为2．79％，1．90％和5．80％；而Alcalase碱性蛋白酶3．0T、Neutrase中性蛋白酶1．5MG和Flavourzyme^TM复合风味蛋白酶1000MG分别是32．25％，26．55％和16．38％。胰蛋白酶、胃蛋白酶和Protamex^TM复合蛋白酶水解面筋蛋白8h后Gln的得率分别是77．86％，69．58％和87．70％。试验结果表明胰蛋白酶、胃蛋白酶和Protamex^TM复合蛋白酶为制备Gln结合肽的合适蛋白酶。     

绵羊瘤胃微生物胞外蛋白酶性质的研究

本试验测定了pH、温度和EDTA对纯化的绵羊的瘤胃微生物胞外蛋白酶活性的影响,并用一已知氨基酸排列顺序的肽段(由15个氨基酸组成)作为底物,进一步测定了蛋白酶的酶切位点。结果表明,(1)纯化蛋白酶的最适pH在6.0～6.5之间,最适温度为40℃左右。(2)不同浓度的EDTA(浓度分别为1,10,25,50,75和100mM)对蛋白酶活性没有影响,因而该酶属于丝氨酸蛋白酶类。(3)纯化蛋白酶是一种内肽酶,其酶切位点在组氨酸—酪氨酸(?)、天冬氨酸—丙氨酸(?)、亮氨酸—赖氨酸(?)和(或)缬氨酸—赖氨酸(?)相连的肽键。(4)胰蛋白酶和纯化的蛋白酶虽同属丝氨酸蛋白酶类,但前者对底物具有高度的专一性,后者对底物的专一性不强,这是瘤胃内饲料蛋白质强烈降解的主要原因之     

钙蛋白酶抑制蛋白可抑制屠宰后肌肉蛋白水解

钙蛋白酶蛋白系统在细胞内普遍存在，并参与机体生长与代谢过程．主要由钙蛋白酶（ucalpain和m-calpain）、钙蛋白酶抑制蛋白（calpastatin）及骨骼肌特异性钙蛋白酶（muscle specifiocal pein，P94）组成钙蛋白酶抑制蛋白（calpastatin）是钙蛋白酶的内源性抑制蛋白，对调控calpains的活性有重要意义。本文对钙蛋白酶蛋白系统的概况、钙蛋白酶抑制蛋白（calpastatin）基因的结构、特性、功能及其研究进展进行了综述．并对其研究前景进行了展望。     

嗜水气单胞菌弹性蛋白酶的纯化及特性分析

为阐明嗜水气单胞菌弹性蛋白酶的性质及其在致病过程中的作用，试验以我国分离的嗜水气单胞菌J-1株为研究对象．纯化了其弹性蛋白酶．并对该酶进行热稳定性、蛋白酶抑制剂抑制作用、金属离子影响和致病性等特性分析。结果表明．嗜水气单胞菌J-1株的培养上清经35％～60％硫酸铵沉淀、阴离子交换层析和凝胶过滤层析，可获得纯化的弹性蛋白酶．SDS-PAGE显示单条带．相对分子质量约38000。该酶对热稳定，EDTA可抑制其活性，PMSF对其无影响，金属离子铜、锌、钴等抑制其活性。说明此酶属于热稳定金属蛋白酶。腹腔注射纯化的弹性蛋白酶能致死小鼠．其对小鼠的LD50为6．4μg（0．2mL）．表明该酶是一种直接致病因子。     

外源蛋白酶对仔猪生产性能,器官重的影响

本试验在３５日龄断奶长哈杂交仔猪日粮中分别加入０．１％、０．５％浓度的Ｐ４、Ｐ７两种外源蛋白酶。在３５天试验中加酶日粮和对照日粮在平均日增重、饲料增重比差异不显著（Ｐ＞０．５）。０．５％Ｐ４蛋白酶降低了小肠鲜重（Ｐ＜０．０１）和小肠鲜重／空体重（Ｐ＜０．０５），提高了心脏重／空体重，与对照组差异显著（Ｐ＜０．０５）。     

中药组方和外源蛋白酶对肉鸡生长性能、屠宰性能及肠道菌群的影响

试验旨在研究肉鸡日粮中添加中药组方和外源蛋白酶对肉鸡的生长性能、屠宰性能及肠道菌群的影响。选取240只1日龄肉仔鸡随机分为4组,每组3个重复,每个重复20只鸡。对照组鸡饲喂基础日粮,试验1组、试验2组、试验3组分别在基础日粮中添加1 g/kg中药组方、0.5 g/kg蛋白酶以及1 g/kg中药组方+0.5 g/kg蛋白酶。试验期28 d。结果显示：与对照组相比,各试验组肉鸡的末重、平均日增重、平均日采食量显著提高（P<0.05）,料重比均显著下降（P<0.05）。与对照组相比,试验1组、试验3组肉鸡屠宰率显著升高（P<0.05）,各试验组肉鸡的屠体重、全净膛重、胸肌重、腿肌重、全净膛率、胸肌率均显著增加（P<0.05）,试验1组和试验2组的腿肌率显著升高（P<0.05）。与对照组相比,各试验组肉鸡肠道内容物大肠杆菌含量显著降低（P<0.05）,乳酸杆菌含量显著增多（P<0.05）。研究表明,中药组方和外源蛋白酶联合使用可更好地提升肉鸡生长性能、改善屠宰性能和肠道菌群,值得深入研究。     

溶菌酶在饲料领域的研究进展

溶菌酶（Lysozyme），法定编号：EC 3．2．1．17，美国化学文摘服务社（CAS）编号[9066—59—5]，又称胞壁质酶或N-乙酰胞质聚糖水解酶，是一种安全性很高，具有一定保健作用的蛋白酶。它广泛存在于鸟类和家禽的蛋清中，哺乳动物的泪液、唾液、血浆、乳汁、胎盘、体液及组织细胞内，其中以蛋清中含量最丰富（约0．3％）。     

菠萝蛋白酶防治仔猪腹泻的研究现状

1957年，Heinicke发现在菠萝的茎中有高浓度的菠萝蛋白酶。它的作用包括：(1)抑制血小板聚集；(2)溶解纤维蛋白；(3)消炎；(4)抗肿瘤；(5)调节细胞因子和免疫；(6)对皮肤清创的特性；(7)促进其它药物的吸收；(8)溶解粘液；(9)助消化：(10)促进伤口愈合；(11)改善心血管循环系统；(12)抑制细菌毒素分泌。菠萝蛋白酶是从菠萝中提取的一组巯基水解蛋白酶．从来源可分为果菠萝蛋白酶和茎菠萝蛋白酶。菠萝     

全脂大豆替代豆粕补充蛋白酶对肉鸡生长性能、养分消化及肠道健康的影响

文章旨在评估全脂大豆日粮补充蛋白酶对肉鸡生长性能、养分消化及肠道健康的影响。试验将800只初始体重为（58.98±1.02）g的1日龄商品肉鸡随机分为4组,每组4个重复,每个重复50只。试验日粮采用2×2因子设计,即2个全脂大豆水平（0和4.5%）及2个酶水平（0和0.5 g/kg蛋白酶）,分别对应T1～T4组。结果：T3组肉鸡末重和平均日采食量显著低于T1和T2组（P＜0.05）,而T3组料重比显著高于其他组（P＜0.05）。4.5%全脂大豆组肉鸡的末重显著低于0%组（P＜0.05）,同时0.5 g/kg蛋白酶组肉鸡末重也显著高于0 g/kg酶组（P＜0.05）。T3组肉鸡粗蛋白质、赖氨酸、蛋氨酸和丙氨酸表观消化率显著低于T1和T2组（P＜0.05）。4.5%全脂大豆组肉鸡赖氨酸表观消化率显著低于0%组（P＜0.05）。日粮全脂大豆和酶添加水平对肉鸡空肠绒毛高度与隐窝深度比值的影响具有显著交互作用（P＜0.05）。结论：综合本试验分析的指标,日粮添加4.5%全脂大豆替代豆粕会降低肉鸡体重、赖氨酸表观消化率及空肠绒毛高度,添加5 g/kg蛋白酶可以改善全脂大豆对上述指标的负面影响。 [关键词]全脂大豆|蛋白酶|肉鸡|生长性能|养分消化|肠道健康     

豆粕和菜籽粕饲粮中添加新型蛋白酶对生长猪生长性能、养分消化率和血清生化指标的影响

本试验旨在探究豆粕和菜籽粕饲粮中添加新型蛋白酶对生长猪生长性能、养分消化率和血清生化指标的影响。采用2×2因子试验设计，试验因素分别为饲粮类型（玉米-豆粕型和玉米-豆粕-菜籽粕型）和蛋白酶水平（0和300 mg/kg）。选取初始体重为（21.40±1.59） kg的杜×长×大生长猪32头，随机分为4个组，每组8个重复，每个重复1头猪。各组分别饲喂玉米-豆粕型饲粮、玉米-豆粕型饲粮+300 mg/kg蛋白酶、玉米-豆粕-菜籽粕型饲粮以及玉米-豆粕-菜籽粕型饲粮+300 mg/kg蛋白酶。试验期21 d。结果表明：1）饲粮类型和蛋白酶水平对生长猪的生长性能无显著影响（P>0.05）。2）与玉米-豆粕型饲粮相比，玉米-豆粕-菜籽粕型饲粮显著降低了生长猪的有机物、粗纤维和粗蛋白质消化率（P<0.05）。3）饲粮中添加300 mg/kg蛋白酶显著提高了生长猪的有机物、粗脂肪、干物质、粗蛋白质、粗纤维以及总能消化率（P<0.05）。4）与玉米-豆粕型饲粮相比，玉米-豆粕-菜籽粕型饲粮显著降低了生长猪的血清尿素氮含量（P<0.05）。5）饲粮类型与蛋白酶水平对生长猪的生长性能...     

饲用酸性蛋白酶研究及其应用

蛋白酶是水解蛋白质肽链的总称，包括酸性（pH2.5-3)、中性（pH 7左右）和碱性（pH 8左右）3种，而在饲料中多采用酸性和中性蛋白酶，以提高动物对蛋白质的水解效率，促进动物对饲料蛋白质的吸收效率。其中酸性蛋白酶是端肽酶，一般存在于细胞内，具有多种生物学功能，主要应用于饲料、医药、乳酪制造、合成洗涤剂以及制革工业。本文主要就近年来对饲用酸性蛋白酶的研究及其在动物饲料营养中的应用进行综述。     

饲料中添加蛋白酶AG对鲤鱼鱼种生长和蛋白质消化酶活性的影响

通过2个试验研究了饲料中添加蛋白酶AG对鲤鱼生长和前肠蛋白质消化酶活性的影响.试验Ⅰ选用540尾均重11.7 g的鲤鱼,随机均分为6组,随机选取3组分别饲喂鱼粉含量为10%、15%、20%的3种等蛋白基础饲料,另外3组分别饲喂添加有175 mg/kg蛋白酶AG的以上3种饲料,试验期60 d.试验Ⅱ选取120尾均重48.7 g的鲤鱼,随机分为2组,一组饲喂鱼粉含量6%的基础饲料为对照组,另外一组饲喂添加175 mg/kg蛋白酶AG的基础饲料为试验组,试验期为30 d.试验Ⅰ结果表明:摄食10%鱼粉饲料和20%鱼粉 175 mg/kg蛋白酶AG饲料的鲤鱼分别具有最低和最高的增重率;在10%鱼粉饲料中添加蛋白酶AG显著提高了鱼体增重率(P<0.05),但在15%、20%鱼粉饲料中添加蛋白酶AG,对鱼体增重率没有显著影响.试验Ⅱ结果表明:相比于对照组,试验组鲤鱼增重率提高了6.4%(P<0.05),饲料系数降低了5.4%(P<0.05).试验Ⅰ和试验Ⅱ中,添加蛋白酶AG对鱼体肌肉水分、粗脂肪、粗蛋白质含量均无显著影响(P>0.05);对消化酶活性的测定表明,在鱼粉含量为10%、6%的基础饲料中添加蛋白酶AG,可显著提高前肠组织蛋白酶活性和食糜蛋白酶活性(P<0.05),但在鱼粉含量为15%、20%的基础饲料中添加蛋白酶AG,对前肠组织蛋白酶活性和食糜蛋白酶活性没有影响.综上所述,在鱼粉含量较低的饲料中添加蛋白酶AG,可提高鲤鱼消化道蛋白酶活性,改善生长性能.     

苜蓿草粉对禾花鲤蛋白酶和淀粉酶活性影响的研究

选取来源一致、规格整齐的2龄禾花鲤1 200尾,采用单因子完全随机设计,分为5个处理,每处理3个重复,每重复80尾鱼,分置于15个试验池中。各处理苜蓿Medicago sativa草粉的添加量分别为0（对照组）、40（试验Ⅰ组）、80（试验Ⅱ组）、120（试验Ⅲ组）和160 g/kg（试验Ⅳ组）,正试期50 d,观测苜蓿草粉对禾花鲤前、中、后肠及肝胰脏蛋白酶和淀粉酶活性的影响。结果表明：1）添加苜蓿草粉对前肠蛋白酶活性有显著影响 (P<0.05),其中试验II组显著高于对照组和试验Ⅳ组,但和试验Ⅰ、Ⅲ组差异不显著 (P>0.05)。添加苜蓿草粉对中、后肠及肝胰脏蛋白酶活性均无显著影响 (P>0.05),但它们有相同的变化趋势,即试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组鱼的蛋白酶活性均高于对照组。2）鲤鱼的前肠、中肠、后肠蛋白酶活性依次减弱,而肝胰脏的蛋白酶活性远低于肠道。3）添加苜蓿草粉后前肠及中肠淀粉酶活性比较,试验II组显著高于对照组 (P<0.05),其余各组与对照组差异不显著 (P>0.05),后肠淀粉酶活性与对照组无显著差异 (P>0.05)。添加苜蓿草粉能提高鲤鱼肝胰脏淀粉酶活性,其中试验Ⅱ组显著高于对照组 (P<0.05),其余试验组与对照组无显著差异 (P>0.05)。4）禾花鲤前、中、后肠及肝胰脏4部分淀粉酶的活性有较大的不同,肝胰脏>后肠>中肠>前肠。     

日粮添加蛋白酶对肉仔鸡生产性能、氮代谢及粪便氨气释放的影响

试验旨在探讨蛋白酶对肉仔鸡生产性能、氮代谢以及粪便氨气释放的影响，确定适宜的蛋白酶添加水平，为提高肉仔鸡的生产性能并减少氮的排放提供理论依据。选取体况相近且健康的1日龄AA肉仔鸡240只，随机分为4组，每组6个重复，每个重复10只。对照组饲喂基础日粮（不添加蛋白酶），试验组分别在基础日粮中添加4、8、12 U/g蛋白酶，试验期为42 d。结果表明：蛋白酶对肉仔鸡的平均日采食量无显著影响；1～21、22～42、1～42 d,8 U/g组和12 U/g组平均日增重均高于对照组（P <0.05);12 U/g组耗料增重比均低于对照组（P<0.05）；蛋白酶对摄入氮无显著影响；8 U/g组在1～21 d排出氮低于对照组（P<0.05),12 U/g组在22～42 d排出氮低于对照组（P<0.05);12 U/g组各时期的氮利用率均高于对照组（P<0.05);21 d时，12U/g组血液总蛋白水平高于对照组（P <0.05），尿酸水平低于对照组（P <0.05）；试验组粪便氨气释放量均低于对照组（P<0.05）。可见，蛋白酶添加水平为12 U/g有...     

酶制剂对种番鸭生产性能的影响

试验选择健康无病、产蛋性能稳定的26周龄法国黑羽番鸭384只，随机等分为4组，每组设置3个重复，每重复32只。对照组喂基础日粮，试验组在基础日粮的基础上，分别添加0．1％中性蛋白酶、0．1％植酸酶、0．05％中性蛋白酶＋0．05％的植酸酶，相同环境条件下饲养56d。结果表明，与对照组相比，试验2，3，4组的产蛋量分别提高9．83％（P＜0．05），5．27％（P＜0．05），11．64％（P＜0．01）；受精率分别提高6．66％（P＜0．05），7．48％（P＜0．05），10．67％（P＜0．01），说明在种番鸭日粮中添加酶制剂可显著提高生产性能，并改善种番鸭的采食量、料蛋比和蛋重，尤其两种酶类复合使用效果更佳。     

中性和酸性蛋白酶对断奶仔猪生长性能的影响

选用135头平均体重为(7.2±0.1)kg的杜X长×大三元杂交断奶仔猪,采用3×3两因子完全交叉试验设计,研究了日粮中添加3个中性蛋白酶水平(0、0.004%和0.008%)和3个酸性蛋白酶水平(0、0.004%和0.008%)对断奶仔猪生长性能的影响.试验共设9组,每组3个重复,每个重复5头猪.试验期为28 d,分为前期(1～14 d)和后期(15～28 d)2个阶段.结果表明,中性和酸性蛋白酶对断奶仔猪的前期、后期和全期的平均日增重和料重比有显著影响(P<0.05);对腹泻率无显著影响(P>0.05).其中添加0.008%的中性蛋白酶和0.004%的酸性蛋白酶可显著提高断奶仔猪的平均日增重和平均日采食量,显著降低料重比(P<0.05),而单独在日粮中添加0.008%酸性蛋白酶时料重比最高(P<0.05).由此可知,中性和酸性蛋白酶可一定程度上提高断奶仔猪生长性能,以添加0.008%的中性蛋白酶和0.004%的酸性蛋白酶效果最好,且两者存在互作效应.     

复方健脾散对肉牛生产性能和消化酶活性及抗氧化功能的影响

选用7月龄,190kg“利鲁”杂交一代小牛18头,平均分为3组,分别在小牛日粮中添加0％（对照组）、2％（试验1组）和4％（试验2纽）的复方健牌散添加剂饲喂至10月龄屠宰,其中,试验2组的日粮中不含有常规微量元素添加剂。通过本试验,研究复方健脾散对小牛的促生长作用;对小牛胃肠道非蛋白酶（瘤胃纤维素酶、胰脂肪酶、胰淀粉酶）和蛋白酶（胃蛋白酶,胰蛋白酶,胰凝乳蛋白酶）活性的影响;对肉牛血清中丙二醛（MDA）含量、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—Px）和总超氧化物歧化酶（T—SOD）活性的影响。结果表明,饲喂复方健脾散对小牛的促生长不显著（P〉0．05）;可以显著提高小牛十二指肠的胰脂肪酶、胰蛋白酶和胃蛋白酶的活性（P〈0．05）,但对瘤胃纤维素酶、胰淀粉酶、胰凝乳蛋白酶的活性影响不显著（P〉0．05）;2％复方健脾散添加水平可显著降低肉牛血清中MDA含量和显著提高T—SOD活力（P〈0．05）;但4％复方健脾散添加水平明显提高GSH—Px活力（P〈0．05）。     

不同水产复合酶对芙蓉鲫的应用效果研究

试验芙蓉鲫;500尾随机分成4个组,每组5个重复．每个重复放养25尾鱼。对照组为不添加复合酶制剂的基础日粮,试验组在基础日粮下添加不同公,--j水产复合酶微丸,添加量为200g／t,养殖时间为8周。结果表明：添加水产复合酶的生长性能、对肝脏蛋白酶和淀粉酶都比对照组的高。添加了溢多利公司水产复合酶试验组的终末尾均重和增重率比对照组提高5．12％、12．09％,饵料系数降低了7．14％且差异显著（P〈0．05）,肥满度提高7．55％,差异不显著（P〉0．05）;溢多利水产复合酶对淀粉酶活性提高,分别较公司1复合酶、对照组、公司2的复合酶三组提高1．29％、3．49％、4．73％;蛋白酶的活性提高6．46％、1．77％、0．44％。由此可见,添加200g／t的溢多利水产复合酶对芙蓉鲫的生长性能和内源酶活性提高的效果是最好的。     

9种杀菌剂对香蕉灰纹病菌的室内毒力测定

为了测定不同化学杀菌剂对香蕉灰纹病的毒力,采用菌丝生长速率法测定了9种杀菌剂对3株香蕉灰纹病菌的抑制效果。结果表明,80%多菌灵可湿性粉剂（WP）和12.5%氟环唑悬浮剂（SC）毒力最强,平均EC50值均小于1 mg/L;25%丙环唑乳油（EC）、37%苯醚甲环唑水分散粒剂（WG）、20%戊唑醇乳油（EC）和50%甲基硫菌灵悬浮剂（SC）次之,平均EC50值在1～3 mg/L之间;80%代森锰锌可湿性粉剂（WP）和24%腈苯唑悬浮剂（SC）毒力一般,平均EC50值在9～20 mg/L之间;40%百菌清悬浮剂（SC）毒力最弱,平均EC50值为46.572 4 mg/L。80%多菌灵WP、12.5%氟环唑SC、25%丙环唑EC、37%苯醚甲环唑WG、20%戊唑醇EC和50%甲基硫菌灵SC可有效抑制香蕉灰纹病菌菌丝生长,可进一步用于田间试验。     

饲用酸性蛋白酶研究及其应用

产业规模化养殖畜禽水产，尤其是养殖中的幼年饲养动物，因其消化器官分泌的酶系和酶量（内源酶）不足，对饲料蛋白质消化能力较差，极易引起消化不良、腹泻与消瘦等疾病。因此，国外营养学者很早就将酶制剂作为饲料添加剂加以应用，并证实在饲料中添加蛋白酶（外源性消化酶），有利于提高饲料中蛋白质的可消化性。在２０世纪５０年代，Jensen等（１９５７）和Fry等（１９５８）曾报道，添加粗制蛋白酶制剂到大麦日粮中，可显著提高鸡的生长速度和饲料转化率。经研究发现，酸性蛋白酶是其中一类较为重要的蛋白酶，常见的包括胃蛋白酶、凝乳…