马传贫病毒结构蛋白分子生物学研究进展

马传贫病毒为正链ＲＮＡ病毒 ,具有反转录病毒特有结构。病毒ＲＮＡ基因组两端是完全相同的重复区 (Ｒ区 ) ,在 5′Ｒ下游是 5′独特区 (Ｕ5 ) ;3′端Ｒ区上游是 3′独特区 (Ｕ3)。基因组上游的Ｒ -Ｕ5和下游的Ｕ3-Ｒ构成了病毒基因组两端的非编码区。非蛋白编码区均较短 ,大小分别为Ｒ 78ｎｔ,Ｕ5 36ｎｔ,Ｕ32 0 7ｎｔ。两端非编码区中间是三个较大的开放阅读框架 ,分别编码病毒三个主要结构蛋白ＧａｇＰｏｌ和Ｅｎｖ。其顺序从 5′到 3′端依次是 :ｇａｇ[ｇｒｏｕｐａｓｓｏｃｉａｔｅｄａｎｔｉｇｅｎ]基因编码的群特异性抗原蛋白 ,表达…     

马传贫病毒与人免疫缺陷病毒的形态结构比较

马传贫病毒(EIAV)和人免疫缺陷病毒(HIV)同属于反转录病毒科的慢病毒属成员。目前,反转录病毒科包括七个属:哺乳动物B型肿瘤病毒属;哺乳动物C型反转录病毒属;禽C型反转录病毒属;D型反转录病毒属;泡沫病毒属;HTLV-BLV属和慢病毒属。在慢病毒属中主要包括有:梅地-维斯纳病毒、马传贫病毒、牛免疫缺陷病毒、山羊关节炎-脑炎病毒、人免疫缺陷病毒和猴免疫缺陷病毒等。它们是一组形态结构相关的病毒群。EIAV与HIV在病毒分类学上具有特殊的亲缘性。     

应用冷冻蚀刻技术对马传贫病毒的形态结构的研究

关于马传贫病毒的形态结构,我们已经用“超薄切片法”、“负性染色法”、“抗原抗体复合物的免疫电镜法”、“扫描电镜的临界点干燥法”等进行了研究。通过这些技术方法可以得出:马传贫病毒的形态近似球形,     

马传贫病毒基因组转录图谱的研究

ＥＩＡＶ和ＨＩＶ－１、ＦＩＶ等病毒均属慢病毒属成员,这些病毒在基因组结构、复制的分子机制、抗原漂移及病毒与宿主的相互作用等方面都十分相似。在慢病毒基因转录过程中,首先形成一个与病毒基因组等长的ｍＲＮＡ,然后经过不同方式的拼接,得到长短不一的ｍＲＮＡ,进而出现核表达不同的蛋白。我们知道,慢病毒的基因表达受多种病毒蛋白及细胞核因子的复杂调控,这一过程的改变往往会影响病毒的致病力和繁殖能力。马传贫白细胞弱毒疫苗是目前唯一成功的慢病毒疫苗,因此比较 ＤＬＡ ＥＩＡＶ的拚接位点及拚接方式与其他毒株的异同,对于揭示 ＤＬＡ ＥＩＡＶ致弱的分子机制是十分必要的。本研究首先鉴定了 ＤＬＡ ＥＩＡＶ和 ＤＡ ＥＩＡＶ的几个拼接位点和几个转录产物,将这些拼接位点与已报道毒株相比较,发现 ＤＬＡ ＥＩＡＶ和 ＤＡＥＩＡＶ外显子３上游拼接位点为新发现的位点信号。同时,Ｒｅｖ的靶序列ＲＲＥ的核苷酸序列差异较大。在本研究试验条件下,未克隆到ＤＬＡＥＩＡＶ的１、２、４外显子拼接产物及ＤＡＥＩＡＶ感染动物细胞的１、４外显子拼接产物,这可能由于样品采集时间及病毒体内外繁殖环境差异造成的假阴性结果,但也有一种可能的情况,就是这两个毒株在转录产物的构成或构     

病毒粒子计数公式的推导及其在马传贫病毒收毒期试验中的应用

根据立体计量学原理，对病毒粒子在细胞内的计数公式进行了推导和计算，并且在马传贫病毒收毒期试验中做了应用。结果表明：该公式在理论上成立，实践中可行。使应用电镜技术对病毒的形态定性观察，步入定量分析，为揭示病毒粒子在细胞培养物中的消长规律提供了新的手段。     

病毒粒子计数公式的推导及其在马传贫病毒收毒期试验中的应用

根据立体计量学原理,对病毒粒子在细胞内的计数公式进行了推导和计算,并且在马传贫病毒收毒期试验中做了应用。结果表明:该公式在理论上成立,实践中可行。使应用电镜技术对病毒的形态定性观察,步入到定量分析,为揭示病毒粒子在细胞培养物中的消长规律提供了新的手段。     

马传贫病毒阿根廷株接种中国马病理变化的观察

对接种 EIAV 阿根廷毒株的10匹马进行了病理解剖,病理组织和病毒抗原分布的观察。结果表明,接种阿根廷毒马出现黄染,出血素质、实质脏器肿大与渐进性坏死,胸腺萎缩、出血与水肿,股骨红髓区扩大与稀薄,铁逆转,淋巴样细胞反应,网内系活化与增生,免疫器官中的巨噬细胞及肝脏的库氏细胞有病毒抗原存在等 EIA 共有的证病性病理变化。同时,在接种阿根廷毒的马也观察到出血性素质变化不十分严重;脏器淋巴结肿大、出血、水肿十分明显,而体表淋巴结不明显;85%病例髋结节区出现褥疮样皮下缺损;80%病例各器官,尤其脏器淋巴结髓质区、门区小梁动脉内皮下层显著水肿,甚至闭锁管腔,动脉周围大面积结缔组织增生,水肿;在肾脏,90%病例弓状动脉周围大面积增生,水肿的结缔组织附近尚见有贫血梗死样的大灶性细尿管坏死;部分小动脉,尤其内皮下水肿不明显的小动脉内皮细胞胞浆中有病毒抗原存在。这些特殊的病理变化是辽毒,wyoming 毒或云南毒接种马未曾观察到的。本文就这些共性和特殊性病变产生的原因,引起的结果,及其与防制的关系等进行了讨论。     

马传贫病毒阿根廷株接种中国马病理变化的观察

对接种ＥＩＡＶ阿根廷毒株的１０匹马进行了病理解剖，病理组织和病毒抗原分布的观察，结果表明，接种阿根廷毒马出现黄染，出血素质，裨脏器肿大与渐进性坏死，胸腺萎缩，出血与水肿，股骨红髓区扩大与稀薄，铁逆转，淋巴样细胞反应，网内系活与增生，免疫器官中的巨噬细胞及肝脏的库氏细胞有病毒抗原存在等ＥＡ共有的证病性病理变化，同时，在接种阿根廷毒的马也观察到出血性素质变化不十分严重；脏器淋巴结肿大，出血，水肿十分明     

抗马传贫病毒单克隆抗体试剂在鉴别诊断上的应用

马传染性贫血(简称马传贫)是对马匹危害较大,无法治疗的慢性传染病。近十几年来,我省采取以注射马传染贫驴白细胞弱毒疫苗为主要预防手段,收到了较好的成效。但是,患本病的马匹和注射本疫苗的马匹,均出现血清学阳性反应,只依现行的免疫扩散试验(ID)等法检查,对二者无法区别。这是注疫苗以来,现地在马传贫病的诊断上的     

两种抗艾滋病药物对马传贫病毒的体外抑制作用

探讨了抗艾滋病病毒药物3′-叠氮3-脱氧胸腺嘧啶核苷及三氮唑核苷在马传贫病毒(EIAV)-驴胎皮肤细胞培养系统中对EIAV的抑制作用。通过细胞病变观察及培养物病毒抗原活性的测定表明,上述两种药物对EIAV有明显的抑制作用。     

应用固相免疫放射分析检查马传贫病毒抗体的研究

参子固相免疫放射分析(SPRIA)试验的各成分的适宜条件是:固相载体抗原浓度为200～300μg/m1;马传贫阳性、阴性血清及被检样品为1:100稀释;~(125)Ⅰ-兔抗马血清 IgG 的适宜工作浓度为1000万 cpm/ml.检查了马传贫弱毒疫苗接种马以及牛白血病等疾病阳性血清证明,SPRIA 具有高的敏感性和特异性.     

小反刍兽疫病毒受体SLAM基因的克隆及其结构与功能分析

信号淋巴激活分子（SLAM）为小反刍兽疫病毒（PPRV）感染其自然宿主的细胞受体。本试验从山羊外周血淋巴细胞中克隆获得了SLAM基因,并对其结构和功能的关系进行分析,为研究SLAM的功能及其在PPRV侵染过程中的作用奠定基础。利用RT-PCR的方法对山羊SLAM基因全长进行克隆,通过生物学软件对其核苷酸序列和氨基酸序列进行了比对,利用Swiss-Model进行三级结构预测,然后分析其结构和功能之间的关系。山羊、绵羊、黄牛、水牛、虎鲸和海豚SLAM基因同源性较高,分别是98.7%、96.6%、96.3%、89%和88.8%,氨基酸的相似性分别是97.6%、94.1%、93.2%、83.5%和83.6%。山羊SLAM蛋白V结构域中存在8个影响宿主—病毒特异性结合的8个关键氨基酸,且与绵羊、黄牛和水牛的均完全保守;胞内区含有三段高度保守的富含酪氨基酸（Tyrosine）的基序（TXXYXXV/I/A）。本试验成功地克隆小反刍兽疫病毒受体SLAM基因,分析和预测了SLAM蛋白的结构和功能的关系,为其进一步的生物学功能研究及其应用奠定了基础。     

传染性喉气管炎病毒的基因结构及基因工程疫苗研究进展

鸡传染性喉气管炎病毒(Infectious laryngotracheitis Virus,ILTV)隶属于疱疹病毒科仪α-疱疹病毒亚科,病毒粒子呈球形,有囊膜,直径为195～250 nm,根据其颗粒的大小又可分为大囊膜颗粒(直径180 nm左右)和小囊膜颗粒(直径150 nm左右).核心缠有DNA的纤丝卷轴,纤维末端固定于衣壳下侧,衣壳为正20面体,由162个长形中空壳粒组成,每个角上有5个壳粒,共有12个五邻粒,150个六邻粒.衣壳周围常有一层无定形的致密物质,称为皮质,皮质外有膜包被,为典型的类脂双层膜,其上有短的纤突.……