脂多糖诱导奶牛子宫内膜上皮细胞炎性损伤的研究

为了初步探讨大肠杆菌型奶牛子宫内膜炎发生机制,进而为后续筛选出作用于关键信号通路靶点的药物奠定基础。试验通过组织块培养法和传代培养分离纯化得到奶牛子宫上皮细胞(Bovine endometrial epithelial cell,bEEC)。30μg/mL的脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)刺激bEEC 12 h后,收集细胞用于奶牛子宫内膜上皮细胞体外炎性损伤模型的研究。通过荧光定量RT-PCR检测LPS作用于bEEC 2、6、9、12 h后细胞内IL-1β、IL-8、IL-6、TNF-α mRNA表达,然后通过Western-blot检测LPS诱导bEEC NF-кB和MAPKs相关蛋白的表达。结果表明：30μg/mL的LPS作用b EEC细胞2、6、9、12 h可极显著(P<0.01)诱导IL-1β、IL-8、IL-6、TNF-α mRNA表达。LPS可上调MAPKs相关蛋白P38、ERK、JNK的磷酸化水平(P<0.01),促使NF-κB抑制蛋白IκBα的降解(P<0.05)。说明LPS可激活MAPKs和NF-кB信号通路,诱导大量炎症介质的...     

化学杀菌剂对木霉菌厚垣孢子萌发及菌丝生长的抑制作用

为探索化学杀菌剂的施用与残留对木霉菌厚垣孢子制剂的影响,本研究采用孢子萌发抑制法和菌丝生长速率法研究7种常用化学杀菌剂对2株生防木霉菌哈茨木霉610(Trichoderma harzianum 610)和长枝木霉758(T. longibrachiatum 758)厚垣孢子萌发和菌丝生长的影响。结果显示,多菌灵、戊唑醇、苯醚甲环唑的抑制作用较强,五氯硝基苯、甲霜灵的抑制作用较弱,福美双、萎锈灵的抑制作用中等。木霉菌菌丝生长比厚垣孢子萌发对杀菌剂更加敏感。不同木霉菌菌株对杀菌剂敏感性差异较大,7种杀菌剂对610孢子萌发的抑制作用比758强,但多数杀菌剂对610菌丝生长的抑制作用则比758弱。98%多菌灵对610厚垣孢子萌发和菌丝生长的抑制作用最强（EC50分别为1.64和0.05 μg/mL）,70%五氯硝基苯的抑制作用最弱（EC50分别为681.82和1266.00 μg/mL）。98%多菌灵对758厚垣孢子萌发的抑制作用最强(EC50 0.62 μg/mL),甲霜灵的抑制作用最弱（EC50为1108.61 μg/mL）。96.2%戊唑醇对758菌丝生长的抑制作用最强(EC50 0.32 μg/mL),95%甲霜灵的抑制作用最弱(EC50 1206.29 μg/mL)。结合各杀菌剂的使用浓度,施用木霉菌610和758厚垣孢子制剂防治病害时,不能与多菌灵、戊唑醇、福美双与萎锈灵结合使用,并且上述4种农药残留可能影响木霉菌剂的防效,可与五氯硝基苯、苯醚甲环唑结合使用。758厚垣孢子制剂可与甲霜灵结合使用,610孢子萌发后可与甲霜灵结合使用。五氯硝基苯、苯醚甲环唑、甲霜灵的农药残留对木霉菌剂的影响不大。     

郑州地区草坪根部病害病原种类鉴定及防治研究

通过实地调查、室内分离培养和病原鉴定 ,发现郑州市草坪根部病害的病原菌主要是禾德氏霉 (Drechsleragraminea)、立枯丝核菌 (Rhizoctoniasolani)、镰刀菌 (Fusariumspp .)、腐霉菌(Pythiumspp .)等。选用 10种不同杀菌剂对草坪根病优势病原菌室内毒力测定结果表明 ,烯唑醇和敌力脱对禾德氏霉、立枯丝核菌均有强烈的抑制菌丝生长的作用 ,对禾德氏霉的EC50 均为0 0 3μg/mL ,EC90 分别为 0 2 5 μg/mL和 0 98μg/mL ;对立枯丝核菌的EC50 分别为 0 11μg/mL和 0 4 7μg/mL ,EC90 分别为 78 0 6 μg/mL和 3 97μg/mL。五氯硝基苯对丝核菌也有较强的抑制作用。福美双对镰刀菌抑制作用较强。在小区防治试验中 ,对草坪根部病害效果较好的是12 5 %烯唑醇WP 10 0 0倍液、 4 0 %棉花保苗剂WP 5 0 0倍液、 4 0 %五氯硝基苯WP 5 0 0倍液和2 5 %敌力脱EC 10 0 0倍液 ,防治效果均在 5 0 %以上     

辣椒疫霉不同发育阶段对氟吗啉的敏感性研究

从江西省各地采集分离获得108个辣椒疫霉菌株,通过菌丝生长法等测定了辣椒疫霉菌的不同生长阶段对氟吗啉的敏感性。研究结果表明,氟吗啉对辣椒疫霉菌的不同生长发育阶段的抑制作用明显,辣椒疫霉菌丝生长对氟吗啉的敏感性较高,EC₅₀值范围为0.07852~0.38622 μg/mL,平均EC₅₀值为0.18159 μg/mL;游动孢子囊形成对氟吗啉的敏感性更高,EC₅₀值范围为0.00251~0.03943 μg/mL,平均EC₅₀值为0.01588 μg/mL;游动孢子萌发对氟吗啉的敏感性最高,EC₅₀值范围为0.00156~0.00965 μg/mL,平均EC₅₀值为0.00515 μg/mL。正态分析表明,辣椒疫霉菌108个菌株的3个发育阶段对氟吗啉的敏感性符合正态分布,江西省内目前还不存在耐药性的辣椒疫霉群体。     

CdCl2对牛卵母细胞体外成熟及凋亡的影响

利用不同浓度(0,0.8,1.6,2.4 μg/mL)的氯化镉(CdCl2)对处理牛卵母细胞前后对其成熟率、凋亡率、Ca2分布、线粒体膜电位、Bcl-2与Bax的基因表达的影响,初步为重金属对雌性哺乳动物生殖细胞发育及细胞凋亡机制的进一步研究打下基础.利用0,0.8,1.6,2.4 μg/mL的氯化镉(CdCl2)处理...     

Effects of Ethanol Extraction of Cassiae Semen on Glucolipid Metabolism and Inflammatory Cytokines in Hyperlipidemia Rats

[Objective]To observe effects of ethanol extraction of Cassiae Semen on blood lipid,blood glucose,inflammatory cytokines like IL-6 and TNF-α in hyperlipidemia rats and explore the mechanism of Cassiae Semen in regulating lipid when used to treat hyperlipidemia rats.[Methods]The hyperlipidemia rat model was established by feeding high calorie-diet and10% alcohol. After modeling,the selected rats were randomly divided into 5 groups: model group,positive control group(Xuezhikang,0. 15 g /kg),low dose group,medium dose group and high dose group(4,8 and 16 g /kg). All groups were applied by intragastric administration by 10 mL /kg for 4 weeks. Except rats in normal control group,the remains were fed with high calorie-diet and 10% alcohol during the period of administration. After the last delivery,blood was sampled and the serum content of total cholesterol(TC),triglyceride(TG),low-density lipoprotein-cholesterol(LDL-C),high-density lipoprotein- cholesterol(HDL-C) and glucose(Glu) were detected by automated chemistry analyzer. And the content of IL-6 and TNF-α were determined by ELISA. [Results]Compared with model group,the content of TC,TG,LDL-C and Glu in rats treated with ethanol extraction of Cassiae Semen at medium and high dose significantly decreased,and the content of HDL-C increased significantly(P 0. 01). At the same time,the content of IL-6 and TNF-α in hyperlipidemia rats increased remarkably. And the content of IL-6 and TNF-α significantly decreased in rats of medium dose group and high dose group(P 0. 01). [Conclusions]Ethanol extraction of Cassiae Semen could effectively improve the serum content of blood glucose and blood lipid in hyperlipidemia model rats,it also could decrease the serum content of inflammatory cytokines like IL-6 and TNF-α. As a result,it might be benefit to the stabilization of atherosclerotic plaque.     

香椿提取物对痛风抑制作用的初步研究

研究了香椿老叶提取物对痛风治疗过程中2种关键性酶(黄嘌呤氧化酶和环氧合酶-2)的抑制作用。结果表明,香椿提取物对黄嘌呤氧化酶有显著抑制功效,且呈剂量效应关系,其IC50为151.6μg/mL;香椿提取物对环氧合酶-2有明显的抑制作用(p<0.01),其IC50为2.66μg/mL,效果优于阳性对照。香椿提取物可有效降低尿酸水平,抑制环氧合酶-2的活性;香椿提取物具有较强的抗炎、抗痛风作用。     

5种化学药剂对苹果树腐烂病室内防效评价

为探索和筛选出对苹果树腐烂病菌菌丝生长、分生孢子萌发抑制作用效果较好,以及对离体枝条的保护作用较强的化学药剂,以期获得具有良好防效、对环境友好的化学药剂,以便进一步为生产中防治苹果树腐烂病提供一定的理论依据。采用菌丝生长速率法、分生孢子萌发玻片法和离体枝条烫伤接种法,测定5种化学药剂对苹果树腐烂病菌菌丝生长和分生孢子萌发的抑制作用,以及其在离体枝条上的保护作用。结果表明,苯醚甲环唑对苹果树腐烂病菌菌丝生长的抑制率最高,其EC₅₀为 0.0163 μg/mL;丙环唑与戊唑醇次之,EC₅₀分别为0.0224、0.0994 μg/mL;海藻酸对苹果树腐烂病菌丝生长的抑制作用最差,EC₅₀为81.630 μg/mL。苯醚甲环唑对苹果树腐烂病菌分生孢子萌发的抑制效果最高,EC₅₀为0.0061 μg/mL;丙环唑与戊唑醇次之,EC₅₀分别为0.0064、0.0390 μg/mL;海藻酸对苹果树腐烂病菌分生孢子萌发抑制效果最差,EC₅₀为15.3820 μg/mL。离体枝条保护试验表明,海藻酸对离体枝条保护作用最强,病疤扩展面积最小,病疤扩展面积仅为对照的7.2%;菌毒清和戊唑醇次之,分别为对照的32.3%和45.9%;丙环唑对离体枝条保护作用最差,病疤扩展面积最大,为对照的59.8%。筛选出苯醚甲环唑可作为抑制苹果树腐烂病菌菌丝生长和分生孢子萌发的最佳药剂,海藻酸可作为离体枝条保护作用的最佳药剂。     

化学物质对水稻纹枯病菌黑色素形成的影响研究获得进展

正水稻纹枯病是由立枯丝核菌Rhizoctonia solaniAG-1 IA融合群引起的真菌病害。为明确外界培养条件与水稻纹枯病菌黑色素形成的关系,华南农业大学农学院等单位研究人员采用菌丝生长速率法和紫外分光光度法,测定了化学肥料(500μg/mL硫酸钾、磷酸二氢钠、尿素)、金属离子(5μg/mL CuSO_4、FeSO_4、ZnSO_4)、抗氧化剂(5μg/mL槲皮素、桑色素、抗坏血酸)和对照(300μg/mL莨菪碱、50μg/mL儿     

中药复方宫净对奶牛子宫内膜上皮细胞抗炎作用研究

为探讨中药复方的疗效和调控机制,本试验利用脂多糖建立奶牛子宫内膜上皮细胞炎性损伤模型,通过MTT法筛选出脂多糖最佳作用时间浓度时100 ?g/mL,12 h;中药复方宫净的最佳作用浓度为2 mg/mL。利用Real-time PCR技术检测对照组、模型组、中药组在3、6、12 h时细胞因子IL-1β、IL-6、IL-8 mRNA的表达变化。结果表明：与对照组相较,6、12 h模型组：IL-1β、IL-6、IL-8极显著升高(P<0.01);3 h：IL-1β、IL-8显著升高(P<0.05);中药组与模型组相较,3 h时IL-1β、IL-6显著下降(P<0.05);6 h时 IL-6、IL-8极显著下降(P<0.01),12 h时IL-8     

古丈茶区优异茶树单株资源的筛选

为了解古丈群体品种单株间生化成分的变化及差异情况,初步判断各茶树资源的特点和适制性,筛选一批符合不同茶类要求的优良单株,利用紫外分光光度计法和高效液相色谱法(HPLC)测定古丈地方茶树资源春季鲜叶主要生化成分（茶多酚、游离氨基酸、可溶性糖、水浸出物、咖啡碱、茶氨酸和儿茶素）的含量,主成分分析和聚类分析以测定结果为基础。通过主成分分析出共5 个主成分,累计贡献率达到86.90%;聚类分析将10 个供试样及2 个对照样分为4 类,茶多酚和水浸出物含量在各分类间存在较大差异,测定的其他生化成分含量差异不明显。所研究的古丈茶树资源整体表现为高水浸出物、高氨基酸、高可溶性糖、低茶多酚、低酚氨比、低咖啡碱。试验从10个供试茶样中筛选出8个适制绿茶单株、2个红绿茶兼制单株,其中游离氨基酸高于4%的种质资源3 份、茶多酚含量低于16%的种质资源3 份、咖啡碱低于2%的种质资源为1份、酚氨比低于5的种质资源3份。     

氨基酸叶面肥对黄化茶树夏秋茶产量和品质的影响

探明氨基酸叶面肥对黄化茶树夏秋茶产量和品质的影响,为黄化茶树夏秋茶提质增产提供技术支撑。以黄化茶树品种ʻ中黄3号ʼ为试材,设置不施叶面肥(CK)、喷施氨基酸水溶性叶面肥（氨基酸≥100 g/L、锌≥10 g/L、硼≥100 g/L,T1）、喷施活性氨基酸叶面肥（氨基酸≥100 g/L、有机质≥130 g/L、锌+硼≥100 g/L,T2）、喷施茶树叶面肥（氨基酸≥100 g/L、锌+硼≥100 g/L,T3）、水溶喷施1.8%尿素（总氮≥46.4%,T4）5个处理,比较分析各处理对夏秋茶产量、品质的影响。结果表明,施叶面肥处理的发芽密度、一芽二叶百芽鲜重分别大于、显著大于CK。CK产量最低,T1、T2、T3的产量分别高于T4,T1和T3产量分别略高于T2。各处里间的水浸出物和咖啡碱含量无显著差异。CK的酚氨比最高,T2的酚氨比最低,T1和T2的酚氨比显著低于CK和T4,而CK、T3、T4之间无显著差异。研究表明,夏秋季T1、T2能较好地提高黄化茶树茶叶产量,改善绿茶品质,T2的综合效果更好。     

绿茶多酚微波辅助提取和纯化工艺研究

摘要：以碎绿茶为原料,采用二步法提取和纯化茶多酚,通过及正交试验确定较佳工艺为：第一步采用微波乙醇溶液提取效果最好,最佳条件是乙醇溶液浓度为50%,料液比为l:30,浸提20min后,用320W微波辐射25s,再常温浸提60min,重复浸提2次,在此工艺条件下茶多酚浸出率为21.74%。第二步采用离子沉淀法纯化茶多酚,最佳工艺条件为选用A13++Zn2+复合沉淀剂,沉淀剂加入量与茶叶质量之比为3:20,沉淀温度在25℃左右,当茶多酚沉淀完全后迅速分离,最终得到的茶多酚浓缩液纯度可达99.50%。     

不同茶树品种雨花茶适制性评价及其呈味特征研究

研究旨在鉴定筛选优良雨花茶适制品种,为茶树良种引进和雨花茶品质提升提供技术支撑。对南京市6 个主栽茶树品种制作雨花茶的氨基酸、茶多酚、水浸出物、咖啡碱、酚氨比、外形、汤色、香气、滋味和叶底等农艺性状进行综合比较,结合品质成分分析和感官审评结果,研究不同品种雨花茶适制性及其呈味特征。感官审评结果表明,不同品种制成的雨花茶总分依次为‘龙井43’>‘苏茶早’>‘迎霜’>‘浙农117’/‘锡茶5号’>‘乌牛早’,其中‘龙井43’的香气、滋味、汤色得分均高于其他品种。品质成分分析表明,不同品种原料对雨花茶的水浸出物含量、咖啡碱含量影响较小,对茶多酚含量、GA含量、儿茶素组成、氨基酸含量及其组成有着较大影响,‘龙井43’的茶多酚总量显著高于其他5个茶树品种,没食子酸(GA)、儿茶素(C)、表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)、酯型儿茶素含量和儿茶素总量也均排在首位。呈味特征研究认为,雨花茶的滋味特征多由具有苦涩味的儿茶素类决定;茶汤中鲜味氨基酸仅谷氨酸达到鲜味阈值,而GA浓度远高于其阈值(0.034 mg/mL),认为GA是雨花茶鲜爽滋味的关键因素之一。此外,茶多酚含量最高的‘龙井43’还表现出最强的DPPH自由基清除活性,其IC₅₀仅为26.65 μg/mL,抗氧化活性最强。综上,‘龙井43’用于制备雨花茶具备一定的优势,从而为茶树良种引进和雨花茶品质提升提供技术参考。     

茶叶活性成分对梨火疫病菌的抑制活性及稳定性研究

研究茶叶活性成分对梨火疫病菌的抑菌活性及其稳定性,旨在为田间病害防治提供依据。采用打孔法测定茶叶活性成分对梨火疫病菌的抑菌活性及最小抑菌浓度(MIC),并进一步探讨温度、pH和紫外线照射对绿茶提取物茶多酚抑菌活性稳定性的影响。结果表明,抑菌活性绿茶提取物茶多酚>壳寡糖,茶皂素没有抑菌活性;绿茶提取物茶多酚MIC为40 mg/mL。绿茶提取物茶多酚10～60℃时抑菌活性保持稳定,但经高温80～100℃处理后,抑菌活性略有下降;在p H 2时抑菌活性增强,碱性条件下抑菌活性减弱;经紫外处理10～50 min后,抑菌活性随着照射时间的增加而减弱。茶叶活性物质对梨火疫病菌有一定的抑菌活性,且绿茶提取物茶多酚具有较稳定的抑菌活性,为其作为天然的农药防治梨火疫病提供依据。     

树脂法绿色制备茶多酚研究

为了提高中低档茶叶资源利用率,解决目前茶多酚生产工艺使用较多氯仿、乙酸乙酯等有毒有机溶剂、易造成环境污染等问题,以中低档茶叶为原料,采用食用级乙醇和水2种易得、安全的溶剂,比较BYX、HPD200A、HZ103、HZ841、NKA-9、PA、ADS17、XDA5、XDA7、NPS1、NPS2、HP20等12种树脂对茶多酚、咖啡碱、儿茶素的静态吸附和解吸附效果,筛选出较好的绿色制备树脂BYX,并应用BYX树脂对茶多酚进行动态洗脱研究。结果表明,以2 BV/h流速、80%乙醇体积分数、3 BV洗脱体积的BYX树脂洗脱工艺参数进行茶多酚分离制备,茶多酚纯度和得率分别可达到98.36%和19.56%,咖啡碱含量为0.96%,儿茶素含量为80.82%,EGCG含量为46.52%。该茶多酚绿色制备法工艺简单易行,不使用乙酸乙酯、氯仿等有毒有机溶剂,整个工艺过程不产生毒害污染物,安全卫生,产品质量高,可为高质量茶多酚产品的工业化绿色生产制备提供新途径。     

家兔子宫内膜细胞炎症模型的建立

摘要：胶原酶消化法分离和培养家兔子宫内膜细胞,大肠杆菌细菌脂多糖（LPS）诱导子宫内膜细胞炎症,以培养细胞的形态学和传统炎症指标作为炎症发生和发展的判断标准。以不同浓度的LPS作用于细胞,收集不同时段培养上清液,ELISA法测定TNF-α、IL-1β的含量。结果表明,100ng/mL LPS是体外培养的子宫内膜细胞诱导炎症的最适浓度。炎症模型组培养上清液中TNF-α、IL-1β的含量比同期空白组高（P＜0.01）,表明炎症模型建立成功。     

大孔树脂对短梗五加多酚的纯化效果及多酚的抗疲劳作用研究

为优化大孔树脂纯化短梗五加多酚的工艺条件,以短梗五加果的多酚提取物为原料,釆用静态吸附-解吸试验筛选合适的大孔树脂后,利用单因素试验研究最佳纯化工艺条件,同时考察短梗五加多酚对运动后小鼠的抗疲劳效果。结果表明,AB-8大孔吸附树脂对短梗五加多酚具有最佳的纯化效果。纯化短梗五加多酚的最佳工艺条件为：配制浓度为0.1 mg/mL、pH 4的多酚吸附液50 mL,以2 mL/min流速上样至5 g AB-8树脂进行吸附,采用体积为100 mL的70%乙醇溶液,以1 mL/min流速洗脱,产物中多酚含量由124.53 mg/g提高至279.73 mg/g。体内研究结果表明,短梗五加多酚纯化产物可显著延长小鼠游泳力竭时间,明显增加体内肝糖原、肌糖原含量与乳酸脱氢酶活力,并有效降低尿素氮、丙二醛和乳酸浓度水平,较好地缓解机体疲劳,这为短梗五加多酚化合物的进一步开发利用提供参考。     

武夷名丛茶多糖清除羟基自由基活性研究

以‘金毛猴’、‘金罗汉’、‘留兰香’、‘玉麒麟’、‘玉观音’等5份武夷名丛种质资源为研究对象,测定了主要生化成分含量,通过水提醇沉法提取茶多糖,分析了茶多糖的基本组分,并采用D-脱氧核糖-铁体系法研究了茶多糖清除羟基自由基的活性。结果表明：5份名丛中游离氨基酸、茶多酚含量存在极显著差异,可溶性糖含量存在显著差异,茶多糖中糖醛酸、中性糖的含量存在极显著差异,表明武夷名丛种质资源具有生化成分多样性;‘玉观音’、‘金毛猴’、‘玉麒麟’、‘金罗汉’、‘留兰香’茶多糖对羟基自由基的清除活性存在显著差异,其IC50分别为4.37、4.80、6.21、6.31、6.75 mg/mL,均高于阳性对照Vc (IC50= 26.03 mg/mL),表明武夷名丛茶多糖是一种较好的羟基自由基清除剂,具有较强的抗氧化活性,不同名丛间茶多糖活性具有多样性。     

信阳绿茶主食面包的研制

将信阳毛尖绿茶研磨成粉添加到主食面包中制备信阳绿茶主食面包,研究不同绿茶粉添加量对主食面包比容、感官品质、水分含量及酸度的影响。结果表明,绿茶粉最佳添加量为面包粉质量的3%,此时得到的绿茶主食面包比容为5.75 m L/g,感官品质评分98分,水分含量32.7%,茶多酚含量0.386 g/100 g,酸度2.98°T;绿茶面包表皮完整且丰满,无焦斑,色泽均匀,稍有茶叶的黄绿色,组织紧密有弹性、耐咀嚼,有茶叶的清香,无茶苦味,且具有较好的营养保健功能,市场前景广阔。