烟草种质资源TI203对烟草花叶病的抗性特点

[目的]系统了解烟草种质资源TI203抗烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)的特点,为烟草抗病育种的亲本选择提供更丰富信息.[方法]以烟草种质资源TI203为材料,采用TMV病毒接种、病情调查、病毒外壳蛋白累计量检测、TMV复制水平测定及日灼现象观察等方法,研究TI203对TMV的抗性特异性、TI203接种TMV普通株系(TMV-U1株系)后的症状、病毒复制水平等.[结果]TI203只对TMV表现无症状的抗病特点,接种马铃薯Y病毒(PVY)和黄瓜花叶病毒(CMV)则表现出典型症状.接种TMV-U1株系后14 d,Western blotting检测结果显示,TI203叶片病毒复制水平明显低于对照品种;用表达GFP的TMV侵染性克隆浸润接种发现,TI203对TMV的抗性发生在病毒复制水平.在高温和强日照条件下,TI203生长迅速的中上部叶片会发生日灼现象,且难以恢复.[结论]TI203只对TMV表现无症状,其对TMV的抗性发生在病毒复制水平.     

烟草品种Coker176和Ti245抗TMV的遗传分析

以2个抗烟草花叶病毒(TMV)的烟草品种Coker176和Ti245及感TMV烟草品种K326为材料,经杂交、自交、回交建立F1,F2,BC1等世代群体。采用人工接种TMV的方法对各群体进行抗性鉴定,统计各世代抗感植株数;利用卡方测验对分离世代群体进行抗感分离比检测。结果表明,Coker176的TMV抗性由一对显性基因所控制,Ti245的TMV抗性由两对隐性基因所控制。最后对2个抗性亲本在抗TMV育种中的利用进行了探讨。     

烟草抗TMV育种研究进展

增强TMV抗性是烟草抗病育种的重要目标。简要介绍了烟草TMV的发病症状及防治方法，综述了烟草抗TMV的主要抗源、烟草抗TMV育种进展及生物技术在抗TMV育种中的应用，并就今后如何有效开展烟草抗TMV育种提出了建议。     

抗烟草花叶病毒(TMV)转基因烟草的初步选育

 病毒病是云南烤烟生产上的重要病害,目前尚无有效的防治手段,本研究试图采用植物基因工程技术,将TMV54KD蛋白基因转人云南烤烟栽培品种,获得抗TMV的转基因植株,减少由TMV危害造成的重大经济损失,用携带植物抗病毒基因表达载体的根癌农杆菌LBA4404菌株转化云南烤烟栽培品种红花大金元,获得了大量转基因植株,戴体质粒上含有卡那霉素抗性标记基因(NPTII)和CaMV35s启动子控制的烟草花叶病毒(TMV) 54KD蛋白基因,烟草叶片与携带载体质粒的根癌农杆菌共培养后,将其转移到含50μg/ml卡那霉素(Km)的MS+2.0mg/m16-BA+0.1mg/LNAA培养基上培养筛选,2-3周后分化出芽,切下小芽转移到含50μg/ml卡那霉素的MS+0.2mg/ml NAA的培养上进一步培养基筛选并使转化体生根,再对生根植株叶片进行Km抗性鉴定,结果表明,Km抗性标记基因(NPTII)在烤烟植株中已得以表达,间接证明TMV54KD蛋白基因已整合到烤烟植株的基因组中,抗性鉴定结果表明,转基因植株对TMV摩擦接种表现出明显抗性,选择抗性植株,单株收种子,以对其后代抗性的遗传稳定性研究.     

烟草品种Coker176和Ti245抗TMV的遗传分析*

 以2个抗烟草花叶病毒（TMV）的烟草品种Coker176和Ti245及感TMV烟草品种K326为材料,经杂交、自交、回交建立F1,F2,BC1等世代群体。采用人工接种TMV的方法对各群体进行抗性鉴定,统计各世代抗感植株数;利用卡方测验对分离世代群体进行抗感分离比检测。结果表明,Coker176的TMV抗性由一对显性基因所控制,Ti245的TMV抗性由两对隐性基因所控制。最后对2个抗性亲本在抗TMV育种中的利用进行了探讨。     

烟草Ti245抗烟草花叶病毒的遗传分析及抗性基因定位

以含抗烟草花叶病毒(TMV)基因的烟草Ti245为抗病亲本,以K326为感病亲本,经杂交得到F1,F1自交得到F2群体,分析了Ti245抗TMV的遗传规律,并对抗性基因进行SSR标记定位.结果表明:Ti245对TMV的抗性由1对隐性基因控制;基因定位发现,Ti245抗TMV的位点位于LG9连锁群,标记*Tp217200...     

水杨酸诱导的烟草对烟草花叶病毒的抗性

采用水杨酸(SA)诱导烟草对烟草花叶病毒(TMV)的抗性,间接ELISA法检测诱导后烟草叶片的病毒含量,并用枯斑寄主的半叶法检测诱导抗性程度。结果表明,水杨酸处理后烟草叶片内TMV含量明显降低,随着病毒挑战接种后时间延长,病毒含量增多,第28d普通烟叶片的病毒含量达到最大值。SA诱导处理后,处理叶片(T-SA)与其上部未处理叶片(N-SA)比较,枯斑数基本一致,均比对照处理明显减少。     

烟草对烟草花叶病毒耐受性的早期防御反应

为深入研究植物对烟草花叶病毒(TMV)产生耐受性的机制,以烤烟栽培种NC89和其自然变异株系培育的品种豫烟8号(具有TMV耐受性)为材料,人工接种TMV后,检测其生理生化指标变化及抗性基因表达水平,并进行组织切片比较分析。结果显示,豫烟8号接种TMV 24 h叶片中的超氧阴离子含量、过氧化物酶(POD)活性、苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性、过氧化氢酶(CAT)活性都明显高于NC89,而丙二醛(MDA)含量低于NC89,N基因表达水平高于NC89。接种TMV 9 d的烟草组织切片显示:相对豫烟8号,NC89叶片表皮细胞破裂,栅栏组织细胞间排列疏松,海绵组织细胞间隙较大。表明豫烟8号对TMV的耐受性体现在早期的快速应答反应。     

水杨酸诱导的烟草对烟草花叶病毒的抗性

采用水杨酸（SA）诱导烟草对烟草花叶病毒（TMV）的抗性．间接ELISA法检测诱导后烟草叶片的病毒含量．并用枯斑寄主的半叶法检测诱导抗性程度。结果表明．水杨酸处理后烟草叶片内TMV含量明显降低．随着病毒挑战接种后时间延长．病毒含量增多．第28d普通烟叶片的病毒含量达到最大值。SA诱导处理后．处理叶片（T-SA）与其上部未处理叶片（N-SA）比较，枯斑数基本一致。均比对照处理明显减少。     

草酸青霉菌果胶酶诱导烟草抗TMV的研究

本试验就草酸青霉菌(Penicillium oxalicum)的固态发酵提取产物——果胶酶粗酶液诱导烟草对烟草花叶病毒(TMV)的抗性进行了研究。以不同浓度果胶酶粗酶液喷雾处理2个烟草品种,超过100 U/mL的各浓度处理,病斑抑制率均达到50%以上。通过果胶酶诱导烟草抗病的时效性、加强诱导的效果、系统诱导抗病性、处理方法不同对烟草抗TMV效果以及果胶酶液对TMV病毒毒性的研究,结果表明:诱导处理2、4d后接种TMV病毒,果胶酶的诱导抗病效果最明显,病斑抑制率在50%左右;二次加强诱导处理可以提高烟草抗TMV的效果;果胶酶可诱导烟草产生对TMV的系统获得抗性;叶面喷雾果胶酶处理方法,对烟草抗TMV的效果最显著;果胶酶液中不含有影响TMV致病力的因子。由此表明,果胶酶对TMV的防治是通过激发烟草植株体内一系列抗病防御反应而增强自身抗病能力的。     

丹皮酚对烟草花叶病毒的抑制作用

从牡丹皮中提纯的丹皮酚结晶(0.6 mg.mL-1)与烟草花叶病毒(Tobacco m osaic virus,TMV)混合10 m in后对TMV枯斑抑制率达80%以上,说明丹皮酚对叶圆片中的病毒复制具有抑制作用;电镜下观察丹皮酚与TMV混合对粒体形态没有影响;丹皮酚与TMV混合后透析病毒可恢复侵染力,表明丹皮酚对病毒没有直接毒害作用;用丹皮酚喷施叶面不影响病毒侵染;低含量丹皮酚可阻碍TMV-CP的体外聚合,对TMV-RNA无体外抑制侵染作用.据此推测,丹皮酚对TMV的抑制作用可能主要是通过其与TMV-CP结合而影响病毒粒体对叶片表面侵染位点的识别,或影响植株体内TMV-CP亚基的体内聚合.     

植物单宁对烟草花叶病毒的抑制活性

测试了从11种植物提取的单宁对烟草花叶病毒(TMV)的抑制活性.结果表明:(1)任一植物的单宁质量浓度为5.000或2.500mg·mL-1时,与TMV混合10min后接种,其抑制率均达80%以上.(2)单宁质量浓度为5.000mg·mL-1时,与TMV混合后立即接种,其抑制率也均达80%以上,表明单宁与病毒粒体作用时间很短.(3)TMV与单宁混合,透析3d后,可恢复大部分侵染力;混合3d但未作透析处理,与混合10min的处理相比,抑制率下降,表明部分植物的单宁体外稳定性可能较差,与TMV粒体作用能力下降.(4)这11种植物的单宁对TMV体内抑制复制效果不明显.(5)大飞扬、杠板归、虎杖3种植物的单宁,在接种前先喷施心叶烟再接种TMV,可抑制病毒的初侵染;在接种前先喷施普通烟草K326再接种TMV,烟株发病期推迟3-8d.     

中草药中抗植物病毒TMV活性物质PZ_1作用机理研究

以烟草花叶病毒 (TMV) /烟草为测试体系 ,研究了天然物 PZ1抗病毒 TMV作用机理。在离体及活体条件下 ,PZ1均可抑制病毒核酸与植物核糖体结合。在活体条件下 ,PZ1抑制 TMV- RNA及 TMV蛋白质合成。实验结果表明 PZ1的主要作用靶标为 TMV- RNA     

15种中草药抗烟草花叶病毒活性的研究

[目的]测定15种中草药提取物抗TMV的活性。[方法]利用半叶枯斑法,初筛测定15种中草药对TMV钝化作用,复筛测定其对TMV初侵染和复制增殖作用。[结果]商陆、大黄、板蓝根、金银花4种中草药表现出明显的TMV体外钝化作用,其钝化抑制率均在50%以上;复筛测定4种中草药抗TMV初侵染和复制增殖活性,大黄表现出较好的活性,且与其他3种中草药相比差异显著。盆栽试验表明,植物提取液(大黄)在100倍液下,喷雾加灌根的施药方式对烟草病毒病的防效最好,达49.00%,优于对照药剂20%吗啉胍·乙铜可湿性粉剂。[结论]15种中草药中大黄具有较优的抗TMV活性,值得进一步研究。     

植物提取液对感染TMV烟叶中自由基含量及TMV增殖的影响

研究了商陆、落葵、毛叶子花和配伍植物(板蓝根等20种植物混合)的水提取液对感染TMV烟叶中自由基含量和TMV增殖的影响,并探讨了其防治TMV的效果。结果表明,不论在接种TMV毒液之前施用,还是接毒后施用上述植物提取液都能使O2·-和.OH含量降低,且对TMV增殖有较好的抑制作用,其中配伍植物提取液对TMV的防治效果优于单一植物提取液,并且预防效果大于治疗效果。     

浮盘消毒方式对烟叶TMV的影响分析

为在烤烟浮盘消毒这一环节,找到适宜的消毒方式,有效降低烟叶普通花叶病（以下缩写TMV）的发生,从而减少损失。通过采取不同的浮盘消毒方式,对烟苗TMV带毒率检测和大田TMV发生情况跟踪监测,结果表明：使用烟雾机浮盘消毒方式能减少烟苗TMV带毒率,降低大田TMV发病率,比常规消毒方式在预防和控制TMV上效果更好。     

嘧肽霉素复配制剂06抗病毒机理初探

针对自主研制的抗病毒农药嘧肽霉素复配制剂06,以普通烟NC89为试材,通过比色法和生物学测定法研究了4种处理(接种TMV,接种TMV前24h喷06,接种TMV后马上喷06,接种TMV后24h喷06)烟株体内病毒浓度的变化。结果表明:嘧肽霉素复配制剂06对病毒的复制和增殖有一定的抑制作用,并且其保护作用好于治疗作用。同时对4种处理(接种TMV,TMV与06混合接种,喷施06不接种,对照)烟株体内防御酶活性的变化进行了研究,结果表明:嘧肽霉素复配制剂06可使烟株CAT、POD、PAL、PPO的活性比对照均有不同程度的提高,酶活高峰集中表现在4~10d。