人参皂苷20(S)-Rg_3,20(R)-Rg_3,Rg_5,Rk_1对照品的制备

为建立一种简单快速、高效制备人参皂苷20(S)-Rg3、20(R)-Rg3、Rg5、Rk1的方法。利用大孔吸附树脂和硅胶柱层析对样品进行预处理,通过反相高效制备液相色谱,从红参的甲醇提取物中快速分离得到目标产物人参皂苷20(S)-Rg3、20(R)-Rg3、Rg5、Rk1,经检测,4种化合物的纯度均98%。色谱柱为Polaris C18(250 mm×4.6 mm,10μm),以V(乙腈)∶V(水)=46∶54为流动相,恒梯度洗脱,流速4.0 mL/min,柱温室温,检测波长为203 nm,在此色谱条件下,它们得率分别为0.012%、0.013%、0.012%、0.013%。该方法操作简便,可重复进样,适用于制备高纯度稀有人参皂苷20(S)-Rg3、20(R)-Rg3、Rg5、Rk1。     

高效液相色谱法测定心脉素注射液中20(S)-人参皂苷Rg2和20(R)-人参皂苷Rg2构型异构体的含量

建立心脉素注射液中20（S）-人参皂苷Rg2和20(R)-人参皂苷Rg2构型异构体的高效液相色谱测定法。采用YWG-C18分析柱，以甲醇-磷酸溶液(1→25)(7：3)为流动相，在203nm波长处检测。平均回收率分别为99．5％和100．6％。相对标准偏差分别为1．2％和1．4％。该方法准确、简便。     

人参皂苷Rg3诱导结直肠癌细胞凋亡作用研究

本文初步探讨人参皂苷Rg3 (Rg3)体外抗结直肠癌作用研究,采用高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)测定Rg3的含量,以流式细胞术法测定Rg3的凋亡百分数,并利用蛋白质印迹法(Western Blot,WB)测定c-Jun氨基端激酶(c-Jun N-...     

人参三醇型皂苷黑根霉发酵产物与人参皂苷的增强记忆活性对比

通过建立3种损伤性拟痴呆模型,即东莨菪碱致胆碱能损伤拟痴呆小鼠模型、40%乙醇损伤拟痴呆小鼠模型、氯霉素注射致痴呆小鼠模型,每日给予小鼠受试药物,通过跳台试验和被动回避试验对小鼠进行行为学检测,并对小鼠脑内胆碱能含量进行检测,对比人参三醇型皂苷的黑根霉发酵产物和部分人参皂苷的增强记忆活性。结果表明:人参三醇型皂苷黑根霉发酵产物3种损伤模型中均显示出增强记忆活性,且与对照组相比差异显著。人参三醇型皂苷黑根霉发酵产物组和人参皂苷Rg1组小鼠脑内乙酰胆碱转移酶(ChAT)活性明显高于空白对照组(P0.05),乙酰胆碱酯酶(AchE)活性低于空白对照组(P0.05),说明人参三醇型皂苷黑根霉发酵产物不仅能降低AchE活性,而且能增强ChAT活性,并且此活性与小鼠脑内的胆碱能系统具有一定关系。     

人参皂苷Rg3体内抗马立克氏病毒的作用

为探讨人参皂苷Rg3对马立克氏病毒感染的防治效果,采用马立克氏病毒人工感染雏鸡模型,通过人参皂苷Rg3口服途径,并应用发病率、保护率、平均存活日龄等指标来评价了药物对机体的保护作用。结果表明,人参皂苷Rg3可明显降低试验鸡的发病率与肿瘤检出率,能保护感染鸡的免疫器官,增强了感染鸡的免疫力,具有抗病毒作用。     

HPLC-ELSD法测定三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1的含量

采用高效液相-蒸发光散射检测器法(HPLC-ELSD)测定免疫佐剂——三七总皂苷中三七皂苷R1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1的含量,色谱柱Discovery C18(250 mm ×4.6 mm,5μm),采用梯度洗脱,流动相为水-乙腈,流速为1.0 mL/min,柱温30℃.结果显示,三七皂苷R1含量5.19％,人参皂苷Rb1含量32.19％,人参皂苷Rg1含量41.28％,3种皂苷含量之和为78.66％.说明该方法简便、快速、重现性好,可用于控制三七总皂苷的质量.     

正交试验法筛选人参皂苷提取工艺的研究

目的筛选人参皂苷最佳提取工艺。方法采用正交试验法进行优选,高效液相色谱法测定人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的含量。结果提取次数和乙醇浓度对提取工艺有显著影响。结论人参皂苷最佳提取工艺为A2B2C2D3,即药材用70%乙醇回流提取3次,每次加醇8倍量,提取时间1.5h。     

三七须（绒）根的化学成分研究

为分析三七须(绒)根的皂苷成分,本研究将三七的须(绒)根乙醇提取物利用少量水溶解后通过D101大孔吸附树脂柱层析,先用水洗脱,再用70%EtOH洗脱得到三七总皂苷,随后经硅胶柱层析,以氯仿-甲醇-水(体积比∶8.0∶2.0∶0.2～6.50∶3.50∶0.35)梯度洗脱得到4个流份,经正相硅胶柱层析,得到化合物。通过谱学分析鉴定其结构。结果表明,分离得到8个单体化合物分别为胡萝卜苷、人参皂苷Rf、人参皂苷Rh1、20(S)-人参皂苷Rg3、20(R)-人参皂苷Rg3、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re和人参皂苷Rb1。其中人参皂苷Rf和20(R)-人参皂苷Rg3是首次从三七须(绒)根中分离得到的化学成分。     

从三七根、茎中快速批量分离提取三七皂苷R_1、R_2及人参皂苷Rg_1有效部位群的方法

从三七根、茎中快速批量分离提取三七皂苷R1、R2及人参皂苷Rg1有效部位群。三七根、茎经70%乙醇提取得三七粗皂苷,粗皂苷用D101大孔吸附树脂分离得三七总皂苷。三七总皂苷经硅胶柱"氯仿-甲醇-水"溶剂梯度洗脱过柱获得纯度为60%的三七皂苷R1、R2及人参皂苷Rg1有效部位群。此法适合于批量分离提取三七皂苷R1、R2及人参皂苷Rg1有效部位群。     

HPLC-ESI-MS法分析蒸参水浓缩物中人参皂苷

研究红参蒸参水浓缩物中人参皂苷类化学成分。采用HPLC-ESI-MS测定蒸参水浓缩物中的人参单体皂苷,测得12种人参皂苷,分别为人参皂苷Ro、Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re、Rf、Rh4、Rg3、Rg3异构体、Rg5、Rk1。结果表明,蒸参水浓缩物含有多种具有生物活性的皂苷类化合物,可作为健康食品添加剂、化妆品添加剂及动物饲料添加剂开发产品。     

人骨形成蛋白3全长基因转化烟草的初步研究

将含有人骨形成蛋白3(hBMP-3)全长基因的质粒pCAMBIA1300-hBMP-3通过电激法转化到根癌农杆菌LBA4404中,以烟草无菌苗叶盘为外植体,通过农杆菌介导法进行遗传转化,获得了抗潮霉素(Hy-gromycin,Hyg)的再生植株,通过潮霉素抗性鉴定及PCR检测,初步确定人骨形成蛋白-3(hBMP-3)全长基因已整合到烟草的基因组中。     

水稻脂氧合酶-3基因启动子的特性分析

从栽培水稻品种越光中克隆了水稻脂氧合酶-3基因(Lox-3)的启动子,长度为1343bp,其序列与日本晴对应的序列完全相同。生物信息学分析表明,该启动子序列中包含受信号诱导的元件(G-box)、温度响应元件(CCGAAA)和水分胁迫响应元件(CACATG)等顺式作用元件;进一步构建了Lox-3基因启动子与gus和gfp基因的融合表达载体并获得转基因植株,发现报告基因在转基因植株的根、茎、叶、花药、种胚及种皮中均有表达,在萌发种子的胚和胚芽中也有表达,但在胚乳中不表达。此外,经ABA、NaCl及人工陈化处理后对报告基因的表达进行了定量分析,发现这些非生物胁迫可能通过诱导启动子顺式元件致使报告基因表达活性增强。     

IGF-1调控RBM3表达抑制低温应激诱导牦牛卵丘细胞凋亡

【目的】探索动物机体遭受低温应激及细胞冷冻过程中胰岛素样生长因子1(insulin-like growth factor, IGF-1)与RNA结合基序蛋白3(RNA-binding motif protein 3, RBM3)之间的作用关系,及IGF-1参与哺乳动物细胞抑制低温损伤的机制。【方法】体外培养牦牛卵丘细胞,采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR, qRT-PCR)、蛋白免疫印迹(Western blot, WB)和免疫荧光技术检测不同浓度(0、50、100、200ng·mL^-1)IGF-1和低温应激(30℃、25℃)对RBM3表达影响。卵丘细胞经最佳浓度IGF-1(100 ng·mL^-1)和对照组(0IGF-1)作用30 h后,低温(30℃、25℃)应激8 h,比较RBM3表达水平。评估在低温应激组、100 ng·m L^-1 IGF-1处理组和100 ng·mL^-1 IGF-1+RBM3抑制剂处理组,卵丘细胞25℃应激8 h后凋亡水平差异,并从基因...     

豌豆根尖铝毒的敏感浓度探讨

以不同浓度Al3+处理豌豆幼根根尖,24 h后通过测定幼根的相对伸长率、不同根段的胼胝质含量、POD活性同时结合苏木精染色,探讨不同浓度Al3+对豌豆根尖生长的影响。结果表明:幼根伸长明显受到抑制,苏木精染色的颜色也随Al3+浓度上升而加深;不同根段的胼胝质含量明显增加,当Al3+浓度大于50μmol/L后,差异达到显著;幼根的POD活性显著降低。说明Al3+抑制豌豆幼根的生长,其敏感浓度为50μmol/L。     

赤霉素和生根粉对牡丹促成栽培影响的初步研究

该文以 ‘藏枝红’牡丹为试材,研究了促成栽培前喷施赤霉素（GA3）、生根粉（ABT）及其不同浓度组合对促成栽培牡丹生长发育的影响,并讨论了有关问题.结果表明: GA3对解除芽体和植株休眠、促进芽体提前萌发、提高植株的萌发率、提前花期、促进枝叶生长和减少积温有明显作用,但降低了成花率和切花品质;ABT则有明显地促进新根生长、改善切花品质的作用,试验的最佳浓度是100 mg/L.      

桔小实蝇14-3-3基因的克隆和表达谱分析

【目的】克隆桔小实蝇14-3-3蛋白的基因(Bactrocera dorsalis14-3-3,Bdor14-3-3),研究Bdor14-3-3mRNA在不同组织和不同发育时期的表达情况,探索其是否参与了桔小实蝇的发育过程。【方法】采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和快速扩增cDNA末端(RACE)技术克隆Bdor14-3-3;采用实时荧光定量PCR(real-time PCR)方法,研究Bdor14-3-3 mRNA在桔小实蝇不同组织及不同发育时期的相对表达量。【结果】克隆获得了Bdor14-3-3基因,其编码区长度为747 bp,编码248个氨基酸残基。氨基酸序列一致性分析表明,在昆虫纲中,桔小实蝇与刺舌蝇14-3-3蛋白的序列一致性最高,为98.8%,与豌豆蚜的序列一致性最低,为85.4%。实时荧光定量PCR分析表明,Bdor14-3-3 mRNA在桔小实蝇不同组织和发育时期都有表达;在雌虫头(去除触角)和翅中的相对表达量均较高,分别是触角的1.39和1.44倍;在雄虫胸和后足中的相对表达量均较高,分别是前足的1.28和1.23倍。在蛹的早期发育过程中Bdor14-3-3 mRNA表达量逐渐升高,到7 d蛹期相对表达量达到最高峰,是10 d蛹的4.91倍。【结论】克隆获得了Bdor14-3-3基因,其表达的14-3-3蛋白可能参与了桔小实蝇的变态发育过程,尤其在蛹的发育过程中Bdor14-3-3可能发挥着重要作用。     

甘蓝型油菜F3’H基因反义植物表达载体的构建

类黄酮3’-羟化酶(F3’H)是类黄酮途径中的一个关键酶,对种皮色泽和花色的形成具有重要作用。通过PCR法扩增了甘蓝型油菜(Brassica napus L.)F3’H基因的一段特异保守片段F3’HA,并将其亚克隆到中间载体pCAMBIA2301G中,构建了F3’H反义植物表达载体pCAMBIA2301-F3’HA,通过PCR鉴定和酶切鉴定证实载体构建成功,并转化到根癌农杆菌LBA4404菌株中形成工程菌株。为进一步研究F3’H基因在甘蓝型油菜种皮色素合成途径中的分子生物学机理和该基因的代谢调控网络奠定基础。     

叠氮化钠(NaN3)诱变在作物性状改良中的应用

化学诱变是作物改良中变异性状的重要来源之一,是目前应用较为广泛的诱变育种技术.综述了以叠氮化钠(NaN_3)为诱变剂的化学诱变技术在作物性状改良方面的研究进展,并展望了NaN_3诱变的应用前景,以期为相关研究者提供参考.