鲐鱼鱼精中5＇-脱氧核苷酸的分离工艺

论述了用桔青霉Penicillium citrinum M71菌株,经液体培养制得的5＇-磷酸二酯酶降解鲐鱼鱼精DNA成5＇-脱氧核苷酸的分离工艺.分离采用201×8阴离子交换树脂,具体条件为:柱床高l05mm,柱床直径45mm,样品浓度213mg@mL-1,洗脱流速0.5mL@cm-2@min-1.分离结果表明,采用0.005M HCl+0.04M NaCl作洗脱刺,流速为0.7mL@cm-2@min-1时,四种5'-脱氧核苷酸组分能完全被洗脱下来,且呈一个大峰,同其它成分分开,再先后采用0.001 8M HCl、0.0028M HCl、0.036M NaCl(pH6.0)、0.005M HCl+0.02M NaCl 作洗脱剂时,则能分别将dCMP、dAMP、TMP、dGMP完全分离.     

鲐鱼鱼精中5′-脱氧核苷酸的分离工艺

论述了用桔青霉PenicilliumcitrinumM71菌株 ,经液体培养制得的 5′ -磷酸二酯酶降解鲐鱼鱼精DNA成5′ -脱氧核苷酸的分离工艺。分离采用 2 0 1× 8阴离子交换树脂 ,具体条件为 :柱床高 1 0 5mm ,柱床直径 45mm ,样品浓度 2 1 3mg·mL-1,洗脱流速 0 .5mL·cm-2 ·min-1。分离结果表明 ,采用 0 .0 0 5MHCl 0 .0 4MNaCl作洗脱剂 ,流速为 0 .7mL·cm-2 ·min-1时 ,四种 5’ -脱氧核苷酸组分能完全被洗脱下来 ,且呈一个大峰 ,同其它成分分开 ,再先后采用 0 .0 0 1 8MHCl、0 .0 0 2 8MHCl、0 .0 36MNaCl(pH6 .0 )、0 .0 0 5MHCl 0 .0 2MNaCl作洗脱剂时 ,则能分别将dCMP、dAMP、TMP、dGMP完全分离     

离子对反相高效液相色谱法同时检测水产品中6种ATP关联化合物

建立了水产品中6种ATP关联化合物的离子对反相高效液相色谱(IP-RPLC)检测方法,确定了缓冲液的最佳pH、流速和浓度,并对方法的准确度、精确度和检测限进行了测定.采用10％的高氯酸分离提取样品,用KOH溶液中和后进行HPLC分析.采用Waters 2695色谱系统,Thermo ODS-2 Hypersil(250 mm ×4.6 mm,5μm)色谱柱,柱温为25℃;以10％甲醇,90％ 0.05 mol/L磷酸盐溶液为流动相,磷酸盐溶液含9 mmol/L四丁基氢氧化氨(TBA),并用1 mol/L的磷酸调pH至6.5,采用等度洗脱,流速为0.9 mL/min;检测波长为254 nm.结果表明:6种ATP关联化合物在13 min内完全分离;在2～400 μg/mL范围内线性关系良好,相关系数在0.9994～1.0000之间;方法最低检测限(信噪比S/N =3)在0.1～0.4 μg/mL之间;加标平均回收率为82.2％ ～110.0％,相对标准偏差为4.2％ ～9.5％.本方法可用于水产品中ATP、ADP、AMP、IMP、Hx和HxR等6种ATP关联化合物的同时测定和分析.     

电喷雾-串联四级杆-飞行质谱法分析津新乌鲫中的一种二肽

津新乌鲫(Carassiusauratus var.Jinxin Black)是具有较高营养和食用价值的鲫鱼新品种,为分析其肌肉中的小肽及其结构,建立了电喷雾-串联四级杆-飞行质谱分析津新乌鲫中的一种二肽Tyr-Ser的方法,优化了津新乌鲫提取物的色谱分离条件。采用Agilent Zorbax Rx-C8柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液(V∶V=2∶98),0.8 mL/min等度洗脱,采用ESI-QTOF对其中一种二肽进行鉴定,证实二肽为Tyr-Ser。     

高效液相色谱-荧光/紫外串联测定 海洋沉积物中16种多环芳烃

采用高效液相色谱-荧光和紫外检测联用技术,建立了海洋沉积物中16种多环芳烃（PAHs）的同时测定方法.样品用异丙醇提取,HLB固相萃取柱净化,Waters PAHs C18 （4.6 mm×250 mm,5μm）色谱柱分离,乙腈-水溶液梯度洗脱,荧光-紫外检测器串联检测.本方法中,16种PAHs在各自相应浓度范围内线性良好,相关系数均大于0.999.添加水平为5μg/kg和10 μg/kg时,回收率在72.6％～117％之间（n=6）,RSD％均小于10％,检出限（S/N=3）为0.2～4.9 μg/kg.利用该方法对采自大连和烟台沿岸的沉积物样品进行了分析,发现均含有一定的PAHs组分.该方法方便、快捷、灵敏度高,为海洋沉积物中PAHs的污染分析及风险评估提供了良好的方法基础.     

全自动固相萃取-超高效液相色谱法测定淡水养殖水体中的呋喃丹

本文建立了淡水养殖水体中呋喃丹的全自动固相萃取-超高效液相色谱检测方法。选取HLB固相萃取小柱作为水样的富集和净化小柱,水样以5 mL·min~(-1)的速度上样,用10 mL甲醇洗脱。洗脱液经浓缩、定容后,采用超高效液相色谱-荧光检测法分析,色谱柱为ACQUITY UPLC BEH C_(18)柱(100 mm×2.1 mm,粒径1.7μm),流动相为乙腈-水(40∶60,V/V),流速为0.200 mL·min~(-1),激发波长为270 nm,发射波长为310 nm。呋喃丹在20~1 000μg·L~(-1)范围内线性关系良好,相关系数R~20.999,方法检出限为0.100μg·L~(-1),定量限为0.250μg·L~(-1),在0.250、2.50、10.0μg·L~(-1)三种加标浓度水平下,平均加标回收率为90.4%~96.3%,相对标准偏差为2.55%~5.10%。该方法自动化程度高、操作简便、快速准确、稳定性好,适用于淡水养殖水体中呋喃丹的测定。     

液相色谱-串联质谱法测定水产饲料中喹乙醇残留量

为测定水产饲料中喹乙醇的残留量,建立了高效液相色谱-串联质谱的测定方法.水产饲料经5%甲醇溶液提取,HLB固相萃取小柱净化后上机定量检测.采用Zorbax XDB C18色谱柱,并以O.2%乙酸水溶液+甲醇(60+40,体积分数)为流动相,色谱分离后直接进串联质谱器.采用电喷雾正离子,多反应监测模式检测,外标法定量.在1～20 mg/L浓度下具有良好的线性关系,方法的定量限为0.04 mg,/kg,添加浓度在1-20 mg/kg时的回收率为72.2%～98.5%,相对标准偏差小于7.9%.     

高效液相色谱法测定水产品中β-阿朴-8′-胡萝卜素醛的含量

建立了水产品中β-阿朴-8′-胡萝卜素醛的高效液相色谱检测方法.样品采用抗氧化剂焦性没食子酸保护,酸化乙腈提取,二氯甲烷萃取,旋转蒸干后乙腈定容,高效液相色谱-紫外检测器检测,外标法定量.流动相乙腈+0.1％甲酸溶液=97+3,检测波长457 nm,色谱柱ZORBAX Eclipse XDB-C 18柱(4.6mm×150 mm,粒度5 μm).实验结果表明β-阿朴-8′-胡萝卜素醛在0.02～10.0 μg/mL范围内线性良好(r=0.999 95);检出限0.01 mg/kg,平均回收率62％～107％之间,平行样品的标准偏差≤6.1％.     

离子色谱法同时测定水中7种阴离子的含量

为建立快速准确地同时测定水中F-、Cl-、NO2-、SO24-、PO34-、Br-、NO3-等7种阴离子含量的离子色谱分析方法,通过配制不同浓度的多种淋洗液,选择合适的淋洗液、淋洗液流速和离子色谱仪参数,使用ICS-3000离子色谱仪系统、Dionex IonPac AS-23阴离子分离柱和IonPac AG-23保护柱进行了检测试验,分析这种方法的线性、检测限、回收率和精密度。结果表明,用0.45μm微孔滤膜过滤水样,以4.5mmol.L-1Na2CO3+0.8 mmol.L-1NaHCO3为淋洗液,淋洗液的流速为1.0 mL.min-1,混合标准溶液的进样量为50μL,进行电导抑制检测,可以有效分离这些阴离子,标准曲线在一定范围内具有良好线性,线性相关系数(R2)为0.999 3～0.999 7,相对标准偏差(RSD)0.2%～0.6%,各离子的回收率为90%～110%,检测限为0.011～0.052 mg.L-1。     

超高效液相色谱法测定黄颡鱼肌肉中叶黄素含量

本文建立检测黄颡鱼Pelteobagrus fulvidraco肌肉中叶黄素含量的反相超高效液相色谱分析方法。样品经95%乙醇提取,ACQUITY UPLC BEH C_18色谱柱(2.1mm×100mm,1.7μm)分离,以89%甲醇-1%乙腈-10%水为流动相等度洗脱,二极管阵列检测器检测,检测波长446nm,外标法定量。结果显示:叶黄素在0.04~0.8μg·mL~(-1)范围内线性良好,此方法检出时限0.03mg·kg~(-1)。添加量在0.5mg·kg~(-1)、1.0mg·kg~(-1)、5.0mg·kg~(-1)时,叶黄素的回收率为82.0%~84.2%,相对标准偏差在10%范围内。结果表明:该方法可用于黄颡鱼中叶黄素成分的定性和定量检测。     

中国对虾卵水的特性和精子的应答

研究了中国对虾卵水的采集、保存方法、紫外吸收特性和有效期等方面的内容,并应用卵水研究了交尾期虾、雌虾及产卵期雌虾精荚或纳精囊中精子对卵水的应答开始时间、必要的反应时间等响应卵水的时间特性以及精子的存活期等。结果表明,卵水经液氮保存或先经液氮后转入普通冰柜保持冻结状态７个月后诱导精子激活效力无显著差异。精子在自然温度（１０℃）普通海水中可在１０ｈ内保持对卵水的响应能力。交尾期精子最初响应卵水有５￣１     

改良离子色谱法测定咸鱼中亚硝酸盐的研究

文章优化了现有国家标准成鱼中亚硝酸盐的离子色谱测定方法。咸鱼样品先经硝酸银（AgNO3）除去大部分氯离子（Cl-）,IC-Ag预处理柱排除剩余Cl-的干扰,再用Ion Pac AS23（4mm×250mm）分析柱和Ion Pac AG23（4mm×50mm）保护柱,以4．5mmol·L-1碳酸钠（NaCO,）和0．8mmol·L-1碳酸氢钠（NaHCO,）的溶液为淋洗液,流速为1．0mL·min-1,抑制型电导检测器检测。结果显示,用该改良方法测定不同品种咸鱼亚硝酸根离子（NO2-）的线性范围为0．01～2．00mg·L-1,相关系数为0．9999,加标回收率为83．0％～101．6％,方法检出限为0．2mg·kg-1。该方法前处理简便、快速,能更加准确测定咸鱼制品的亚硝酸盐质量分数。     

太平洋牡蛎生物沉积作用的研究

2001年3-9月,在自然养殖状态下对太平洋牡蛎的生物沉积及其对物质输运的影响进行了研究。结果显示,太平洋牡蛎能加速海洋中颗粒物质的沉积,太平洋牡蛎的生物沉积率分别为小个体(壳长80～95mm)26.3～69.9mg·ind-1·d-1,中等个体(壳长95～110mm)37.5～83.7mg·ind-1·d-1和大个体(壳长110～125mm)44.1～103.7mg·ind-1·d-1。太平洋牡蛎的生物沉积与其壳长呈正相关线性关系,与其干组织重呈正相关的指数关系,而单位重量的生物沉积则与壳长和干组织重分别为负相关的线性和幂指数关系。海水温度和环境中饵料数量是影响太平洋牡蛎的生物沉积的重要因子。     

对虾白斑综合征病毒在螯虾动物模型的感染特性

应用克氏原螯虾作为动物模型研究对虾白斑综合征病毒（ＷＳＳＶ）的感染增殖特性，涉及感染温度，感染途径，继发感染，半数致死量（ＬＤ５０），免疫保护及保存期等，结果显示，２２－２５℃时，接种ＷＳＳＶ的螯虾一般于２－７d内死亡，温度升高对病毒增殖影响不显著，３０－３２℃时，平均死亡时间２－６d，温度降低对病毒增殖影响较显著，１５－１９℃时，接种螯虾平均２－１０d内死亡，８－１０℃时，平均死亡时间３－６d，感染途径分别用腹节肌肉，腹节皮下洲射及口服，均能使螯虾感染发病，而浸泡方式不能使螯虾发病，细菌分离和细菌定量结果表明，寄考于螯虾心脏，肝胰腺内的阴沟肠杆菌在感染后期大量增殖，菌量分别是正常螯虾的２５和３０倍，形成继发感染，用螯虾心脏，肝胰腺内的阴肠杆菌在感染后期大量增殖，菌量分别是政党螯虾的２５和３０倍，形成继发梁。用螯虾测定ＷＳＳＶ的ＬＤ５０为１０^-6.5.mL^-1种毒液，将病毒５６℃，３０min灭活后免疫螯虾，不能使螯虾形成免疫保护，ＷＳＳＶ匀浆液－３０℃冻存１年后失活，而－３０℃冻存于螯虾体内ＷＳＳＶ保存１年后仍有活力。     

饲料中添加叶黄素对胡子鲶体色的影响

进行了3个试验以考察饲料添加叶黄素对本地胡子鲶体色的影响。试验A比较了野生、半人工养殖、全人工养殖胡子鲶体色的差异,其皮肤叶黄素含量分别为8.01、4.64和1.61mg·kg-1鲜组织,肌肉叶黄素分别为2.06、1.83、0.96mg·kg-1鲜组织;试验B采用平均体重为52g的本地胡子鲶成鱼,在基础饲料中分别添加0、100、150、200mg·kg-1叶黄素,饲养6周后,成鱼皮肤叶黄素含量分别为1.07、5.88、7.02、7.81mg·kg-1鲜组织,肌肉叶黄素含量分别为0.64、1.35、1.81、1.86mg·kg-1鲜组织;试验C采用平均体重为3.2g的本地胡子鲶鱼种,在基础饲料中分别添加0、50、100、150mg·kg-1叶黄素,饲养6周后,鱼种皮肤叶黄素含量分别为3.2、8.73、11.49、12.51mg·kg-1鲜组织,肌肉叶黄素含量分别为0.87、1.71、1.97、2.03mg·kg-1鲜组织。上述结果表明,养殖与野生胡子鲶体色的差异主要来源于食物中叶黄素含量的不同,在饲料中添加叶黄素类产品可有效改善养殖胡子鲶体色,叶黄素适宜添加量建议为100mg·kg-1饲料(成鱼)或50mg·kg-1饲料(鱼种)。     

现场胃含物法测定鲐的摄食与生态转换效率

2000年7月至9月在山东半岛南部沿海鲐繁殖海域的鱼类养殖网箱中,应用胃含物法测定了渤海优势鱼种鲐的摄食、生态转换效率等生态能量学参数。结果表明,(1)在饵料不受限制时,鲐的摄食量和生长呈不规则波浪式变化,其波距比较恒定,但波高变化较大;(2)鲐的瞬时胃含物重量随时间变化可用指数模型St=9.0876e-0.1868t描述,瞬时排空率Rt=0.1868g·(100g)-1·h-1(按湿重计算);(3)按Eggers公式可求得鲐日摄食量Cd=(15.60±2.55)g·(100g·d)-1(按湿重计算)或(69.84±11.42)kJ·(100g)-1·d-1;(4)实验期间鲐体重随时间的变化可用线性方程Wt=2.23t+16.71描述,由该式可求得其相对平均日生长量Gd=3.72g·(100g)-1·d-1或30.00kJ·(100g)-1·d-1;(5)由于已知的平均日摄食量和平均日生长量,可求得鲐生态转换效率Eg=23.85%(按湿重计算)或42.96%kJ。     

溴化钠对鲤生长、甲状腺激素的影响及其在体内的蓄积

水体中添加不同浓度的溴化钠(NaBr)对鲤进行试验,分别在15、30和45d进行生长速度测定和组织蓄积研究,并在45d对甲状腺激素进行测定。研究发现,NaBr对鲤生长有促进作用,其中浓度为15mg·L-1的NaBr试验组促进作用最显著(P<0.05);NaBr影响甲状腺激素水平,浓度为15mg·L-1的NaBr试验组含量最高(P<0.01);鲤各组织中肝和皮的溴蓄积量较高,而肾在各浓度试验组均保持较高水平,浓度为25mg·L-1NaBr时肌肉中溴蓄积量为72.40mg·L-1;添加NaCl对鲤组织的溴蓄积量影响显著(P<0.01)。水体中NaBr含量低于25mg·L-1时,对淡水水生生物是安全的,所养殖生物中溴蓄积量符合食品卫生标准。     

用nested—PCR方法快速检测鲑鱼肾杆菌

描述了用嵌套式聚合酶链式反应(nested PCR)快速检测鲑鱼细菌性肾病病原鲑鱼肾杆菌的方法。以BKDR和BKDF为引物,扩增鲑肾杆菌编码57kDa主要可溶性蛋白基因中501bp的DNA片段,再用引物BKDR2和BKDF2扩增其中长度为314bp的DNA片段。用其它15种常见鱼类致病菌验证这两组引物的特异性,结果没有非特异性的DNA片段被扩增出来。用酚抽提法和煮沸加冻融的方法获得的细菌裂解产物,PCR检测的灵敏度均可达到1.8×103CFU·mL-1,用Nested PCR进一步扩增PCR扩增的产物,检测灵敏度可再提高100倍。检测鲑鱼肾杆菌菌悬液与鲟卵的混合物,结果表明,该方法能准确、可靠、快速地检测鲑肾杆菌。     

低分子量海带岩藻聚糖硫酸酯的清除活性氧自由基和体内抗氧化作用

用化学发光分析法研究了3种低分子量涨带岩藻聚糖硫酸酯（LMWF－M，LMWF－I，LMWF－IV）体外清除超氧阴离子自基基（O2^-)及羟基自同基（．OH）的作用，并观察了LMWF－M对高脂血症大鼠的抗氧化作用，结果表明阴离子分量海带岩藻聚糖硫酸酯组分均有清除活性氧自由基的能力，随体系中LMWF浓度的增加，其清除活氧自由基的能力增强，LMWF－I清除自同基的能力最强，它对O2^-的IC50为0.044mg.mL^-1,对.OH的IC50为0.062mg.mL^-1,，LWMF－M能显著降低高脂血症大鼠箅清和组织中LPO含量（P＜0．01），增强SOD活力（P＜0．01）.     

乐清湾塘养泥蚶的生长

1998年6月至2000年7月对浙江省乐清湾塘养泥蚶的生长进行了详细的观察。刚孵化变态的D形幼虫壳长92-100μm，经10d培育达到180.5-201.5μm，平均每日增长8.9-10.2μm；稚贝附着后16d平均壳长从191.3μm增长到634.1μm，平均每日增长27.7μm；出库稚贝放养于围塘内，培育9个月平均壳长达到8.34mm，成为商品贝苗，平均每月增长0.86mm，其中9－10月份增长可达1.65mm；再经15个月培育达到成品贝，平均壳长28.57mm，平均每月增长1.35mm。泥蚶是一种慢生型贝类。对室内浮游幼虫、稚贝、中间暂养贝苗、成蚶养殖期间的多项生长指标进行测量和称重，获得的相关关系非常显著。