藤稔葡萄芽变株系研究

以藤捻葡萄为对照,对藤枪的一个芽变株系的生物学和植物学特性进行观测,并对其幼叶的ＤＮＡ进行ＲＡＰＤ分析。结果表明：芽变株系在植物学、生物学特性方面存在着不同程度的变异,尤其生长势明显比对照强;一年多次结果性能好;丰产稳产;果实中的水溶性总糖、还原糖、维生素Ｃ、可溶性固形物含量增加,品质优于对照;且果肉硬度提高,具良好的贮藏性能。从幼叶中提取ＤＮＡ进行ＲＡＰＤ分析,某些引物的ＰＣＲ产物存在着一定的多态性,表明芽变株系发生了基因型的分化。     

桃芽变新品种秋妃的选育

秋妃是桃品种西妃的芽变新品种。果实近圆形,平均单果重280.0 g,最大单果重462.0g,摘袋铺反光膜果实红色;黏核,近表皮1/2部分果肉为红色,近核心1/2果肉为白色,果核周围果肉放射线状红色,肉质细,硬脆,硬溶质,粗纤维少,汁液多,风味浓甜,鲜食品质上等;可溶性固形物含量13.50%;在河北省唐山地区,果实8月中旬成熟。2013年6月通过河北省科学技术厅组织的品种鉴定。     

桃芽变新品种渝佛桃的选育

渝佛桃是冬桃芽变新品种。果实长圆形,平均单果重204.4 g,最大单果重315.4 g;果面鲜红色或浓红色,果面茸毛少,左右不对称;黏核,近果皮果肉白色,中心部果肉呈放射状红色,肉质硬、致密,汁液丰富,风味甜,有浓香味;可溶性固形物含量14.30%,总糖含量10.48%,可滴定酸含量0.25%,可食率73.58%;在重庆市,果实8月中下旬成熟。2013年通过重庆市农作物品种审定委员会品种鉴定。     

桃芽变中早熟新品种凤红的选育

凤红是桃品种白凤的芽变,我们于2000年在山东省单县终兴镇桃园发现。果实圆形或近圆形,平均单果重182.0g,最大单果重300.0g;果皮鲜红色;黏核,果肉黄白色,近果皮处果肉有红色素,肉质细脆,硬溶质,汁液多,有香味,风味甘甜,鲜食品质上等;可溶性固形物含量12.80%,5～7℃可贮藏3个月;在山东省菏泽,7月15日果实成熟,果实发育期100天左右。2009年12月通过山东省林木品种审定委员会品种审定。     

百合杂交后代ISSR鉴定

 使用筛选出的5对ISSR引物, 对由东方百合优良品种‘Sorbonne’、‘Tiber’‘Cobra’为亲本的4对杂交组合获得的40个杂交后代指纹进行了分析, 利用NTSY Spc软件UPGMA聚类构建的遗传关系能够较好地反映其亲缘关系。其中, 编号为P23和P21的引物是本试验中鉴定的分辨率较高的ISSR引物。     

‘蛇龙珠’葡萄新株系遗传多样性的SSR、ISSR和VvmybA1基因片段分析

【目的】探究‘蛇龙珠’8个新株系的亲缘关系和遗传多样性,选育出具有推广价值的‘蛇龙珠’新株系。【方法】以‘蛇龙珠’8个新株系(E01~E08)为样品,近缘品种‘品丽珠’‘赤霞珠’等为对照,利用SSR、ISSR分子标记和VvmybA1基因序列进行遗传多样性和亲缘关系分析。【结果】利用14对SSR引物对10份葡萄材料进行基因组DNA的扩增,通过聚类分析得出只有‘蛇龙珠’E06与其他7个株系有差异,另外7个株系聚为一类。利用11个ISSR引物进一步研究得出,‘蛇龙珠’E02(栖霞北)和E03(栖霞南)聚为一类,遗传距离与地理距离一致,E05(莱山)和E08(开发区)聚为一类,E01、E04、E06、E07之间差异显著。分析VvmybA1基因片段的差异探讨‘蛇龙珠’8个新株系的遗传差异,得出‘蛇龙珠’E01、E02、E04、E05、E06、E07的VvmybA1基因亲缘关系较近,聚为一支。‘蛇龙珠’E08和E03的VvmybA1基因分别单独聚为一支。【结论】利用SSR和ISSR可以显示‘蛇龙珠’8个新株系的亲缘关系,在区别‘蛇龙珠’8个株系时首先考虑遗传距离而不是地理距离。这些葡萄样品的VvmybA1基因片段的遗传多样性较低,在近期进化史上VvmybA1基因较稳定,在过去一段历史未发生种群扩张。     

桃种间亲缘关系的SSR鉴定

通过正交试验,建立了桃SSR反应体系,对桃的6个种和扁桃进行了鉴定;对谱带进行数字化转换,用SPSS11.5中的Jaccard聚类方法对结果进行了聚类,发现桃亚属间普通桃与新疆桃的亲缘关系最近,陕甘山桃与甘肃桃间也有较近的亲缘关系,在相似系数小于0.589时,普通桃、新疆桃、陕甘山桃、甘肃桃4个种被聚为一类,与这4个种相近的为光核桃,其次为山桃,最远的为扁桃。     

结球甘蓝西园4号种子纯度的SSR鉴定

利用SSR分子标记技术对结球甘蓝西园4号及其亲本的DNA进行扩增,从90对SSR引物中筛选出1对具有双亲条带差异明显的引物O112-G04,构建了清晰的DNA扩增指纹图谱,并对西园4号种子进行了纯度鉴定,与田间形态学的鉴定结果高度一致,种子纯度均为96.7%.结果表明,利用这对引物对结球甘蓝西园4号种子的纯度鉴定是可行的.     

“桂橙一号”的遗传鉴定

＂桂橙一号＂成熟果实风味浓郁,为探明＂桂橙一号＂的亲本,本研究应用倍性检测、形态学标记和AFLP、SSAP等分子标记对其进行遗传鉴定。倍性检测证实＂桂橙一号＂为二倍体。形态学观察表明,其叶形指数、气孔密度、气孔纵径与冰糖橙的差异显著,叶形比冰糖橙更接近椭圆,气孔密度更高。SSAP标记显示,＂桂橙一号＂与冰糖橙相比存在1个多态性位点。通过对差异片段的回收、测序及序列比对结果表明：该差异片段长102bp,与柑桔抗CTV基因同源性高达87%。表明＂桂橙一号＂是不同于冰糖橙的芽变新种质,可以直接作为品种资源加以利用。     

结球甘蓝西园4号种子纯度的SSR鉴定

利用SSR分子标记技术对结球甘蓝西园4号及其亲本的DNA进行扩增,从90对SSR引物中筛选出1对具有双亲条带差异明显的引物O112-G04,构建了清晰的DNA扩增指纹图谱,并对西园4号种子进行了纯度鉴定,与田间形态学的鉴定结果高度一致,种子纯度均为96.7 %。结果表明,利用这对引物对结球甘蓝西园4号种子的纯度鉴定是可行的。     

Molecular characterisation of coconut (Cocos nucifera L.) varieties using ISSR and SSR markers

The present study was carried out to standardise a DNA isolation protocol for coconut and to characterize five coconut varieties using 18 inter-simple sequence repeat (ISSR) and 14 simple sequence repeat (SSR) markers. DNA was extracted from tender young leaf samples collected from the fronds of five different trees of each coconut variety. A protocol using 0.095 g ml^?1 glucose, 0.025 g ml^?1 polyvinylpyrrolidone, 0.0045 g ml^?1 sodium bisulphite, 0.0055 g ml^?1 sodium dodecyl sulphate, and 50 µl ml^?1 sarcosine produced good quality DNA. The average polymorphism percentages revealed using ISSR or SSR markers between the five varieties were 31.9% or 92.9%, respectively. Using ISSR markers, the overall similarity between all five varieties ranged from 0.657 to 0.775, whereas it was 0.037–0.304 using SSR markers. The levels of polymorphism detected using ISSR markers among the five samples each of ‘Banawali’, ‘Gangabondum Green Dwarf’, ‘Pratap’, ‘Konkan Bhatye Coconut Hybrid-I’, and ‘East Coast Tall’ were 23.2%, 24.2%, 25.6%, 27.1%, and 21.2%, respectively. The levels of polymorphism detected using SSR markers among the five samples of the same five varieties were 85.7%, 86.9%, 85.7%, 100%, and 92.9%, respectively. This study indicated that genetic variation existed both between and within samples of each of the five varieties of coconut. SSR markers were superior to ISSR markers. The extent of genetic variation obtained within a variety was not expected, so it is essential to maintain seed purity via artificial pollination.     

利用SSR研究不同国家桃育成品种的遗传多样性

利用34对SSR分子标记对来自不同国家的56份桃育成品种进行遗传多样性分析。筛选的13对SSR引物共检测出226个等位基因,其中多态性等位基因为222个。桃群体的平均Nei’s基因多样度为0.224,Shannon遗传多样性表型指数为0.367,说明桃总群体遗传变异较低;基因分化系数为0.081,与AMOVA分析结果8.13%相近,说明2者遗传变异以群体内遗传变异为主;基因流值为5.657,则说明不同国家间桃育成品种交流比较频繁。根据Nei’s基因多样度和Shannon遗传多样性表型指数2指标所得,欧美品种群遗传变异最高,其次为中国,最后为日本。UP-GMA聚类分析结果表明,品种间的遗传距离与系谱关系基本吻合。     

Characterization of sequence-related amplified polymorphism markers analysis of tree peony bud sports

Bud sports have been widely exploited for creating novel cultivars in vegetatively propagated plants. However, bud sports of tree peony have rarely occurred nor been applied to breeding. We used sequence related amplified polymorphism (SRAP) markers to characterize two tree peony groups with bud sports. ‘Er Qiao’ and ‘Luo Yang Hong’ formed group I and are derived from Chinese cultivars, while ‘Shima-nishiki’ and ‘Taiyō’ formed group II and are related to Japanese cultivars. The DNA samples were evaluated with 25 different primer pairs. This resulted in a total of 149 different amplicons in Group I, of which 80.5% were polymorphic. Group II generated a total of 57 amplicons, of which 63.2% were polymorphic. The two groups shared 43 amplicons. The genetic similarity among the cultivars ranged from 0.33 to 0.60. The two bud sports groups were apparently separated on the unweighted pair-group method with arithmetic averages cluster analysis tree. The results demonstrated that this marker system appeared effective in detecting molecular differences between original parents and their bud sports in tree peony. This study provides a technical base for characterizing plants with bud sports, which are valuable genetic resources for further breeding.     

Evaluation of the genetic diversity of Asian peach accessions using a selected set of SSR markers

A total of 94 peach accessions from the Zhejiang province of China were analyzed using 34 polymorphic single-locus simple sequence repeat (SSR) markers. Genetic distance analysis divided the accessions into two major clusters, one with mainly local accessions from the Fenghua region. Preselected lines from some crosses were exclusively clustered with the local ones, possibly related to maintaining the taste quality of the fruit. The number of alleles per locus at most loci was two or three, with an average of 2.85. The value of observed heterozygosity varied from 0.05 to 0.84 (average of 0.48). Diversity within the introduced accessions was higher than that of the Fenghua local accessions. Of the accessions analyzed in this study, 94% were individually identified. Those that could not be differentiated were all derived from the ‘Yulu’ cultivar, being either mutations or of identical origin.     

桃叶片再生不定芽的研究

以桃栽培品种曙光、金童5号和甜桃王试管苗叶片为外植体,研究了基本培养基、植物生长调节剂种类及质量浓度组合、基因型和试管苗继代次数等因素对叶片再生的影响。结果表明,适宜暗培养的培养基为LP+1.5mg·L-1TDZ+0.15mg·L-1NAA;光培养基为LP+0.5mg·L-1TDZ+0.3mg·L-1KT+0.3mg·L-1NAA和LP+0.6mg·L-1TDZ+0.3mg·L-1KT+0.4mg·L-12,4-D;金童5号和曙光具有较强的再生能力,再生率分别为21.8%和14.5%;曙光和金童5号试管苗继代第1～11次叶片的再生能力与继代前3次愈伤组织相比形成率较高;曙光再生苗在培养基1/2MS+0.5mg·L-1NAA上生根率为100%,平均生根条数为7.9。     

不同需冷量桃品种芽休眠诱导期间的生理变化

以3a生低需冷量春捷毛桃和高需冷量青州冬雪蜜桃为试材,研究桃芽自然休眠诱导期间的生理变化。结果表明,在自然休眠诱导期间,桃芽中水分质量分数和存在状态、膜透性、淀粉和可溶性糖质量分数以及呼吸代谢发生重大变化。伴随着自然休眠的发展,桃芽中水分质量分数、自由水/束缚水比值和膜透性迅速降低,且青州冬雪蜜桃先于春捷毛桃下降,下降速度青州冬雪蜜桃大于春捷毛桃;而淀粉和可溶性糖质量分数则迅速增加,青州冬雪蜜桃先于春捷毛桃增加,增加速度青州冬雪蜜桃大于春捷毛桃;呼吸强度逐渐降低,同时呼吸途径发生重大变化,其中蛋白质和脂肪的三羧酸循环途径的容量急剧增加;糖酵解—三羧酸循环途径的容量呈不规则变化;磷酸戊糖途径的容量逐渐降低;剩余呼吸途径的容量逐渐升高。     

ISSR分子标记在茶树上的应用

ISSR是一种基于微卫星序列发展起来的新的分子标记,具有简便、稳定、DNA多态性高等优点.本文概述了ISSR反应的原理、特点,并阐述了其在茶树种质鉴定、亲缘关系、遗传多样性、指纹图谱建立、辅助育种等方面的应用.     

ISSR标记在芋遗传多样性研究中的应用前景

ISSR是在SSR基础上发展起来的一种分子标记技术,兼具SSR、RAPD、RFLP、AFLP等分子标记的优点。对运用形态学和分子生物学手段研究芋的遗传多样性进展进行了综述,并对ISSR分子标记技术在芋种质资源遗传多样性和亲缘关系、种质资源鉴定和指纹图谱构建、基因定位和分子标记辅助选择等方面的应用前景做出了分析和展望。     

赤霉素和脱落酸与桃芽自然休眠诱导

以2年生且生长健壮的低需冷量(需冷量极低,108～122c·u)春捷/青州冬雪蜜桃[Prunuspersica(L.)Batsch.为试材,共设置短日照、短日照+GA3、自然条件+ABA和自然条件(对照)4种处理,研究脱落酸和赤霉素在桃芽自然休眠诱导中的作用。结果表明,ABA和GA3均参与桃芽自然休眠诱导,调节自然休眠的启动,但其对休眠诱导的调节作用是通过2者的平衡变化实现的,而不是ABA和GA3各自的单独作用。而且这种平衡变化存在一个临界阈值,GA3/ABA比值高于这个临界阈值,则不诱导桃植株进入休眠,反之则诱导桃植株进入休眠。     

李种质资源ISSR鉴定及亲缘关系分析

为了更好的利用目前收集得到的李资源,对重庆地方李品系和国内外引进的李品种共40份资源进行了ISSR分析。从100条引物中筛选出13条多态性引物,共扩增得到134条带,多态性条带109条,多态性百分率为81.3%,其中9条特征性谱带可用于品种鉴定和系谱分析的参考性标记。此外,13条引物可将40份材料完全区分开来,图谱分析表明不存在同物异名现象。UPGMA聚类分析将供试品种分成2组,进一步可细分为4个亚组;主坐标分析将其分成6类,其中奉节李、脆红李和万盛鸡血李分别单独成类。2种分析方法所得的结果均与按原产地划分的结果不完全相符,奉节李、脆红李和万盛鸡血李与其余品种(品系)的亲缘关系较远。来自江苏的早黄李与日本和美国李品种间的亲缘关系相对较近,初步推测国外中国李可能来源于我国华东地区。