药用植物黑骨藤化学成分研究初报

黑骨藤Periploca forrestii Schltr,又名山杨柳、青蛇胆、小青蛇、柳叶夹、黑骨头、牛尾蕨、山筋线、青风藤等,为萝摩科杠柳属植物,为藤状灌木,长达10 m,生于海拔2000 m以下的山地向阳处或阴湿的杂木林下或灌木林中,分布于西南及青海、广西、西藏等地.其气微香,味苦,性味辛温、小毒,具有舒筋活血、祛风除湿、清热解毒作用,对于由风湿、类风湿引起的软组织无菌性炎症具有较强的消肿止痛作用,为贵州少数民族用药[1].为规范民族药质量标准,寻找活性化合物,为创新药物研制奠定物质基础.笔者采用乙醇提取、溶剂萃取、大孔树脂吸附、硅胶柱层析、凝胶柱纯化等方法对黑骨藤的化学成分进行了研究.     

黑骨藤和青蛇藤挥发油成分的比较研究

采用水蒸气蒸馏法提取黑骨藤、青蛇藤叶中的挥发油,应用气相色谱、质谱、数据系统联用法对其挥发油成分进行分析比较,用气相色谱面积归一法计算各成分的相对含量。从黑骨藤叶挥发油中鉴定了19个成分,占挥发油总量的94.54%;从青蛇藤叶挥发油中鉴定了11个成分,占挥发油总量的98.99%。黑骨藤、青蛇藤叶中挥发油的主要成分相同,为11,14,17-二十碳三烯酸甲酯、棕榈酸和亚油酸。     

黑骨藤对PC12细胞氧化损伤的保护研究

[目的]研究黑骨藤提取物对H2O2诱导的PC12氧化损伤的保护作用。[方法]使用H2O2氧化压力诱导PC12出现氧化损伤,检测黑骨藤乙醇提取物对PC12细胞的保护作用。[结果]与模型对照组相比,黑骨藤乙醇提取物浓度在16~128μg/mL时,能显著提高PC12细胞的存活率,呈典型的量效关系。[结论]黑骨藤乙醇提取物具有抗氧化损伤作用。     

不同浓度乙醇溶液对黑骨藤提取物的影响

通过比较不同黑骨藤提取物对淋巴细胞增殖抑制作用的影响,确定其提取物制备的最佳方法及有效成分的预测.采取不同比例水—醇混合物提取的方式,获得6种不同的黑骨藤提取物,将这些提取物进行淋巴细胞增殖抑制试验,确定最佳提取方法.检测各提取物中杠柳苷系列化合物含量,以了解该指标是否与黑骨藤免疫抑制活性存在关系,明确杠柳苷系列化合物...     

苗药黑骨藤不同极性提取部位急性毒性及抗氧化研究

[目的]对黑骨藤不同极性部位进行急性毒性试验及抗氧化研究,确定其临床用药安全性及活性部位。[方法]急性经口毒性试验采用SD(180～220 g)大鼠,连续灌胃给药7 d(9.75 g/kg)后,测定血清中的肝功能和肾功能等相关指标,观察其肝脏、肾脏毒性反应,采用ABTS(agreement of basic telecommunications services)法测定肝脏中的总抗氧化能力。[结果]黑骨藤不同极性部位给药7 d后,大鼠未出现死亡,石油醚部位、氯仿部位、醋酸乙酯部位、正丁醇部位组对肝脏和肾脏生化指标均无显著性影响(P>0.05),水部位组大鼠血清中的ALP和BUN显著升高(P<0.05)。[结论]黑骨藤的不同极性部位中的石油醚部位、氯仿部位、醋酸乙酯部位、正丁醇部位未出现毒性反应,水部位中的ALP和BUN升高,可能表现出微低毒性。氯仿部位和正丁醇部位表现出较强的抗氧化能力。     

黑骨藤追风活络微丸处方及制备工艺的研究

本研究旨在获得黑骨藤追风活络微丸的最优处方及制备工艺。以吸湿率、成型率和微丸圆整度为指标,采用软件Design Expert 8.06中的混料设计实验对微丸处方进行优化,确定最优处方:复方黑骨藤药粉40%、微晶纤维素45%、乳糖15%。采用挤出滚圆法制备黑骨藤追风活络微丸,通过正交实验确定最优条件为:挤出频率为35 Hz,滚圆频率为45 Hz,滚圆时间为10 min。采用最优处方及最佳工艺制备了3批黑骨藤追风活络微丸,得到的微丸外观圆整、光滑,粒度均匀且收率高,能完全满足后续生产工艺过程中对微丸流动性、硬度、崩解时限等的要求。     

从海绵Pseudoceratina purpurea中分离的化合物及其结构鉴定

对海绵Pseudoceratina purpurea的化学成分进行系统研究。采用多种分离手段对海绵Pseudoceratina purpurea进行化学成分的分离,运用多种波谱分析手段和与文献报道对比的方法,对分离得到的化合物进行结构鉴定。从海绵Pseudoceratina purpurea中共分离得到9个化合物,经鉴定为hyrtiosin A(1),5-羟基-1H-吲哚-3-羧酸(2),11-hydroxy-12-(5-hydroxy-1H-indole-3-yl)-ethanone(3),Stevensine(4),Spongiacidin A(5),Oroidin(6),2-bromoaldisine(7),Aaptamine(8),demethylaaptamine(9)。所有化合物均为首次从海绵Pseudoceratina purpurea中分离得到。     

湘西黑藤的杀虫活性及其杀虫成分

 【目的】研究湘西黑藤的杀虫活性及其有效成分。【方法】通过叶片浸渍法和叶碟法测定了该植物提取物对几种害虫的杀虫活性和拒食活性，并在活性跟踪的基础上，通过萃取、柱层析、薄层制备、重结晶、核磁共振和质谱等方法对其有效成分进行了分离和鉴定。【结果】该植物仅根有杀虫活性，根甲醇提取物对桃蚜无翅蚜成虫、3龄菜青虫、白纹伊蚊4龄幼虫、玉米螟3龄幼虫、黄曲条跳甲成虫、棉蚜无翅蚜成虫和甘薯天蛾3龄幼虫都有毒杀效果，其24 h的LC50值分别是30.9 mg•L-1、38.4 mg•L-1、135.4 mg•L-1、161.7 mg•L-1、180.3 mg•L-1、212.9 mg•L-1和244.5 mg•L-1。首次从该植物根中分离和鉴定了5个活性化合物，即鱼藤酮、6a，12a-脱氢鱼藤素、Tephrosin、Isolonchcarpin和Pongaflavone。鱼藤酮、6a,12a-脱氢鱼藤素和Tephrosin对白纹伊蚊4龄幼虫、3龄菜青虫、黄曲条跳甲成虫和棉蚜都表现出毒杀活性，在浓度为100 mg•L-1时，死亡率为62.3％～100％；Isolonchcarpin和Pongaflavone对甘薯天蛾3龄幼虫有拒食活性，48 h的AFC50值分别是195.5 mg•L-1和106.6 mg•L-1。【结论】湘西黑藤各部位中仅根为活性部位。该植物根的甲醇提取物对棉蚜等多种害虫有较高的活性。首次从该植物的根中分离5个活性成分，即鱼藤酮、6a，12a-脱氢鱼藤素、Tephrosin、Isolonchcarpin和Pongaflavone。前3个成分对多种害虫有较高的毒杀活性，后2个成分对甘薯天蛾幼虫有拒食活性。     

黑骨藤药材中铅·镉·砷·汞·铜的含量及其质量标准评价

[目的]对不同产地的黑骨藤药材中铅、镉、砷、汞、铜的含量进行测定,为高品质黑骨藤药材的筛选、药材质量标准建立及中药材生产质量管理规范（GAP）种植提供科学依据。[方法]样品经湿法消解后,用原子荧光光度法和原子吸收分光光度法进行检测;采用聚类分析等数量统计软件对测定结果进行分析处理。[结果]黑骨藤药材中主要是铅和镉重金属元素超标,超标率为铅47.62%、镉71.43%、汞14.28%、铜14.28%。[结论]不同产地的黑骨藤药材中砷、汞和铜含量较低,铅和镉含量严重超标。     

苗药黑骨藤部分理化指标及杠柳毒苷含量的测定

为进一步完善苗药黑骨藤的质量标准评价体系,按照《中国药典》方法对10个不同产地黑骨藤药材中水浸出物、醇浸出物和水分含量进行测定,采用HPLC法测定药材中杠柳毒苷的含量,并采用薄层色谱(TLC)法对其进行定性鉴别。结果表明:该药材的薄层鉴别方法具有专属性,10批样品水溶性浸出物平均为8.97%,醇溶性浸出物含量平均为10.05%,水分含量平均为8.60%,杠柳毒苷含量平均为0.33mg/g。建立的方法准确、灵敏、简便,可用于苗药黑骨藤中杠柳毒苷的定性鉴别与含量测定。     

多棘海盘车化学成分的分离与鉴定

采用硅胶柱色谱、薄层制备色谱、凝胶柱色谱等手段分离纯化,通过理化常数测定、光谱数据分析和文献对照等方法,对多棘海盘车Asterias amurensis Lutken未被发现的化学成分进行结构鉴定。结果从多棘海盘车中分离得到4种化合物,化合物的结构分别为Phalluside 1(化合物1); N-(胆甾-5-烯-3β-烃基)-3β-醋酸酯-5-乙基-17β-咪唑羧酰胺(化合物2);胆甾-5,20(22)-二烯-3β-醇(化合物3);(2S)-1-O-7溴烷醇甘油(化合物4)。研究表明,化合物1、2、3、4为首次从海盘车属中分离得到的化合物。     

多棘海盘车化学成分的分离与鉴定

采用硅胶柱色谱、薄层制备色谱、凝胶柱色谱等手段分离纯化,通过理化常数测定、光谱数据分析和文献对照等方法,对多棘海盘车Asterias amurensis Lutken未被发现的化学成分进行结构鉴定。结果从多棘海盘车中分离得到4种化合物,化合物的结构分别为Phalluside 1(化合物1);N-(胆甾-5-烯-3β-烃基)-3β-醋酸酯-5-乙基-17β-咪唑羧酰胺(化合物2);胆甾-5,20(22)-二烯-3β-醇(化合物3);(2S)-1-O-7溴烷醇甘油(化合物4)。研究表明,化合物1、2、3、4为首次从海盘车属中分离得到的化合物。     

小鹅瘟病毒的分离与初步鉴定

从死亡的具有典型小鹅瘟症状的7日龄雏鹅肝中分离到1株病毒．选用未免疫小鹅瘟疫苗的健康母鹅所产的12日龄鹅胚，进行鹅胚接种试验，雏鹅表现出典型鹅瘟临床症状和剖检特征；鸡胚致死率达到25％；不能凝集多种动物红细胞；能凝集黄牛精子，经琼脂扩散试验，用此株病毒感染的鹅胚液能与小鹅瘟病毒阳性血清发生特异性反应．综上所述，这株病毒初步鉴定为小鹅瘟病毒．     

粉蕉种植土镰刀菌分离与鉴定

利用PPA培养基对粉蕉不同生长周期根际土壤中镰刀菌进行分离,通过形态学和分子生物学对分离的菌株进行描述与鉴定,并分析粉蕉不同生长周期根际土壤中镰刀菌群落变化.试验结果表明,在粉蕉不同生长期根际土壤中共分离出31株镰刀菌,经形态学和分子生物学鉴定,31株镰刀菌分属于茄病镰刀菌(Fus arium solani)、尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)、木贼镰刀菌(Fusarium equiseti)、层出镰刀菌(Fusarium proliferatum)和串珠镰刀菌(Gibberella moniliformis).随着粉蕉生长,粉蕉根际土壤中可分离的镰刀菌种类表现出先上升后下降的趋势,且菌株种类逐渐稳定.在生殖生长期,由于受到枯萎病病原菌的影响,土壤中镰刀菌种类产生显著变化,菌株种类数量显著增加.