拟康氏木霉产胞外多糖发酵培养基及培养条件的研究

以生物量和胞外多糖产量为指标,采用单因素和正交试验对摇瓶培养的拟康氏木霉(Tricho-dermapseudokoning)的液态发酵条件进行优化。优化后的拟康氏木霉发酵控制参数为:最佳培养基配方为麦麸30g/L,玉米粉30g/L,葡萄糖7.5g/L,KH2PO41g/L;发酵培养时间为6d;培养基的初始pH值为5.0～6.0;发酵温度为30±1℃。最佳培养条件下菌丝干重及胞外多糖的产量分别5.272g/L、0.622g/L。     

PDA中水含量对固体培养黄绿木霉T1010分生孢子生长发育的影响

本研究旨在探索马铃薯葡萄糖培养基(PDA)中水含量对固体培养黄绿木霉T1010分生孢子生长发育的影响,为木霉菌剂工厂化生产提供理论与技术支撑。以PDA为基本培养基,设计17种水营养配比和16种水琼脂配比,观测平板培养T1010的菌落形态、半径,菌丝生长状况和分生孢子发育过程、形态及其数量。在水葡萄糖质量比试验中,水葡萄糖质量比55.56时T1010分生孢子近似直径最大,比标准PDA提高7.94%;水葡萄糖质量比83.33时T1010菌丝生长极限值最大;水葡萄糖质量比500时比生长速率最大,为0.316/h;水葡萄糖质量比25时单位面积产孢量最大,比标准PDA提高61.04%;水葡萄糖质量比55.56时单位葡萄糖质量产孢量最大,比标准PDA提高10.86%。在水琼脂质量比试验中,水琼脂质量比38.46时单位面积产孢量最大,比标准PDA提高21.72%;水琼脂质量比500时单位琼脂质量产孢量最大,比标准PDA提高381.94%。PDA培养基中水、马铃薯、葡萄糖、琼脂配比为1000:36:18:26时,T1010分生孢子发育好、产量高,固体发酵生产中基质水调控很关键。     

酿酒酵母培养条件及发酵培养基的优化

为了确定酿酒酵母的最适摇瓶发酵培养条件及最适培养基,采用单因素试验及L₉(3³)正交试验研究影响酿酒酵母生长的关键因素,包括培养温度、培养时间及摇床转速;采用单因素试验及L9(34)正交试验优化发酵培养基并进一步筛选出关键因素。结果表明：优化的培养条件为培养温度29℃,摇床转速160 r/min,培养27 h,优化的发酵培养基配方为葡萄糖20 g/L,酵母粉10 g/L,KH₂PO_{4sub> 1.5 g/L,MgSO4 1 g/L。结论：影响酿酒酵母生长的关键因素为摇瓶培养时间及培养基中葡萄糖浓度。}     

农用抗寄生虫抗生素尼莫克汀发酵工艺的初步研究

为优化蓝灰链霉菌产尼莫克汀的发酵工艺。通过摇瓶法对其发酵条件进行了初步研究,采用单因素分析法,考察了时间、温度、溶氧及接种量对蓝灰链霉菌发酵产尼莫克汀的影响。结果表明：菌龄为8天的蓝灰链霉菌孢子适用于制种,并以甘油管法低温保存建成工作细胞库,但保存时间应不超过2个月;将工作细胞库中的菌种接入种子培养基中,置于28℃培养28 h,种子质量较好。摇瓶发酵的较优条件是容量为250 mL的三角瓶中装有发酵培养基50 mL,以5 %的比例加入培养好的种子液,将发酵瓶置于25℃以250 r/min的转速发酵8天,尼莫克汀产量可达164.90 μg/mL。     

杏鲍菇液体菌种培养基的筛选及培养条件的探讨

采用液体摇瓶培养法,以菌丝生物量为主要指标,对杏鲍菇液体菌种培养基配方及培养条件进行研究。试验表明,最适宜的培养基配方为：蔗糖3%,玉米面3%,麦麸3%,酵母粉0.4%,KH2PO4 0.25%,MgSO4 0.1%,ZnSO4 0.05%,CaSO4 0.05%,起始pH值为6~7。最适摇瓶培养条件为装液量80 mL/250 mL,摇床转速150 r/min,接种量10%,培养周期为6天。     

长枝木霉TICC鉴定及其生物学特性研究

从土壤中分离得到1株木霉T1CC,为明确其分类地位及其生物学特性,对该菌进行形态学鉴定和分子鉴定,并对其生长培养基、光照、温度、碳源、氮源、微量元素和pH等生物学特性进行研究.鉴定结果显示,该菌株为长枝木霉(Trichoderm longibrachiatum).生物学特性结果表明:菌株T1CC在PDA上生长量最大,查氏培养基和基本培养基上生长量最小;不同光照条件下,菌丝生长无明显差异,但在连续光照条件下可明显促进孢子产生;在15～40℃范围能够生长产孢,在35℃时菌丝生长最快,但产孢量在25～35℃最大;果糖最能促进菌丝生长,果糖、可溶性淀粉最有利于产孢;谷氨酸对菌丝生长和孢子产生都有促进作用;Cu最能促进菌丝生长,而zn、K和Mg则对菌丝生长有一定抑制作用,Cu最有利于产孢,zn对产孢明显抑制;在pH/值在2～10范围内均可生长,在pH为5时为生长最佳,在pH值3～7范围内最有利于产孢.     

11种木霉菌对葡萄灰霉病菌的拮抗作用

对采自宁夏14个市县的170份土样及其它材料进行分离,得到96株木霉菌株,采用形态分类方法鉴定出9种木霉菌以及2种未知名菌种,它们分别为哈茨木霉（Trichoderma harzianum）、绿色木霉（T.viride）、长枝木霉（T.longibrachiatum）、康氏木霉（T.koningii）、拟康氏木霉（T.pseudokoningii）、顶孢木霉（T.fertile）、黄绿木霉（T.aureoviride）、深绿木霉（T.atroviride）、钩状木霉（T.hamatum）以及T.sp1和T.sp2。竞争及对峙培养结果表明：11种木霉菌种对葡萄灰霉病菌(Botrytis cinerea Pers.)均有不同程度的拮抗作用,尤其前四种木霉菌表现出了很强的竞争优势,在对峙培养中对葡萄灰霉菌的拮抗系数为Ⅰ~Ⅱ,抑菌率达61.8%~77.6%。在光学显微镜下可观察到木霉菌或缠绕或穿入葡萄灰霉菌菌丝生长,并发生菌丝断裂、消解以及细胞原生质浓缩等现象     

枯草芽孢杆菌B-332菌株发酵条件的研究

为了探明生防菌株枯草芽孢杆菌B-332的发酵条件及培养基配方,采用单因素和正交试验设计,通过摇瓶培养对枯草芽孢杆菌B-332菌株的发酵培养基和培养条件进行优化。结果表明,最适培养接种时间为18 h,优化后的培养基配方为：豆饼粉0.60 g/L、蔗糖0.25 g/L、硫酸铵0.07 g/L、柠檬酸三钠0.03 g/L、磷酸氢二钾0.003 g/L、硫酸镁0.005 g/L、硫酸亚铁0.0005 g/L;发酵条件为：温度30℃、摇床转速180 r/min、摇瓶装量80 mL/500 mL。在该综合条件下,发酵后的芽孢数为1.43×1011 cfu/mL,比初始条件的芽孢总数4.03×109 cfu/mL提高了34.48倍,为该菌株的工厂化打下了基础。     

白灵菇液体菌种培养条件研究

以菌丝生物量,菌球密度,菌球直径为指标,探讨了白灵菇液体菌种最适培养条件。结果表明：最适培养基为蔗糖2.0%,玉米粉3.0%,蛋白胨0.2% ,麸皮4.0%,磷酸二氢钾0.3 %,硫酸镁0.1%,硫酸钙 0.1%;摇瓶装液量100ml/250ml,接种量10%,起始 pH 为6.5,摇瓶转速160r/min,培养时间为6d。     

黄绿木霉T1010促进黄河三角洲滨海盐渍土花生生长的研究

在黄河三角洲滨海盐渍土采用黄绿木霉T1010 (Trichoderma aureoviride 1010)制剂处理土壤观察花生生长变化,为应用T1010制剂改善盐渍土,促进花生生长发育提供理论依据和技术支持。通过植物生长指标测定法比较T1010制剂施用效果,特定物质测定观测T1010对花生的生长作用,拷种法分析花生果实不同处理的差异。试验结果表明,T1010制剂处理土壤后种植的花生,出苗好,成苗率高,植株长势好,有效茎数多;花生生长旺盛期,取功能叶片进行叶绿素等生理指标测定,黄绿木霉T1010处理组叶片中叶绿素a、叶绿素b、类胡罗卜素含量均大幅度提高,细胞初级代谢产物增加,其中葡萄糖提高最多,游离氨基酸、可溶性淀粉、可溶性蛋白质含量提高。花生收获期拷种结果显示,黄绿木霉T1010处理组提高了花生百果、百粒的重量和双果数,最后大幅度提高产量。T1010制剂帮助花生克服盐碱的危害,达到苗齐、苗旺,提高叶绿素含量促进光合作用,有效积累光合产物,T1010制剂作为土壤改良剂对黄河三角洲盐渍土的改良及作物结构调整作用重大。     

黄绿木霉T1010对日光温室番茄功能叶光合色素含量及光系统II光化学效率的影响

番茄(Lycopersicon esculentum Mil1.)是喜温植物,在日光温室冬季生产中经常遇到低温逆境,使其光合生产力的发挥受到限制。本研究通过采用黄绿木霉T1010制剂进行日光温室番茄连作土壤处理试验,探索黄绿木霉T1010（Trichoderma aureviride 1010）对日光温室番茄光合生产力的主要限制因素光合色素含量及PSII光化学效率是否具有积极影响。试验结果显示：与常规生产区（对照）相比,黄绿木霉T1010处理的日光温室番茄初花期功能叶叶绿素a、叶绿素b、类胡萝卜素含量分别提高34.37%、34.67%、32.19%,PSII光化学效率（Fv/Fm）少降低48.73%;收获中期功能叶叶绿素a、叶绿素b、类胡萝卜素含量分别提高21.77%、58.54%、50.53%;PSII光化学效率（Fv/Fm）少降低35.03%。与常规生产区（对照）相比,黄绿木霉T1010处理的日光温室番茄单功能叶干重、单果重和667m2产量分别提高42.69%、30.46%和20.00%。进一步进行 ANOVA 分析,结果显示：日光温室番茄以上光合生理和产量指标不同处理间差异除初花期叶绿素b和收获中期叶绿素a达显著水平外,其他均达极显著水平。可见,黄绿木霉T1010对日光温室番茄不同时期功能叶主要光合色素叶绿素a、叶绿素b、类胡萝卜素含量及低温逆境胁迫下PSII光化学效率均有不同程度的积极的影响,这对于提高秋冬茬日光温室番茄各时期特别是收获中期亚低温胁迫下的光合生产力,进而提高番茄产量意义重大。     

深绿木霉生物学特性研究

从灰树花染病时分离出一株具生防潜力的木霉菌,为了明确其生物学特性,对该菌株进行了形态学鉴定,并对其生长培养基、温度、pH、碳源、氮源和维生素等生物学特性进行了研究。结果表明：该菌为深绿木霉;该菌株在PDA、MEA、基本培养基和查彼培养基上均能生长,但在PDA培养基上生长最快,2天即能长满平皿。在10~37℃范围内,菌丝均能生长,以25℃时菌丝生长最快,30℃时产孢量最大。在pH 2~10范围内,菌丝菌均能生长,pH 5~7时菌丝生长最快。牛肉膏为菌丝生长的最佳氮源,葡萄糖为最佳的碳源,维生素B6对菌丝生长最有利。     

大苞鞘石斛(Dendrobium wardianum)种子离体萌发培养

通过无菌播种,对影响大苞鞘石斛(Dendrobium wardianum)种子萌发的各因素进行比较研究.结果表明,将种胚播于B<,5>+20 g/L绵白糖+20% 椰乳+pH5.4上最有利于种胚萌发,培养50 d萌发率达79%.基本培养基、激素、氮源形态及有机添加物对大苞鞘石斛种胚萌发影响明显,萌发时需要硝态氮的量较大,并且基本培养基的正确选择可以有效地避免褐变的发生.     

哈茨木霉TH-1对棉花枯萎病菌和黄萎病菌的拮抗机制研究

采用平板对峙法、杯碟法和显微观察法研究了哈茨木霉(Trichoderma harzianum)TH-1菌株对棉花枯萎病菌和黄萎病菌的拮抗作用及其机制.结果表明,哈茨木霉TH-1菌株与病菌对峙培养以及在培养基中加入TH-1菌株孢子悬浮液,对供试棉花枯、黄萎病菌均有较好的抑制效果;但TH-1菌株的代谢液对棉花黄萎病菌的抑制效果较差,对枯萎病菌几乎无抑制效果;显微观察发现,TH-1菌丝与枯、黄萎病菌的菌丝平行生长、产生附着胞结构附着于病菌菌丝上,或穿透病菌菌丝使病菌菌丝发生裂解.上述结果说明,哈茨木霉TH-1对供试棉花枯、黄萎病菌的拮抗机制主要是营养和空间竞争及重寄生作用.     

利用玉米秸秆培养木霉菌分生孢子的研究

为了研究利用资源丰富的玉米秸秆作为发酵基质生产木霉分生孢子的可行性,本文研究了秸秆基质细度、含水量、外加营养成分及搅拌等因素对木霉分生孢子产孢量的影响。结果表明,细度适中,在40~10目之间,含水量60%~70%,利于木霉产孢,分生孢子产量可达1.27×1010 cfu/g(干培养物);接种量对最终产孢量影响不大,处理间差异不明显;通过添加碳源葡萄糖,并加入少量(NH4)2SO4、CaCO3、KH2PO4和MgSO4无机盐,可显著提高木霉分生孢子的产量,分生孢子产量最高可达2.0×1010 cfu/g(干培养物);但在固体培养过程中,对基质进行搅拌,不利于木霉分生孢子的形成。由此表明,利用玉米秸秆固体发酵生产木霉分生孢子可行、高效、无污染,对于木霉菌剂的生产和推广具有重要的参考价值。     

Genetic control of somatic embryogenesis in cotton petiole callus cultures

Summary Three commercial varieties (Acala SJ-5, Coker 312 and Paymaster 303) and three exotic accessions (T1, T25 and T169) of cotton (Gossypium hirsutum L.) were tested for ability to undergo somatic embryogenesis. Sections of split petiole were cultured on 3 media and evaluated for embryogenesis after 180 days. Embryogenic T25 and Coker 312 plants were selected and crossed in a diallel with non-embryogenic Acala SJ-5, Paymaster 303, T1 and T169 plants. F₁, F₂ and BC₁ populations were generated and tested for embryogenesis on a medium of MS salts and vitamins (1962) plus (per liter) 4.0 mg NAA, 1.0 mg Kn, 30 g glucose, 100 mg myo-inositol, 2.0 g Gelrite and 0.75 g MgCl₂. Segregation for both occurrence and magnitude of embryogenesis was observed, suggesting the action of more than one gene.     

尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum Schl.）的生长特性

【研究目的】研究尖孢镰刀菌的生长特性，寻找培养过程的异质性指标。【方法】供试菌株为黄瓜尖孢镰刀菌F-H.6.5-030318-J2和花生尖孢镰刀菌F-P.5.0-030710，培养基采用PSA培养基，装液量为100ml/250ml，接菌量从培养7d的平板上打取3个6mm的菌片，培养温度为25±1℃，摇床转速为110r/min，培养10d，观察测定发酵液颜色、OD值、pH值、菌丝干重变化，并利用聚类分析方法划分生长阶段。【结果】在培养过程中，尖孢镰刀菌发酵液的颜色、OD值、pH值和菌丝干重都会随着培养时间而变化。在相同的培养条件下，来源于不同寄主的尖孢镰刀菌菌株之间在颜色和OD值变化存在着显著性差异，而pH值和菌丝干重变化未表现出显著性差异。来自黄瓜和花生的尖孢镰刀菌菌株的生长分为3个阶段：1~2d为适应阶段，3~5d为对数生长阶段，6~10d为稳定阶段。【结论】尖孢镰刀菌在培养过程的色素变异和OD值的变化可作为菌株培养的表征性特征     

长枝木霉T8对水稻纹枯病菌拮抗作用的研究

对峙培养表明：长枝木霉T8[Trichoderma longibrachiatum]对立枯丝核菌有较强的拮抗作用,拮抗系数为1。长枝木霉T8对立枯丝核菌形成明显的拮抗区带,界面处病菌菌丝的细胞质变稀薄、消解或菌丝断裂,病菌菌丝停止生长,同时对立枯丝核菌菌核形成包围,抑制其萌发。在光学显微镜下,可观察到长枝木霉T8对立枯丝核菌菌丝的缠绕、细胞质变稀薄、菌丝消解、菌丝断裂或侵入等现象。