家兔PPARγ基因的克隆表达及肌内脂肪含量的相关性分析

为了克隆家兔过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisome proliferative activated receptor gamma, PPARγ)基因蛋白质编码区(CDS)序列,并研究其生物学功能、组织表达规律及与肌内脂肪(IMF)含量的关系,试验克隆了家兔PPARγ基因CDS序列,并对其进行生物信息学分析;采集70日龄新西兰白兔心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、子宫、胃、腿肌、腹肌、背最长肌,0,35日龄新西兰白兔背最长肌,70日龄豫丰黄兔腿肌、腹肌、背最长肌,通过qRT-PCR扩增检测了PPARγ基因在不同组织/器官中的相对表达量;测定了70日龄新西兰白兔和豫丰黄兔腿肌及背最长肌的IMF含量,并对PPARγ基因相对表达量与IMF含量进行相关性分析。结果表明：家兔PPARγ基因CDS序列长1 428 bp,共编码475个氨基酸,其核苷酸序列与GenBank上公布的人、鼠、猪、绵羊、牛、马、犬及鸡等物种的氨基酸序列相似性分别为91.0%、90.5%、90.5%、90.2%、90.1%、90.0%、89.9%和80.5%,与小鼠的亲缘关系最近,与鸡的亲缘关系最远。PPARγ基因在70...     

猪心脏和脂肪型脂肪酸结合蛋白基因表达与肌内脂肪含量的关系

肌内脂肪含量是猪肉食用品质的 1个主要决定因素 ,是高度遗传的 ( Hovenier等 ,1 993)。在纯种的杜洛克猪群中已经证实 ,A- FABP( FABP4)和 H- FABP( FABP3)基因位点的遗传变异与肌内脂肪含量显著相关 ( Gerbens等 ,1 998,1 999)。对梅山×荷兰大白猪杂交群的分析进一步支持H- FABP(而非 A- FABP)参与肌内脂肪沉积的观点 ( Gerbens等 ,2 0 0 0 )。然而 ,尽管有这样一些的联系 ,在对 2个猪群的分析中都不能排除与 A-FABP、H- FABP基因密切相连的基因的影响。为了调控肌内脂肪含量 ,A- FABP、H- FABP基因的遗传学变异最…     

鸡H-FABP和A-FABP基因表达与肌内脂肪含量相关研究

选用H-FABP和A-FABP基因作为影响鸡肌内脂肪沉积的候选基因,以北京油鸡、矮脚鸡、白莱航鸡和AA肉鸡为研究群体,利用RT-PCR和实时荧光定量PCR技术,分别对56、90、120日龄H-FABP和A-FABP基因mRNA进行定量分析,结合IMF含量及屠体性状测定,分析H-FABP及A-FABP基因表达水平对IMF含量等的影响.结果表明：H-FABP基因mRNA随日龄的增长表达量显著降低,而A-FABP基因mRNA随日龄的增长表达量显著升高,并表现出显著的品种效应（P＜0.01）,性别因素对A-FABP基因表达影响显著.北京油鸡、白莱航鸡和AA鸡群体的H-FABP基因mRNA表达水平与IMF含量及屠体重呈现显著的负相关,而A-FABP基因mRNA表达水平与屠体重显著相关,与IMF含量没有显著的相关性.矮脚鸡A-FABP基因mRNA水平与IMF含量呈现显著的负相关,其H-FABP基因mRNA水平对屠体重影响显著,表现出显著的品种差异.     

绵羊肌肉组织MyoG和PID1基因的表达及其与肌内脂肪含量的关系

本研究旨在探究绵羊不同部位肌肉MyoG和PID1基因mRNA的发育变化规律,分析MyoG和PID1基因mRNA表达水平对肌内脂肪沉积的影响。选取2、4、5、6月龄敖汉细毛羊公羔和12月龄敖汉细毛羊成年公羊各5只,屠宰后取背最长肌和股二头肌检测肌内脂肪(Intramuscular fat,IMF)含量,用实时荧光定量PCR检测两个部位肌肉MyoG和PID1mRNA表达量,并进一步分析表达量与肌内脂肪含量的关系。结果表明,2~5月龄时,背最长肌和股二头肌的IMF含量均随着月龄的增加而增加;而5~12月龄时则基本保持不变;同月龄背最长肌IMF含量极显著高于股二头肌(P0.01)。两个部位肌肉MyoG和PID1mRNA表达的发育模式有所不同,具有组织特异性。背最长肌MyoG基因表达量5月龄最高(P0.01),PID1基因表达量6月龄最高(P0.05),均呈上升-下降趋势;股二头肌MyoG和PID1基因各月龄之间表达量均差异极显著(P0.01),MyoG基因表达量随着月龄增长呈上升-下降趋势,PID1基因表达量大体呈下降-上升趋势。同月龄MyoG和PID1表达量存在组织差异。相关分析表明,MyoG和PID1表达量与IMF含量呈不同程度正相关。综上,MyoG基因表达对绵羊肌内脂肪的沉积可能有正调控作用,而PID1基因表达可能对肌内脂肪的沉积产生一定的影响。     

中国环颈雉屠宰性能和肌内脂肪含量及A-FABP基因表达的研究

为研究中国环颈雉的屠宰性能、肌内脂肪含量及A-FABP基因mRNA表达情况,对240只成年中国环颈雉(公母各半)进行屠宰.结果表明:公、母雉屠宰率分别为90.28％、88.23％,公雉活重、屠宰率和腿肌率显著高于母雉,差异显著(P＜0.05);肌内脂肪含量公雉低于母雉,但差异不显著(P＞0.05);A-FABP基因表达存在组织和性别的差异.     

仙湖肉鸭B系肌内脂肪含量与屠体性能关系研究

本研究对仙湖肉鸭B系的肌内脂肪含量与屠体性状关系进行分析.结果表明:公鸭活重、屠体重、半净膛重、全净膛重与肌内脂肪含量均表现为中等正相关,其中半净膛重与肌内脂肪含量的相关关系达到显著水平(P<0.05),胸肌重、腿肌重、皮脂重、皮脂率均与肌内脂肪含量呈弱的正相关,相关关系不显著;母鸭腹脂重、腹脂率与肌内脂肪含量的相关系...     

日粮不同蛋白水平对绵羊脂肪和肌肉中FAS基因表达的影响

选择年龄、体质量相近的杂交母羊(萨福克♂×小尾寒羊♀)24只,随机分为3组,分别饲喂不同蛋白水平的日粮:中蛋白日粮(150 g.d-1)、低蛋白日粮(112.5 g.d-1)和高蛋白日粮(187.5 g.d-1)。采用半定量RT-PCR的方法,检测日粮不同蛋白水平对绵羊脂肪和肌肉中FAS基因表达的影响。结果表明:日粮的蛋白质水平影响绵羊腹部皮下脂肪、肠系膜脂肪和半腱肌组织中FAS基因的表达,随着日粮蛋白质水平的升高FAS表达量降低。FAS基因表达量在各组织间有差异,腹部皮下脂肪、肠系膜脂肪中,中蛋白组和低蛋白组间表达差异不显著(P0.05),高蛋白组显著低于中蛋白组和低蛋白组(P0.05);在半腱肌组织中,中蛋白组与高蛋白组和低蛋白组间均差异显著(P0.05),高蛋白组极显著低于低蛋白组(P0.01)。     

藏鸡FTO基因表达的时空特性及与肌内脂肪含量的相关分析

旨在获得藏鸡FTO基因序列,并分析其生物学特性,阐明其组织及时序表达规律,同时揭示该基因在不同发育阶段肌肉组织中的表达水平与肌内脂肪含量的关系。选取1~210日龄健康藏鸡为试验材料,采集心、肝、脾、肺、肾、胸肌、腿肌和皮下脂肪组织样品,提取组织总RNA,利用RT-PCR方法克隆FTO基因序列,同时利用实时荧光定量PCR检测其在各组织及不同发育阶段的mRNA表达丰度,并将其表达量与肌内脂肪含量进行相关分析。结果表明,获得藏鸡FTO的基因序列长1 585bp(GenBank登陆号:KY366175),其中CDS为1 524bp,5′UTR 35bp和3′UTR 26bp,编码507个氨基酸,具有一个N端结构域和一个C端结构域。藏鸡与原鸡FTO氨基酸相比发生了6个氨基酸突变。FTO基因在藏鸡的各个组织中广泛表达,在脾组织中的表达水平极显著高于其他组织(P0.01),在脂肪组织和肺组织也存在较高水平的表达。时序表达谱显示,FTO基因在藏鸡胸肌和腿肌具有不同的表达模式,在胸肌中的表达水平随生长日龄的增加呈逐渐下降的趋势,而在腿肌中的表达水平随生长日龄的增加呈先上升后下降的趋势。藏鸡在不同发育阶段,不同肌肉组织中FTO基因表达水平与IMF含量具有不同程度的相关性,其中FTO基因表达水平与藏鸡胸肌IMF含量呈负相关,并且在母鸡中的相关性达到显著水平(P0.05)。而公鸡FTO基因表达水平与腿肌IMF含量呈正相关(在119~210日龄阶段r=0.601,P0.05),母鸡则相反。研究结果提示,FTO基因可能在藏鸡生长发育过程中对肌内脂肪沉积起重要调控作用,本试验结果将为藏鸡FTO基因的结构和功能的进一步研究奠定基础。     

猪新基因FAM134B的克隆及稳定干扰肌内前体脂肪细胞阳性克隆的筛选

本实验旨在对猪新基因FAM134B基因进行全长克隆,尝试有效沉默FAM134B基因的干扰表达载体的构建和筛选,并筛选出沉默FAM134B基因的稳定阳性细胞。设计合成3对FAM134B基因的特异性发夹siRNA干扰片段,将其克隆入干扰载体pYr-1.1,构建可沉默FAM134B基因的siRNA表达载体FAM134B-1、FAM134B-2和FAM134B-3,采用LipofectamineTM(Lip)2000介导质粒转染肌内前体脂肪细胞,通过实时荧光定量分析siRNA表达载体的干扰效果,并进一步用G418进行了稳定转染siRNA的肌内前体脂肪细胞筛选。结果表明:FAM134B基因的全长克隆成功,其siRNA表达载体构建正确,通过稳定筛选后,干扰效率较高的FAM134B-3表达载体和稳定转染FAM134B-3的细胞为构建筛选成功的siRNA表达载体和阳性细胞,干扰效率达65.0%。本研究成功克隆了新基因FAM134B的全长以及构建了有效沉默FAM134B基因表达的干扰载体,并筛选出了稳定沉默的阳性肌内前体脂肪细胞,为进一步研究FAM134B基因在脂肪沉积中的功能研究奠定了基础。     

利用双能X射线预测绵羊胴体肌内脂肪含量的研究

本研究旨在探讨双能X射线在绵羊肌内脂肪(IMF)含量等营养指标测定中的应用价值。试验选取19只8月龄蒙古绵羊作为研究对象,利用索氏抽提法测定IMF含量,利用组织成分检测仪测定胴体骨密度(BMD)、胴体单位矿物质的脂肪含量(FBMC)、胴体单位矿物质的肌肉含量(LBMC)、后腿单位矿物质的脂肪含量(LFBMC)、后腿单位矿物质的肌肉含量(LLBMC) 5个指标,再将这些指标进行相关性分析、通径分析及回归方程的构建。结果显示,FBMC对IMF的决定程度最大,且FBMC与IMF构成的回归方程极显著,表明可通过检测FBMC来进行绵羊胴体IMF的预测。该研究为双能X射线在肉品质快速评定中的应用提供了必要的依据。     

猪生长肥育期背最长肌LPL基因表达与肌内脂肪含量相关研究

选取健康、体重接近10 kg的杜洛克×长白×大约克去势公猪36头,体重达10,20,35,50,80,110 kg时各屠宰6头。从背最长肌提取总RNA,反转录为cDNA,以猪β-actin基因作为内参,利用实时荧光定量RT-PCR技术,对各阶段LPL mRNA进行相对定量分析;结合IMF含量及大理石纹评分,分析LPL基因表达水平对IMF含量等的影响。结果表明:LPL mRNA、IMF含量及大理石纹评分随体重增加均呈上升趋势,其中LPL mRNA表达量80 kg阶段显著高于10~50 kg阶段(P<0.05),肌内脂肪和大理石纹评分110 kg均高于10~50 kg阶段(P<0.01);IMF含量与大理石纹评分和LPL基因表达水平均呈现极显著正相关(P<0.01)。     

北京鸭胸肌肌内脂肪含量与屠体性能指标的关系

对Z型北京鸭3个品系的肌内脂肪含量与屠体性能的关系进行了分析。结果表明:Z2系母鸭腿肌重、皮脂重与肌内脂肪含量的相关系数分别为0.3738、0.4349(P<0.01),均为极显著中强正相关,而皮脂率为显著弱正相关。Z4系公母鸭肌内脂肪含量与胸肌重(率)、腿肌重(率)、腹脂重(率)、皮脂重(率)均相关较弱,表现为相关不显著。杂交系公鸭皮脂重与肌内脂肪含量相关系数为0.3(P<0.05),表现为显著弱正相关;母鸭胸肌重、腿肌重与肌内脂肪含量均表现为显著弱正相关。综合本试验可得出:由于各品系间及品系内肌内脂肪含量与屠体各指标相关程度的不同,在瘦肉型北京鸭选育过程中,要针对不同品系公母单独制定育种目标,以加快北京鸭的选育速度。     

AA肉鸡脂联素基因表达与皮下脂肪和腹腔内脂肪含量的关系

试验选择500只同品种同日龄的AA肉仔鸡,随机设置10个重复组,每重复组50只鸡。各重复组饲喂同一日粮,在同一环境条件下饲养管理,自由采食和饮水。饲养期分为0~3和4~8周龄2个阶段,同一阶段喂饲同一日粮。分别在肉鸡发育3、4、5、6、7及8周龄末,每重复组随机抽取10只鸡进行屠宰,并分离皮下脂肪和腹腔内脂肪。用电子计量法分别称量皮下脂肪和腹腔内脂肪的质量。荧光定量RT-PCR法观测ADPN的表达。试验结果显示:在3周龄到6周龄期间皮下脂肪和腹腔内脂肪含量与脂联素基因表达呈正相关(r**=1.036,P0.01;r**=1.182,P0.01)。7周龄到8周龄期间皮下脂肪和腹腔内脂肪含量与脂联素基因表达呈负相关(r*=-0.946,P0.05;r*=-0.987,P0.05)。     

优质鸡肌内脂肪含量与屠体及肉质性状间的关系

选用优质鸡父本和母本各 3个组成 5个杂交组合 ,饲养杂交后代 182 1只 ,在 10周龄时对其中 2 10只进行屠宰测定 ,并分析了胸肌肌内脂肪含量与屠宰率、胸肌率、腿肌率、肌间脂宽、皮下脂厚、腹脂率、胸肌pH值、胸肌剪切力等性状之间的关系。结果表明 ,个体胸肌肌内脂肪含量为 1.93%～ 9.6 3% ,总体平均值为 4 .76 %。其中峪口黄鸡♂×矮小隐性白♀组合增重最快、肌内脂肪含量高 ,符合优质鸡的育种目标。优质鸡父本相同的杂交后代 ,其平均肌内脂肪含量差异不显著 (P >0 .0 5 ) ,表现出同一父本的一致性。母本相同而父本不同的杂交后代 ,其平均肌内脂肪含量差异显著 (P <0 .0 5 )。同一组合内不同性别间肌内脂肪含量差异不显著 (P >0 .0 5 )。肌内脂肪含量与皮下脂厚和腹脂率的相关性因杂交配套组合而异 ,而与活重、屠体重、屠宰率、胸角宽、肌间脂宽、胸肌率、腿肌率这些性状均无显著相关     

不同猪种脂联素和胰岛素含量与肌内脂肪含量关系研究

采用酶联免疫吸附(ELISA)方法检测约克夏猪和藏猪血清中脂联素和胰岛素的含量,并分析了其与肌内脂肪含量的关系。结果表明,约克夏猪和藏猪血清中脂联素含量分别为(62.59±5.51)μg/L和(87.79±1.97)μg/L,呈极显著差异(P0.01);胰岛素含量分别为(48.48±3.17)m IU/L和(47.41±0.94)m IU/L;肌内脂肪含量分别为(2.50±0.24)%和(5.48±0.44)%。相关性分析显示,脂联素水平与肌内脂肪含量呈极显著正相关(P0.01),说明脂联素可通过血液正向调控肌内脂肪含量,初步阐明了猪血清中脂联素的品种差异及其与肌内脂肪含量的关系,为深入研究猪肌内脂肪沉积机理提供基础数据。     

贵州黑山羊不同肌肉组织FASN基因表达与肌内脂肪含量相关性分析

为探究FASN基因在贵州黑山羊不同肌肉组织中调控脂肪沉积的作用,采集12月龄公、母贵州黑山羊胸肌、背最长肌、肱三头肌、臂股二头肌,运用实时荧光定量PCR法（qPCR）检测FASN基因表达量,酸水解法测定肌内脂肪（IMF）含量,并通过Pearson分析FASN基因表达量与IMF含量相关性。结果显示,FASN基因在公、母羊不同组织中表达量均为臂股二头肌>胸肌>肱三头肌>背最长肌,其中公羊臂股二头肌显著高于背最长肌,母羊臂股二头肌极显著高于背最长肌;相同组织比较,母羊胸肌、肱三头肌、臂股二头肌表达量均高于公羊,背最长肌表达量低于公羊,但均未达到差异显著水平。IMF含量测定发现,公、母羊4个组织中IMF含量均为臂股二头肌>胸肌>肱三头肌≥背最长肌,同性别各组织之间比较差异不显著;相同组织比较,母羊4个组织中IMF含量均高于公羊。FASN基因表达量与IMF含量相关性分析表明,公、母羊FASN基因表达量与胸肌IMF含量呈正相关,与背最长肌、肱三头肌、臂股二头肌IMF含量呈负相关。     

肉鸡PRKAA基因表达与MyHC基因表达和肌内脂肪沉积关系的研究

本研究主要探讨不同品种肉鸡PRKAA基因表达的规律及其与MyHC基因表达和肌内脂肪沉积的关系。选择体重一致的1日龄AA鸡、BJY鸡各90只,每品种随机分为6个处理,每处理15只,在相同营养标准和管理条件下饲养至1、56日龄进行屠宰,测定腿肌MyHC、PRKAA基因表达水平与肌内脂肪(IMF)的含量。结果表明:AA鸡和BJY鸡1日龄和56日龄的PRKAA1基因表达水平差异不显著(P>0.05),而PRKAA2、MYHC基因表达水平及IMF沉积差异显著(P<0.05)。1日龄AA鸡MYHC_IIA基因、PRKAA2基因表达水平显著高于56日龄(P<0.05),IMF含量都是1日龄显著高于56日龄含量(P<0.05)。相关性分析表明,PRKAA1基因表达与MYHC_IIB基因表达呈显著负相关,     

牦牛不同肌肉组织的肌内脂肪含量与脂肪代谢相关基因表达的相关性分析

本实验旨在研究牦牛不同肌肉组织的肉品质和脂肪代谢相关基因表达水平,并分析肌内脂肪(IMF)含量与脂肪代谢相关基因表达的相关性。选用4岁健康麦洼牦牛10头,屠宰后采集小黄瓜条、辣椒条和外脊测定IMF含量、剪切力和脂肪代谢相关基因表达水平,并分析基因表达水平与IMF含量的相关性。结果表明:外脊的IMF含量显著高于小黄瓜条和辣椒条,小黄瓜条的剪切力显著高于辣椒条,且二者均显著高于外脊;外脊的硬脂酰辅酶A去饱和酶1(SCD1)、固醇调节元件结合蛋白-1(SREBP-1)、脂肪酸合成酶(FAS)、过氧化物酶增殖激活受体γ(PPARγ)基因表达显著高于小黄瓜条和辣椒条,辣椒条的SCD1、SREBP-1、FAS、PPARγ基因表达显著高于小黄瓜条,外脊的激素敏感脂肪酶(HSL)和肉碱转移酶1(CPT-1)基因表达显著低于小黄瓜条,外脊的CPT-1基因表达显著低于辣椒条,辣椒条的HSL基因表达显著低于小黄瓜条;小黄瓜条的SCD1基因表达与IMF含量呈极显著正相关,辣椒条和外脊的SCD1基因表达与IMF含量呈显著正相关,小黄瓜条、辣椒条和外脊的HSL、CPT-1基因表达与IMF含量呈显著负相关。结果提示,与小黄瓜条和辣椒条相比,外脊通过促进脂肪合成相关基因(SCD1、SREBP-1、FAS和PPARγ)的表达以及抑制脂肪分解相关基因(HSL和CPT-1)的表达,促进IMF沉积,提高牛肉嫩度,改善牦牛肉品质;并且SCD1、HSL和CPT-1基因可作为调控牦牛肌肉IMF形成的候选基因,为进一步揭示IMF沉积机制及优化牦牛肉品质奠定基础。     

脂肪酸合成酶与不同猪种肌内脂肪含量关系研究

采用酶联免疫吸附(ELISA)方法检测约克夏猪和藏猪血清中脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)的含量,并分析其与肌内脂肪(intramuscular fat,IMF)含量的关系。结果表明,约克夏猪和藏猪的FAS含量分别为(5.7±0.40)mol/L和(4.6±0.43)mol/L,呈极显著差异(P0.01);肌内脂肪含量分别为2.50%、5.48%。相关性分析显示,FAS与肌内脂肪含量呈极显著负相关(P0.01),说明FAS可通过血液负调控肌内脂肪含量,但肌内脂肪含量是FAS和激素敏感脂酶共同作用的过程,对FAS与肌内脂肪含量的关系还将做进一步的研究,为深入研究猪肌内脂肪沉积机理提供基础数据。