中国对虾（Penaeus chinensis）精子做载体将生长激素基因导入受精卵的研究

本实验采用卡介苗注射器将羊生长激素基因溶液注射到亲虾纳精囊中，以精子为载体，携带基因导入对虾受精卵，而达到转基因对虾的目的。经ＰＣＲ检测表明：１．经ＳＴＥ（ｐＨ８．０）第一次洗涤精子的洗涤液呈阳性信号；第２－４次的洗涤液呈阴性；２．多次洗涤后的精子抽提的ＤＮＡ呈阳性；３．检测 １０个样品１００尾仔虾中有一个样品呈阳性结果，转基因比率在 １％以上。同时斑点杂交结果也印证了上述结果。     

中国对虾精子做载体将生长激素基因导入受精卵的研究

本实验采用卡介苗注射器将羊生长激素基因溶液注射到亲虾纳精囊中，以精子为载体，携带基因导入对虾受精卵，而达到转基因对虾的目的。经ＰＣＲ检测表明：１．经ＳＴＥ（ｐＨ８．０）第一次洗涤精子的洗涤液呈阳性信号；第２－４次的洗涤液呈阴性；２．多次洗涤后的精子抽提的ＤＮＡ呈阳性；３．检测１０个样品１００尾仔虾中有一个样品呈阳性结果，转基因比率在１％以上。同时斑点杂交结果也印证了上述结果。     

中国对虾（Penaeus chinensis）杆状病毒病的研究↑（*）

１９９３年养殖的中国对虾（ＰｅｎａｅｕｓＣｈｉｎｅｎｓｉｓ）发生了暴发性流行，经人工感染和电镜观察，证实是由杆状病毒引起的。病虾活力差。体色暗淡或微红，头胸甲上有浅黄色至白色的斑点，头胸甲与表皮下粘连，容易剥离，血淋巴混浊，淋巴器官和肝胰腺肿大，糜烂，在肝胰腺，淋巴器官，中肠，皮下组织和鳃等组织细胞的核内均发现有大量病毒粒子，病毒粒子杆状，无包涵体，具囊膜，平均长３５０ｎｍ，宽１５０ｎｍ，核衣壳体     

中国对虾（Penaeus chinensis）幼体发育各阶段脂肪酸组成的研究↑（*）

通过对中国对虾幼体的五个发育阶段的脂肪酸组成的测定，分析比较了幼体脂肪中１１种主要脂肪酸的含量变化。在卵脂肪中占主要比例的脂肪酸为棕榈酸，棕榈油酸和ＥＰＡ，油酸；在仔虾脂肪中占主要比例的脂肪酸为棕榈酸，油酸，亚油酸，ＥＰＡ及ＤＨＡ。从卵到仔虾整个发育过程中，幼体脂肪中的豆蔻酸，棕榈酸，棕榈油酸的含量逐渐减少，而硬脂酸，亚油酸，亚麻酸和ＤＨＡ的含量逐渐增加。     

外源基因导入鲤受精卵最佳时期的研究

本研究以鲤鱼受精卵为材料，通过显微注射技术，在受精卵的不同发育时期把鲤鱼ＭＴ启动子基因和大麻哈鱼ＧＨ基因导入受精卵中，按孵出的鱼苗数分别计算成活率，再通过斑点杂交和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ Ｂｌｏｔ杂交检测整合情况，计算整合率，孵化率最高的为单细胞中期（９０．８３％），整合率最高的为单细胞后期和囊胚期（４０％）。综合研究结果外源基因导入鲤鱼受精卵的最佳时期应选在单细胞后期。     

外源基因导入鲤（Cyp rinus carpio）受精卵最佳时期的研究

本研究以鲤鱼受精卵为材料，通过显微注射技术，在受精卵的不同发育时期把鲤鱼ＭＴ启动子基因和大麻哈鱼ＧＨ基因导入受精卵中，按孵出的鱼苗数分别计算成活率，再通过斑点杂交和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ Ｂｌｏｔ杂交检测整合情况，计算整合率，孵化率最高的为单细胞中期（９０．８３％），整合率最高的为单细胞后期和囊胚期（４０％）。综合研究结果外源基因导入鲤鱼受精卵的最佳时期应选在单细胞后期。     

鲤鱼受精卵导入外源基因最佳时期的研究

鲤鱼受精卵导入外源基因最佳时期的研究梁利群，孙孝文，沈俊宝，闫学春，王鹏（中国水产科学研究院黑龙江水产研究所，哈尔滨１５００７６）１９８５年以来，世界各国先后应用不同外源基因导入虹鳟鱼、鲤鱼、鲶鱼等人工养殖鱼类以提高鱼的质量和产量。但受精卵发育到何时...     

大菱鲆受精卵显微注射技术的建立

本研究将100~300 pg含有肌肉特异表达启动子和绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,GFP)基因的重组质粒(smyd1:gfp)显微注射到大菱鲆(Scophthalmus maximus)受精卵动物极细胞中,通过细心培育,成功孵化出鱼苗约120尾。统计分析显示,显微注射后,大菱鲆胚胎存活率为4.8%。利用荧光显微镜观察大菱鲆胚胎及仔鱼,只在注射smyd1:gfp质粒的胚胎及仔鱼的肌肉中发现有绿色荧光。通过进一步PCR扩增检测,在注射的大菱鲆胚胎及仔鱼DNA中扩增出了GFP特异片段,大小约为340 bp。研究表明,本研究成功建立了大菱鲆显微注射技术,可为大菱鲆基因功能研究和遗传育种奠定基础。     

中国明对虾(Penaeus chinensis kishinouye)Sox基因PCR-SSCP分析条件优化的研究

聚合酶链反应一单链构象多态性（PCR-SSCP）是一种快遮、简便、较灵敏的检测基因变异的方法，但其影响因素很多，本试验从多个方面对中国对虾SOX基因SSCP方法的影响因素进行分析，结果发现应用12％，交联度49：1的聚丙烯酰胺凝胶常温下低压电泳效果最佳。条带清晰。容易识别。可应用于其他SSCP分析方法的参考。     

中国对虾卵子激活过程的形态学研究

报道了对中国对虾卵子激活反应的形态学研究。中国对虾卵子皮层中有由卵黄膜下陷形成的与卵表垂直的皮层囊,内有棒状结构称棒状周边体,其内物质为凝胶前体。对虾卵子的激活并不需要精子的发动,而是在卵子与海水接触后即开始进行。在卵子激活过程中,棒状周边体向外放出形成花冠状的凝胶层,然后从基部开始逐渐消失并向远端扩展,最后完全消失,同时卵子进行成熟分裂放出第一、第二极体,并举起受精膜,完成激活反应。还对中国对虾卵子激活的作用进行了讨论。     

对虾一种杆状病毒多角体蛋白基因的PCR扩增

根据已发表的几种杆状病毒的多角体基因的序列比较与分析，设计并合成两对ＰＣＲ简并引物Ｐ—６０／Ｐ７４０和Ｐ１６４／Ｐ６４０，从纯化的对虾皮下及造血组织坏死杆状病毒提取ＤＮＡ并进行ＰＣＲ扩增，Ｐ—６０／Ｐ７４０的扩增片段较为复杂，基中１条的长度为８００ｂｐ的主带与设计的ＤＮＡ片段长度相近。Ｐ１６４／Ｐ６４０经优化ＰＣＲ的反应条件后，成功地扩增出与设计相同的约４８０ｂｐＤＮＡ片段。进一步的实验表明，Ｐ—６０／Ｐ７４０扩增的分子量为８００ｂｐ的片段可被Ｐ１６４／Ｐ６４０引物对扩增，分子量与预期的相同，初步研究结果显示，Ｐ—６０／Ｐ７４０可用于杆状病毒多角体蛋白全基因的克隆，Ｐ１６４／Ｐ６４０对于对虾杆状病毒的调查和研究有实际应用价值。     

中国对虾胃内主要基础饵料检出率及其与对虾生长的关系

１９９３年在牟平宁海虾场养池通过定期分析对虾胃含物，发现在虾池生物种类较多的情况下，对虾最先大量摄食猫水蚤，到６月下旬，则主要摄食一种小型多毛类短鳃伪稚虫 。到７月中旬，基础饵料在虾胃中急剧减少，若投饵不足，将有高比例的空胃虾 。     

添加稀土元素的配合饲料对中国对虾生长效果的研究

本文讨论了添加稀土元素的配合饲料对中国对虾（Ｐｅｎａｅｕｓｃｈｉｎｅｎｓｉｓ）生长效果的影响，从试验中得到了以下结论。（１）添加稀土元素的配合饲料对其有促生长作用，其适宜添加量为３０～１００ｍｇ／ｋｇ，其中以添加６０ｍｇ／ｋｇ为最适宜，该组增长比为１３５，增重比为１５０（对照组为１００）。（２）成活率有不同，但差别不明显，说明稀土元素对其成活率无明显影响。（３）用添加６０ｍｇ／ｋｇ稀土元素的饲料在     

酸败油脂和黄曲霉毒素对中国对虾（Penaeus Chinensis）生长的影响

分别在对虾配合饲料中添加酸败鱼油和含黄曲霉毒素花生饼粉养虾，鲑油的酸价为０．２，８．０，２２．４，３１．０ｍｇ／ｇ，黄曲霉毒素Ｂ１的含量为４７２．０ｐｐｂ，７８．７ｐｐ。试验进行了２８天，其结果如下；随着鱼油酸价的增高，以上四组对虾的增重率依次为７２．４％，３７．０％，２９．２％，２７．５％；成活率依次为８３．１％，５９．６％，５８．０％．５３．０％；消化率依次为７８．７％，６８．５％，６３．３％     

中国对虾人工受精技术的研究

首次探讨了中国对虾人工受精的方法。干法、湿法、半湿法和滴管法都可获得一定比例的受精卵,其中滴管法的受精效果最佳,最高受精率为77.8％。受精卵经过培养,能够进行正常的卵裂和胚胎发育。通过对这几种方法受精效果的分析和比较,认为,在精卵未丧失受精能力的前提下,尽可能地使精卵充分混合,才能得到较高的受精率。还对这四种方法的人工受精和自然受精对受精率的影响进行了比较和分析。     

维生素B_(12)对中国对虾仔虾生长与存活的影响

通过在配合饵料中添加不同剂量维生素B_(12)的方法,研究维生素B_(12)对中国对虾仔虾的影响。结果表明,适量的维生素B_(12)可明显地促进仔虾的生长,并可提高仔虾的存活率。     

中国对虾幼体消化酶活力的实验研究

以酶学分析方法测定了中国对虾各期幼体几种消化酶活力，实验结果表明，在中国对虾幼体发育过程中，五种消化酶活力表现出四种变化模式，其中胃蛋白酶和类胰蛋白酶活力逐渐增大，淀粉酶活力呈下降趋势，纤维素酶和脂肪酶活力极微，在食性转换过程中，胃蛋白酶、类胰蛋白酶和淀粉酶出现较明显的变化。中国对虾幼体消化酶活力对饵料中的营养物质有着明显的适应性，而且饥饿实验表明消化酶活力受个体发育的影响。作者认为中国对虾幼体消     

中国对虾皮下及造血组织坏死杆状病毒（HHNBV）DNA探针的制备及应用

ＨＨＮＢＶ是１９９３年中国对虾暴发性流行病的主要病原之一。从纯化的病毒中提取ＤＮＡ，用ＥｃｏＲｌ限制性内切酶酶切成ＤＮＡ片段，与ＰＵＣ１８体外重组，建立ＨＨＮＢＶＤＮＡ文库。从中筛选出三个重组质粒（５＃、８＃、９＃），它们所插入的片段大小分别为：２．８Ｋｂ、０．８Ｋｂ、１．６Ｋｂ，它们分别用光敏生物素标记成探针，与感染ＨＨＮＢＶ的病虾ＤＮＡ呈阳性反应，以此利用制备的ＨＨＮＢＶＤＮＡ探针的高敏感性和特异性来检测虾病。