猪下丘脑开胃素 A的分布定位

用免疫组织化学方法研究了5头苏钟猪下丘脑内开胃素(orexin)A的分布。结果表明,在猪下丘脑内,开胃素A免疫阳性神经元分布于下丘脑的视前内侧区、室周核、室旁核、视上核、背内侧核、穹隆周核、乳头体核、前区、外侧区和后区等部位,以下丘脑外侧区、乳头体核和视上核出现的免疫阳性神经元最多,以室周核的最少。这一结果与在其他动物上获得的基本相似。     

猪类胚胎生殖细胞体外诱导分化为神经细胞的研究

【目的】探讨猪类胚胎生殖细胞向神经细胞分化的潜能。【方法】采用性腺-中肾区基质细胞与猪原始生殖细胞共培养的方法得到猪类胚胎生殖细胞,通过直接分化的方法进行神经细胞定向诱导。【结果】（1）与小鼠成纤维细胞作为饲养层相比,性腺-中肾区基质细胞作为饲养层同样能够支持猪类胚胎生殖细胞生长,二者对猪类胚胎生殖细胞的增殖能力不存在显著影响;（2）猪类胚胎生殖细胞有较强的碱性磷酸酶活性,Q-PCR结果显示多能性基因Oct4、Sox2及Nanog表达,增殖能力呈现“S”型,即生长的潜伏期、对数期及平台期,猪类胚胎生殖细胞经体外悬浮培养能够形成拟胚体;（3）经过诱导猪类胚胎生殖细胞能够分化形成表达神经干细胞、神经元及神经胶质细胞标记物的多种神经细胞类型。【结论】从早期性腺中成功分离培养得到了猪类胚胎生殖细胞,通过简单、快速的神经细胞分化的诱导体系证实了猪类胚胎生殖细胞具有体外定向分化为多种神经谱系细胞的能力。     

猪下丘脑开胃素 A的分布定位

用免疫组织化学方法研究了5头苏钟猪下丘脑内开胃素(orexin) A的分布.结果表明,在猪下丘脑内,开胃素 A免疫阳性神经元分布于下丘脑的视前内侧区、室周核、室旁核、视上核、背内侧核、穹隆周核、乳头体核、前区、外侧区和后区等部位,以下丘脑外侧区、乳头体核和视上核出现的免疫阳性神经元最多,以室周核的最少.这一结果与在其他动物上获得的基本相似.     

皖南花猪血清酶的测定和分析

本研究测定了皖南花猪从出生到３６０日血清７种酶的水平和活性,并分析了随猪日龄变化各种酶活性的变化规律,结果显示,各种酶随着日龄的变化十分明显,其中３０－６０和１２０～１５０日龄阶段是各种酶变化的转折点,猪去势后这些酶的变化趋势无明显的改变,在后备猪中仅ＡＫＰ,ＧＯＴ和ＣＫ分别与日龄之间的相关达到显著水平（－０．７５３２,０．７１２１和－０．７５７５）酶之间的相关仅ＧＯＴ与ＡＫＰ之间表现明显（０．８     

皖淮猪血液激素水平的测定与分析

测定了不同日龄（30~180日龄）定远淮新品系（皖淮猪）共60头（公猪30头,母猪30头）,前腔静脉采血,用放射免疫分析法测定血液中睾酮、生长素、甲状腺素（T3）、甲状腺素（T4）的含量,分析不同日龄血浆激素的水平及其随日龄变化规律。结果表明：不同日龄皖淮猪公猪睾酮水平随着日龄的增加而升高,180日龄达18.060 mmol/L,而生长激素水平在60日龄后维持在1.003~1.353μg/L;T3水平在不同日龄之间差异不明显,但T4的水平在不同日龄之间存在显著的波动。不同日龄皖淮猪母猪血浆生长激素水平随着日龄而增加,在180日龄后达1.317μg/L,在30~180日龄呈现周期性的节律;T3水平在不同日龄之间差异不明显,T4水平在30~180日龄也呈现周期性的节律。     

猪传染性胃肠炎的防制

2004年10月～2005年1月，我县发生了猪传染性胃肠炎，造成不同日龄2000多头猪感染；死亡134头，仔猪74头，架子猪2头，育肥猪8头，给养殖户带来极大的损失。     

山羊骨髓间充质干细胞的分离培养及向神经细胞诱导分化的研究

采用体外细胞培养技术将山羊胎儿骨髓中的干细胞从骨髓血中分离并培养扩增;分别用含β-巯基乙醇或当归的培养液诱导骨髓间充质干细胞分化为神经细胞,免疫组织化学鉴定神经丝蛋白和神经元特异性烯醇化酶的表达.结果表明,通过贴壁培养法,可使低丰度的山羊骨髓间充质干细胞在体外实现分离扩增;诱导后的细胞强表达神经丝蛋白和神经元特异性烯醇化酶.还建立了一种简单易行的体外分离与培养山羊骨髓间充质干细胞的方法,同时表明山羊骨髓间充质干细胞同样具有分化为神经细胞的潜能,为今后对某些疾病的治疗提供了理想的动物模型.     

猪下丘脑促生长激素释放激素(GHRH)基因克隆及序列分析

从杜长大杂交猪的下丘脑中提取基因组RNA,根据报道的猪GHRH cDNA序列设计引物1和引物2,用反转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）进行cDNA扩增,获得一条132 bp的片段,克隆于pGEM-T Easy载体后进行序列分析表明,该片段为GHRH基因的cDNA,它由132个核苷酸组成,编码44个氨基酸组成的多肽,即GHRH。本研究扩增得到的基因片段与报道的猪GHRH基因编码区序列完全一致。     

猪骨骼肌卫星细胞体外培养

探索和建立猪骨骼肌卫星细胞体外分离、培养及鉴定的技术方法。结果表明,通过机械法与酶消化法相结合的方法,15%血清完全培养液分离、培养细胞效果最好,对培养细胞进行了形态观察、生长曲线测定、染色体分析。结果表明,培养的细胞具有正常的大小、形态和染色体数目,该方法所获得的猪骨骼卫星细胞可在体外稳定培养,为有关实验提供充足的猪骨骼卫星细胞。     

兔小肠上皮细胞体外分离培养

选用新生未哺乳仔兔,应用胶原酶Ⅳ消化法对小肠上皮进行分离培养,得到兔小肠上皮细胞后,联合应用相差消化法和相差贴壁法对兔小肠上皮细胞进行纯化。通过形态学观察及细胞免疫组织化学方法对所得到的纯化兔小肠上皮细胞进行鉴定。结果表明：应用胶原酶Ⅳ消化法得到的兔小肠上皮细胞生长状况良好,纯化后得到95％以上纯度的兔小肠上皮细胞,纯...     

柞蚕微孢子虫(Nosema pernyi)对柞蚕卵巢初代培养细胞的侵染与增殖

将精制的柞蚕微孢子虫孢子用0.2mol.L-1KOH处理后,接种感染生长状态良好的柞蚕蛹卵巢初代培养细胞,调查其感染增殖规律。接种1h后,孢子的发芽率为53.8%,培养细胞的初期感染率为30%。接种24h后,可观察到裂殖体的数量急速增加,72h达最高峰。接种96h后可观察到短极丝孢子发芽后形成的空孢壳和二次感染体。接种5d后形成成熟孢子,每个细胞平均产100个孢子。在其生活史中,柞蚕微孢子虫呈双核或四偶核,并表现出孢子二型性,具有典型的Nosema属特征。     

昆虫细胞培养研究进展

随着生命科学的迅速发展,细胞工程愈来愈受到人们的重视。以昆虫细胞为对象的细胞培养技术在现代实验生物学上具有重要的价值,已经广泛地应用于医学、农业及生物学的各个领域。本文综述了有关昆虫细胞培养的研究进展,包括昆虫细胞培养基研究开发,昆虫细胞系的建立和组织培养,利用生物反应器大规模培养昆虫细胞,昆虫细胞-杆状病毒表达系统(B acu lov irus express ion vector system,BEV S),构建基因工程细胞系及其稳定性表达,以及昆虫细胞培养的应用前景和研究展望。     

杂色鲍原代细胞培养方法的优化及其在基因功能研究中的应用

优化了杂色鲍原代细胞的培养条件,并利用原代细胞进行了RNAi和外源基因表达。结果表明,较高的渗透压对血淋巴细胞培养起重要作用,淋巴细胞分离液分离血淋巴细胞更利于其生长。原代细胞培养至第5天,在细胞培养液中添加50μg My D88 dsRNA,能够显著降低My D88 mRNA的表达。p EGFP-N1转染培养5 d的鳃细胞,5 d后可以检测到绿色荧光。该研究表明可以成功培养杂色鲍血和鳃原代细胞,并且利用原代细胞可以进行功能基因表达量调低或调研究,为功能基因注释提供了便利条件。     

诱导子在植物细胞培养中的研究进展

详细地介绍了诱导子的概念,常用的诱导子种类及其在植物细胞培养过程中的应用。     

三七组织与细胞培养研究进展

 对三七组织和细胞培养研究的历史、三七愈伤组织的诱导和培养、细胞悬浮培养、植株的再生等方面进行了综述。     

牛的卵泡颗粒细胞采集与培养

本试验培养了牛的颗粒细胞,并且进行了细胞的冷冻与复苏,建立了一套颗粒细胞的培养方法,为后期的牛体细胞核移植技术做准备.     

猪子宫内膜基质细胞和腺上皮细胞的分离培养

为了获得高纯度的猪子宫内膜基质细胞和腺上皮细胞,对猪子宫内膜进行胶原酶消化,分离基质细胞和腺上皮细胞进行体外培养,研究其生长特性.结果表明:猪子宫内膜组织在37℃、通过1 g/L胶原酶Ⅰ消化90 min可以获得游离的腺体,对腺体进行培养时上皮细胞比例可达70％以上.培养过程中采用差速消化和差速贴壁可以成功分离腺上皮细胞和基质细胞.基质细胞最适贴壁时间为25 min,腺上皮为3h.纯化的基质细胞生长迅速,可传5代以上,上皮细胞生长缓慢,并且成片脱落.     

《动物细胞培养》实验教学的初步探索

高校开设的实验课多数是在理论教学的基础上开设的,实验教材中给出规范化的实验步骤和注意事项,这虽然巩固了理论知识,但学生独立设计实验和独立操作实验的能力得不到充分的发挥。《动物细胞培养》是一门以学生为主、教师为辅的实验教学,该文对实验课准备及预习实验报告的撰写、实验分组的具体实施、现代化电教手段及多元化考核手段的应用进行了初步的探索,以期为学生主动性、独立思考和解决问题能力的提高提供参考。     

Study on Cell Suspension Culture of Floribunda Rose

Friable callus was induced when immature seeds of floribunda rose were inoculated on MS medium supplemented with 2,4-D 3.0 mg.L^-1. When transfered onto subculture media, friable callus developed into embryogenic callus, which was used to establish cell suspension lines. Cell suspensions had to be subcultured at a interval of 4-5 days at the first several culture cycles. The best subculturing cycle for the stable cell suspensions was 8-10 days. The best inoculum quantity was 1 mL PCV（Packed Cell Volume） per 40 mL culture fluid.