新剂型兔瘟疫苗的研究

经血凝抑制和攻毒试验结果表明，在含有相同抗原量制备的疫苗，兔瘟油乳剂灭活疫苗比兔瘟组织灭活苗免疫后血清ＨＩ抗体效价高３．２５￣６．０ｌｏｇ２，即使油乳剂灭活疫苗仅为组织灭活苗四分之一的抗原量，免疫后血清ＨＩ抗体效价还高１ｌｏｇ２。油乳剂灭活苗免疫兔第５０天其血清ＨＩ抗体未见下降，而组织灭活苗免疫后第２６天已开始下降。虽然接种二种剂型的疫苗攻毒后均具有１００％的保护率，但血清ＨＩ抗体效价消长情况证明     

小鹅瘟病毒荧光抗体的制备与应用

将小鹅瘟病毒(GPV)分离毒xw株接种健康兔获得兔抗GPV超免疫血清，由此制备兔抗GPV荧光抗体。采用直接荧光抗体试验对人工感染雏鹅、鹅胚及自然病例进行了检测。结果表明，该方法可栓出患病组织中的病毒抗原，且肠和肝的含毒量高于尿囊细胞。     

小鹅瘟病原学与检测方法的研究

从患病雏鹅的病料样本中分离鉴定出一株小鹅瘟野生强毒.采用鹅胚增殖病毒,以琼脂扩散试验从感染鹅胚尿囊液中检出小鹅瘟病毒抗原;以感染鹅胚尿囊液人工接种5日龄健康雏鹅,复制出与自然感染病例相类似的病变; 通过电镜观察到典型的小鹅瘟病毒粒子.该分离毒株核酸分子量为5 000 bp.制备的小鹅瘟沉淀抗原可以检测患病雏鹅血清中的抗体,监测治疗血清的滴度和疫苗接种的效果.标记的小鹅瘟荧光抗体能直接检测患病雏鹅组织中的病毒抗原.针对编码主要结构蛋白VP3的基因设计合成一对引物,扩增出与预期长度相符的特异性DNA片段.     

单克隆和多克隆双抗体夹心斑点酶联法检测兔瘟病毒的研究

本文建立的酶标双抗体夹心斑点酶联法检测兔瘟病毒的主要步骤为,以单抗包被,加入待测抗原,再加多克隆兔抗兔瘟病毒血清,最后加酶标羊抗兔抗体示踪。由于本法操作简便、试剂用量小、肉眼可观察结果、无需特殊仪器,故对兔瘟的诊断具有较大的实用价值。     

家兔葡萄球菌病血清学诊断的研究 Ⅰ.琼脂糖免疫扩散试验

以琼脂糖免疫扩散法检测实验感染葡萄球菌的免,其血清沉淀抗体在感染后13～41天阳转;自然流行群中的兔血清,阳性率为41.5％,群养兔为17.40％,散养兔为10.20％。兔巴氏菌抗原、波氏菌抗原、链球菌抗原对葡萄球菌感染兔血清沉淀抗体不发生交叉夏应。葡萄球菌抗原对巴氏菌高免兔血清、巴氏菌抗体阳性兔血清、波氏菌阳性兔血清及健康兔血清不发生反应。     

兔瘟精制卵黄抗体的实验室制备及检验

选用免疫原性良好的兔瘟抗原制备成兔瘟灭活疫苗,按特定的免疫程序接种健康商品蛋鸡群,通过HI检测免疫鸡群血清和卵黄的兔瘟抗体效价,收集合格的高免蛋,制备兔瘟精制卵黄抗体。经实验室检验,本品安全性良好,     

应用酶联免疫吸附试验检测伊氏锥虫循环抗原的实验研究

本文介绍一种检测伊氏锥虫循环抗原的双抗体夹心酶联免疫吸附试验。这种试验敏感性和特异性高,检查实验室制备的伊氏锥虫可溶性抗原,可检出的阈值为0.049—0.195微克蛋白/毫升(0.122±0.066微克蛋白/毫升);检查泰氏锥虫和龚地弓形体抗原,即使抗原浓度分别高达180微克蛋白/毫升和200微克蛋白/毫升,亦为阴性。用此法观察了7只实验感染家兔血清中伊氏锥虫循环抗原的动态,实验兔于感染后4—8天首次呈现抗原血症,滴度于感染后8—10天达高峰,持续仅4—12天,于感染后14—28天转为阴性,而实验感染前和用拜耳205治疗后的血清则全部阴性。将治疗前已转阴的15份血清和治疗后的28份血清标本按Bout等介绍的方法解离免疫复合物再检循环抗原,前者10份阳性,后者全部阴性.此结果证明,实验感染兔于感染后2—4周血清中出现伊氏锥虫抗原-抗体免疫复合物,复合物的产生影响循环抗原的检出。     

旋毛虫感染兔血清抗体消长规律的研究

应用旋毛虫肌幼虫干燥冷浸可溶性抗原与聚醛化聚苯乙烯（ＰＡＰＳ）载体微球共价交联制成快诊试剂,对旋毛虫感染兔血清进行检测,初步探明其血清抗体的消长规律。实验显示,以１６０００条肌幼虫／只经口饲喂感染１０只兔,于第７天可检出抗体,并分别于感染后第４５￣４９天先后达到抗体最高水平,然后维持一段时间（２０￣３０天左右）,以后逐渐缓缓下降。此结果与旋毛虫肌幼虫感染宿主后的生活周期相吻合。肌幼虫在肠道内发育为     

Dot-ELISA检测兔疥螨抗体方法的建立和应用

将从病兔痂皮内收集的疥螨经研磨、冻融、离心后,制成可溶性抗原,作为诊断抗原,建立Dot-ELISA方法检测兔疥螨血清抗体.研究确定了该方法的最佳工作条件.制备的诊断膜片特异性强,不与兔瘟病毒、兔大肠埃希菌、兔附红细胞体等阳性血清反应.膜片具有良好的灵敏性,高免血清作1∶210稀释亦能检出;重复性试验表明该法重复性良好.诊断膜片在4 ℃保存5个月其检测活性不变.结果表明,建立的Dot-ELISA可用于免疥螨抗体的检测.     

红细胞吸附病毒-荧光抗体染色法快速诊断“兔瘟”

“兔瘟”是由病毒所引起,其病原可凝集人的“O”型红细胞,而且此种凝集现象可被相应的抗病毒抗体所抑制。为寻求更为简便、快速的诊断方法,特进行本试验。材料及方法一、免瘟种毒:由自然病兔中分离,并经用江苏农学院制备的“兔瘟”组织灭活疫苗做免疫保护试验证实为“兔瘟”病毒。取人工接种第5代病死兔的肝、牌,-30℃保存作为种毒,代号RZ-5。     

间接ELISA检测试剂盒在兔瘟抗体监测中的效果评价

兔瘟是一种急性、热性、败血性和毁灭性的传染病,发病率和死亡率极高,是目前危害我国养兔业最重要的疫病之一。间接ELISA抗体检测方法是兔瘟血清学抗体水平检测的主要方法,在兔瘟的诊断、流行状态的监测和流行病学调查等方面得到了广泛应用。为了评价兔瘟病毒间接ELISA抗体检测试剂盒在兔瘟抗体检测中的应用效果,利用兔瘟病毒间接ELISA抗体检测试剂盒对2012年采集于河南、河北、山东等地的818份免疫兔血清进行了检测,并进行了间接ELISA抗体检测试剂盒与间接血凝抑制试验(HI)的符合率研究。结果显示两者的符合率达94.0%,说明ELISA试剂盒具有良好的临床适用性和准确性,非常适用于兔场免疫后兔群的抗体水平监测。     

一种增殖小鹅瘟病毒的方法

小鹅瘟强毒和鸭胚化弱毒可以在产蛋母鸡中增殖,并传递到卵黄中。卵黄中的病毒抗原可以用琼脂扩散试验和对流免疫电泳检出,该沉淀线可被高免血清阻断。在人工感染产蛋母鸡45天后,仍能在感染母鸡所产蛋的卵黄中检到小地瘟病毒抗原。含病毒的鸡蛋在普通冰箱中保存3个月,仍可用琼扩试验检测出卵黄中病毒抗原。该试验为小鹅瘟病毒的增殖提供了一种途径。     

水牛抗小鹅瘟高免血清的研制和应用

用小鹅瘟病毒浓缩乳化抗原,皮内多点注射分3次免疫水牛,可获得琼扩抗体为1:6～1:64的抗小鹅瘟高免血清。此血清具有良好的预防效果和较高的疗效,在疫区注射1～5日龄雏鹅预防小鹅瘟,可提高雏鹅成活率36.4％;治疗发病雏鹅,治愈率达88.7％。乳化抗原以首免剂量1.5ml/只,二免2.5ml/只为佳,三免剂量应根据二免后血清琼扩抗体效价高低而定,抗体高加倍剂量大,低则加倍剂量小。同时测得水牛三免后13～16天血清琼扩抗体开始站达高峰,血清抗体达高峰后,至少可以持续16天以上。     

平坝灰鹅群鹅细小病毒病流行病学调查

为了解鹅细小病毒(GPV)对贵州省平坝灰鹅群的感染现状和潜在威胁,在平坝县境内采集临床健康平坝灰鹅的血清和卵,优化GPV感染鹅胚尿囊液浓缩度,使用不同浓缩度抗原进行琼脂扩散试验检测GPV血清和卵黄抗体,同时针对病毒VP3基因,利用分子生物学方法检测血清、卵黄和蛋壳带毒情况,并分析隐性感染对平坝灰鹅群的可能影响。结果表明,10倍浓缩抗原较宜于抗体检出,平坝灰鹅GPV血清抗体平均阳性率达37.3%;卵黄抗体阳性16.7%;阳性血清、阴性血清和卵黄、蛋壳表面病原核酸检出率分别为13.2%,6.7%,13.3%和0。这一结果说明GPV抗原抗体可共存在于血清,平坝灰鹅面临GPV威胁并可能长期隐性带毒,而母源抗体的存在可能是避免小鹅瘟大规模暴发的原因。     

免疫酶琼脂扩散试验在小鹅瘟诊断中的应用

利用抗小鹅瘟病毒酶标单克隆抗体建立了一种新的诊断方法一免疫酶琼脂扩散试验.该方法在检测小鹅瘟病毒抗原时,灵敏度比常规琼脂扩散试验高256倍左右.可直接检出鹅胚尿囊液及病料组织中的小鹅瘟病毒.15例自然病例肝组织的检验结果与病毒分离结果一致.在检测血清抗小鹅瘟病毒抗体时,灵敏度比常规琼脂扩散试验提高256倍。该方法灵敏、简便、快速、准确,适用于小鹅瘟临床诊断及免疫鹅抗体水平的监测.     

检测兔抗大肠杆菌血清抗体的Dot—ELISA方法的建立

用兔大肠杆菌（ＲＣ８９１１２４）制备包抗原，建立了检测兔抗大肠杆菌血清抗体的Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ方法，抗原最佳稀释度为１：５，待检务清最佳释度为１：１０，酶标记山羊抗兔ＩｇＧ最佳稀释度为１：４０００。对３０只大肠杆菌菌苗免疫兔进行检测，免疫后８天血清抗体即全部阳转，敏感性为１００％，分别对２３只兔轮状病毒，２０只病毒性出血症，２２只巴氏杆菌，７天波氏杆菌，１８只链球菌，２１只葡萄球菌感染兔进行血清检     

琼脂扩散试验检测羊口疮病毒

以羊口疮痂皮毒抗原接种家兔制备高免血清,经琼扩试验检测血清价为1∶16;通过抗原与兔抗羊口疮高免血清的方阵分析,确定兔抗羊口疮高免血清诊断抗体的最佳稀释度为1∶4;该诊断抗体对5份不同地区的羊口疮疑似病料都呈现特异性反应,不与山羊痘疫苗毒、口蹄疫疫苗毒和羊正常皮肤抗原发生交叉反应。琼脂扩散试验检测羊口疮病毒是一种简便、易于判断、实用性强的诊断方法。     

检测马传贫强毒感染马与弱毒疫苗免疫马外周血病毒抗原的研究

从马传贫强毒急性感染马的外周血白细胞、血浆、血清中可检出马传贫病毒抗原;从亚急性感染马外周血的白细胞、血浆中可检出马传贫病毒抗原;从无症状慢性马外周血的白细胞中偶尔能检出马传贫病毒抗原。对9匹马传贫驴白细胞弱毒疫苗免疫马连续跟踪3个月,从外周血的白细胞、血浆、血清中均未检出马传贫病毒抗原。     

兔病毒性出血症（RHD）母源抗体动态与抗病毒感染关系

为了阐明母源抗体动态与抗病毒感染关系、母源抗体对疫苗免疫干扰程度，从而提出适宜的免疫程序，进而为易感动物筛选，疫苗免疫后抗体水平的跟踪调查等提供科学依据，进行了本项研究。 1试验材料和方法 1. 1被检血清样品 RHD常规免疫母兔怀孕到产期剖腹取胎兔，产后 24～ 48h未经吃初乳仔兔，已吃初乳仔兔，产后第 6、 15、 30、 45、 60、 90、 120日龄兔和产仔母兔，经心脏采血分离血清。 1. 2 RHD种毒 种毒系本研究组分离保存的兔病毒性出血症病毒 (RHDV)湖 84－ 12毒株。 1. 3凝集抗原 取人工感染死亡兔肝组织，以 PBS作 1∶ 10…     

禽网状内皮组织增殖病琼脂免疫扩散抗原的研制及应用

禽网状内皮组织增殖病（ＲＥ）琼脂免疫扩散抗原为淡粉红色液体，具有良好的特异性，与抗鸡马立克氏病、鸡传染性法氏囊病、禽白血病、鸡传染性贫血病、鸡新城疫病毒标准阳性血清不发生交叉反应。抗原还具有良好的敏感性，在实验室对人工感染ＲＥＶ的ＳＰＦ鸡７天即可检出抗体，检出率为４０％，１４天检出率为１００％。抗原在３７℃保存７天，在１５℃保存１５天，在４℃保存３０天，在－２０℃至少保存１８０天，未见效价下降。用本抗原检查血清沉淀抗体来诊断ＲＥ，是一种特异，敏感简便的方法，适于在生产中推广应用。