苦苣菜内生菌的筛选及其次级代谢产物分析

为开发陕北野生苦苣菜内生菌资源,发现潜在药用活性成分和新的医药先导化合物。以苦苣菜健康植株的根、茎、叶为材料,采用平板对峙培养法测定其对11株供试指示菌的抑菌活性,以苦苣菜提取液为对照,对各拮抗菌株的发酵液进行薄层层析、硅胶柱层析和高效液相色谱分析。从中共筛选出95株内生菌,通过抑菌试验发现其中20株对1种或多种指示菌具有抑菌活性,占分离菌株数的21.05%,其中UG-004、UG-036、UY-085、CY-009、CJ-014、CG-033和CG-035 7株具有较强谱抑菌活性。薄层层析检测结果表明,菌株CG-035的发酵产物在R_f为0.35处有与苦苣菜提取液的层析带迁移率相当的显色带。并通过高效液相色谱分析确定其主要成分为黄酮类物质。菌株CG-035能发酵产生黄酮类或其类似化合物,表明苦苣菜内生菌在次级代谢产物方面具有研究潜力,这为内生菌在微生物药物研究方面提供了理论依据。     

一株产银杏黄酮类成分内生菌的筛选

[目的]保护银杏资源,寻找生产黄酮类物质的内生菌。[方法]以健康银杏叶片、树根为材料,通过组织块分离法和划线分离法分离银杏内生菌;再以银杏黄酮类提取液为对照,对各发酵液进行薄层层析（TLC）分析,用Al（NO3）3-NaNO2为黄酮类物质特异性显色剂。[结果]共筛选出8株内生菌。薄层层析检测表明,菌株07-Y8的发酵产物有1条层析带,与银杏黄酮类提取液的层析带迁移率相当。[结论]菌株07-Y8内生菌能分泌黄酮类或其类似化合物,这为银杏黄酮类成分的开发利用提供了新途径。     

药用植物马蔺的内生真菌分离及其抑菌活性的研究

[目的]研究药用植物马蔺内生真菌资源的多样性及其抑菌活性特征。[方法]通过组织块法对内生真菌进行分离,并选择小麦全蚀病菌、枸杞黑果病菌、番茄灰霉病菌、黄瓜枯萎病菌和黄瓜立枯病菌5种植物病原真菌和枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌4种细菌作为指示菌,采用对峙法和改进的菌块法测定抑菌活性。[结果]从马蔺不同组织器官中分离出32株内生真菌,以根部的最多,茎叶次之;经形态学初步分类鉴定其属于3个目,3个科,4个属。其中,有22株内生真菌对2种或2种以上的植物病原真菌指示菌有不同程度的抑制作用,占菌株总数的68.8%;有12株内生真菌对2种或2种以上的供试细菌指示菌具有不同程度的抑制作用,占分离菌株总数的37.5%;有7株内生真菌对3种以上的植物病原真菌指示菌具有明显的抑制作用,占菌株总数的21.9%;有2株内生真菌对2种供试细菌指示菌有明显的抑制作用,占分离菌株总数的6.3%。马蔺内生真菌对供试植物病原真菌指示菌和供试细菌指示菌有明显抑制作用,且抑制植物病原真菌的范围较宽;2株高活性菌株来源于马蔺叶部,对5种供试真菌指示菌具有明显抑制作用;2株高活性菌株来源于马蔺根部,对2种供试细菌指示菌具有明显抑制作用;1株高活性菌株对4种供试真菌指示菌和1种供试细菌指示菌有明显抑制作用。这5株高活性内生真菌菌株属于束丝菌属、镰孢霉属、梭孢霉属和组丝核菌属。[结论]药用植物马蔺具有丰富的内生真菌资源,并具有明显的抑菌活性。     

青钱柳内生真菌多样性及其代谢产物的特性

为揭示青钱柳内生真菌的分布、多样性及其代谢产物的抑菌活性,并筛选产黄酮的内生真菌,挖掘植物内生真菌新资源,采用组织分离的方法对青钱柳的枝、皮、叶、根部位的内生真菌进行分离,用马丁氏培养基、察氏培养基、PDA培养基对内生真菌进行培养,通过观察内生真菌的形态特征进行初步分类,同时提取其发酵产物,并以金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌为供试病原菌对分离的内生真菌进行抑菌活性试验,通过显色试验和薄层层析试验筛选出产黄酮的内生真菌.试验共分离得到67株内生真菌,通过菌落形态和显微形态对分离得到的青钱柳内生真菌进行分类,其分别隶属于3纲4目6科10属;青钱柳不同组织中内生真菌的分离结果不同,其中根部分布的内生真菌从数量和种属上都占优势;马丁氏培养基培养的菌株种类少、数量多,而察氏培养基和PDA培养基培养的菌株种类较多、菌株较少;抑菌试验共得到13株具有抑菌作用的内生真菌,其中有2株内生真菌的发酵产物对供试菌株均表现出较强的抑菌活性,分别属于青霉属和链格孢属;并且筛选出7株菌株(PP03、PY01、PG11、PZ06、PY12、PP12和PP06)具有稳定的产生黄酮类化合物的能力.     

一株产紫杉醇的南方红豆杉内生菌的分离与鉴定

以南方红豆杉植株为材料,采用组织块法从中开展内生菌的分离筛选,并借助薄层层析和高效液相色谱对内生菌的发酵产物进行分析,最终获得1株具有产紫杉醇能力的内生菌。根据菌株形态学观察以及18S rRNA序列分析,结果表明该菌株属于间座壳属(Diaporthe sp.),间座壳属内生菌产紫杉醇尚属首次报道。     

越橘产黄酮类化合物内生真菌的筛选

从越橘(Vaccinium)属植物的叶片和茎中共分离出176株内生真菌.应用显色反应对176株越橘内生真菌的发酵产物进行初步分析,筛选出2株产黄酮类化合物的内生真菌Y2-3和L5-5,经鉴定1株为细链格孢(Alternaria.tenuissima),另一株为无孢菌株.利用高效液相色谱(HPLC)进一步检测.应用薄层层析检测出菌株所产生的黄酮类化合物与越橘原植物产生的黄酮类化合物相同或相似,利用分光光度法测定出其总黄酮含量.     

两种天南星内生细菌抗魔芋软腐病菌株筛选

魔芋软腐病严重影响着魔芋的生产,利用内生细菌来抑制魔芋软腐病菌有很多优点。选择23株从药用植物一把伞南星、异叶天南星中分离得到的内生细菌,用牛津杯法皿内测试内生细菌对魔芋软腐病菌的拮抗作用,以筛选拮抗软腐病菌能力强的菌株。研究结果表明,23株供试内生细菌对魔芋软腐病菌均有不同程度的拮抗活性,8株抑菌效果非常显著,YC06和YC09两株内生细菌抑菌能力极强,其发酵产物对魔芋软腐菌也有极强的抑菌能力。     

具有抑菌活性的红树植物根际土壤细菌鉴定及多样性研究

为在红树植物根际土壤中挖掘具有广谱抑菌活性的细菌。以大肠埃希氏菌、乙型副伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌作为指示菌,采用琼脂扩散法对红树植物根际土壤中分离到的细菌进行抑菌活性筛选,提取活性菌株的DNA,对其16S rRNA基因进行测序分析。试验从红树植物根际土壤中共分离702株细菌,筛选出35株具有抑菌活性的菌株,其中M27抑菌效果最好,对4种指示菌均具有抑菌作用,且抑菌圈直径均在13 mm以上。在属水平上,具有抑菌活性的菌株分属7个属,其中芽孢杆菌属为优势菌属,占有抑菌活性菌株的54.3%。试验初步揭示了红树植物根际土壤具抑菌活性细菌的多样性,为开发新型抗菌药提供理论依据。     

药用白花泡桐内生细菌的分离鉴定及抑菌活性检测

为开发新的抑菌活性物质,以湘西药用白花泡桐叶片为材料,采用组织分离法从药用白花泡桐叶片中分离内生细菌,通过对峙培养法检测内生细菌发酵液对2株病原真菌的抑菌活性,根据菌株形态、生理生化特性及16S rRNA基因序列系统发育分析对活性菌株进行鉴定.结果表明:从白花泡桐叶片中筛选出对水稻纹枯病菌(Rhizoctonia so...     

陕西核桃内生真菌代谢产物抑菌活性分析

为筛选出具有抑菌活性的核桃内生真菌,以核桃炭疽病原菌等6种真菌和大肠杆菌等5种细菌病原菌作为指示菌,通过平板对峙培养、生长速率法和滤纸片法测定内生菌的拮抗作用及其代谢产物的抑菌活性。结果表明:共筛选出抑菌活性显著的内生菌6株,其中弯角镰刀菌LTL-G3、木霉属YJL-3和德氏霉属YJL-14菌株的发酵液抑菌活性显著,其次生代谢产物中可能存在独特的抑菌活性物质;番茄早疫病原菌和产气荚膜梭菌对核桃内生真菌代谢产物的响应最为显著。     

加拿大一枝黄花黄酮成分的动态分析

研究加拿大一枝黄花植物不同部分黄酮成分随生长季节的动态变化,以确定其最佳采收期。用NaNO2-Al(NO3)3-NaOH法测定总黄酮含量,用HPLC分析黄酮成分。结果表明,4至6月份,叶中总黄酮含量增加,6月份达到最高,枝和茎、根和根茎的总黄酮量则逐渐下降;此时各器官的黄酮成分均较少,主要为绿原酸、咖啡酸。7月份起,叶中总黄酮含量下降,10月份降至最低;枝和茎、根和根茎的则逐渐上升。但7至8月份,各器官黄酮成分最多,且多为槲皮素苷类等黄酮苷类。10月份,叶中黄酮成分明显减少。在出苗高峰期及盛夏采集加拿大一枝黄花,可充分利用其作为黄酮原料,以控制其进一步生长扩散。开花期后,花亦可作黄酮原料加以利用。     

超声波提取分光光度法测定红枣中的总黄酮

[目的]研究红枣中的总黄酮测定方法。[方法]样品经甲醇作溶剂的超声波辅助法提取后,用NaNO2-A l（NO3）3-NaOH显色络合,在分光光度计波长为500 nm处测定其吸光度。[结果]红枣中黄酮类化合物在0.004 8-0.047 0 mg/m l范围内有良好的线性关系,其回归方程为Y=25.625X＋0.023 7（R=0.999 0）。3种不同产地红枣中的黄酮类化合物含量在65.1-158.6 mg/100 g。结果表明,红枣中总黄酮含量与产地及红枣部位有关,以清涧黄河边的新鲜红枣中总黄酮含量最高,枣皮部总黄酮含量高于枣肉和枣核。[结论]建立了超声波辅助法提取、分光光度法准确测定红枣中总黄酮含量的新方法。     

超声波-微波协同萃取枇杷叶黄酮的工艺研究

为研究超声波-微波辅助法提取枇杷[Eriobotrya japonica(Thnnb.)Lindl]叶中黄酮类化合物的最佳工艺条件,以总黄酮类化合物提取量为指标,在单因素试验的基础上,通过正交试验优化超声波-微波辅助提取枇杷叶中黄酮类化合物的最佳工艺条件.试验结果表明,在微波功率为160 W、提取时间为240 s、料液比为1∶50(m/V,g∶mL)、乙醇体积分数为45％,黄酮类化合物的提取量最高达115.41 mg/g.超声波-微波辅助法提取枇杷叶黄酮类化合物提取量高,提取时间短、乙醇用量少,是从枇杷叶中提取总黄酮化合物的有效方法.     

黄酮类化合物的活性研究进展

黄酮类化合物是植物经光合作用产生的,以2-苯基色原酮为母核的一类低分子天然物质,在母核上连接有羟基、羟氧基等结构不同的黄酮,具有抗氧化活性。文章综述了黄酮类化合物抗氧化活性大小与其结构的关系和测定黄酮类化合物抗氧化性的方法。     

冲泡条件对明日叶发酵茶活性物质及抗氧化能力的影响

以纤维素酶辅助发酵的明日叶发酵茶为材料,研究冲泡温度、时间对茶汤中主要活性物质(多酚、黄酮、查尔酮)浸出量及抗氧化能力的影响。结果表明,随着冲泡温度从80 ℃升高至95 ℃,茶汤中多酚、黄酮、查尔酮的浸出量呈先增后减的趋势,90 ℃下茶汤中总酚、总黄酮和总查尔酮浸出量达最大值。随着冲泡时间延长,茶汤中多酚、黄酮和查尔酮溶出量在15 min内迅速增加,之后进入饱和状态。相关性分析结果表明,DPPH法测定的抗氧化性与多酚、黄酮和查尔酮含量呈显著(P<0.05)正相关。     

生姜中黄酮类物质的提取

[目的]优化生姜中黄酮类物质的提取工艺。[方法]以生姜为原料,通过正交试验探讨了溶剂浓度、料液比、超声提取时间以及提取温度等对生姜提取物总黄酮含量的影响。[结果]试验表明,各因素对生姜提取物总黄酮含量的影响大小次序为：料液比、乙醇浓度、提取时间、提取温度,其最优方案为以30％乙醇为浸提溶剂,料液比1：10g／ml,20℃超声提取30min。[结论]研究可为生姜的综合利用和深入研究提供理论依据。     

大蒜黄酮类化合物的浸提工艺条件研究

为了对大蒜总黄酮进行有效分离提取,探讨了用乙醇提取大蒜总黄酮的最佳工艺。采用有机溶剂提取法从大蒜中提取黄酮类物质并用分光光度法进行含量测定。结果表明：最佳提取条件为16倍95％乙醇于80℃浸提3h,样品液中黄酮含量为3．6％。证明采用乙醇为提取剂是提取大蒜黄酮类物质的有效途径。     

锐孔法制备红枣黄酮微胶囊的研究

探索锐孔法制备红枣黄酮微胶囊的工艺条件,本文以红枣黄酮为芯材,研究壁材海藻酸钠浓度、凝固浴Ca Cl2溶液浓度、芯材红枣黄酮与壁材海藻酸钠的比例、凝固浴溶液温度对红枣黄酮微胶囊化效果的影响。结果表明:海藻酸钠浓度3%、Ca Cl2浓度为0.4%、芯材与壁材的比例为1:3、凝固浴Ca Cl2温度35℃,在此条件下微胶囊的包埋率可达69.72%。红枣黄酮微胶囊为米黄色,呈圆球状,大小均匀,具有较好的硬度和弹性。     

超声波协助桔皮总黄酮的提取

根据超声波作用机理,采用超声波循环方法提取桔皮中的总黄酮,该方法时间短、效率高,克服了以前提取工艺上的一些缺点,为工业化提取桔皮总黄酮提供了一定的理论依据和技术支撑。     

荷叶中4种黄酮类物质含量的测定

为快速、简便地定性定量荷叶中的黄酮类物质,建立高效液相色谱法测定荷叶中金丝桃苷、槲皮素、山奈酚和异鼠李素4种黄酮含量的方法。结果表明:在其分析测定条件色谱柱为Gemini C18,柱温为40℃,流动相为甲醇-0.1%磷酸(55∶45,体积比),流速为1mL/min,检测波长360nm的条件下,金丝桃苷、槲皮素、山奈酚和异鼠李素含量分别在1.5~48.0μg/mL,1.0~32.0μg/mL,1.0~32.0μg/mL,0.7~24.0μg/mL线性关系良好,方法的回收率为90%~103%,精密度为3.5%~4.2%,荷叶中4种黄酮含量依次为1.94%、0.092%、0.025%和0.016%。该方法可用于荷叶样品4种黄酮类物质的含量测定。