日本血吸虫蛋白质组学研究

蛋白质组学是研究一种细胞、组织或完整生物体在特定时空上全部蛋白质及其存在方式的学科。近年来,应用蛋白质组学技术开展了日本血吸虫尾蚴、童虫、成虫蛋白质组,成虫性别差异和排泄分泌物蛋白质组,体被蛋白质组,与药物和诊断相关的蛋白质组等多方面的研究,增加了人们对日本血吸虫的生长发育、免疫逃避等机制的了解,为发掘血吸虫病疫苗、诊断和药物靶点提供了新的线索。     

羊毛蛋白质组学研究进展

羊毛是由蛋白质组成的天然纤维,被广泛应用于纺织等行业,然而随着经济的发展,人们对羊毛品质的要求越来越高,传统的研究方法已满足不了人们对羊毛蛋白研究的需要。蛋白质组学作为后基因组时代的一门新兴学科,可大规模、高通量、系统化地从整体水平研究羊毛蛋白质的组成、功能及其蛋白之间的相互作用,在羊毛研究领域已得到广泛应用。文章从羊毛蛋白质组学的研究方法,已知的羊毛蛋白质以及蛋白组学在羊毛蛋白质研究中的应用进展进行了综述,以期为蛋白质组学在羊毛中的应用提供参考。     

蛋白质组学实验技术及其应用

蛋白质组学是以蛋白质组为研究对象,从整体、动态和定量的角度去研究基因的功能,是后基因组计划的一个重要组成部分。与基因组学相比,蛋白质组学更能从细胞和生命的整体水平上阐明生命现象的本质和活动规律,因此受到了各国学者的高度重视。蛋白组学的发展离不开其相关实验技术的突飞猛进,这些技术不仅可以进行蛋白质的分离和鉴定,还可以进行目的蛋白的筛选和样品的分析,为生命科学领域相关研究提供了新的思路和解决办法。论文主要综述了包括双向电泳、免疫共沉淀、酵母双杂交、蛋白质芯片及同位素标记相对和绝对定量技术等蛋白质组学实验技术的原理及特点,并概述了这些技术在生命科学中的重要应用。     

微生物蛋白质组学研究现状

正随着人类基因组的绘制成功,标志着后基因组时代的到来。由于基因的功能主要是通过其表达的蛋白质来实现,要了解该基因的全部信息,必须对其编码的蛋白质进行深入研究。蛋白质组学分析为研究微生物的生命活动和细胞功能提供了广阔的视野。因此,蛋白质组学在生命科学研究中具有十分重要的位置,随着研究的不断深入,蛋白质组学必将对人类的生活和生产带来十分重大的影响。本文主要就目前微生物蛋白质组学的研究现状进行简要阐述。     

蛋白质组学在动物科学研究中的应用研究

作为功能基因表达的一种产物,蛋白质会对机体各种生命代谢活动产生间接或是直接的调控者作用,并为人体生命活动提供本质上直观的分子学基础.随着后基因组时代的来临,蛋白质组学在以动物科学为代表的生物学研究方面表现出了较高的应用价值.本文就对蛋白质组学在动物科学研究中的应用方法和现状进行了分析.     

桑树蛋白质组学研究进展

蛋白质是生理功能的执行者,是生命活动的直接体现者,要对生命的复杂活动有全面和深入的认识,就必须进行蛋白质组学方面的研究。桑树可作为果桑、菜桑和饲料桑等进行种植,是中国重要的经济林树种,为适应其多元化的育种目标,需要了解其分子机制,为此要加强桑树蛋白质组学方面的研究。本研究总结了桑树蛋白质提取方法及分离鉴定技术、生物与非生物胁迫和桑树不同组织器官的蛋白质组学研究的最新进展,以期为桑树分子生物学研究提供理论参考。     

蛋白质组学技术在动物营养与健康研究中的应用现状

蛋白质是功能基因转录翻译表达的产物,能直接或间接作用到动物生理活动和代谢调控中,是后基因组时代研究生命生理活动重要的分子学基础。蛋白质组学具有高通量和全面性的特点,可对动物机体组织或细胞全部的蛋白质进行鉴定和分析,是目前基于蛋白质水平研究生命活动规律重要的技术手段。文章简要介绍蛋白质组学技术内容和方法同时,对蛋白质组学技术在动物产品品质、分子营养原理与调控及动物健康等方面的应用现状做以综述,旨在为该技术在动物营养与健康研究中的应用提供一定的理论依据和技术借鉴。     

蛋白组学技术在牦牛、犏牛生产领域的研究进展

生物体中,基因决定蛋白质的水平,但是几乎所有蛋白质发挥活性功能都需经过复杂的修饰过程,故而仅仅研究基因的表达水平并不能了解生物体蛋白的功能水平。蛋白质组学某种程度上是对基因组研究的一种补充,通过研究蛋白质的活性功能及蛋白质之间的相互作用等以全面揭示基因组表达,更好地揭示生命活动的现象与规律。文章简述了蛋白质组学的基本分类与核心技术,并重点阐述了蛋白质组学在牦牛及犏牛育种、繁殖、食品3个方面的研究应用,并对牦牛和犏牛蛋白质组学的应用发展进行了展望。     

水牛唾液蛋白组学研究进展

唾液具有溶菌、消化和滋润口腔等多种生物学功能,唾液中含有各种酶类,唾液是一种非损伤性的体液,作为研究材料被应用。唾液蛋白质组学研究也成为现代组学研究的热点内容。本文对唾液的收集方法、组学研究方面的应用、疾病方面、生物标记,特别是对水牛唾液蛋白组学方面的研究进行了综述,旨在为今后其他物种唾液蛋白质组学方面的研究奠定基础。     

蛋白质组学研究方法及应用的研究进展

蛋白质是细胞生理功能的具体执行者,并常以蛋白复合体或与核酸相互作用的形式来发挥作用。蛋白质组代表在一定时间和特定条件下,1个细胞、组织或生物个体所表达的全部蛋白,因此蛋白质组会随着时间和空间的改变而发生动态变化。蛋白质组学从整体水平研究蛋白质组的结构、功能、表达模式及其相互作用的方式。根据研究内容的不同,蛋白质组学可分为表达蛋白质组学、结构蛋白质组学和功能蛋白质组学等。研究蛋白质组学有助于了解蛋白的结构、细胞的功能、生命的本质及活动规律,为疾病的诊断、治疗、疫苗及新药开发提供科学依据。研究蛋白质组学的常用手段主要有：双向聚丙烯酰胺凝胶电泳、质谱、酵母双杂交系统及蛋白芯片法等,文章将对蛋白质组学常用的技术方法及应用进行综述。     

吡喹酮和硝硫氰醚对日本血吸虫体内5-HT含量的影响

本文研究了吡喹酮和硝硫氰醚与日本血吸虫拟似神经递质 5-羟色胺间的关系。以吡喹酮 ( 5× 1 0 - 7mol/ L和 5× 1 0 - 8mol/ L )、硝硫氰醚 ( 1 0 - 4mol/ L和 1 0 - 5mol/ L )分别培养日本血吸虫成虫 4h和 8h ,反相离子对高效液相法测定其体内 5-HT的含量变化。结果显示 :吡喹酮和硝硫氰醚对日本血吸虫体内 5-HT等含量的影响与对照相比均无显著性差异。表明二者抗虫作用似不通过影响虫体 5-HT的生物合成和降解。     

中华拟德氏吸虫与日本血吸虫的RAPD遗传标志分析

中华拟德氏吸虫(Paradeontacylix sinensis)是冷血吸虫,日本血吸虫(Schistosoma japonicum)是温血吸虫的重要代表。分别对中华拟德氏吸虫和日本血吸虫成虫的全基因组进行随机扩增多态性研究,筛选出31种随机引物,对2种成虫扩增得到189条多态性基因片断,S6、S46对中华拟德氏吸虫全基因组有特异性,分别扩增出一条大小约399bp和695bp的特异性强条带;引物S2对日本血吸虫基因组有特异性,只扩增1条1670bp的特异性强条带。多数引物对中华拟德氏吸虫和日本血吸虫成虫全基因组扩增出大小相似的条带,推测中华拟德氏吸虫与日本血吸虫的亲缘关系密切。     

抗日本血吸虫药物的研究进展

日本血吸虫是一种重要的人兽共患寄生虫,具有重要的公共卫生和社会经济意义,引起国内外学者的高度关注。作者综述了抗日本血吸虫药物的最新进展,重点综述了吡喹酮、青蒿素和硝硫氰胺的药物代谢、作用机制和临床应用,为日本血吸虫病的防治奠定理论基础。     

东方田鼠肺脏裂解物筛选日本血吸虫成虫噬菌体展示cDNA文库

目的寻找与东方田鼠抗性相关的血吸虫靶基因。方法以东方田鼠肺脏裂解物为探针,亲和淘洗筛选日本血吸虫成虫（44d）噬菌体展示cDNA文库。三轮筛选后．随机挑取76个阳性噬菌体克隆进行序列测定及生物信息学分析。结果共获得了13个有效EST序列,其中8条EST序列与已知基因或表达序列标签同源,5个EST序列与已知基因或表达序列标签均无同源性,为新的表达序列标签。功能预测结果显示．这13个有效EST编码蛋白主要与血吸虫基因表达调控及蛋白质加工修饰相关。结论东方田鼠直接或间接地影响血吸虫基因表达,进而影响血吸虫的发育,可能是东方田鼠具有抗血吸虫特性的一个重要分子机理。     

Characterization of a novel vaccine candidate and serine proteinase inhibitor from Schistosoma japonicum (Sj serpin)

Serine proteinase inhibitors (serpins) represent an important superfamily of endogenous inhibitors that regulate proteolytic events active in a variety of physiological functions. Immunological screening of a Schistosoma japonicum adult worm cDNA expression library with sera of Microtus fortis, a naturally resistant vertebrate host, has identified one clone that encoded for a sequence homologous to those of the serpin superfamily. The full-length sequence encoding S. japonicum serpin (Sj serpin) was amplified from adult worm cDNA by using 5'-RACE-PCR and subsequently cloned into the prokaryotic expression vector pET28c. The full-length Sj serpin fusion-protein with his-tag was expressed in E. coli, purified by affinity chromatography and used to immunize New Zealand white rabbits. Sj serpin is located on the tegument in S. japonicum adult worms. C57BL/6 mice immunized with Sj serpin induced the production of high levels of specific IgE and IgG1 subclass antibodies as well as a marked IL-4 response. Lymphocyte surface marker analysis revealed proliferation of CD19 expressing B cells, indicating a predominant Th2-type response to Sj serpin. Immunized mice developed moderate protection against infection of S. japonicum as demonstrated by a 36 and 39% reduction in the recovery of adult worms and eggs, respectively. These data suggested a role for Sj serpin as a vaccine candidate or as a novel target for anti-schistosome drugs.     

日本血吸虫含EF手性结构域分子序列的分析和初步鉴定

为分离鉴定日本血吸虫含EF手性结构域分子及分析其序列结构特征,首先找到含有EF—hand结构域的分子,按照序列一级结构进行分类,之后进行生物信息学分析。然后用PCR方法以虫卵和成虫cDNA文库为模板扩增分类后的分子,构建重组质粒,诱导蛋白表达并纯化,选取14个纯化蛋白用Western blot进行初步免疫原性鉴定。结果269个原始含EF-hand结构域分子按照序列一级结构分为70个;成功表达和纯化了49个含EF手性分子,进化树分析将其分为9类;Western blot显示,14个纯化蛋白均可被日本血吸虫感染小鼠阳性血清识别。本研究结果为下一步采用这类分子进行动物保护性效果评价以及保护性免疫机制的研究奠定了基础。     

家鸭具有作为血吸虫转运宿主的可能性

为研究日本血吸虫(Shistosomia japonicum)卵通过家鸭消化系统后的孵化能力,将人工感染血吸虫尾蚴45 d的小鼠剖杀,取肝脏和小肠制成匀浆,并进行虫卵计数,将带有虫卵的肝脏及小肠匀浆液分别灌喂家鸭,观测不同时间收集鸭粪的毛蚴孵出情况。结果显示,经过家鸭体内2 h后,粪便中孵化率达到峰值,相对孵化率分别为0.61%和4.066%;7 h后,没有虫卵能孵化出毛蚴。同一批次的虫卵所孵化的毛蚴中,大约经过4 h后其孵化率达到峰值。结果表明,日本血吸虫虫卵通过家鸭消化系统后仍有部分依然保持孵化能力,家鸭具有可能作为血吸虫的转运宿主,拥有传播血吸虫有效虫卵的能力。     

Comparison of the vaccine efficacy of gamma-irradiated Schistosoma japonicum cercariae with the defined antigen Sj62(IrV-5) in pigs

Development of a vaccine against Schistosoma japonicum which can protect both man and the domestic animal zoonotic reservoirs of infection would be an invaluable tool in attempts to control this infection in those areas in which conventional control methods have failed to break transmission. The pig is a natural host of S. japonicum and because of its anatomical and immunological similarities to humans, it is a potentially valuable host for studies on S. japonicum in particular and schistosomes in general. Radiation-attenuated cercariae are highly effective in inducing immunity in experimental schistosomosis and there are promising reports of partial protection against schistosomes with recombinant-derived individual antigens. In the present study we have set out to establish a protocol for inducing protection with gamma-irradiated cercariae in pigs and to assess the protective capacity of recombinant and naked DNA formulations of Sj62, a 62kDa region of S. japonicum myosin. The corresponding S. mansoni version or Sj62, recombinant IrV-5, has previously been implicated in irradiated vaccine immunity in S. mansoni infections and has been shown to induce high levels of immunity in a variety of hosts.Groups of pigs were immunised three times at 2-week intervals with 2000 cercariae irradiated at 20krad, with Sj62 as a recombinant (rSj62) incorporated in Freund's adjuvant, a micellar preparation, or as a naked DNA construct. Vaccination with irradiated cercariae did not induce significant anti-Sj62 antibody but following intramuscular challenge with 2000 cercariae, the vaccinated pigs showed >95% resistance as assessed by reduced faecal egg output, worm tissue egg burdens and also reduced septal fibrosis. Immunisation with each of the Sj62 formulations induced significant anti-Sj62 antibody responses, the highest titre (>12,800) being with the Freund's preparation but none of the Sj62-immunised groups showed significant resistance to challenge. The data suggest that Sj62 shows little promise as a vaccine candidate for schistosomosis.     

东方田鼠血清筛选噬菌体展示抗原对小鼠日本血吸虫病免疫效果观察

本研究利用前期研究中东方田鼠血清筛选日本血吸虫成虫噬茵体展示cDNA文库获得的10个阳性克隆中的8个噬茵体克隆单独或联合免疫BALB/c小鼠,观察对日本血吸虫病的免疫预防效果,以筛选其中具有发展成疫苗的候选抗原编码基因.研究发现与空白对照组相比,展示血吸虫锌指蛋白的1号噬茵体克隆免疫组在两次实验中分别获得了32.10%和31.25%的减虫率、61.14%和47.31%的肝脏减卵率,虫体合抱率分别由92.59%、57.39%下降到69.09%、41.03%;其它噬茵体克隆单独免疫组或联合免疫组在第一次实验中均获得了8.02%～32.72%的减虫率和40.19%～69.53%的减卵率,但在第二次实验中未能得到验证.研究结果提示,日本血吸虫环状锌指蛋白(1号克隆)编码基因在疫苗方面具有重要研究价值.