李基因组DNA提取方法的探讨

本文通过采用改良CTAB法对幼嫩程度不同的李的叶片的DNA的提取进行研究,加大CTAB提取液的浓度,加入抗氧化剂以及RNase最大限度的降低DNA的降解,减少蛋白。多酚类物质的污染和破坏,提高DNA的产量,可以很好地用于PCR扩增和限制性酶切反应中。     

常春藤总DNA提取方法的改进

由于常春藤组织内含有较多的酚类和多糖类物质,获得高质量的总DNA有一定难度.现以常春藤叶片为材料,采用不同方法进行常春藤总DNA的提取,并对提取方法进行了改进、优化,有效去除了多糖类杂质的干扰.结果表明:CTAB法、SDS法及改进方法均可进行总DNA的提取,但改进的方法优于常规CTAB法和SDS法,所得的DNA无降解现象,且无杂质污染.     

几种三华李基因组DNA提取方法的比较研究

以CTAB法、改良CTAB法、SDS法、改良SDS法、改良陈大明法、高盐低pH值法、SDSCTAB法和氯化苄法等8种目前常用植物基因组DNA提取方法为基础,通过采用异丙醇和无水乙醇进行2次常温短暂沉淀、提高离心力等多种去杂质措施进行适当改进,对它们用于三华李基因组DNA提取的效果进行比较。结果表明,8种方法中以CTAB法最优,改良CTAB法其次,高盐低pH值法稍逊,其他5种方法则不适合于三华李基因组DNA的提取;CTAB法不仅适合于早食李不同季节(4月、8月和12月)和不同成熟度叶(未展开嫩叶、展开嫩叶、成熟叶和老叶)基因组DNA的提取,也适合于华蜜大蜜李、白脆鸡麻李、大鸡麻李、中蜜李、小蜜李、串珠李、从化三华李、红线李、香蕉李、中熟李和软枝三华李等11个三华李品种嫩叶基因组DNA提取。     

菊芋基因组DNA提取方法的比较

采用改良CTAB法、改进的高盐SDS法及两种植物基因组DNA提取试剂盒法等４种方法提取菊芋基因组DNA,并进行电泳分析、质量检测及ISSR引物扩增检测。结果表明,改良CTAB法优于其他3种方法,提取的DNA质量较好、纯度较高,能够满足ISSR-PCR扩增要求。     

猕猴桃基因组DNA提取方法的研究进展

对猕猴桃基因组DNA提取的各个环节的进展进行综述。经分析得出,干叶片是一种较为理想的材料,容易保存,获得的基因组DNA质量也较高。提取方法主要有SDS和CTAB法,SDS法可以较好的将DNA与蛋白质分开,而CTAB法则可以较好的将基因组DNA与糖等杂质分离开;此外还有一些改良的提取基因组DNA的方法,都是比较实用的。可以根据不同的条件选取不同的方法。     

部分梨品种基因组DNA不同提取方法的比较

以不同梨品种为材料,分别采用改良CTAB法、改良SDS法、SDS-CTAB和高盐低pH值法对梨基因组DNA进行了提取.结果表明：采用改良CTAB法在提取各种梨基因组DNA过程中表现最好且纯度最高;SDS法提取的基因组DNA产率最高,但纯度较低;高盐低pH值法产率和纯度均最低.     

节瓜基因组DNA提取方法比较研究

以节瓜的成熟干种子、子叶和不同发育阶段的真叶为材料,选用尿素提取法、高盐低pH值法、SDS法和CTAB法等4种DNA提取方法进行比较。结果表明:不同节瓜材料均可以提取到基因组DNA,其中子叶和第1片真叶的提取效果最好;尿素提取法提取种子DNA最为简便快捷,CTAB法提取叶片能得到纯度较高的基因组DNA。经PCR检验,干种子和子叶提取的基因组DNA都可用于PCR扩增。     

高质量枣基因组DNA提取方法

主要针对枣组织中多糖严重干扰基因组DNA提取质量的问题,比较了常规CTAB法、TE3D法和改良CTAB法3种方法的处理效果。结果表明:常规CTAB法提取DNA难以除去多糖类杂质;TE3D法提取的DNA多糖杂质少,但产率低,易降解,褐化严重;改良CTAB法提取DNA产率高,无明显降解,杂质少,D260nm/D280nm比值1.80左右,通过基因组DNA-AFLP指纹图谱分析,完全满足实验要求。并对改良CTAB法的关键步骤作了具体分析讨论。     

桃基因组DNA提取方法及部位的比较研究

通过对桃基因组DNA几种提取方法所得的DNA质量分析,表明分步离心法是最为理想的提取方法,能满足RAPD及其他分子生物学研究的需要。用此方法提取桃不同部位基因组DNA,结果分析表明,从嫩叶和幼嫩果实提取DNA产率较高。     

贡水白柚基因组DNA提取方法研究

以"贡水白柚"为试材,采用盐乙醚处理法、苯酚氯仿处理法、基本CTAB处理法3种DNA提取方法来处理"贡水白柚"基因组DNA,研究不同提取方法对DNA样品的产率、外观、酶切电泳等方面的影响。结果表明:用盐乙醚法所提DNA外观呈纯白色,冷冻沉淀为纤维状,效果最好;用苯酚氯仿法处理幼穗期柚叶片基因组提取DNA产率最高,DNA浓度达118ng/μL;EcoRⅠ酶切图谱用CTAB处理法和盐乙醚处理法效果均较好,苯酚氯仿处理法则拖尾严重,效果差;RAPD引物PCR扩增效果图表明,3种方法均能扩增出清晰条带,均适合于有关"贡水白柚"基因组的相关研究。     

不同方法提取青藏高原蕨麻总DNA的比较研究

以改良CTAB法、改良SDS法、试剂盒法提取青藏高原蕨麻总DNA;用紫外分光光度法测定提取的青藏高原蕨麻的总DNA浓度和质量;用琼脂糖凝胶电泳法、分光光度法测定提取的青藏高原蕨麻的总DNA质量,以期筛选出青藏高原蕨麻总DNA提取的最佳方法。结果表明:用改良SDS法提取的蛋白质含量最高,OD260/OD2801.61左右,用改良CTAB法提取的DNA的OD260/OD2801.76左右;用试剂盒法提取的DNA的OD260/OD2801.70左右;用改良CTAB法提取DNA的浓度在100μg/mL。     

超声波辅助提取鸡骨草总皂苷的工艺研究

采用超声波法,通过单因素试验和正交实验设计,研究超声波功率、乙醇浓度、料液比、提取时间对总皂苷提取率的影响,优选鸡骨草总皂苷提取的工艺条件.结果表明:超声波提取法的最佳提取工艺为:超声波功率90 W,乙醇浓度50％,料液比1∶25(w/v),提取时间20 min,在此工艺条件下皂苷提取得率为1.43％.     

适于SSR分析的树莓基因组DNA的快速提取

通过改良CTAB法对不同品种的树莓幼嫩叶片进行DNA提取,并对得到的DNA进行了电泳检测、含量测定和SSR分析.结果表明:该方法所提DNA的纯度和产率都较高,OD260/OD280比值均介于1.7～1.9之间,OD260/OD230比值介于2.0～2.5之间,无降解现象,RNA去除干净,产率均在50～130μg/mL之间.经SSR-PCR分析条带清晰,多态性好,说明此方法提取的树莓基因组DNA完全适于SSR分析.     

分蘖洋葱叶片RNA提取方法的比较和分析

以新鲜的分蘖洋葱叶片为材料,比较了Trizol法、Trizol改进法、SDS法、SDS改进法以及柱式植物RNA提取法提取总RNA的效果。结果表明:Trizol法和Trizol改进法所提取的RNA得率很低,且不能有效除去叶片中的多糖成分;SDS改进法能够有效的去除分蘖洋葱叶片中的多糖,提取的RNA中28S RNA亮度约为18S RNA的2倍,OD260/OD280值介于1.7~2.2之间,但RNA的得率偏低,约为56.32μg/g;柱式植物RNA提取法提取的RNA 28S、18S、5S条带清晰,完整性好,RNA的得率最高,为123.58μg/g,完全适合于分蘖洋葱进一步的分子生物学研究。     

高质量提取柑橘样品中病原总核酸方法的建立

针对柑橘老熟组织中富含多糖、多酚、色素和其它次生代谢产物的特点,以柑橘老叶老皮为试材,在传统CTAB提取法的基础上通过添加增效剂并优化配方,建立了一种快速、简便的提取植物老熟组织及其内部病原总核酸的CTAB-Triton提取法。新的提取液对细胞的裂解能力更强,且解决了传统CTAB溶液因低温析出而致DNA得率损失的弊端。比较了该法和微量葡聚糖柱纯化法制备模板时韧皮部杆菌的检出率,并用该法制备模板,分析了韧皮部杆菌在柚子叶片中的分布情况,及对其它几种柑橘病原菌进行PCR/RT-PCR检测。结果表明,CTAB-Triton方法能有效提取柑橘老熟叶片的DNA,所得DNA质量高,产量比商品化试剂盒大,提高了韧皮部杆菌的检出率,且可用于柑橘其他病原真菌、细菌,以及DNA或RNA病毒病害的PCR/RT-PCR检测,也可用于定量PCR检测和病原种群多态性分析。     

辣椒叶片基因组DNA提取方法的研究

本项研究采用SDS法、CTAB1法、CTAB2法及CTAB3法对辣椒叶片基因组DNA进行提取,通过琼脂糖凝胶电泳法与紫外吸收检测法对DNA的纯度进行检测。试验证明几种提取方法均能提取出辣椒叶片的基因组DNA,其中CTAB3法提取的DNA经琼脂糖凝胶电泳检测得到一条迁移率很低的整齐清晰的DNA条带,所提取DNA的质量和纯...     

葡萄叶片中提取总RNA的三种方法比较

采用试剂盒法、热酚法和LiCl沉淀法3种方法提取葡萄叶片总RNA,通过琼脂糖凝胶电泳和Agilent 2100计检测总RNA的完整性和提取纯度.对红地球葡萄叶片总RNA提取方法做比较,以得到完整的、高质量的葡萄RNA.结果表明:LiCl沉淀法提取的RNA收率高,完整性好,OD260/OD280均在1.80～2.00,纯度高,28S、18S条带清晰完整.可以满足后续分子生物学的研究.     

适用于新疆野核桃SSR-PCR的快速提取DNA的方法

以新疆野核桃幼叶为试材,采用活性碳改良的高盐低pH法和常用的改良CTAB法进行DNA提取,并检测提取的DNA.结果表明:快速提取法提取DNA的质量与CTAB法相比无明显差异.除研磨样品的时间外,快速提取法完成一次提取所需时间为35 min左右,约为CTAB法的1/3;提取100个样品所消耗的药品价值为7.8元,与CTAB法相比节省成本约60％.该研究为新疆野核桃遗传多样性的分析奠定了坚实的基础,也为其它大规模研究样品DNA的提取提供了技术支持.