丝瓜多酚氧化酶及过氧化物酶酶学特性的研究

应用分光光度法研究丝瓜多酚氧化酶及过氧化物酶酶学特性的影响因素,为丝瓜酶促褐变的研究提供基础。以普通丝瓜果肉为材料,PPO以邻苯二酚为底物,POD以愈创木酚为底物,研究分析反应温度、反应时间、pH及测量波长、底物的浓度、PPO提取酶液添加量对丝瓜PPO、POD活性的影响。丝瓜褐变相关酶提取和测定方法的优化:(1)PPO最佳反应体系:测定波长408nm、反应温度是35℃、pH为6.0、酶液用量0.15mL,最适底物为邻苯二酚,底物浓度为0.056mol·L~(-1);(2)POD最佳反应体系:测定波长410nm,反应温度为40℃,最佳pH为5.5,酶液用量0.1mL,底物是愈创木酚,浓度为0.067mol·L~(-1)。     

多酚氧化酶的酶学性质及其应用研究

多酚氧化酶(PPO)广泛分布于各种生物体中,它引起食品的褐变,严重损害食品的感官质量。本文介绍了多酚氧化酶催化的反应及其在酶促褐变中的作用,着重阐述了多酚氧化酶酶学性质研究的主要内容和现状,简要介绍了控制酶促褐变的几种常用方法。     

高山花椰菜多酚氧化酶特性及酶褐变预防对策

用硫酸铵分级盐析及透析法分离提纯高山花椰菜多酚氧化酶(PPO)。用分光光度法测定PPO活力,分别测定了花椰菜PPO的最适pH、最适温度及vmax和Km值。结果表明,以邻苯二酚为底物,花椰菜的最适pH值为6.7,最适温度为55℃,vmax值为340.1unit.min-1,Km值为4.7mmol.L-1。温度适应范围广泛,与底物亲和力特别高。并据此结合山区气候和栽培特点提出了相应的预防花椰菜酶褐变对策建议。     

牡丹多酚氧化酶的酶学特性

【目的】研究影响牡丹试管苗多酚氧化酶（PPO）酶学特性的因素,为牡丹的高效组培提供参考。【方法】以牡丹品种“乌龙捧盛”为供试材料,采用分光光度计比色法,研究温度、pH值、PPO提取液添加量及底物的类型和浓度对牡丹PPO活性的影响。【结果】以邻苯二酚为底物时,牡丹PPO的最适反应温度与最适pH分别为25 ℃和6.0,最适PPO提取液添加量为1 mL。牡丹PPO的最适作用底物为咖啡酸,其最适浓度为0.08 mol/L。【结论】通过选择合适的pH值和培养温度,同时结合化学抑制剂调控牡丹PPO活性,可以达到在牡丹组织培养中减少褐化现象、提高试管苗生根率的目的。     

莲藕多酚氧化酶的酶学特性

鲜切莲藕褐变一直是生产中急待解决的关键问题。莲藕的护色主要表现为对组织中多酚氧化酶 (ＰＰＯ)活性的控制。ＰＰＯ是大多数果蔬中普遍存在并引起组织酶促褐变的一类氧化还原酶[1] 。鲜切果蔬由于组织经切分等使ＰＰＯ与底物的接触机会增加 ,加速了褐变反应 ,影响产品质量及     

澳洲青苹多酚氧化酶特性的研究

以邻苯二酚为底物,对澳洲青苹中的多酚氧化酶进行了探讨。分别研究了pH值、温度、底物浓度及抑制剂等因素对多酚氧化酶活性的影响,结果表明:澳洲青苹多酚氧化酶最适pH值为6.5;最适温度为35℃;90℃处理3min,多酚氧化酶活性基本被抑制;添加浓度为125mg/kg抗坏血酸或者浓度为600mg/kg的柠檬酸或者浓度为50mg/kg的亚硫酸氢钠后,多酚氧化酶活性分别为对照的36%,38%和23%。澳洲青萍多酚氧化酶的米氏方程参数为:Km=0.137mol/L,Vmax=0.460U/min。     

红肉桃皮中多酚氧化酶的酶学特性及结构表征

以红肉桃桃皮中多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)作为研究对象,采用Tris-HCl缓冲液进行提取并采用硫酸铵盐析法和柱层析法进行纯化,电泳得到单一的条带。根据米氏常数确定桃皮PPO的最适底物为邻苯三酚,采用分光光度计法测定桃皮中多酚氧化酶的活性,其最适温度为45℃、最适p H值为7.0~7.5,PPO在中性p H值环境中以及55℃以下更为稳定。分别应用圆二色谱仪、荧光光谱仪、动态散射光谱仪对PPO的结构进行表征。圆二色谱表明,该PPO二级结构包含α-螺旋、β-折叠、β-转角以及无规卷曲等结构,其含量分别为50.61%、32.47%、10.83%和6.21%。荧光光谱表明,该PPO最大发射波长为352 nm,相对荧光强度为133.9,表明荧光基团处于极性亲水环境中。动态散射光谱显示,该PPO粒径分布集中在255 nm处,表明其在溶液中以聚集形态存在。     

菜花多酚氧化酶的酶学特性研究

以菜花为原料制备粗酶液,以邻苯二酚为底物,采用分光光度法在420 nm波长下研究温度、pH值、底物浓度对菜花多酚氧化酶活性的影响,建立相应的酶促褐变反应动力学方程,并探讨了氯化镁、十二烷基硫酸钠、亚硫酸氢钠、L-半胱氨酸、抗坏血酸等对酶活性的影响.结果表明,菜花多酚氧化酶的最适pH值为7.0,最适温度为50℃,50℃加热10 min仍保留61％的活性.其米氏常数和最大反应速率分别是0.056 23 mol·L-1和8.650 5U·min-1.氯化镁、十二烷基硫酸钠可增强菜花PPO活性,亚硫酸氢钠、L-半胱氨酸、抗坏血酸可抑制其活性.     

苦瓜多酚氧化酶特性研究

采用分光光度法以邻苯二酚为底物研究了苦瓜多酚氧化酶的酶学特性及一些抗褐变剂对酶活性的影响。结果表明:苦瓜多酚氧化酶作用的最适温度为20℃和80℃,最适pH值为5,米氏常数Km=0.0519 mol/L,Vmax=74.0741U。Vc、L-半胱氨酸和亚硫酸氢钠对苦瓜多酚氧化酶有明显的抑制作用,硫代硫酸钠、柠檬酸有一定的抑制作用,而氯化钠的抑制作用比较弱。     

无核白葡萄多酚氧化酶的酶学特性

【目的】研究无核白葡萄多酚氧化酶（PPO）的酶学特性,为无核白葡萄干加工过程中褐变问题的解决和控制提供参考。【方法】利用McIlvaine缓冲液从无核白葡萄中提取PPO,研究了反应温度、pH、底物浓度、酶液用量对其催化活性的影响,并考察了该酶在不同温度条件下的稳定性,分析了其催化邻苯二酚的催化动力学方程及其参数。【结果】以10 mmol/L的邻苯二酚McIlvaine溶液为底物时,无核白葡萄PPO的最适作用温度为25 ℃,最适反应pH为6.0。在最适作用条件下,米氏常数（K_m）和最大反应速率（V_max）分别为45 mmol/L和500 U/min。该酶在温度低于25 ℃时,能在60 min内保持较稳定的活性,30～60 ℃的高温处理只能破坏其部分活性,在70 ℃条件下保温处理10 min可使其活性全部丧失。【结论】高温短时处理能够破坏无核白葡萄的PPO活性,因此高温处理可在葡萄干加工的前处理中推广应用。     

菊芋块茎多酚氧化酶特性

采用分光光度法,研究了菊芋组织中多酚氧化酶(PPO)的活性,以及PPO的最适pH、最适温度、热稳定等特性和不同化学物质对PPO的抑制效果.结果表明,其最适pH为7.4,pH 3.5环境可有效抑制酶活性;最适温度为45 ℃,在70 ℃以下,其热稳定性较强,大于80 ℃时,热稳定性急剧下降,生产上可采用80 ℃热处理2 min使酶失活;0.04 mol·L-1的柠檬酸和亚硫酸氢钠对PPO活性都有较强的抑制作用.     

小麦多酚氧化酶特性及褐变控制研究

[目的]研究小麦多酚氧化酶(PPO)的特性及其褐变的控制方法,为提高小麦品质提供试验和理论依据。[方法]对洛阳地区5个品种小麦籽粒PPO的催化特性、热稳定性和pH值稳定性等性质进行了研究,同时考察了抑制剂对PPO的褐变抑制作用。[结果]小麦PPO活性的最适温度为40℃,最适pH值为6.0;柠檬酸、抗坏血酸、半胱氨酸等抑制剂均可有效抑制PPO的活性,且随着抑制剂浓度的增大PPO活性降低越明显。[结论]可通过调节合适的温度、pH值和添加一定浓度的抑制剂有效地防止PPO褐变的发生。     

白肉枇杷多酚氧化酶酶学特性研究

以“白梨”枇杷(EriobotryajaponicaLindl．cv．Baili)果实为试材,采用硫酸铵分级盐析及透析法提取PPO研究其理化特性,包括温度、pH、抑制物对PPO活性的影响及其底物特性;测定果实＼贮藏期间pH值变化。结果表明:PPO的最适温度为30—40℃,在30℃有较好的热稳定性;最适pH值为5．0和7．0,pH值为6．0和9．0时酶的稳定性较好;维生素C和L-半胱氨酸抑制物对PPO有较强的抑制作用,以维生素C抑制作用最强。     

荔枝果肉多酚氧化酶酶学性质研究

[目的]为研究荔枝果肉多酚氧化酶（PPO）的作用机制,控制荔枝果肉在贮藏和加工过程中的酶促褐变提供理论依据。[方法]从荔枝果肉中提取多酚氧化酶,并对其酶学性质进行研究。[结果]荔枝果肉PPO的最适反应温度为55℃,对热稳定性较强,90℃水浴保温30 min后剩余相对酶活为22.6%;pH值为7.0时该酶的活力最强,在pH值6.5~8.0范围内酶活力较稳定;邻苯二酚与该酶的结合能力最强,其次为4-甲基儿茶酚;谷胱甘肽为该酶的最好抑制剂,其次为半胱氨酸、抗坏血酸、NaF和亚硫酸钠;SnCl2和FeSO4对该酶活性有抑制作用,而CuSO4、MgC l2和CaCl2对其活性有促进作用。[结论]该研究确定了荔枝果肉多酚氧化酶的最适作用条件。     

红毛丹果皮多酚氧化酶的酶促动力学研究

[目的]通过对红毛丹果皮多酚氧化酶的酶促动力学研究,寻找影响其催化活性的环境因素。[方法]以红毛丹果皮为试验材料,以邻苯二酚为底物,研究不同温度、不同pH、以及EDTA、Vc、亚硫酸氢钠、柠檬酸4种抑制剂和底物浓度对其多酚氧化酶活性的影响。[结果]红毛丹果皮多酚氧化酶的最适温度为40℃,最适pH值6.8;EDTA、Vc、NaHSO3、柠檬酸对多酚氧化酶活性表现出较好的抑制效果,其中EDTA的抑制效果较其他3种抑制剂强。[结论]利用低温、一定浓度的EDTA、Vc、NaHSO3、柠檬酸等试剂可抑制红毛丹果皮多酚氧化酶的催化活性,延长红毛丹果实的贮藏和运输时间,抑制其褐变;该研究结果为开发利用红毛丹果皮多酚氧化酶提供了理论依据。     

鲜切马铃薯多酚氧化酶酶学特性及褐变抑制剂的研究

［目的］研究常用防腐、防褐抑制剂对切分马铃薯多酚氧化酶（PPO）的抑制效果及贮运品质的影响。［方法］以无公害马铃薯为试材,以邻苯二酚为底物,采用分光光度法和正交试验法,测定马铃薯中PPO的酶学特性及不同试剂作用下PPO的活性。［结果］马铃薯PPO的最适pH值为7.6,最适温度为32℃,短时高温处理能显著抑制PPO活性;PPO催化酶促褐变反应符合米氏方程,酶促反应的最大速率（Vmax）为0.2866U/（gFW·min）,米氏常数（Km）为0.032mol/L;NaHSO3、抗坏血酸能较好地抑制PPO活性,且随着浓度的升高,抑制效果增强;0.1%抗坏血酸、0.06%或0.10%CaCl2、0.08%苯甲酸钠、1.0%壳聚糖保鲜切分马铃薯丝在4℃下贮藏96h后褐变度仅为6.14%。［结论］马铃薯PPO活性受诸多因素影响,尤以pH值和温度影响最为显著;试验采用抗坏血酸等复合保鲜剂对切分马铃薯丝的褐变抑制进行了系统研究,关于不同试剂间多因素协同作用机理和抑制效应尚需做进一步研究。     

块茎与块根多酚氧化酶部分性质的比较

[目的]为高职学生实验《多酚氧化酶的制备和性质研究》筛选合适的实验材料.[方法]选取马铃薯和紫薯比较研究块茎与块根中多酚氧化酶（PPO）的活性、最适底物、最适温度等特性.[结果]两者PPO最适底物均为邻苯二酚;马铃薯PPO的最适反应温度为35℃,紫薯PPO的最适反应温度为10 ℃.[结论]经综合比较,该实验以马铃薯作为实验材料更为合适.     

富士苹果多酚氧化酶特性及褐变抑制研究

研究了富士苹果多酚氧化酶(PPO)的特性。结果表明,试验最大吸收波长为400 nm,在4℃的条件下贮存的富士苹果多酚氧化酶活性随着时间的延长逐渐降低。富士苹果多酚氧化酶的最适p H为6.5,最适温度为35℃,在80℃以上失活。不同抑制剂对富士苹果多酚氧化酶的抑制效果不同,抑制能力由高至低依次为抗坏血酸、柠檬酸、D-山梨醇、D-果糖、Na Cl、EDTA-2Na。当抗坏血酸的浓度为1 mmol/L时,富士苹果多酚氧化酶的相对活性仅为5.10%。