防治茄二十八星瓢虫Bt菌株的筛选及杀虫活性分析

以从湖北宜昌、襄阳、荆州、广东东莞、安徽安庆5个地区采集得到的52份土样为试材,分别采用温度筛选法、镜检法、PCR-RFLP法和SDS-PAGE等方法,分离了土壤中的苏云金芽孢杆菌,并鉴定了分离出的Bt菌株的基因型,通过茄二十八星瓢虫二龄幼虫的室内杀虫试验测定分离株的杀虫活性,同时分析了部分Bt菌株的伴孢晶体蛋白,以期挖掘新的Bt菌株资源,筛选出对茄二十八星瓢虫具有高毒力的Bt菌株.结果 表明:分离得到10株含cry3基因的菌株,3株含cry7基因的菌株和2株含cry8基因的菌株,得到1株对茄二十八星瓢虫二龄幼虫有高毒力的Bt菌株,当其伴孢晶体悬浮液的浓度在40 mg·mL-1时,校正死亡率最高可达40.42％;发现YC-2-20、GD-4-1均表达分子量约为67 kDa的晶体蛋白;GD-5-7表达分子量约为130 kDa和80 kDa的晶体蛋白;YC-12-6表达分子量约为130 kDa和70 kDa的晶体蛋白.试验筛选出的Bt菌株为农业生产中茄二十八星瓢虫的绿色防控提供了可应用的菌株及基因资源,同时对延缓害虫抗药性的产生也具有重要意义.     

厉眼蕈蚊高活性Bt菌株的筛选

采用浸渍山药饲喂法测定了46株苏云金芽孢杆菌菌株对厉眼蕈蚊的活性。初步筛选结果表明,部分菌株对厉眼蕈蚊7日~8日龄幼虫具有一定的活性,其中BRC-LLP29和IPS82毒力相对较高,处理后48 h幼虫校正死亡率可达87.93%和70.21%。复筛得出二者的LC50（96 h）分别为1.182×108 cfu.mL-1和1.977×108 cfu.mL-1。     

四种杀虫剂对异迟眼蕈蚊的防治效果

以平菇为试材,选择4种杀虫剂,分别在实验室和菇房条件下研究其对异迟眼蕈蚊的防治效果,并在实验室内考察其对秀珍菇菌丝生长的影响。结果表明:0.3%印楝素乳油对异迟眼蕈蚊2龄幼虫毒力最高,LC50为13.486mg/L,但对秀珍菇菌丝生长抑制较大,EC50小于9.845mg/L;供试药剂对异迟眼蕈蚊成虫均有防治效果,但3 000IU/mg苏云金杆菌以色列亚种各浓度处理对秀珍菇菌丝生长抑制较大。除虫脲和灭蝇胺对秀珍菇菌丝生长抑制较小,其余均表现较高的安全性。     

苏云金芽孢杆菌制剂对双孢蘑菇栽培房眼蕈蚊的控制作用

以黄板诱集蕈蚊虫口为指标,小区试验比较了苏云金芽孢杆菌以色列变种(Bacillus thuringiensis var.israelensis,Bti)制剂和苏云金芽孢杆菌苏云金亚种(Bacillus thuringiensis sub.thuringiensis HB-2,Btt)制剂的两种使用剂量在双孢蘑菇栽培过程中对眼蕈蚊的控制效果,在此基础上选用Bti制剂以10g/m2的剂量用于A、B两种菇房中,生产结果显示Bti制剂对控制眼蕈蚊数量有很好的效果,两种菇房在种群高峰期的虫口减退率分别达到74.3%和98.6%,增产率达96.7%和132.5%。     

苏云金杆菌对韭菜迟眼蕈蚊幼虫的室内毒力测定

以苏云金杆菌和韭菜迟眼蕈蚊科为试材,采用浸泡韭菜茎段法,设计了5个韭菜茎段浸泡时间、5个苏云金杆菌稀释浓度和4个处理观察时间,以期确定苏云金杆菌对韭菜迟眼蕈蚊幼虫室内毒力测定时的最佳韭菜茎段浸泡时间、苏云金杆菌稀释浓度和处理时间。结果表明:室内测定苏云金杆菌毒力时,以韭菜茎段的浸泡时间60 s、苏云金杆菌稀释浓度500 mg·L~(-1)、处理观察时间24 h为宜,该条件下试虫平均死亡率为90%。通过计算不同处理时间苏云金杆菌不同稀释浓度的毒力方程,确定处理观察24 h时半致死浓度为49.40 mg·L~(-1)。     

二化螟高毒力苏云金杆菌菌株的筛选

以高毒力苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)为供试菌株,以二化螟为试虫,初步研究了30个Bt菌株对1~2龄二化螟幼虫的毒力效果,进而以筛选出的5株较高青力Bt菌株进行2~3龄二化螟幼虫青力试验,以筛选出适合黑龙江省二化螟防治的Bt菌株。结果表明:Bt14菌株在饲喂菌液168h后,二化螟的校正死亡率可达90%以上,毒力回归方程为y=0.6121x+0.8789,R2=0.9989,LC50=5.4×106芽孢/mL,致死剂量与其它菌株差异显著,表明该菌株对防治二化螟具有很好的应用前景。     

韭菜迟眼蕈蚊(韭蛆)绿色防控技术

正生产上防治韭菜迟眼蕈蚊主要依赖化学农药,易造成韭菜产品农药残留超标和菜田农药面源污染。针对韭菜迟眼蕈蚊的为害特点,提出了韭菜迟眼蕈蚊成虫和幼虫的农业防治、生态调控、生物防治、化学防治等绿色防控技术。韭菜迟眼蕈蚊(Bradysia odoriphaga Yang et Zhang)属双翅目眼蕈蚊科迟眼蕈蚊属,又称韭蛆、韭菜蛆、根蛆等。其为杂食性害虫,可为害7科30多种蔬菜和多种食用菌,以韭菜、洋葱、大蒜、韭葱、香葱为主,尤其喜食韭菜。该虫为我国特有     

露地和大棚栽培胡萝卜韭菜迟眼蕈蚊的发生规律

为明确韭菜迟眼蕈蚊在胡萝卜上的发生规律,于2018、2019年采用挖根调查和粘虫板诱集调查法,系统调查了露地和大棚胡萝卜上韭菜迟眼蕈蚊幼虫和成虫的发生情况。调查结果表明:韭菜迟眼蕈蚊在露地和大棚胡萝卜田的始发虫态为成虫,主要发生在春、秋两季,此间的土壤温湿度适宜韭菜迟眼蕈蚊的发生,春季4—5月发生2代,大棚发生时间较露地发生时间早;秋季10—11月发生1代。     

苯甲酰基脲类杀虫剂对异迟眼蕈蚊的生物活性及亚致死效应

以异迟眼蕈蚊为试虫,采用浸渍法和药膜法,研究了4种苯甲酰基脲类杀虫剂对异迟眼蕈蚊的生物活性和亚致死效应,以探讨苯甲酰基脲杀虫剂对异迟眼蕈蚊的致毒效应。结果表明:氟啶脲和氟虫脲对2龄和4龄幼虫的毒力相对较高,其中氟啶脲对2龄和4龄幼虫的LC50分别为5.526mg·L~(-1)和7.521mg·L~(-1)。4种药剂亚致死浓度均导致4龄幼虫发育历期和蛹期的延长,成虫单雌产卵量和卵孵化率的下降,其中氟虫脲和氟啶脲对4龄幼虫发育历期、蛹期、化蛹率和羽化率有显著影响(P0.05),因此氟啶脲和氟虫脲可用于温室和田间防治异迟眼蕈蚊幼虫的理想药剂。     

武汉地区越冬代韭菜迟眼蕈蚊成虫性比调查

对武汉地区越冬代韭菜迟眼蕈蚊成虫性比进行了调查。调查结果显示,韭菜迟眼蕈蚊在武汉地区以老熟幼虫越冬,蛹羽化高峰集中,占羽化总量的79.06%;成虫雌雄性比差异较大,平均性比在(2.71～7.17)∶1,总体性比为3.29∶1,即韭菜迟眼蕈蚊主要以雌性个体越冬。     

根结线虫生防细菌的筛选及鉴定

以抗病番茄根际土壤、根为分离对象,采用稀释分离方法,进行了根结线虫生防细菌的筛选及鉴定。结果表明:从番茄根际土和根内分离出47株细菌,其中,根内细菌7株,根际细菌40株。经杀根结线虫活性检测,获得2株活性强且稳定的细菌菌株W49、W21,对根结线虫的校正死亡率均超过90.0%,对卵的孵化抑制率达96.0%。通过菌落形态特征、生理生化特征观察和16SrDNA序列分析,W49和W21分别被鉴定为简单芽孢杆菌(Bacillus simplex)和内生芽孢杆菌(Bacillus endophyticus)。     

大蒜迟眼蕈蚊的发生及防治技术

迟眼蕈蚊主要危害大蒜、苔蒜、葱、洋葱、韭菜等。丰县年种植葱蒜类蔬菜面积在3．333万hm^2以上,由于多年重茬种植,迟眼蕈蚊已逐渐成为丰县大蒜及葱蒜类蔬菜生产上的主要害虫之一。据调查,该虫在丰县蒜田普遍发生,一般地块有虫株率10％～30％,严重地块虫株率高达50％以上,一般蒜田单株有虫13～75头,     

葡萄根瘤蚜共生细菌分离与分子生物学鉴定

从严格密封温室的盆栽巨峰葡萄根系、寄生的葡萄根瘤蚜虫体和根际土壤中分离获得17个细菌菌株,并对其16S rDNA基因进行PCR扩增和序列分析。结果表明,17个细菌菌株16S rD-NA均扩增出1 500 bp左右的片断,通过与Genbank上已知同源性较高细菌的16S rDNA部分序列对比,初步确定了这17个细菌菌株分属于蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)、巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)、枯草芽孢杆菌(Bacillus substilis),其中蜡状芽孢杆菌(菌株C2、R2、L2、L3、L4)和巨大芽孢杆菌(菌株L1、L4、R1、R3、C1、B1、B2、J1、J2)集中于葡萄根系和葡萄根瘤蚜虫体,而枯草芽孢杆菌(菌株T1、T2)只在根际土壤中发现,说明蜡状芽孢杆菌和巨大芽孢杆菌为葡萄根系和葡萄根瘤蚜的共生细菌。     

黄瓜枯萎病拮抗芽孢杆菌A7-3-14的筛选及鉴定

以从敦煌地区盐碱土壤中分离获得的19株细菌为试材,采用平板对峙法和菌丝生长速率法进行筛选,通过菌株形态特征、生理生化试验和16S rDNA序列分析进行鉴定,并采用盆栽试验测定所筛选的拮抗菌,研究了其对黄瓜枯萎病病原菌Fusarium oxysporum的防效,以期得到对黄瓜枯萎病病原菌具有较强拮抗作用的芽孢杆菌。结果表明:从敦煌地区盐碱地土壤中共分离出19株拮抗细菌,其中菌株A7-3-14拮抗作用最强,抑制率为79.22%,菌株鉴定为内生芽孢杆菌Bacillus endophyticus,盆栽防效结果表明该菌株发酵液对黄瓜枯萎病具有显著的防治效果,其处理后的黄瓜苗病情指数为28.14,防治效果达到69.77%。表明分离到的芽孢杆菌菌株A7-3-14可以用于黄瓜枯萎病的生物防治,且具有良好的效果。     

球孢白僵菌菌株对平菇厉眼蕈蚊的室内毒力

利用球孢白僵菌MZ050724菌株株5种孢子悬浮液浓度(3.6×104个·mL-1～3.6×108个·mL-1),对平菇厉眼蕈蚊(Bradysia difformis)成虫、幼虫和蛹进行室内毒力测定。结果表明该菌株对异平菇厉眼蕈蚊具有较强致病力。孢子浓度3.6×108个·mL-1可造成大量平菇厉眼蕈蚊感染致死,其成虫、幼虫和蛹的累计校正死亡率分别为87.31%、92.93%和70.12%,成虫、幼虫和蛹第7天的LC50分别是2.865×105个·mL-1、2.685×105个·mL-1和9.063×105个·mL-1,而在浓度3.6×108个·mL-1时平菇厉眼蕈蚊成虫、幼虫和蛹的LT50分别为4.36 d、4.06 d和5.10 d。     

韭菜迟眼蕈蚊在不同寄主上产卵及对LED光趋性的研究

为了实现活虫捕捉,预测田间种群发生规律,了解田间种群抗性发生动态,通过韭菜迟眼蕈蚊在4科9种不同寄主上的产卵趋性和对6种不同颜色LED光趋性测定,获得最佳寄主与光源,结合韭菜迟眼蕈蚊采集笼制备与野外田间应用,成功获得活虫。韭菜迟眼蕈蚊在马铃薯上产卵量最大,为93.56粒,占产卵总量的45.27%,且对绿色光趋性最强,诱虫量达26.75只,占全部诱虫量的40.38%。在韭菜迟眼蕈纹采集笼的野外应用中,露地捕虫量为700~800只,温室100~200只,大棚300~400只。     

杜梨根癌病原菌质粒类型鉴定及枯草芽孢杆菌对其抑制研究

以杜梨根瘤为试材,采用分子生物学方法、牛津杯法和指示植物接种法,研究了杜梨根癌病原菌的质粒类型及枯草芽孢杆菌对杜梨根癌病原菌的影响。结果表明:从1年生杜梨根部冠瘿瘤上分离、纯化、培养菌株,得到4株与根癌病原菌相似菌株,对之进行PCR扩增,此4株菌株均获得特异性目的条带,鉴定为根癌土壤杆菌胭脂碱类型。将病原菌接种指示植物向日葵幼苗,4株菌株均有致病性。经室内离体试验,供试的9株枯草芽孢杆菌对病原菌表现不同程度的抑菌效果;接种指示植物试验中,菌株9076和9161过滤发酵液能够完全抑制冠瘿瘤的生长。     

闽菇迟眼蕈蚊在地道菇场的活动节律研究

闽菇迟眼蕈蚊Bradysia minpleuroti Yanget Zhang,异名黄足菌蚊,在福建分布较普遍。经北农大杨集昆教授鉴定,该虫是福建省食用菌害虫的一新种。它严重为害蘑菇、平菇等,尤以地道菇场发生更严重。为此,笔者对地道菇场的闽菇迟眼蕈蚊的活动节律和发生条件进行了研究,现报道如下:     

苏云金杆菌增效细菌研究进展

苏云金芽孢杆菌Bt制剂是当前应用最广、最有效的一种细菌杀虫剂,因其对鳞翅目、鞘翅目、双翅目、膜翅目、同翅目等昆虫以及动植物线虫、蜱螨等节肢动物都显示杀虫活性而倍受人们关注.综述对苏云金杆菌具有增效作用的细菌的研究进展.目前,环境微生物中Bt增效细菌主要有苏云金杆菌、蜡状芽孢杆菌,其发酵上清液或芽孢不同程度地提高了苏云金杆菌防治害虫的效果.     

大花惠兰根腐病拮抗细菌ZL7-5菌株的筛选与鉴定

 从各地大花惠兰种植地采集的土样中共分离到细菌519株,初筛出对大花惠兰根腐病病原菌尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporium）具有拮抗活性的细菌菌株26株,经过复筛,选出1株具有较高拮抗活性的菌株ZL7-5。通过16S rDNA序列相似性分析,菌株ZL7-5与解淀粉芽孢杆菌标准菌株(NBRC 15535)的16S rDNA序列相似度达100%,通过比较菌株ZL7-5和模式菌株的形态特征和生理生化特性,最终将菌株ZL7-5鉴定为解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）。