Vitamin D deficiency inhibits pancreatic secretion of insulin

The effects of a vitamin D deficiency on insulin and glucagon release was determined in the isolated perfused rat pancreas by radioimmunoassay of the secreted proteins. During a 30-minute period of perfusion with glucose and arginine, pancreases from vitamin D-deficient rats exhibited a 48 percent reduction in insulin secretion compared to that for pancreases from vitamin D-deficient rats that had been replenished with vitamin D. Vitamin D status had no effect on pancreatic glucagon secretion. This result, along with the previously demonstrated presence in the pancreas of a vitamin D-dependent calcium-binding protein and cytosol receptor for the hormonal form of vitamin D, 1,25-dihydroxyvitamin D3, indicates an important role for vitamin D in the endocrine functioning of the pancreas.     

B超在犬妊娠后期胎儿头、肝及心跳变化监测上的应用

通过B超技术监测犬妊娠后期胎儿头、肝脏及心跳的变化情况,研究其变化规律。结果表明,胎儿头径随妊娠时间的增加整体增加,且妊娠最后10d较前期增长幅度大,平均每天增长0.70mm。肝脏直径随妊娠时间的增加而增大,妊娠最后5d胎儿肝脏直径平均每天增长3.03mm。胎儿胎心搏动次数随妊娠时间增加没有明显变化规律,但在分娩前10h有胎儿胎心跳动次数下降到180次/min,刚出生胎儿心脏搏动次数会有所回升。     

猪胎儿卵母细胞发生早期的细胞凋亡变化

为研究猪卵母细胞发生早期卵巢上细胞的凋亡情况,制作妊娠33、40、46、54、61 d母猪胎儿卵巢的石蜡切片,并进行荧光染色。结果发现,母猪妊娠到33 d时,胎猪卵巢上即可见原始生殖细胞和卵原细胞的凋亡,随着妊娠时间的延长,凋亡也逐渐增加,妊娠33、40、46、54和61 d母猪胎儿卵巢上卵原细胞的凋亡率分别为3.13%、4.32%、5.50%、9.43%和11.10%,同时,颗粒细胞的凋亡率则分别为8.89%、12.45%、14.74%、17.96%和22.81%。结果说明,在猪胎儿卵母细胞发生早期,即开始发生了卵原细胞和颗粒细胞的凋亡,且有逐渐增加的趋势。     

超声多普勒技术诊断奶山羊妊娠试验

应用超声多普勒诊断仪,以胎儿心脏和脐带血流音(快音)、母体子宫动脉血流音(慢音)及胎儿活动音作为判断妊娠的指证,在测出这四种音响信号中的任何一种就认定为怀孕。对配种后不同阶段的64头母羊共探测了302头次。其中怀孕母羊(根据以后的产羔记录确定)274头次(58头);未孕母羊28头次(6头)。结果怀孕50天以上的母羊全部被检出;未孕母羊除了正在发情的一头测出慢音以外,其余各次均未发现表明妊娠的任何信号。     

实验性缺硒病雛鸡胰腺的电子显微鏡观察

经电子显微镜对实验性缺硒病雏鸡的胰腺进行观察,见有明显的超微病理变化。在缺硒实验组的雏鸡中,胰腺外分泌部腺上皮细胞的线粒体和粗面内质网的生物膜受到损害;在补硒对照组的雏鸡中,胰腺外分泌部腺上皮细胞未见明显变化。     

山羊早期胎儿组织TET1与Wnt通路基因的表达变化及其相关性

【目的】通过检测TET1和Wnt信号通路相关基因以及DKK家族基因在山羊胎儿发育早期的表达变化,分析TET1与Wnt通路基因的相关性,为TET1调控山羊胎儿发育研究提供理论依据。【方法】选取12只健康大足黑山羊母羊,自然发情后与同一只种公羊自然交配。采用剖腹产手术的方法,分别获得妊娠20、25、30、60和90d的胎儿,对胎儿的生长指标(体重、体长)进行统计,并采集了60和90d胎儿的组织器官样品(心、肝、肺、肾、脑、皮肤),通过Real-time PCR(RT-PCR)检测各样品中TET1基因,DKK家族基因(DKK1、DKK2、DKK3)和Wnt家族基因(Wnt2、Wnt2b、Wnt4、Wnt5a、Wnt5b、Wnt7b、Wnt16)的相对表达量。利用SPSS软件分析山羊胎儿发育早期不同阶段TET1与WNT信号通路相关基因相关性以及基因表达显著性(P0.05)。【结果】山羊妊娠早期胎儿生长在60d后有显著变化。荧光定量检测结果表明,TET1基因表达随妊娠天数的增加呈上升趋势。Wnt家族基因在山羊胎儿发育中都检测到表达(Wnt2,-2b,-4,-5a,-5b,-7b,-16)。其中,Wnt2和Wnt7b表达量随胎儿发育逐渐增高;Wnt2b、Wnt5a、Wnt5b、Wnt7b在妊娠30 d时有显著高表达(P0.05);Wnt4在胎儿发育20 d时表达显著(P0.05);Wnt16基因在妊娠25 d有显著高表达(P0.05)。DKK家族基因表达检测结果显示,DKK1在胎儿发育早期阶段都有表达,DKK2/3在妊娠初期表达量较低,后期表达增高。通过组织中基因表达检测显示,TET1在90d胎儿肝、肺、肾和脑中的表达水平相比于60d胎儿组织升高,肝中表达量显著(P0.05)。Wnt家族基因Wnt2在组织器官中有相对活跃的表达,妊娠90d胎儿肺中表达量极显著(P0.01);Wnt16基因在胎儿皮肤组织中表达显著(P0.05),且维持在一个较高的水平;Wnt5a和Wnt7b在肾中表达显著(P0.05),其他Wnt基因在组织中都有表达。相关性分析显示,胎儿生长指标(体重、体长)变化与TET1的表达呈极显著正相关(P0.01);TET1在胎儿发育早期的表达与Wnt2、Wnt7b、Wnt16呈现正相关,与Wnt2b、Wnt4、Wnt5a、Wnt5b呈负相关,其中与Wnt5b呈显著负相关(P0.05),与Wnt7b呈极显著正相关(P0.01)。Wnt通路基因之间也有相互关系,Wnt2与Wnt4呈极显著负相关(P0.01)。Wnt2与Wnt7b,Wnt2b与Wnt5a、Wnt5b,Wnt5a与Wnt5b呈极显著正相关(P0.01)。Wnt4与Wnt5a呈显著正相关(P0.05)。【结论】获得了TET1与Wnt基因在山羊胎儿发育早期的表达模式,并进行了相关性分析,填补了这些基因在山羊方面的研究空白;TET1与Wnt基因对山羊胎儿早期的发育和组织的形成是一个动态的调控变化过程;TET1基因表达与部分Wnt基因呈现显著正相关,部分呈现显著负相关;Wnt通路基因之间表达量呈现一定的相关性。这些数据为TET1与Wnt分子调控山羊早期胎儿发育的机制深入研究提供了参考。     

同源重组敲除MSTN基因的猪胎儿成纤维细胞的构建

 【目的】获得敲除肌肉生长抑制素（MSTN）基因的猪胎儿成纤维细胞。【方法】打靶载体的构建：以Neo为正筛选基因、HSV-tk为负筛选基因。在Neo的两侧分别插入同源长臂和同源短臂。同源长臂5 382 bp,包含MSTN基因的部分5′端,全部的exon1,intron1和exon2及大部分intron2;同源短臂844 bp,包含部分exon3及3′端的部分序列。取35 d胎龄的大白猪,用胰酶消化法,分离胎儿成纤维细胞并对其进行培养和建系。采用脂质体法将打靶载体导入胎儿成纤维细胞中,转染后的细胞采用250 μg?ml-1 G418筛选7 d,再用200 μg?ml-1 G418+2μmol?L-1 GANC维持筛选。用RT-PCR法检测转染前转染后细胞MSTN基因表达量。【结果】成功构建了对猪MSTN基因部分intron2和exon3区域进行敲除的替代型打靶载体。共得到5个具有药物抗性的细胞克隆,经PCR检测,其中一个细胞克隆发生了正确的同源重组。转染后细胞MSTN基因表达量明显降低。【结论】获得了敲除MSTN基因的猪胎儿成纤维细胞。     

长大二元杂交猪胎儿成纤维细胞的生物学特性

【目的】研究长大二元杂交猪胎儿成纤维细胞的生物学特性。【方法】采用室温消化法从妊娠30d的长大二元杂母猪胚胎中分离胎儿成纤维细胞,利用MTT法检测第5、10、15、25、35、45、60、70代胎儿成纤维细胞的增殖能力,通过倒置显微镜观察不同代数的细胞形态,流式细胞仪分析细胞周期变化,DAPI染色观察细胞核染色质的形态以及衰老相关β-葡糖苷酶活性的染色测定等方法来判断细胞的衰老程度。【结果】①采用消化液室温消化法成功分离到猪胎儿成纤维细胞,细胞具有典型的成纤维细胞形态。②猪胎儿成纤维细胞于生长初期1～6d呈对数增长,此后进入平台期。【结论】随着细胞代数的增加,细胞的增殖能力虽有所下降,但仍然呈稳定的增长状态,各代次猪胎儿成纤维细胞生长良好。     

绵羊体外受精胚胎培养系统优化与囊胚差异染色

[目的]评定SOF和CR1培养系统对绵羊体外受精胚胎的发育的影响,筛选适合绵羊体外受精胚胎发育的培养体系,为相关试验研究提供一定的理论依据和研究基础.[方法]通过分析研究SOF和CR1两种培养系统在添加不同蛋白和血清成分时对绵羊体外受精胚胎发育的影响,并采用一种简化的差异染色方法,对SOFaaBSA和CR1aaBSA-FBS组培养液培养的绵羊扩张囊胚和孵化囊胚的总细胞数,滋养层细胞与内细胞团细胞数的组成和比例进行深入比较.[结果]SOFaaBSA和CR1aaBSA-FBS组的卵裂率、囊胚率和囊胚孵化率均高于其它实验组,但这两组之间差异不显著(P＞0.05).同时,SOFaaBSA组的扩张囊胚和孵化囊胚的总细胞数和滋养层细胞(TE)数均显著高于CR1aaBSA-FBS组(P＜0.05),但内细胞团(ICM)数和ICM与TE细胞的比例在两组培养系统中均无显著差异(P＞0.05).[结论]CR1aaBS A-FBS培养液能够像SOFaaBSA培养液一样支持绵羊体外受精胚胎的发育,CR1培养系统可以用于绵羊体外受精胚胎的生产,但SOFaaBSA培养液相比较CR1aa BSA-FBS培养液而言更加适合绵羊体外受精胚胎的发育.     

母猪喂服中药黄白痢散对哺乳仔猪血液的有关生理生化及免疫学参数的影响

选取品种、胎次、分娩期相近的10头待产母猪,随机分为试验组和对照组.试验组的母猪从产前5-7 d开始,每头每天分别喂服50 g中药黄白痢散一次,产后1-2 d连喂2次,之后每隔5 d再喂一次,直至断奶.于仔猪出生后的20 d,从每窝仔猪中随机选取体重相近的空腹公、母仔猪各一头,采血检测相关指标,探讨母猪喂服黄白痢散对哺乳仔猪血液的有关生理生化及免疫学参数的影响.结果表明,给母猪喂服黄白痢散能提高哺乳仔猪血红蛋白含量10.36%(P<0.05)、红细胞比积8.00%(P<0.05)、平均红细胞血红蛋白浓度2.19%(P<0.05)、血清总蛋白含量16.56%(P<0.01)、血清白蛋白含量17.97%(P<0.05)、乳酸脱氢酶活性31.17%(P<0.05),其他指标有提高的趋势,但差异不明显.     

Adaptation of an insect cell line (Grace's Antheraea cells) to medium free of insect hemolymph

Cultures of the insect cell line derived by Grace from Antheraea eucalypti Scott [Austrocaligula eucalypti (Scott)] were successfully adapted to medium supplemented with fetal bovine serum, whole-egg ultrafiltrate, and bovine plasma albumin instead of insect hemolymph. Cells, now in their 37th passage, have a population doubling time of 2.5 days; those of unadapted cultures, 4.2 days.     

鸽冠状病毒的分离与鉴定

从有呼吸道症状、有胰脏充出血、肺脏肉样病变的肉鸽中,通过鸡胚接种、电镜观察和反转录套式PCR分析,证实分离的病毒为冠状病毒;经过动物试验,鸡传染性支气管炎标准毒株（IBV M41）不引起试验鸽感染,而本次分离株对试验鸽具有一定的致病性,表明该分离株与IBV有较大差异,暂命名为鸽冠状病毒（PSH）.     

长白母猪妊娠天数的影响因素及效应分析

[目的]为养猪生产实践和科学管理决策提供参考依据.[方法]分析我国华南地区长白母猪妊娠天数的影响因素,并研究妊娠天数与其他繁殖性状的关系.[结果]胎次、分娩月份及年份对妊娠天数均有极显著影响.初产母猪的妊娠天数比经产母猪显著增长,低温季节分娩比高温季节有显著增长.妊娠天数近年来有显著缩短趋势（0.2 d/a）.妊娠天数与总产仔数、产活仔数、初生窝重、死胎数间呈极显著负相关,与木乃伊数及畸形数间无显著相关性.死胎率在妊娠116 d时最低.[结论]妊娠天数可作为养猪生产的间接指标.     

Copper Requirements of Pregnant Ewes under Conditions of the Arid Zone in Russia

The copper requirements of pregnant ewes in the environment of the arid zone in the Republic of Kalmykia have been studied. The organ and tissue analyses have shown that the copper quantitative concentrations in the fetal tissues and organs tend to vary depending on its age. The maximum copper contents are recorded in the bone tissue and the skin (1839.7 and 1714.08 μg%, respectively) of the fetuses of 100 days of age and in the bone tissue and the liver (1843.08 and 1261.04 μg%, respectively) of the 145-day-old fetuses. In the bone tissue, the percentage of the element was relatively steady during the period of the prenatal development and varied in the range of 1839.7–1843.08 μg%. The blood copper level has slightly increased for the survey period; the blood mass increased 5.84-fold. The total amount of copper in the blood of the fetus at the age of 100 days was 111.21 μg%, while it increased up to 717.33 μg% in the blood of the 145-day-old fetus. For the period of the fetal development, the copper contents in the muscle tissue and the sheepskin with wool decreased from 957.06 to 52.53 μg% and 1714.08 to 170.7 μg%, respectively, while the total amount of this element in these tissues decreased from 3531.07 to 1020.5 μg and from 1458.65 to 1309.05 μg, respectively. The liver copper content elevated with the gestational age by 37.14 μg%, it comprised 1261.04 μg% up to the age of 145 days, and the total content increased 3.1 times. The relative percentage and the total content of copper in the lungs increased by 77.29 μg% and 4.3 times, respectively, between 100 and 145 days of age generally due to the increase in the organ masses. The total copper content in the 100-day-old and 145-day-old fetuses comprised 6.95 and 9.74 mg, respectively. The copper doses at the stages of early (55 days), middle (100 days), and late (145 days) gestation of the Kalmyk fat-rumped meat sheep were determined to be 12.93, 14.02, and 15.34 mg, respectively. Taking into consideration the fact that the dietary copper absorbtion rate is in the range of 71.05–73%, the fat-rumped ewes entering early, middle, and late pregnancy should intake 18.2, 19.3, and 21 mg dietary copper, respectively. The dietary copper intake norms per 1 kg dry matter intake are 11.0, 7.9, and 8.0 mg; the copper intake norms per 1 kg live weight should be 0.30, 0.32, and 0.35 mg.     

Circulating somatostatin acts on the islets of Langerhans by way of a somatostatin-poor compartment

Somatostatin perfused in canine pancreases at 10 to 20 picograms per milliliter or 10 to 20 percent of the pancreatic vein somatostatin concentration inhibited insulin and glucagon secretion. This suggests that the high local concentration of endogenous somatostatin is not in contact with somatostatin receptors of the islets. The integrity of this separation may determine the sensitivity of islet cells to circulating somatostatin.     

青山羊胚胎期卵巢组织发生的研究

50日龄的卵巢皮质与髓质的分化不明显,为原始皮质和原始髓质,卵原细胞处于繁殖期。65日龄出现初级卵母细胞团,有的初级卵母细胞处于减数分裂的核网期。80日龄,皮质与髓质分区明显并出现原始卵泡。初级卵泡、次级卵泡和三级卵泡最早形成时间分别是在95日龄、110日龄和140日龄的皮质深层。胚胎发育早期(50～65日龄),卵母细胞的分化生长快于退化。65日龄后,卵母细胞的退化大于分化生长。125日龄后达到动态平衡。     

山羊胎儿成纤维细胞转染人t-PA指形区缺失基因及其核移植研究

采用阳离子脂质体法将人t-PA指形区缺失基因乳腺特异性表达载体(pEBT)导入山羊胎儿成纤维细胞,以山羊胎儿成纤维细胞和转染的山羊胎儿成纤维细胞作供体,构建核移植胚,对其体外发育情况进行了研究,比较了2种供体细胞(山羊胎儿成纤维细胞和转人t-PA指形区缺失基因的山羊胎儿成纤维细胞)及转人t-PA指形区缺失基因的山羊胎儿成纤维细胞饥饿处理与否对核移植胚胎体外发育的影响。结果表明,早期核移植胚有荧光蛋白(GFP)的表达;以山羊胎儿成纤维细胞作供体细胞时,核移植胚的桑葚胚率(50.3%)及囊胚率(16.0%)均高于以转人t-PA指形区缺失基因胎儿成纤维细胞为供体时的桑葚胚率(48.4%)和囊胚率(10.9%),但差异不显著(P>0.05);转人t-PA指形区缺失基因的山羊胎儿成纤维细胞经饥饿处理后,其核移植胚胎的卵裂率(73.6%)与不饥饿时的卵裂率(73.9%)差异不显著;饥饿处理后核移植胚胎的桑葚胚率(48.5%)和囊胚率(11.2%)均高于不饥饿处理的桑葚胚率(39.2%)和囊胚率(9.2%),但差异不显著(P>0.05)。本研究成功地构建了转人t-PA指形区缺失基因的体细胞核移植胚胎,体外囊胚率为11.2%。     

Histamine and spermidine content in brain during development

Histamine concentration in fetal rat brain is high at 17 days gestation but decreases sharply just before birth. Values subsequently increase to a maximum postnatal concentration 5 to 10 days after birth, and then steadily decline to low adult values by time of weaning. Spermidine follows a pattern similar to that of histamine but with a 24- to 48-hour lag. The developmental pattern for histamine in the central nervous system is different from that for other neural amines. It appears that the marked fetal and neonatal changes in brain histamine correlate best with periods of rapid cell proliferation and growth during brain maturation.     

表皮生长因子对胎鼠卵巢卵泡体外发育和类固醇激素分泌的影响

表皮生长因子（EGF）是参与卵巢功能调节的一个重要肽类因子，关于EGF对小鼠胚胎期卵巢卵泡发育和类固醇激素发育的 今未见报道。本研究以单个卵巢的放泡数、生长卵泡数和5个最大卵母 平均直径为卵泡发育优劣的衡量指标，利用我们早期研究建立的无血清培养体系研究了EGF对胎鼠卵巢卵泡发育和类固醇激素分泌的作用。结果发现：①EGF处理组胎鼠卵巢总卵泡数、生长卵九和卵巢内5个最大卵母细胞平均直径从培养第7天起即显著高于ITS对照组直至培养结束；②EGF在培养后期显著促进胎鼠卵巢分泌睾酮，但对雌二醇的基础分泌无影响；③EGF处理组胎鼠卵巢在培养过程的后期引起贴壁的卵巢边缘脱离培养板底壁发生卷边现象，丧失卵母细胞皮持－髓质生长模式。结果提示：EGF在胎鼠卵巢原始卵泡生长起始中起重要作用， 同时EGF促进胎鼠卵巢小腔前卵泡／卵母细胞进一步生长、发育和体外存活；EGF促卵泡发作用与雌二醇的作用无关。     

圈养花面狸胚体期和生后期生长发育规律及生长模型构建

通过对胚体期和生后期花面狸的形态特征及体质量、体尺指标进行观测和数理分析,揭示其生长发育规律,并构建最优生长曲线模型,为掌握花面狸生长发育规律进行科学饲养、选育提供依据。结果显示,母狸妊娠15日龄时胚胎已附植,25日龄胎儿基本具备花面狸外形,35日龄胎儿性别分化,48日龄胎毛覆盖较多且部分特征性斑纹明显,出生前被毛、斑纹发育完全;胎儿体质量增长最快,生长强度35日龄最强;体长生长速度35日龄前最快,生长强度35日龄最高;肩高生长速度出生前最快,生长强度35日龄最显著;尾长35日龄前生长速度最快,生长强度最高;生长发育早晚顺序为尾长、体长、肩高及体质量。幼狸1～3月龄生长发育最快,3～5月龄次之,5月龄以后变慢;雌、雄狸体质量最大生长强度分别达4.00、4.14,体长为0.93、0.92,肩高为0.86、0.94,尾长为0.11、0.10;生后期体长、肩高不存在体型性二型,幼体、亚成体尾长不存在体型性二型,但成体期存在较为明显的体型性二型,体质量各阶段存在较为明显的体型性二型。Brody模型最适于描述花面狸的生长发育状况,采用拟合度高且有生长拐点的Gompertz模型估测雌、雄花面狸的体...