自花结实鸭梨品种自交亲和分子机理研究

对鸭梨及其自花结实变异品种-金坠梨和魏县阎庄自花结实鸭梨的S基因进行了研究。通过对3个品种基因组DNA进行S基因特异性PCR扩增,扩增产物经2%琼脂糖凝胶电泳检测发现,在370 bp左右均扩增出了1条带,但不能区分2个S等位基因;经8%聚丙烯酰胺凝胶电泳检测发现,鸭梨和金坠梨在370 bp左右有2条带,而魏县阎庄自花结实鸭梨只有1条带,表明魏县阎庄自花结实鸭梨系鸭梨的1个S基因发生了变异,从而导致自交亲和;进一步研究表明,魏县阎庄自花结实鸭梨S1基因正常,系S21基因发生了变异,导致自交亲和;金坠梨和鸭梨谱带无差别,自交亲和机理可能是调控S基因表达的修饰基因发生了变异,导致自交亲和。     

甜荞结实性及授粉受精过程中花粉管的生长动态

【目的】探究甜荞的结实性及授粉受精过程中花粉管的生长动态,为甜荞自交不亲和性机理的研究奠定基础。【方法】以同型花和异型花甜荞品种为材料,在温室条件下利用自然和人工杂交授粉,调查结实率,并对异型花品种的自交和杂交花柱进行荧光显微观察。【结果】1)同型花品种结实率31.5%~72.7%,其为自花结实性品种;异型花品种的结实率为0~6.3%,其为自花不结实品种。2)异型花的异类型花之间杂交结实,其中以长花柱为母本杂交时的结实率高于以短花柱为母本杂交时的结实率;异型花的同类型花之间杂交时不结实或结实率很低,少量的结实发生在长花柱与长花柱类型杂交之间。3)在异型花品种中,长花柱与长花柱杂交授粉,花粉萌发,花粉管伸长,但在花柱的2/3处(时间为1~1.5h)被抑制,其识别部位尚不清楚;短花柱与短花柱杂交授粉,花粉萌发,但花粉管没有伸长,因此其识别和抑制部位均在柱头;异类型花之间杂交花粉管发育正常,并且花粉发育速度快于同类型花之间杂交。【结论】异型花甜荞自交或同类型花之间杂交,花粉管在柱头或花柱中被抑制使甜荞结实率降低,从而降低产量。同型花品种自交可育,结实率提高,培育同型花甜荞是提高产量的有效手段。     

鸭梨自交不亲和性与花柱内源激素关系的研究

以自交不亲和梨品种鸭梨及其亲和变异品种金坠梨为材料,测定了鸭梨和金坠梨自花授粉、鸭梨异花授粉后花柱激素含量的变化,以期阐明内源激素与自交不亲和性的关系。结果表明:金坠梨大气球期花柱中促进生长的激素IAA、GA3、ZR含量均极显著高于鸭梨,而ABA含量极显著低于鸭梨。2个品种自花授粉后72 h内,花柱内IAA、ZR含量呈下降趋势;在授粉后24 h时内GA3含量下降,随后上升;金坠梨花柱ABA含量授粉后24h内上升,然后下降;鸭梨花柱ABA含量变化在自花授粉24 h内处于下降趋势,然后上升;鸭梨异花授粉的花柱内激素变化与自花授粉的不同,授粉24 h后花柱内IAA、GA3、ZR含量与金坠梨自花授粉的相近。     

大白菜自交不亲和系授粉受精过程的研究

通过研究大白菜自交不亲和系异交和自交的授粉受精过程,比较不同蕾期授粉的自交亲和指数,明确了白菜授粉受精过程的时间历程,为提高自交的结实率提供了一个最佳蕾期授粉时间。     

不同处理对提高甘蓝自交不亲和系结实指数的影响

研究了不同处理对提高甘蓝自交不亲和系结实指数的影响。结果表明,花期喷质量分数为５％～６％的盐水＋质量分数为０．２％硼砂后进行授粉,能提高甘蓝型油菜自交不亲和系的结实指数。     

蜜蜂授粉对大白菜自交不亲和系结实的影响

应用大白菜石特和运农两个包头型自交不亲和系材料,在其主枝下部进行人工蕾期授粉,上部采用花期蜜蜂授粉对比试验。结果表明,两个材料蜜蜂授粉结荚率分别为对79.1％,81．9％;单荚结子数分别为10．78粒和11．18粒。人工授粉结荚率分别为28．11％,19．52％;单荚平均结子数分别为5．54粒和5．18粒。蜜蜂授粉可显著地提高自交不亲和系的结英率和单荚子粒数,从而大大提高了种子产量,是繁殖十字花科自交不亲和系的有效方法。     

杜鹃花杂交、自交及开放授粉结实性研究

选用'小叶铁红'、'玉麒麟'、'红珍珠'、'红粉玉蝶'、'粉金蝶'、'火花'6个杜鹃花品种为母本,'映山红'、'满山红'、'羊踯躅'、'大白花'4个野生资源为父本,进行6×4不完全双列杂交,并通过部分反交、自交和开放授粉,对其结实性进行了探讨.结果表明:(1)不同品种与种间杂交结实率存在明显差异,各杂交组合的结实率为0～94.0%;(2)同一品种(种)作父本或母本,其杂交结实率也有明显差异,因此,在人工杂交过程,除选择好亲本外,还要注意确定正反交组合的数量;(3)不同品种(种)自交和天然授粉结实率存在明显差异,自交结实率为12.3%～76.1%,天然授粉结实率为0～21.7%.雄蕊完全瓣化或花药败育者天然授粉结实率为零.     

花烟草自交不亲和性连锁的基因定位研究

自交不亲和性是植物界存在的一种普遍现象,据Ｅａｓｔ估计有３０００种以上的植物存在着自交不亲和性,自交不亲和是由于花粉雌蕊之间表现的抑制作用所致,研究表明烟草属于同形不亲和性中的配子体自交不亲和〔１〕。对烟草的自交不亲和研究表明,花粉可以在柱头上发生水...     

梨自花结实、优质早熟抗病品种的试验与示范通过验收

南京农业大学园艺学院（邮编：210095．电话：025—84396580）张绍铃教授主持完成的科技部农业科技成果转化资金项目“梨自花结实、优质早熟抗病品种的试验与示范”。前不久通过了国家验收。     

多胺、MGBG、水杨酸对鸭梨和雪花梨花粉萌发及花粉管生长的影响

采用液体培养法研究了3种多胺—精胺(Spm)、亚精胺(Spd)、腐胺(Put)以及多胺合成抑制荆—甲基乙二醛-双-鸟苷基腙(MGBG)和水杨酸(SA)对鸭梨、雪花梨花粉萌发和花粉管生长的影响。结果表明,Spm促进鸭梨、雪花梨花粉萌发和花粉管生长的浓度分别为0.005～0.01 mmol/L和0.005～0.05 mmol/L。Spd对鸭梨花粉萌发促进作用的浓度为0.01～0.25 mmol/L。在试验Spd浓度范围内,花粉管长度均显著或极显著长于对照;促进雪花梨花粉萌发和花粉管生长的Spd浓度范围为0.01～0.25 mmol/L。促进鸭梨和雪花梨花粉萌发的Put浓度范围是0.01～0.5 mmol/L,促进二者花粉管生长的Put浓度范围分别为0.01～0.5 mmol/L和0.01～0.25 mmol/L。MGBG只有在0.05 mmol/L时促进这鸭梨和雪花梨花粉萌发,其它浓度均抑制二者花粉萌发;MGBG浓度在0.25 mmol/L以下时,均极显著促进鸭梨花粉管的生长;在0.05 mmol/L时对雪花梨花粉管的生长无抑制,其它浓度均极显著抑制了雪花梨花粉管的生长。在设定的SA浓度范围内,鸭梨萌发率均显著或极显著高于对照,以0.005 mmol/L最好;SA对鸭梨花粉管生长的促进以0.005 mmol/L最有效;促进雪花梨花粉萌发的SA浓度范围是0.025～0.05 mmol/L,但SA对雪花梨花粉管生长基本无促进作用。     

雪花梨S16-RNase基因全长cDNA克隆及序列分析（英文）

    通过逆转录PCR(RT-PCR及快速扩增cDNA末端(RACE)技术从中国白梨品种'雪花'梨中克隆到S16-RNase基因的全长cDNA序列(GenBank接受号为DQ991388)该cDNA克隆总长1101 bp,包含1个完整的开放阅读框,编码228个氨基酸S16-RNase表现出梨S-RNase基因的基本结构特征,即其具有5个保守区(C1,C2,C3,RC4及C5)和1个高变区在推导氨基酸水平上,S16-RNase与梨其他S-RNase基因的相似性为63%至74%,但与苹果S9-RNase的相似性高达95%通过多序列比对构建进化树,分析梨S16-RNase与蔷薇科植物其他S-RNase基因的遗传进化关系结果表明,S16-RNase与苹果亚科S-RNase基因形成一个亚科特异而非种特异的S-RNase基因类群;且不同S-RNase基因间存在属内种间遗传距离远于属间种问遗传距离现象     

新梨7号授粉试验初报

2001与2003年，选用当地主栽的香梨和香梨常用的几个授粉品种对新梨7号做了授粉试验。结果表明：巴梨、苹果梨因花期太晚，不能作为自然授粉树配置，其余供试各品种从物候期来看均可作为新梨7号的授粉树。各组合第一次落果发生在授粉后10余天，除香梨、早酥和慈梨外，其余组合均未发生明显的6月落果。各组合果重、果心比、可溶性固形物含量之问存在极显著差异。新梨7号果实品质性状主要由母性基因控制，花粉直感效应并不明显。综合各性状，我们初步认为砀山梨、茌梨、阿拉尔黄梨和鸭梨作新梨7号授粉树比较理想。     

梨CDPK基因家族全基因组序列鉴定分析

CDPK是植物特有的一类丝氨酸/苏氨酸型蛋白激酶,在介导植物生育信号和逆境信号转导中具有重要作用。为揭示CDPK基因在梨生长发育与抗逆防御机制中的作用,本研究通过生物信息学手段,结合梨基因组注释信息,鉴定梨基因组中CDPK家族基因成员,利用MEGA6.0程序进行多序列比对、分类并构建系统进化树;利用per1程序以及GSDS工具进行基因结构与保守性分析,为植物CDPK基因功能分析与利用提供依据。结果表明,本研究成功鉴定出26个CDPK家族成员,根据系统发育树分析,所有Pb CDPK被分为4类;基因结构预测结果表明,大多数Pb CDPK均含有6~7个内含子;且预测的Pb CDPK氨基酸序列绝大多数含4个EF-hand功能域;为了深入分析梨与其他物种的同源进化关系,构建了梨与拟南芥、水稻的CDPK基因系统进化树,进化树聚类分析结果将所有的CDPK蛋白分为四类。综上所述,目前已初步获得26个梨CDPK基因,为在基因组范围内研究CDPK基因在梨生长发育与逆境响应中的功能奠定了基础。     

香梨花器特征及花粉生活力研究初报

在观察香梨的花器特征的基础上,对花粉量、花粉生活力及花粉萌芽力进行了综合研究。结果表明：香梨为完全花、伞房花序,花冠轮生辐射对称,雄蕊16～30枚,柱头多为5枚,极少数的6枚。顶花芽侧花败育现象普遍。花药花粉量达4000粒左右,花粉活力百分率在75%以上,新鲜花粉发芽率达80%,其发芽势较风干花粉有显著差异。     

鸭梨肌动蛋白2基因克隆和表达分析

根据其他植物肌动蛋白2基因(Actin2)的保守序列设计一对简并性引物,从鸭梨叶片中克隆到1个编码肌动蛋白的基因,命名为PbACT2。PbACT2基因cDNA全长为1 180bp,开放阅读框1 134bp,编码377个氨基酸。氨基酸比对分析表明,该基因编码的氨基酸与其他陆生植物肌动蛋白基因具有较高的同源性。研究证明,PbACT2在鸭梨不同器官和不同发育时期的表达基本一致,说明该基因的表达较为稳定。     

鸭梨果肉多酚氧化酶的活性研究与纯化

对鸭梨(Pyrus bretschneideri Rehd.)果肉多酚氧化酶的活性进行研究并对其进行纯化。以鸭梨果肉为试材,采用邻苯二酚为底物测定氧化产物的方法,就pH值、温度、热稳定性、抑制剂、不同成熟期及果肉不同部位等因素对PPO活性的影响进行了研究;酶粗提液经30%硫酸铵沉淀去杂和80%饱和度硫酸铵析出、Sephadex G200柱层析及HiPrepTM16/10 QXL离子柱层析等步骤进行了纯化,经SDS-PAGE进行了验证。结果表明:鸭梨果肉中的PPO最适pH值为6.4;最适温度为25℃;20～25℃时热稳定性较高;不同成熟期的活性不同;34 mmol/L的NaCl为较好的抑制剂;果肉近果心处活性最高,中部活性最低。经纯化,获得均一的PPO,分子量约43 kD。为鸭梨果肉PPO的性质研究以及控制梨果PPO酶促褐变提供了依据。     

套袋对库尔勒香梨果实发育的影响

以7种膜袋和纸袋为试材在新疆库尔勒香梨上进行了果实套袋试验,来探索套袋果实微域温度变化规律、套袋对果实品质的影响。结果表明,套袋可显著降低果皮叶绿素和叶黄素含量。香梨果实套袋后单果重比不套袋下降了6 g,但差异不显著。果肉的可溶性固形物含量上升1.2%,硬度提高17.5%,可滴定酸比对照低24%。不同袋型对果实品质的效应有明显差异。套白色薄膜袋后在13:00至19:00袋内温度平均要高于对照2.3℃,环境因子的改变是套袋果外观品质和内在品质产生变化的直接诱因。紫色膜袋和日本小林纸袋对果实外观和内在品质的负面影响小,是比较适合香梨的果袋类型。结合疏果作业,香梨在5月下旬至6月上旬进行套袋作业为宜。