猪精液离心低温保存技术的探讨

<正> 精子在体外,精清并不能使精子的生活力保持长久,为提高其生活力,我们对猪精液通过离心清除部分精清,然后稀释,用低温保存的方法进行试验。 一、稀释液的制备:采用2种稀释液,其配制比例如表1:     

离心对绒山羊精液冷冻效果的影响

选用8只精液品质良好的岢岚绒山羊成年公羊,采精后将精液混合,等分为2份,一份不离心(对照组),4倍稀释后颗粒冷冻;另一份在2 000 r/min下离心10 min,弃去上清,补充等体积稀释液,再4倍稀释后颗粒冷冻.探讨离心对冷冻前后的精液品质及其相关酶活性的影响.结果表明,离心可显著提高冻前冻后精子活率、弯尾率和顶体完整率,显著降低精子的畸形率和获能率(P＜0.05);离心组冻前冻后精泣的GOT活性、LDH活性、GPT活性显著低于对照组(P＜0.05),精浆果糖含量显著高于对照组(P＜0.05).表明,离心处理可明显提高绒山羊精液冻前冻后的品质.     

猪精液冷冻研究的现状

当前的冷冻方法当前,有四种方法得到了发展,并且已试验应用于生产。Pursel 和 Johnson 法(1975)采集精液的富含精子部分,加抗菌素,经2小时逐渐冷却至室温,然后分装在离心管中,每管含6×10~9个精子。以300g 离心10分钟。除去精清,使每管中的精子重新悬浮于5毫升 BF_5稀释液中。将稀释的精液经2.5小     

精清对蓝狐精子常温保存存活时间的影响

用手按摩法采集蓝狐精子和精清,并用同源精清和稀释液分别在不同稀释倍数下稀释同一份精液,测出此种条件下蓝狐精子的存活时间。统计分析表明,精清与稀释液处理的蓝狐精液差异显著(P <0 .0 5 ) ,精清不利于蓝狐精子的体外常温保存     

鸡溃疡性肠炎油乳剂灭活苗的研制

将大肠梭状芽胞杆菌接种于色氨酸磷酸液体培养基作厌氧培养，３６ｈ 后离心收集细菌，生理盐水稀释使菌体浓度达５×１０９ ＣＦＵ／ｍ ｌ，经甲醛溶液灭活后，与油佐剂乳化制成鸡溃疡性肠炎灭活苗。经检测证明，该疫苗安全、可靠，无毒副作用，有效免疫期可达６个月     

绵羊鲜精多倍稀释配种效果观察

本试验对绵羊鲜精进行３，５，７，１０倍稀释，从稀释后的精液每毫升精子数，存活时间，生存指数，母羊受胎，测定鲜精稀释最佳倍数，获稀释倍产羔母羊受胎率分别为７３．２８％，６９．３７％、５９．０２％、５４．０９％。有效精子数分别为５６６０万，６７９０万，４８５０万，３４００万。试验说明，绵羊鲜精采用７倍之内稀释倍数，有效精子不少于３０００万个效果最佳。     

清洗哺乳动物精子的一种高效方法

引言研究精子时,常要求将精子细胞清洗得不沾有精清或其它体液,而且维持着活的群体。这些体液含有多种成分,其中有些对精子有干扰和相互影响。清洗精子的方法多数属于“古典”式:将精子悬浮液用人工配制的介质稀释,离心使细胞浓缩,然后将细胞重新悬浮于     

维生素B12注射液在绵羊人工授精中的应用

ＶＢ１２ 注射液用作绵羊鲜精稀释液，能提高精子活力和存活时间，尤其在较低室温下保存时间更长。用ＶＢ１２ 注射液１∶５ 和１∶１０ 倍稀释的精样，在室温１ ～１０ ℃条件下有效存活时间长达５００３ 和５８５５ｈ ，明显高于生理盐水稀释的精样和原精的有效存活时间。因此，ＶＢ１２ 注射液可作为绵羊鲜精的稀释液和保存液在绵羊人工授精中推广应用     

去精清对提高辽宁绒山羊细管冻精质量的影响

随着对山羊精液研究的不断加深，研究者发现山羊的精清中含有磷脂酶、类磷脂酶、磷酸酶等许多物质，当与卵黄接触后会使卵黄凝固，产生对精子有毒害和损伤作用的物质，致使精液酸度增高，造成精子死亡。卵黄作为山羊冻精稀释液的常用成分，来源广、价格便宜，其作用是多方面的，目前尚未发现有比较理想的物质可以完全代替卵黄。因此，要避免发生上述不良反应，就必须将精清中的有害物质除去，再与含卵黄的稀释液接触。离心去精清技术早在20世纪70年代曾用于对猪、马的精液浓缩，以便于     

哺乳动物胚胎体外生产技术（下）

２牛精子的体外获能与体外受精２．１精子的洗涤与体外获能无论是鲜精还是冻精，一般都要经过数次离心洗涤以除去精清成分、加入的稀释液成分、死精以及冷冻保护剂如甘油等，以达到获得高浓度的活力旺盛的精子之目的。目前，牛精子洗涤剂最常用的有ＢＯ液和改良的Ｔｙｒｏ...     

采用环磷酸腺甙（cAMP）低温保存家兔精液的品质与受胎率

用假阴道采集１０只新西兰白兔的精液，经测定精子活力强，密度大，呈前进运动。然后用三羟甲基氨基甲烷缓冲液作抗冻保护，使精液在２小时内冷却至５℃，放置２天。低温保存时加入５毫克分子浓度的咖啡碱或茶碱，并在３７℃条件下持温２小时。在受胎率试验中，选用４３只新西兰白兔，每次用新鲜精液，低温冷藏精液或添加５毫克分子浓度茶碱于稀释低温保存精液输精０．５毫升（含精子１５ｘ１０~６）。结果表明，含５毫克分子浓度咖啡碱或茶碱稀释的低温保存精液，游动精子的比例增加（Ｐ＜０．０１），但持温保存时游动精子的比例降低（Ｐ＜０．０１），且精子顶体异常率增加（Ｐ＜０．０１），乳酸脱氢酶释放进入细胞间质。采用含５毫克分子浓度茶碱低温保存精液的配种效果与鲜精相同；但鲜精与冷藏精液相比，则差异显著（Ｐ＜０．０５）。采用鲜精，冷藏精液及含茶碱低温保存精液输精，母兔的产仔率分别为７０．６％，４１．７％和６４．３％．     

除去精浆对波尔山羊冷冻精液品质的影响

以波尔山羊精液为实验材料,采用二步稀释法在降温前以葡萄糖-卵黄液为洗涤液,应用离心洗涤法对波尔山羊精液进行1000r/min离心处理,制作细管冻精,并进行超微结构分析.结果表明:经离心处理的冻精精子活率极显著优于对照组(P<0.01),精子顶体完整率极显著高于对照组(P<0.01) ,精子存活时间不同处理间未见显著差异(P>0.05).精浆中包含有多种物质,充当精子载体的作用,并可稀释精子,为精子提供代谢物质.试验中除去精浆后精子活率、 顶体完整率均优于对照组,表明除去精浆对冷冻后的精子品质有提高作用.     

不同稀释剂对猪冷冻精液精子活率的影响

手握法采集12月龄大约克种公猪精液，在37℃下离心，弃去精清，收集浓缩段富含精子部分，用7种不同的稀释液进行稀释，应用液氮熏蒸法制作颗粒冻精。结果表明，在7种稀释液中，7号稀释液优于其他6种稀释液（P〈0．05）：与其他的冷冻保护剂相比，甘油的冷冻保护性能较好（P〈0．01），其适宜浓度为2～4mL／L：干解冻（40℃～45℃）效果优于湿解冻，解冻后精于活率达0．6～0．49（P〈0．05）；稀释液中添加安钠咖可有效地延长精于的冻后存活时间（P〈0．01）。     

绒山羊鲜精稀释的要点

鲜精稀释是绒山羊鲜精输精和冻精制作过程中的重要技术环节，正确科学地做好鲜精稀释，可以提高鲜精配种效果，提高细管冻精质量。笔者根据多年的人工受精实践和冻精生产经验，现将鲜精稀释的主要技术要点总结如下，供大家参考。     

公猪精液冷冻解冻试验

全部试验在全苏畜牧所的试验基地和一繁殖场进行。用假阴道收集精液,每周采精一次。采精后用葡萄糖-蔗糖-柠檬酸钾液稀释,离心浓缩使每毫升含精子15亿,按1:1与第二液(含卵黄的上述溶液)稀释,冷却到+5℃,并在-85°～-95℃的液氮蒸汽上冷冻成颗粒。     

间接酶联免疫吸附试验检测禽流感抗体的最佳工作条件

禽流感病毒（ＡＩＶ）感染的鸡胚尿囊液经差速离心后,再经蔗糖密度梯度离心,提纯ＡＩＶ,纯化的ＡＩＶ经ＮＰ４０处理并反复冻融,即为ＡＩＥＬＩＳＡ抗原,用该抗原包被聚苯乙烯微量反应板。将健康鸡ＩｇＧ提纯后免疫兔,制备兔抗鸡ＩｇＧ,用过碘酸钠法制备辣根过氧化物酶标记的兔抗鸡ＩｇＧ。确立了间接酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测禽流感抗体的最适工作条件,即：抗原包被浓度１．９～３．８μｇ／ｍｌ,每孔１００μｌ,４℃冰箱过夜;用含０．５％牛血清白蛋白（ＢＳＡ）的磷酸盐缓冲液,３７℃封闭６０分钟;待检血清最佳稀释度为１８０～１６４０,作用６０分钟;酶标抗体作１２０００稀释,作用６０分钟。根据对５２份ＳＰＦ鸡血清的检测结果制定了判定标准。     

离心去除精浆对绒山羊细管冻精品质的影响

为了研究离心除去精浆对陇东绒山羊细管精液冷冻保存的效果,本试验将鲜精以1 250r/min,离心6min后,经过稀释-平衡-冷冻。结果表明:试验组1冻精的活率为33.34%,与对照组和试验组2差异极显著(P0.01);对照组和试验组2冻精活率分别为30.83%和30.61%,但组间差异不显著(P0.05)。通过人工授精,在自然发情状态下,对照组、试验组1和试验组2的受胎率分别是46.15%,49.73%和46.00%,三组之间差异不显著(P0.05)。通过离心陇东绒山羊鲜精,去除部分精浆可以提高其细管冷冻精液的活力,可以提高受胎率。     

提高奶牛冻配受胎率的技术措施

冻精配种是改良奶牛行之有效的方法，为加快奶牛业的发展，尽快提高奶牛冻配改良技术水平，现结合我市奶牛场多年来的冻配改良实践经验总结如下：１选购优质冻精颗粒冻精的品质优劣是决定母牛受胎率高低的基本条件，为此选购颗粒冻精要注意两点：一要挑选原精子活力在０．８以上，且来源于耐冻性强的良种公牛精液；二要选择最佳的稀释配方，且每份冻精中有效精子数在１２００万个以上。２合理解冻精心掌握好“四快”：即先将盛有１～１．５毫升解冻液的试管放入４０℃左右的水溶器中预热５～８分钟，然后从液氮罐中迅速取出颗粒冻精，并不停…     

马,驴精液的低温贮存

马、驴精液的低温贮存王希平王力波张宇明（黑龙江省家畜繁育指导站１５００６０）张立波（克东县医监督所马、驴精液稀释及低温贮存是将精液采集后，用稀释液将精液进行１∶１～３稀释后，分别装入５ｍｌ的安瓶内（青霉素瓶），经封闭后，置入０～５℃的冰箱中贮存。精子...     

细胞壁抗原用于布氏杆菌病诊断试验的研究

用培养的布氏杆菌菌体，通过超声波裂解、反复离心制备出布氏杆菌细胞壁抗原。将细胞壁抗原作1：128稀释，用作牛种布氏杆菌酶联免疫吸附试验（ELISA)的抗原；将布氏杆菌细胞壁抗原作1：32稀释，用作平板凝集试验抗原；把细胞壁抗原作1：16稀释用作试管凝集试验抗原，分别建立了牛布氏杆菌ELISA试验、平板凝集试验和试管凝集试验。用这3种方法，检测已知200份平板凝集试验阴性血清，5份平板凝集试验阳性血清。结果5份阳性血清在平板凝集试验、试管凝集试验和ELISA试验中均为阳性；200份阴性血清在平板凝集试验和试管凝集试验中均为阴性，在ELISA试验中有1份为阳性?试验证明，细胞壁抗原，既能用于传统的平板凝集试验和试管凝集试验，又能用于ELISA试验。