卵孢白僵菌优良菌株的筛选和选育

从不同地区采集并分离到卵泡白僵菌菌株１７个，其中菌株Ｂｅａｕｖｅｒｉａ ｌｅｎｅｌｌａ２４－１对大黑鳃金龟幼虫室内致病力高达７３．３％。通过单孢分离、紫外线照射分生孢子和原生质体的诱变方法，获得了比出发菌菌株Ｂ．ｔｅｎｅｌｌａ２４－１产孢量高２倍以上，毒力提高０．５４－１．７９倍的优良菌株４个。     

北京地区西瓜枯萎病生理小种分化研究

对在北京大兴、顺义、通县等西瓜主产区采集，经单孢分离得到的８个西瓜枯萎病菌株进行了生理小种分化研究。应用国际通用的３个鉴别寄主ＳｕｇａｒＢａｂｙ、ｃｈａｒｌｅｓｔｏｎＧｒａｙ、ｃａｌｈｏｕｒＧｒａｙ和国内京欣１号、苏蜜１号２个品种，采用全国协作组统一的苗期抗病鉴定方法，进行人工接种鉴定。结果表明北京地区西瓜枯萎病菌株均系同一生理型，为西瓜枯萎病生理小种１号。     

白僵菌防治盐肤木害虫黑角直缘跳甲的初步研究

用来源于黑角直缘跳甲、榆蓝叶甲、泥蜂、竹象、松毛虫上的６株球孢白僵菌，于室内对黑角直缘跳甲２龄幼虫进行致病性测试，结果表明：不同菌株致病力存在显著差异，其中来源于黑角直缘跳甲上的白僵菌Ｂ３．１对该虫的致病性最强，室内试验死亡率达９１．３１％，校正死亡率９０．８８％，高于其它寄主上分离生产的白僵菌；用于林间防治试验，虫口减退率为７０．３％，可明显提高盐肤木倍林结倍率和五倍子产量     

浙中沿海稻区瘟病菌生理小种的种群消长和分布研究

１９９６年至１９９８年,对分离来自浙中沿海台州各市县所获得１７６个单孢菌株,用全国统一鉴别品种共鉴定出７群２２个稻瘟病生理小种。其中中Ｂ和中Ｄ群是台州稻区２个主要的优势小种群,总的出现频率分别为５３．９８％和２３．８６％,它们中的中Ｄ１、中Ｂ１３、中Ｂ１５和中Ｂ１这四个小种在我地分布范围广,出现频率分别高达２０．４５％、１４．２０％、１４．２０％和１０．８０％,且对多数栽种水稻致病,为优势小种。     

田间水稻单个病斑中稻瘟病菌的遗传多样性

根据93个单病斑中分离的227个单孢菌株样品的分析，研究了来自同一定殖系统(同一病斑)中稻瘟病菌不同单孢菌株(同源菌株)的遗传变异。在致病性分析的样品中，仅有5个病斑分离的10个单孢菌株在所有鉴别品种上表现同源菌株有完全相同的致病反应，并且有完全相同的DNA指纹图谱带型；另有13个病斑上分离的32个单孢菌株的同源菌株不仅属于不同的生理小种，而且在1～3个单基因品种上也有不同的致病反应。用rep—PCR指纹图谱和致病型分析67个病斑的157个单孢样品中的同源菌株具有完全相同的DNA指纹图谱；13个病斑中分离的27个单孢样品中同源菌株具有显著差异的指纹图谱；8个病斑分离的27个单孢菌株样品中同一来源样品中部分样品有相同的指纹图谱带型，部分样品却有不同的指纹图谱。同源菌株之间有完全相同致病性其指纹图谱亦相同或有很小的差异；通常，致病性差异很大的同源菌株其指纹图谱差异也很大。作者认为来自同一定殖系统中的不同单孢菌株存在的遗传变异与病菌的异核现象或自然状态下不同遗传背景菌株同时侵染造成同一病斑有关。     

大豆疫霉菌对甲霜灵(Metalaxyl)的敏感性及变异性

大豆疫霉菌(Phytophthora megasperma f.sp.glycinea)对甲霜灵的敏感性及变异性研究结果表明,17个中国大豆疫霉菌侏菌丝生长对甲霜灵较敏感,Ec50值平均为0.0098ppm,Ec95值平均为2.6295ppm。但不同菌株对甲霜灵的敏感性不同,Ec50值范围在0.0042～0.0297ppm之间,相差7倍左右。Ec95值范围在0.7688～6.1682ppm之间,相差8倍左右。3个美国菌株菌丝体生长对甲霜灵有一定耐药性,Ec50值范围在0.3725～0.4813ppm之间,Ec95值范同在125.97～280.59ppm之间,分别比中国大豆疫霉菌株Ec50值和Ec95值平均高43倍和77倍。单孢分离物菌丝体生长对甲霜灵敏感性变异较大,B1菌株单孢分离物Ec50值范围在0.0058～0.2537ppm之间,S367菌株的单孢分离物的Ec50值范围在0.0069～0.1735ppm之间,分别相差43倍和25倍。有的单孢分离物对甲霜灵的耐药性增高。各菌株孢子囊和卵孢子产生对甲霜灵敏感性有一定差异,但1.0ppm的甲霜灵对其抑制率均为100％。活体测定结果表明,1.0ppm的甲霜灵对该病的防效达94～100％。     

大豆疫霉菌对甲霜灵(Metalaxyl)的敏感性及变异性

 大豆疫霉菌(Phytophthora megasperma f.sp.glycinea)对甲霜灵的敏感性及变异性研究结果表明,17个中国大豆疫霉菌侏菌丝生长对甲霜灵较敏感,Ec50值平均为0.0098ppm,Ec95值平均为2.6295ppm。但不同菌株对甲霜灵的敏感性不同,Ec50值范围在0.0042~0.0297ppm之间,相差7倍左右。Ec95值范围在0.7688~6.1682ppm之间,相差8倍左右。3个美国菌株菌丝体生长对甲霜灵有一定耐药性,Ec50值范围在0.3725~0.4813ppm之间,Ec95值范同在125.97~280.59ppm之间,分别比中国大豆疫霉菌株Ec50值和Ec95值平均高43倍和77倍。单孢分离物菌丝体生长对甲霜灵敏感性变异较大,B1菌株单孢分离物Ec50值范围在0.0058~0.2537ppm之间,S367菌株的单孢分离物的Ec50值范围在0.0069~0.1735ppm之间,分别相差43倍和25倍。有的单孢分离物对甲霜灵的耐药性增高。各菌株孢子囊和卵孢子产生对甲霜灵敏感性有一定差异,但1.0ppm的甲霜灵对其抑制率均为100%。活体测定结果表明,1.0ppm的甲霜灵对该病的防效达94~100%。     

野生药用植物内生真菌的分离及拮抗菌株筛选

为挖掘生防新资源,采用组织分离法从21种野生药用植物不同组织部位分离纯化内生真菌,以6种植物病原菌为靶标菌筛选拮抗菌株,并根据形态学及分子生物学对菌株进行鉴定,在此基础上研究了高效拮抗菌株对靶标菌菌丝生长及孢子萌发的影响。结果表明:从分离纯化的478株内生真菌中筛选出11株高活性拮抗菌株,分属于青霉属Penicillium、平脐蠕孢属Bipolaris、棘壳孢属Pyrenochaeta、镰孢属Fusarium、粒毛盘菌属Lachnum、垫壳孢属Coniella和Neonectria 7个属,其中青霉属占比最高,达36.36%。平皿对峙试验表明, 棘壳孢菌12-R-5对灰葡萄孢表现出高效性和专一性,其对菌丝抑制率达66.67%。含药平皿试验表明,菌株12-R-5发酵滤液10倍稀释液对灰葡萄孢菌丝生长抑制率达100%,与其他处理差异显著。菌株12-R-5 10倍发酵滤液处理灰葡萄孢10 h,孢子不萌发;100倍稀释液处理对孢子萌发抑制率为91.01%。显微镜观察发现,棘壳孢菌使灰葡萄孢菌丝扭曲变形,膨大肿胀及断裂,部分菌丝发生抑缩、消融现象。说明棘壳孢菌12-R-5菌株具有很好的生防潜力及应用前景。     

苏云金杆菌高毒力菌株4．0718的快速选育

从湖南省不同生态区域的旱作地，果园和稻园采集的858份土样中，分离筛选出苏云金杆菌30株。选取一株具典型苏云金杆菌菌落特征和较高杀虫毒力的菌株701^2c为出发菌株，经紫外线和两次亚硝基胍的交替复合诱变，显微涂片染色镜检，发现菌体的伴孢晶体的形状、大小、数量及芽孢与伴孢晶体的比例与杀虫菌株4．0718。该突变株杀虫毒力与原始菌株相比提高了7．5倍，在6、12和24h内供试小菜蛾三龄幼虫死亡率分别高达20％、97％和100％。此菌株的高效速效杀虫毒力经连续10代培养能稳定遗传。     

广东省稻瘟病菌生理小种的类型和分布

１９９５～１９９７年,从广东省各市、县田间采集并经单孢分离获得的５８４份水稻稻瘟病菌菌株,用全国鉴别品种鉴定出８群３３个生理小种。３ａ来,ＺＣ群一直是优势小种群,总的出现频率是４５．３％,ＺＣ１３一直是最优势小种,总的出现频率是２７．３％。优势小种的组成随年份而变化：１９９５年,优势小种是ＺＣ１３、ＺＧ１、ＺＣ１５和ＺＡ４５,频率分别为２３．７％、２１．９％、１５．６％和１１．５％;１９９６年,优势小种是ＺＧ１、ＺＣ１３和ＺＣ１５,频率分别是２２．９％、２０．３％和１９．６％;１９９７年,优势小种是ＺＣ１３、ＺＢ１３、ＺＣ１５和ＺＧ１,频率分别是３９．８％、１８．６％、１０．６％和１０．６％。生理小种的生态分布特点是：ＺＣ１３在平原与沿海地区出现的频率较高;而ＺＢ１３则正相反,在山区市、县出现的频率较高,特别是１９９７年,ＺＢ１３在山区出现的频率为２４．７％,而在平原与沿海地区出现的频率是１０．４％。     

玫烟色棒束孢的生物学特性与其对小菜蛾致病力的相关性

测定了玫烟色棒束孢原始亲本菌株PFCF-O、退化亲本菌株PFCF-D和单孢分离子菌株PF-CF-D58、PFCF-D20、PFCF-D50的菌落生长速率、产孢量、孢子萌发率和胞外蛋白酶水平等生物学指标以及各菌株对小菜蛾2龄幼虫的校正死亡率。结果表明,菌株PFCF-O的生长速率呈先快后慢的趋势,产孢量为2.7×107个/mL,孢子萌发率为62.59%,胞外蛋白酶水平为1.16,对小菜蛾2龄幼虫校正死亡率达97.74%。而菌株PFCF-D、PFCF-D20、PFCF-D50和PFCF-D58间平均生长速率和孢子萌发率无显著差异,产孢量变化范围为1.05×107~2.34×107个/mL,胞外蛋白酶水平变化范围为1.02~1.07,各生物学指标及其对小菜蛾2龄幼虫的校正死亡率(19.86%~51.44%)都显著低于菌株PFCF-O。相关性分析结果显示,玫烟色棒束孢对小菜蛾的致病力与菌株生长初期的生长速率、产孢量、孢子萌发率和胞外蛋白酶水平呈极显著的正相关关系,与菌株生长后期的生长速率呈极显著负相关关系。     

稻瘟菌群体中dsRNA的多样性及稻瘟菌菌株QSP5中病毒对寄主生物学性状影响的研究

 真菌病毒在真菌中广泛存在,一些真菌病毒可以影响病原真菌营养生长、产孢和色素形成等性状。本文研究了真菌病毒在水稻稻瘟菌中的多样性以及其对寄主生物学性状的影响。采用单孢分离的方法从发病水稻叶片上分离获得了120个稻瘟菌菌株,其中约52%携带dsRNA片段。菌株QSP5被2个基因组为dsRNA的病毒即产黄青霉病毒1-C(Magnaporthe oryzae chrysovirus 1-C, MoCV1-C)和稻瘟菌病毒3(M. oryzae virus 3, MoV3)所侵染。对菌株QSP5进行单个的分生孢子纯化,获得了仅携带MoV3的菌株QSP5-9。菌株QSP5与QSP5-9的产孢量、菌丝形态以及菌落形态存在明显差异,经研究推测MoCV1-C与菌株QSP5 的产孢能力衰退、菌丝生长和产色素异常相关。同时对MoV3的稳定性进行了初步的研究。从稻瘟菌菌株QSP5获得了100个单孢分离物,通过对随机挑选的40个单孢分离物进行检测,结果表明这些分离物100%携带MoV3,只有部分单孢分离物携带MoCV1-C。另外,从稻瘟菌菌株QSP5-9获得了94个单孢分离物,对随机挑选的45个单孢分离物进行检测,结果表明这些分离物中均含有与菌株QSP5-9大小相同的dsRNA片段。根据以上结果推定MoV3在稻瘟菌菌株QSP5和QSP5-9及其无性后代中具有一定的稳定性。     

球孢白僵菌生物学特性与其对小菜蛾致病力相关性分析

为明确球孢白僵菌的各项生物学指标与其对小菜蛾致病力间的相关性,对一株球孢白僵菌菌株GXU-Bb进行单孢分离,测定了菌株GXU-Bb及其分离子菌株GXU-Bb16、GXU-Bb10、GXU-Bb13和GXU-Bb05这5个菌株的生长速率、产孢量、孢子萌发率、胞外蛋白酶水平和几丁质酶水平等多项生物学指标。结果表明,各菌株间生长速率和孢子萌发率无显著差异;产孢量变化范围1.54×10^7-2.98×10^7个/ml;胞外蛋白酶水平变化范围1.04-1.19;几丁质酶水平变化范围1.05-1.14;各菌株间对小菜蛾二龄幼虫的致病力差异较大,校正死亡率变化范围为39.81%-83.79%。将各生物学指标与菌株对小菜蛾二龄幼虫的校正死亡率进行回归分析得出,球孢白僵菌对小菜蛾的致病力与菌株生长速率、孢子萌发率无显著相关关系;与产孢量、胞外蛋白酶水平呈极显著正相关关系;与几丁质酶水平呈显著正相关关系。     

芝麻棒孢叶斑病病原菌鉴定与致病力比较

 为明确芝麻叶斑病病原菌及其致病力,本研究以河南不同地区芝麻上分离所得叶斑病分离物为研究对象,通过形态观察和分子鉴定探讨这些分离物的分类属性,并且进行离体叶片和活体茎杆接菌,进一步探究了不同菌株的致病力差异。结果显示分离所得的6株芝麻叶斑病分离物的菌落形态、生长速率和产孢量存在差异,分生孢子多数呈倒棍棒状,具隔膜,6个菌株的ITS序列与GenBank中Corynespora cassiicola的一致性达99%以上,结合形态特征与ITS序列将其鉴定为山扁豆生棒孢。室内人工接菌芝麻发现,这6个菌株的致病力存在显著的差异;在芝麻叶片上,20180909-03属强致病力菌株,20180821-01、20180909-05和20180824-01属中等致病力菌株,20180904-02-02和SF1-1属弱致病力菌株;在芝麻茎杆上,20180824-01致病力最强,其次是20180821-01、20180909-03和20180909-05,SF1-1和20180904-02-02致病力最弱。研究结果证明山扁豆生棒孢不同菌株在芝麻上的致病力存在明显的分化。     

芝麻棒孢叶斑病病原菌鉴定与致病力比较

 为明确芝麻叶斑病病原菌及其致病力,本研究以河南不同地区芝麻上分离所得叶斑病分离物为研究对象,通过形态观察和分子鉴定探讨这些分离物的分类属性,并且进行离体叶片和活体茎杆接菌,进一步探究了不同菌株的致病力差异。结果显示分离所得的6株芝麻叶斑病分离物的菌落形态、生长速率和产孢量存在差异,分生孢子多数呈倒棍棒状,具隔膜,6个菌株的ITS序列与GenBank中Corynespora cassiicola的一致性达99%以上,结合形态特征与ITS序列将其鉴定为山扁豆生棒孢。室内人工接菌芝麻发现,这6个菌株的致病力存在显著的差异;在芝麻叶片上,20180909-03属强致病力菌株,20180821-01、20180909-05和20180824-01属中等致病力菌株,20180904-02-02和SF1-1属弱致病力菌株;在芝麻茎杆上,20180824-01致病力最强,其次是20180821-01、20180909-03和20180909-05,SF1-1和20180904-02-02致病力最弱。研究结果证明山扁豆生棒孢不同菌株在芝麻上的致病力存在明显的分化。     

Cultural Characteristics, Pathogenicity and Vegetative Compatibility of Fusarium udum Isolates from Pigeonpea (Cajanus cajan (L.) Millsp.) in Kenya

Seventy-nine single-spore isolates of Fusarium udum, the causal agent of wilt disease of pigeonpea, from Kenya, India and Malawi were characterized according to their cultural characteristics, pathogenicity and vegetative compatibility group (VCG). The isolates exhibited high variation in pathogenicity on a wilt-susceptible pigeonpea variety, and in mycelial growth and sporulation on potato dextrose agar medium. The 79 isolates were categorized into two virulence groups, two groups of radial mycelial growth and four groups of sporulation. Radial mycelial growth showed a moderate negative correlation (r = –0.40; P = 0.01) with sporulation. However, mycelial growth and sporulation had no correlation with virulence. Pairings between complementary nitrate non-utilizing (nit) mutants of F. udum generated on chlorate containing minimal medium revealed that all the isolates belonged to a single VCG (VCG 1) with two subgroups, VCG 1 I and VCG 1 II. Vegetative compatibility was independent of cultural characteristics and pathogenicity. This is the first report of vegetative compatibility in F. udum.     

来源于湖北省梨轮纹病菌中真菌病毒多样性检测及其分析

 一些真菌病毒严重影响寄主生长、产孢量、致病力。本研究对来源于湖北梨轮纹病菌携带真菌病毒情况进行分析,旨在挖掘具有生防潜能的真菌病毒资源。随机采集湖北省梨树发病枝干,分离、鉴定获得13个梨轮纹病菌株,其生长速率、致病性存在差异。提取dsRNA检测,发现12个菌株均携带不同大小的dsRNA片段。观察其dsRNA带型,HBWH-14 dsRNA含有1~7 kb 9条带,其他菌株携带的dsRNA条带位置均位于HBWH-14所含dsRNA带型中的某1条或多条对应的条带位置。RT-PCR检测发现部分菌株携带产黄青霉病毒BdCV1、双分体病毒BdPV1、单分体病毒BdTV1以及未分类的BdRV1。本研究未发现梨轮纹菌株所含病毒种类与致病力存在直接的相关性。HBWH-14原生质体脱毒获得后代100%携带的dsRNAs稳定遗传。     

高毒力白僵菌的筛选及对花生甜菜夜蛾的致病力

为了筛选高毒力的生防白僵菌菌株,本研究对分离获得的4株白僵菌F1、F5、F6、F8的生物学特性进行分析,并在室内检测对甜菜夜蛾的致病力,最后通过大田试验验证了高毒力菌株对花生甜菜夜蛾的防治效果。结果表明,上述4株白僵菌的菌落形态、生长速率、产孢量等生物学性状及致病力存在显著差异。生长最快以及产孢量最高的是菌株F1,菌落呈粉状。菌株F6的分生孢子较其他菌株的分生孢子大。致病力检测结果表明,菌株F1对甜菜夜蛾的致病力最强,LC₅₀和LT₅₀分别是2.9383×10⁶ cfu/mL和5.79 d;其次是菌株F8,菌株F5和F6的毒力相对较弱。大田防效试验表明,菌株F1对花生甜菜夜蛾的防治效果可达75%以上,并在花生叶片具有较强的定殖能力。     

番茄叶霉病菌对氟硅唑敏感基线及抗药性风险研究

从辽宁省不同地区未使用过氟硅唑的保护地中采集番茄叶霉病叶,经单孢分离获得43株叶霉病菌。采用茵丝生长速率法测定其对氟硅唑的敏感性。结果表明,菌株间存在较大差异,EC50值最低为0.151 9μg／mL,最高达4.647 5 μg／mL。所有菌株的EC₅₀总平均值为1.253 1μg/mL,可作为番茄叶霉病菌对氟硅唑的敏感基线。野生菌株经紫外线照射,获得两个抗药性突变菌株,其抗药性倍数分别为6.0和7.6。突变菌株的菌丝生长速率及产孢能力显著低于原野生菌株。     

Mating Behaviour and Vegetative Compatibility in Spanish Populations of Botryotinia fuckeliana

Mating behaviour and vegetative compatibility were studied in Spanish populations of Botryotinia fuckeliana. Fifty-seven isolates out of the 61 tested were sexually fertile with one or more of the reference strains of known mating type (MAT1-1 or MAT1-2). Thirty-nine isolates were heterothallic, giving fertile crosses when mated with the MAT1-1 (24 isolates) or the MAT1-2 (15 isolates) reference strain. Eighteen isolates crossed successfully with both MAT1-1 and MAT1-2 reference strains, and were referred to as homothallic or MAT1-1/2. Both mating types were widespread, being represented in isolates from two regions, from the same and different greenhouses, from different hosts, and from different years of isolation. Isolates were paired on Malt Extract Agar + NaCl to evaluate vegetative compatibility. Most of the paired isolates were unable to fuse and showed a different reaction of incompatibility. Nitrate-non-utilising (nit) mutants were selected by growth on a medium amended with 30–50gl^–1 potassium chlorate. Over 600 chlorate-resistant sectors were recovered from 40 isolates at a mean frequency of 0.15–2.39 sectors per colony, but only 11% were identified as nit mutants by their thin growth with no aerial mycelium on minimal medium. However, most of these nit mutants reverted to wild type during six months of storage on chlorate-amended medium. Genetic complementation between nit mutants occurred only in two cases between mutants from the same isolate.