大麻染色体制片技术的比较研究

以大麻种子根尖和雄花花蕾为材料,采用常规压片法和去壁低渗法对大麻染色体进行观察.结果表明,去壁低渗法较常规压片法更易获得分散细胞,且染色体制片背景清晰;对大麻根尖有丝分裂不同时期进行观察,在种子发芽46h时取材,染色体中期分裂相最多;染色体2n=20,38,40,80等不同倍性的大麻染色体细胞均有存在.     

'棉梨'染色体倍性鉴定

以‘库尔勒香梨’、‘黑酸梨’、‘沙梨01号’为对照,利用流式细胞仪和根尖压片法对‘棉梨’的染色体倍性进行鉴定,以期为梨种质资源的创新和利用提供参考。结果表明:根尖压片得出‘库尔勒香梨’、‘黑酸梨’、‘沙梨01号’以及‘棉梨’的染色体数目分别为34、51、68以及34,‘棉梨’的染色体数目与二倍体的‘库尔勒香梨’相同;利用流式细胞仪得出‘库尔勒香梨’、‘黑酸梨’、‘沙梨01号’以及‘棉梨’均出现了一个峰,且峰值比为1. 0∶1. 5∶2. 0∶1. 0,即各梨品种叶片细胞中DNA相对含量为2C∶3C∶4C∶2C。综上可得:‘棉梨’的染色体数目为2n=2X=34,为单纯的二倍体。     

去壁低渗法制备芦笋染色体标本的研究

应用去壁低渗法进行了芦笋染色体标本制备的研究,其结果是:芦笋种子根尖用2mmol/L的8-羟基喹啉预处理2h,2.0%纤维素酶+1.0%果胶酶37℃酶解45m in,酶解前后各固定1次,能得到效果较好的芦笋染色体标本图;芦笋品种“Atlas”的体细胞染色体数目为2n=20。     

3个广藿香品种染色体制片技术优化与计数

以广藿香根尖为试验材料袁采用常规压片法比较取材时间尧预处理液尧处理时间尧酶液浓度尧酶解时间尧 低渗时间对广藿香染色体制片效果的影响袁采用去壁低渗法对石牌尧海南尧高要3 个广藿香品种进行染色体计数遥结 果表明院上午10:30~11:00 取材尧冰水混合液处理24 h尧4%混合酶液渊纤维素酶和果胶酶各占4%袁g/V冤酶解30 min尧低 渗15 min 所得广藿香染色体制片效果较好曰3 个广藿香品种分散良好尧清晰的50 个分裂相细胞袁70%以上的细胞染 色体数目为2n=64袁3 个广藿香品种在染色体数目上没有差异遥     

河南铁棍山药的染色体数目及核型分析

以根尖为材料采用酶解去壁低渗法,对河南铁棍山药(Dioscorea opposita Thunb.)染色体进行制片、计数,并进行了核型分析。结果表明,河南铁棍山药的染色体数目为120;核型公式为2 n=120=96 m(6 SAT)+18 sm(4 SAT)+4 st+2 T,染色体相对长度组成为16 L+26M2+60M1+18 S。染色体的绝对长度范围0.688~2.628μm,为微小型染色体或小型染色体。相对长度范围为0.869%~3.319%。核型不对称系数为58.13%。最长染色体长度是最短染色体长度的3.819倍,臂比大于2∶1的比例为11.67%,核型类别属于2B型,系统演化上属于较原始的植物。     

草棉染色体高分辨显带技术的初步研究

以草棉(Gossypium herbaceum L.)的根尖为材料,采用5μg/ml放线菌素D(AMD)+0.002mol/l 8—羟基喹啉混合液处理1.5h,Ohnuki′s溶液中低渗0.5h。根尖在载玻片上加固定液捣碎法制片,首次在草棉中诱导出高分辨的染色体带纹。显示的带纹随染色体所处阶段而有所变化,前期和晚前期染色体带纹最多。早中期次之,中期染色体仍能显示1～4个带纹。     

欧洲黑莓的组织培养研究

以欧洲黑莓优良品种冬福瑞(Thornfree)冬季休眠枝为外植体,建立了其快繁体系,即初代培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L;增殖培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+IBA 0.1 mg/L;生根培养基为MS+IBA 0.5-1.0 mg/L;在此体系中增殖系数可达6.5,生根率100%。利用此体系获得的生根组培苗进行移栽,移栽成活率可达到100%,为黑莓工厂化育苗和应用提供理论基础。     

满天星染色体制片技术优化及多倍体诱导

【目的】研究满天星染色体鉴定方法,在对主栽品种进行染色体鉴定的基础上探讨满天星多倍体育种的可行性。【方法】以满天星品种‘云星75’组培苗的根尖和茎尖为试验材料,利用压片法比较不同材料、不同预处理方法对满天星染色体制片效果的影响,并对4个满天星主栽品种进行染色体倍性鉴定,还以二倍体品种‘千万星’为材料进行了多倍体诱导试验。【结果】采用对二氯苯对组培苗茎尖预处理4 h是满天星最适合的染色体制片方法,‘云星75’、‘繁星’、‘日出’为四倍体(4n=68),‘千万星’为二倍体(2n=34);用0.05%的秋水仙碱浸泡处理‘千万星’茎段48 h,多倍体诱导率最高,可达16%。【结论】采用染色体加倍技术培育满天星多倍性新品种是可行的。     

适于荧光原位杂交的大薯叶片染色体制片技术

为克服利用根尖制备染色体标本的局限性,拟通过优化酶解去壁低渗法中的材料幼嫩程度、预处理方法以及酶解时间,建立大薯嫩叶染色体制备技术体系。结果表明:取刚展开的大薯嫩叶,用0.002 mol·L?1 8?羟基喹啉于4 ℃下预处理2 h,用3.5%纤维素酶和1.75%的果胶酶混合溶液于37 ℃下解离1 h,能获得较好的大薯染色体制片。最后,以大薯45S rDNA 序列为探针,对有丝分裂间期和中期细胞进行荧光原位杂交检测,杂交信号清晰稳定。本研究建立的适于荧光原位杂交的大薯嫩叶染色体制备技术可为分子细胞遗传学研究提供一种简便实用的细胞学方法。     

平邑甜茶根尖染色体制片技术优化及核型分析

为探讨制备平邑甜茶染色体制片的最佳技术参数,以平邑甜茶根尖为试验材料,比较材料的不同采集时间、预处理方法、酶解时间和后低渗时间对平邑甜茶根尖染色体制片的影响。结果表明:在26℃培养条件下,平邑甜茶最佳取材时间为11:00—11:30; 4℃低温冰水混合物进行预处理能够获得较为分散的染色体标本;酶解采用2. 5%果胶纤维素混合酶在37℃下处理最佳时间为2 h,后低渗最佳时间为20 min。核型分析发现平邑甜茶染色体属于小型染色体,染色体臂比变化在1. 01～2. 46之间,差异不大,核型组成成分为中部着丝点染色体(m)、亚中部着丝点染色体(sm),核型属于2B型。     

黑莓山楂复合果汁的研制

[目的]将黑莓和山楂制成复合饮料,提高产品的附加值和经济效益。[方法]以黑莓和山楂为原料,运用酶法液化法制取黑莓原果汁,浸提法制取山楂原果汁,以适当的比例调配黑莓山楂复合果汁,并加入适量的稳定剂,白砂糖及柠檬酸,配制成酸甜适口的果汁饮料。[结果]通过酶法液化法处理黑莓果酱泥的正交试验得出,果胶酶用量0.050%(果胶酶活力为3 000 U/g),酶解时间3 h,酶解温度55℃,效果最好。浸提山楂的单因素试验表明,果胶酶添加量的适宜范围1～3 U/ml,酶解时间2 h左右。复合果汁调配的单因素试验表明,黑莓-山楂比例为1∶3,制得的复合果汁色泽、气味、状态、口味最好。[结论]试验制得的黑莓-山楂复合果汁产品营养丰富,酸甜适口,得到品尝者的一致好评     

利用小麦茎尖分生组织进行染色体制片的探讨

以不同倍性染色体小麦种质为材料,探讨通过生长点分生组织进行染色体制片,获得理想染色体图形的方法.结果表明,自然条件下,上午9:00-10:00,切取幼苗基部分蘖节约2 cm,剥离茎外部组织,立即放入有冰水混合物的试管中,试管在0～1℃冰水中处理24～30h,之后将茎尖组织转入装有卡诺氏固定液(95％酒精∶冰醋酸=3∶1...     

金铁锁染色体制片技术研究

以金铁锁组培苗根尖为材料,对其染色体制片过程中预处理、固定、解离、染色等环节的最佳处理条件进行探讨。结果表明,金铁锁根尖在室温下用0.003 mol/L 8-羟基喹啉溶液预处理5.0 h后,放入预冷的卡诺固定液[V(无水乙醇)∶V(冰乙酸)=3∶1]中于冰水中处理30 min,然后用解离液[V(浓HCl)∶V(无水乙醇)=1∶1]处理120 s,再用卡宝品红染色液对根尖染色25 min(先染色20 min后复染5 min),能得到良好的镜检效果。金铁锁根尖体细胞的染色体数目为2n=2x=28,为二倍体。     

大麻染色体制片技术

[目的]探究大麻染色体的制片技术。[方法]对大麻染色体制片技术的预处理液、解离时间、染色时间等进行试验研究,并对其进行染色体数目观察。[结果]研究表明:用大麻根尖在常温下用0.003%的8-羟基喹啉溶液预处理2 h或用饱和对二氯苯处理1.5 h,经卡诺固定液固定30 min后,在1∶1的1 mol/L HCl和45%醋酸60℃下恒温水浴中解离30 s,地衣红染液染色8 h压片镜检,能取得良好的制片效果。大麻染色体数目观察表明,大麻染色体数目2n=2x=20。[结论]该研究为大麻细胞学方面的深入研究提供了资料。     

不同基质对铁皮石斛组培苗成活和生长的影响

试验设3种基质处理,即刨花∶细锯末=1∶6(处理1)、桤木树皮∶细锯末=5∶1(处理2)、杉木树皮∶细锯末=5∶1(处理3),比较铁皮石斛的成活率、茎粗、株高、根长、根数、叶片数等,筛选适合铁皮石斛生长的最佳基质。该试验条件下,移栽30 d后铁皮石斛组培苗成活率在处理1中为91.3%,在处理2中为97.5%,在处理3中为95.5%;移栽60 d后,其株高、根长在处理1中为6.40、3.26 cm,在处理2中为7.40、5.25 cm,在处理3中为6.45、5.10 cm;其根数在处理1、2、3分别为5.0、6.5、5.6条,茎粗则分别为0.255、0.582、0.542 cm,对应的叶片数分别为9.0、14.5、13.0片。研究初步显示,青木树皮∶细锯末=5∶1是用于铁皮石斛试管苗移栽的最佳基质。     

青花菜染色体制片技术及核型分析

以青花菜为材料,筛选染色体制片流程,采用常规压片法制片,并进行核型分析.结果表明:根尖长度为13～15 mm时,中期分裂相最多;在4种预处理中,0002 mol·L-1 8-羟基喹啉预处理25 h效果最好;青花菜染色体数为2n=18,核型公式为:2n=2x=18=8m+10sm(2SAT),其中第1、2、5、6、9对为近中着丝粒染色体(sm),第6对染色体具有随体,第3、4、7、8对为中着丝粒染色体(m).青花菜染色体的相对长度变化范围为(905%±056%)～(1363%±006%),相对长度组成为2n=18=8M2+10M1.着丝粒指数变化范围为(3213%±337%)～(4223%±157%),臂指数为18.核型分类标准为2A型,属于基本对称核型.     

芝麻染色体常规制片技术关键因子的优化研究

为了探索最佳的染色体制片方法,以芝麻活体种子根尖为材料,研究根尖预处理方法、解离时间、取材长度和染色方法等关键因子对芝麻染色体制片的影响.结果表明,预处理方法为40 mg/L的放线茵酮溶液处理3h、饱和对二氯苯溶液处理4h或0.002 mol/L 8-羟基喹啉溶液处理3h;取材长度为0.5～1.0 mm;在V无水酒精∶...     

玉米秸秆中木质素、半纤维素和纤维素的组分分离研究

针对分离植物茎秆中的木质素、半纤维素和纤维素需高温和高压处理的苛刻条件以及所得组分纯度和回收率均较低的缺陷,采用乙醇和硝酸相结合的方法对玉米秸秆在常压下进行预处理,经稀碱溶液蒸煮及过氧化氢处理,实现高效分离和回收木质素、半纤维素和纤维素组分的目的。正交试验确定的最佳条件为：固液比1∶14、硝酸与乙醇体积比1∶2、76℃下反应3 h,原料的木质素脱除率达76.3%,木质素回收率为44.5%;预处理后的原料以4% NaOH为溶剂、固液比1∶40、95℃下蒸煮2.5 h,其半纤维素脱除率98.8%,半纤维素回收率达66.0%（滤液∶乙醇1∶0.8、pH 7、沉淀2 h）;粗纤维素以2.5%H2O2为溶剂、固液比1∶30、pH 11.5、（46±1）℃下处理6 h,其纤维素纯度99.28%,回收率59.7%。该方法具有工艺条件温和及绿色环保等优势,为玉米秸秆的分级利用提供了一条新的途径。     

‘红颜’草莓茎尖培养与快速繁殖

对‘红颜’草莓茎尖进行组织培养研究,建立其再生快繁体系。结果表明：（1）剥取的茎尖越大,萌发率越高;（2）暗培养3d能够抑制褐化,提高萌发率;（3）增殖培养基：MS＋6-BA0．5mg／L＋NAA0．10mg／L,增殖系数为7．00;（4）生根培养基：1／2MS＋IBA0．5mg／L,生根率为100％,移栽到消毒过的蛭石＋草炭＋珍珠岩（1：1：1）,成活率为100％。     

不同条件下蔗糖溶液对隐孢子虫卵囊分离纯化效果的比较

[目的]探索以蔗糖溶液作为介质分离纯化隐孢子虫卵囊的最佳条件。[方法]以隐孢子虫感染阳性奶牛粪样为材料,设计5个蔗糖浓度、3个离心时间和3个离心速度进行隐孢子虫卵裳的分离纯化。[结果]蔗糖浓度为1：2．0和1：2．5时,分离出的卵囊总数极显著大于其他3组（P〈0．01）,其中1：2．5组卵囊平均数最大;不同离心时间分离出的卵囊总数在数量上差异均不显著（P〉0．05）,其中离心20min时卵囊平均数最大;不同离心速度分离出的卵囊总数的比较表明,3000r／min得到的卵囊数量最多。[结论]蔗糖浓度为1：2．5、离心速度为3000r／min、离心时间为20min是隐孢子虫卵囊分离纯化的最佳条件。