我国研制成功猪伪狂犬病疫苗

由四川农业大学教授郭万柱主持研制的“猪伪狂犬病”(基因缺失)活疫苗(SA215株)正式获国家新兽药证书。该疫苗的问世,开创了我国动物病毒基因工程疫苗实用化的先河。     

我国首株动物基因工程疫苗问世

我国首株动物基因工程疫苗在四川农业大学问世,开创了国内动物病毒基因工程疫苗实用化的先河。四川农业大学教授郭万柱等专家经过10多年的潜心研究,在国内率先开展了伪狂犬病病毒生物学及分子生物学特性的研究,运用缺失、重组和克隆等基因操作技术,成功构建出系列伪狂犬病基因缺失疫苗株。近日,该项成果之一的″猪伪狂犬病基因缺失活疫苗SA215株″获得国家新兽药证书,从而成为我国第一株动物病毒基因工程疫苗。该疫苗较常规疫苗及同类疫苗具有遗传性稳定、安全性好、免疫原性强、抗潜伏感染能力独特等优点,达到国际同类疫苗的应用标准。我…     

首株动物基因工程疫苗问世

据《京郊日报》报道 :我国首株动物基因工程疫苗在四川农业大学问世。伪狂犬病是由伪狂犬病病毒引起的猪、牛、羊等多种家畜、家禽及野生动物的一种急性传染病 ,猪是这种病的主要宿主和传染来源。猪伪狂犬病目前已呈世界性分布 ,其流行正呈上升趋势 ,给畜牧业造成巨大损失。四川农业大学郭万柱教授等专家在国内率先系统地开展了伪狂犬病病毒生物学及分子生物学特性的研究 ,成功构建出系列伪狂犬病基因缺失疫苗株。“猪伪狂犬病 (基因缺失 )活疫苗(SA215株 )”获得了国家新兽药证书 ,从而成为我国第一株动物病毒基因工程疫苗。试验研究和应用效果表明 ,该疫苗较常规疫苗及同类疫苗具有遗传稳定性、安全性好、免疫原性强、抗潜伏感染能力独特等优点 ,达到国际同类疫苗的应用标准。首株动物基因工程疫苗问世     

商情新闻

●宁夏肉羊肉牛主导产业项目启动 2003年12月28日,宁夏优势特色农产品区域布局肉羊肉牛主导产业项目启动仪式在自治区家畜繁育中心举行。目前,自治区繁育中心已有萨福克、新多福等6个品种肉用良种羊1 300只;有利木赞、夏洛莱等6个品种的优良种公牛60头。2004年将向全区展开良种牛羊的供种、供精、供胚胎。 ●我国研制成功猪伪狂犬病疫苗 我国第一株动物病毒基因工程疫苗正式在四川农业大学动物生物技术中心宣告问世,由该校教授郭万柱主持研制的“猪伪狂犬病(基因缺失)活疫苗(SA215株)”正式获得了国家新兽药证书(2003新兽药字37号)。…     

向美出口食品和饲料须先取得美FDA注册

本刊讯 :我国首株动物基因工程疫苗在四川农业大学问世 ,同时还开创了国内动物病毒基因工程疫苗实用化的先河。据介绍 ,伪狂犬病是由伪犬病病毒引起的猪、牛、羊等多种家畜、家禽及野生动物的一种急性传染病。猪是这种病的主要宿主和传染来源 ,猪伪狂犬病目前已呈世界性分布 ,其流行正呈上升趋势 ,给畜牧业造成巨大损失。四川农业大学教授郭万柱等专家经过10多年的潜心研究 ,在国内率先开展了伪狂犬病病毒生物学及分子生物学特性的研究 ,运用缺失、重组和克隆等基因操作技术 ,成功构建出系列伪狂犬病基因缺失疫苗株。近日 ,其标志性成果之一…     

新流行猪伪狂犬病的临床发病规律和防控措施

<正>猪伪狂犬病(porcine pseudorabies)是由伪狂犬病病毒引起的B类传染病(世界动物卫生组织认定),该病毒可以感染除短尾猿以外的几乎所有哺乳动物,猪是唯一的自然宿主,猪的感染症状和伪狂犬病毒株本身的毒力、感染量、感染途径以及猪龄、免疫状况等有关。伪狂犬病防制主要依靠接种基因缺失疫苗,欧盟许多国家通过使用gE基因缺失疫苗和与之相配套的鉴别诊断方法控制和根除了伪狂犬     

猪伪狂犬病病毒gE基因核酸探针的制备

<正>猪伪狂犬病是由伪狂犬病病毒引起的一种以发热、呼吸和神经系统疾病为特征的重要传染病,国内到目前为止,已经有20多个省市报道有伪狂犬病流行,并分离出Min A、陕A、AKW、DQ-8401、S、鄂A、京A等多株猪伪狂犬病病毒(PRV)。OIE推荐使用基因缺失疫苗,我国农业部已决定只生产和使用基因缺失疫苗,目前已经商业化基因缺失疫苗普遍缺失了g E基因,本文报道了利用缺失的g E基因制备核酸探针的研究。     

一种检测猪伪狂犬病野毒方法的建立

猪伪狂犬病是危害养猪业的重要病毒性传染病,如何鉴别疫苗接种动物和野毒感染动物是控制和净化该病的前提。本试验根据不同猪伪狂犬疫苗株gE基因缺失的特点,建立了一种猪伪狂犬病野毒病原核酸的PCR检测方法。该方法可以检出猪伪狂犬病野毒,而不能检出猪伪狂犬病疫苗株,实现了疫苗毒和野毒的鉴别检验,同时不能检测出猪常见病毒性传染病病原。最低检测限度为10~3个病毒核酸拷贝。在组织样品检测中不受宿主组织核酸干扰,能区分野毒感染动物组织和疫苗免疫动物组织,是一种值得推广的伪狂犬病毒野毒检测方法。     

对伪狂犬病基因缺失疫苗株研究的思考

四川农业大学动物生物技术中心1999年通过分子流行病学调查从四川分离鉴定了SW和SL两株伪狂犬病毒株，并通过基因缺失获得了PRV TK/gl/gp63/Lac I三个基因缺失株，在此基础上，SA215成了我国第一株自行研制的伪狂犬病基因缺失疫苗，该疫苗完全克服了常规疫苗的不足而且具有安全、高效等特点，其推广应用对于养殖业发展具有重要意义。笔者提出通过数据库中存贮的微生物基因序列信息查找有价值的候选疫苗株，研制基因疫苗来克服残留强毒或弱毒返强等问题；采用DNA质粒做载体，插入多种编码目的抗原的外源性基因，研制多价苗（即NDA疫苗）来实现对同一种传染病的病原（病毒、细菌和寄生虫等）多种变型的有效防治；同时必须加强致病基因库的管理和基因工程疫苗的安全性试验，在投入市场进行规模化工厂化生产前，必须按照严格的管理过程取得部颁新兽药证书。     

本期专家

郭万柱,教授,博导,四川资阳人(1938-),现任四川农业大学动物生物技术中心主任。1984-1986年留学美国,进修了病毒学、基因工程学。1986年回国开展狂犬病、伪狂犬病分子生物学研究;率先开展新型动物病毒基因工程疫苗的研究,并成功研制了“伪狂犬病(基因缺失)活疫苗(SA215株)”、“猪瘟伪狂犬病重组病毒活疫苗”。同时致力于家畜病理生理学、同位素应用、病毒学、生物技术、分子生物学等教学和研究工作,已培养硕士21人,招收博士14人。在国内外重要学术刊物发表论文50余篇(数篇被SCI检索),担任主编的专著5部。 刘镇明,　 副教授,硕士生导师…     

伪狂犬病病毒感染抗体监测及伪狂犬病流行状况分析

在北京大兴和顺义区2个使用伪狂犬病病毒（porcine pseudorabies virus,PRV）Bartha株基因缺失疫苗的规模化猪场进行为期3年的猪伪狂犬病野毒感染抗体跟踪监测,并进行猪场的临床状况和组织样品的PCR检测,结果显示,北京市2011—2012年间在猪伪狂犬病基因缺失疫苗免疫猪场发生了猪伪狂犬病的流行。提示,应对该状况加以重视,对其发病原因需进行进一步的病毒分离和毒株分子遗传学分析。     

猪伪狂犬病的净化条件

●伪狂犬病基因缺失疫苗:　　1.　自然弱毒疫苗(缺失部分gE基因)　　2.　基因工程缺失疫苗(双缺失:TK、gE)　　●鉴别诊断技术:　　gE-ELISA　区分疫苗免疫动物和野毒感染动物。疫苗免疫接种是防制和控制乃至根除伪狂犬病的根本措施。早期的猪伪狂犬疫苗大多为弱毒苗和灭活苗,弱 毒苗和灭活苗在预防控制伪狂犬病方面 虽然能起一定的作用,但是弱毒苗不能防 止病毒在动物体内的复制和排出,即存在 着毒力返强和散毒的危险;而灭活苗虽然 安全性较好,但其免疫效率却较低,免疫时用量较大、有时还可能导致注射部位肿胀,出现过敏反应。因此…     

区分猪伪狂犬病病毒gE基因缺失疫苗株和野毒株的gE—PCR方法的建立

根据编码猪伪狂犬病病毒gE基因保守序列,设计合成一对引物,通过优化PCR反应条件,成功地从猪伪狂犬病病毒感染的细胞中扩增出预期的178bp片段,而猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪细小病毒、猪瘟病毒、猪流感病毒和猪伪狂犬病病毒gE基因缺失株均未扩增出相应的片段,经PCR扩增产物测序鉴定,证实了该扩增片段为预期目的片段;敏感性试验表明,该体系可检测到10^2TCID50的猪伪狂犬病病毒。本方法的建立能够区分基因缺失疫苗免疫猪和野毒感染猪,使猪伪狂犬病病毒的检测更为快速、准确。     

区分猪伪狂犬病病毒gE基因缺失疫苗株和野毒株的gE-PCR方法的建立

根据编码猪伪狂犬病病毒gE基因保守序列,设计合成一对引物,通过优化PCR反应条件,成功地从猪伪狂犬病病毒感染的细胞中扩增出预期的178bp片段,而猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪细小病毒、猪瘟病毒、猪流感病毒和猪伪狂犬病病毒gE基因缺失株均未扩增出相应的片段,经PCR扩增产物测序鉴定,证实了该扩增片段为预期目的片段;敏感性试验表明,该体系可检测到102TCID50的猪伪狂犬病病毒。本方法的建立能够区分基因缺失疫苗免疫猪和野毒感染猪,使猪伪狂犬病病毒的检测更为快速、准确。     

伪狂犬病病毒鄂A株gG-/LacZ+突变株在不同细胞中增殖规律的研究

伪狂犬病病毒 (Ｐｓｅｕｄｏｒａｂｉｅｓｖｉｒｕｓ ,ＰｒＶ)属疱疹病毒科α 疱疹病毒亚科 ,能引起多种家畜及野生动物的伪狂犬病 ,尤其是猪的伪狂犬病 ,已成为危害当今养猪业的最严重的传染病之一。根据已成功根除伪狂犬病国家的经验以及伪狂犬病病毒分子生物学研究的新成果 ,种猪的免疫还是以灭活苗为主。但传统的灭活苗由于缺少检测标志 ,无法采用鉴别诊断方法区分疫苗免疫猪和野毒感染猪。而在目前广泛使用的三种基因缺失标志疫苗株 (ｇＧ- 、ｇＥ- 、ｇＣ- )中 ,由于 ｇＧ的缺失不影响免疫原性 ,因此 ,ｇＧ- 灭活苗优于 ｇＥ- 、ｇＣ-…     

猪伪狂犬病病毒TaqMan-MGB荧光定量PCR检测方法的建立及应用

本研究针对猪伪狂犬病病毒的gE基因序列进行分析比较,设计了一条TaqMan-MGB探针,建立了区别野毒株及基因缺失疫苗株的荧光定量PCR检测方法。结果表明,该方法检测猪伪狂犬病病毒特异性强,能很好的区分猪伪狂犬病病毒与其它病毒。用该方法对83份疑似样本进行检测,与常规PCR检测法符合率达到100%,表明该方法用于检测猪伪狂犬病病毒具有良好的实用性。     

规模化猪场猪伪狂犬病流行病学调查

猪伪狂犬病(PR)临床上以仔猪的神经症状、呼吸道系统疾病及种猪发生流产等繁殖性障碍为特征,猪伪狂犬病病毒(PRV)是引起PR的病原。猪呼吸道疾病综合征(PRDC)是由多种致病因素导致的一种猪复杂的呼吸道疾病,PRV也是引起PRDC的主要病毒性病原之一。近年来规模化猪场对PRV的免疫均选用了基因缺失苗,使用基因缺失苗能更好地利用针对特异性蛋白的Elisa检测方法,将缺失苗免疫动物与野毒感染动物或常规疫苗免疫动物区分开。2010年10月,我们对涪陵区19个使用过猪伪狂犬病gE缺失苗的规模化猪场进行了PRV病原抗体和疫苗抗体的监测。     

猪伪狂犬病基因缺失耐热保护剂活疫苗免疫效果试验探究

猪伪狂犬基因缺失疫苗免疫可以与自然感染相区分,可以结合相应的鉴别诊断方法,进行猪伪狂犬净化计划,达到较理想的结果。近年来,一些国家已经推广应用基因缺失疫苗来免疫猪群。笔者使用酶联免疫吸附试验和中和抗体试验对引种猪群伪狂犬抗体水平进行检测和分析,作为猪场使用伪狂疫苗的理论依据,对猪场猪伪狂犬病抗体水平和野毒感染情况进行评估,从而来验证猪伪狂犬病基因缺失耐热保护剂活疫苗C株在用于我国防治和根除猪伪狂犬病的适用性。     

控制猪伪狂犬病疫苗的研制

控制猪伪狂犬病疫苗的研制美国伊利诺斯大学兽医学院的研究人员,在比较温和的猪痘病毒上,插入经济损失严重的猪病病毒（伪狂犬病病毒）基因,生产出没有潜在危险的伪狂犬病疫苗,以此控制猪的伪狂犬病。该疫苗是伊利诺斯大学病理学教授Ｔｒｉｐａｔｈｙ博士生产的第一个...     

规模猪场应用伪狂犬gE基因缺失疫苗免疫及淘汰措施净化猪伪狂犬病技术

正伪狂犬病(PR)病毒主要毒力基因为gE和gI,诱导产生保护性免疫基因为gB、gC、gD等,通过给猪接种伪狂犬gE基因缺失疫苗,检测PR-gB和PR-gE抗体,区分免疫动物和感染动物,淘汰感染动物,从而为伪狂犬病的净化提供可操作的技术手段。本课题通过在一个规模猪场应用伪狂犬gE