Effects of Lactobacillus reuteri Supplementation on Inhibition of Pathogenic Escherichia coli in Kunming Mice

This study was aimed to explore the effect,dose of Lactobacillus reuteri on inhibition of pathogenic Escherichia coli infection on Kunming mice as well as its potential mechanism. 96 Kunming mice were randomly allocated into four groups with 4 replicates per group and 6 mice per replicate,which were control group,low dose group,middle dose group and high dose group. All of the mice feed commercial basal feedstuff,meanwhile the mice in control group drank tap-water,three treatments were supplemented with 1.0×10⁶,1.0×10⁷ and 1.0×10⁸ CFU/mL Lactobacillus reuteri in water. The feeding period was 28 days. All the mice were weighted, and the ADFI,ADG and F/G were calculated at the end of experiment.At the day of 28,pathogenic Escherichia coli (4.98×10⁹ CFU/mL) were irrigated to study the mortality. The indexes of intestinotoxin and antioxidation in serum and cecal microbacteria were inspected.The results indicated that supplemented with middle dose of Lactobacillus reuteri could significantly improve the final body weight,ADG compared with the control (P<0.05). The mortality, serum intestinotoxin level and MDA concentration,Escherichia coli and Staphylococcus were significantly lower than control group (P<0.05),while the T-SOD,T-AOC,GSH-Px,Lacobacillus and Bifidobacterium were significantly improved (P<0.05).In conclusion,with Lactobacillus reuteri supplementation,the growth performance was improved and antioxidant capacity and cecal microbacteria were enhanced after pathogenic Escherichia coli infected, mouse mortality caused by the pathogenic Escherichia coli was effectively reduced,and the effect of 1.0×10⁷ CFU/mL Lactobacillus reuteri was the best.     

罗伊氏乳杆菌所产细菌素的研究

试验对罗伊氏乳杆菌6126的发酵上清液进行了系统研究。结果表明:罗伊氏乳杆菌6126发酵上清液可以产生细菌素,并研究了6126发酵上清液中细菌素的部分特性。该细菌素抑菌谱广,可以抑制多种革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌,对热(100℃,30min)和pH(2.0～10.0)稳定,胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、蛋白酶K等多种蛋白酶可使其部分失活。     

罗伊氏乳杆菌在畜禽生产中应用的研究进展

罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)是专性异型发酵乳酸杆菌,主要定植在人和动物肠道中,具有抑制病原菌、改善肠道环境、调节肠道菌群、降低血清胆固醇含量等诸多优良益生功能,是广泛应用于食品、药品和饲料添加剂的一类重要微生物。本篇综述主要介绍了罗伊氏乳杆菌的生物学特性、生理功能和其在畜禽生产中的应用及其作用机制,并对未来研究方向和发展前景进行了展望。     

罗伊氏乳杆菌发酵对酸乳营养价值的影响

本试验在脱脂牛乳中以德氏乳杆菌保加利亚亚种LD-02和嗜热链球菌LS-11为基础发酵菌株,当添加罗伊氏乳杆菌LA-02后,研究发酵过程中生长曲线和酸度曲线的变化,以及发酵前后游离氨基酸总量、硫胺素、核黄素和叶酸的变化。结果表明:当添加罗伊氏乳杆菌LA-02后,发酵体系生长更为旺盛,酸度变化先强后弱,游离氨基酸和核黄素提高幅度增大,硫胺素和叶酸提高幅度基本持平。     

植物乳杆菌对致病性大肠杆菌的抑制效果研究

以2株不同来源的植物乳杆菌为研究对象,研究其发酵上清在不同处理方式下对致病性大肠杆菌K88、K99和987p的抑制效果.结果表明:植物乳杆菌Lab2的发酵上清、灭活发酵液和NaOH中和发酵液对大肠杆菌的抑制均优于植物乳杆茵Lab1,可将植物乳杆菌Lab2作为预防和治疗仔猪腹泻病的益生素的参考菌株.     

猪源乳杆菌对大肠杆菌抑制效果的研究

本试验进行了猪源乳杆菌对常见致病性大肠杆菌K88的体外抑制试验。结果表明：分自健康仔猪肠道的6株乳杆菌培养物上清液，对致病性大肠杆菌K88均有较强的抑制作用，证明6株乳杆菌能产生抑菌素，为研究与开发抗仔猪大肠杆菌病的微生态制剂奠定了基础。     

猪源罗伊氏乳杆菌GL001的分离与益生特性研究

为了给猪源益生菌制剂的研究与开发提供更多理论依据,从小型巴马猪粪便中分离获得罗伊氏乳杆菌GL001,对该分离菌株的生长特性、产酸性能、模拟胃肠道环境下的耐受能力、药物敏感性及动物安全性进行检测。结果显示：罗伊氏乳杆菌GL001能迅速进入对数生长期,在16 h达到最高生长点后,pH值也相应变平稳;罗伊氏乳杆菌GL001在模拟的胃液环境中,1.5 h的存活率为93.84%,3 h后为88.41%;对0.3%的胆盐环境耐受性强;罗伊氏乳杆菌GL001对阿莫西林、链霉素、多西环素、氧氟沙星敏感,但对青霉素不敏感;细菌的上清液对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有较好的抑制作用;大鼠安全性试验表明,分离的罗伊氏乳杆菌GL001对雌鼠、雄鼠的生长和脏器指数均无影响,大鼠脏器没有细菌异位情况。研究表明,分离得到的罗伊氏乳杆菌GL001可作为潜在饲用益生菌进一步研究。     

罗伊氏乳杆菌调节肠黏膜屏障功能的作用及机制

罗伊氏乳杆菌是一种天然寄居在哺乳动物和鸟类肠道的益生菌,在维持动物健康和免疫调节等方面有着重要意义.本课题组大量体内外研究表明,罗伊氏乳杆菌对受损的肠黏膜屏障功能具有修复作用.本文综述了肠黏膜屏障的划分和罗伊氏乳杆菌对各部分屏障功能的调节作用及其机理,为深入认识和科学使用罗伊氏乳杆菌提供依据.     

罗伊氏乳杆菌对仔猪空肠miRNAs表达谱的影响

试验旨在研究罗伊氏乳杆菌对仔猪空肠miRNAs表达的影响。选用1日龄健康约克×荣昌仔猪6窝,随机分为两组,每组3窝（共27头）。即对照组（每天每头灌喂0.1%的无菌蛋白胨溶液）,LR组（每天每头灌喂活菌总数为1.0×10¹⁰CFU的罗伊氏乳杆菌）,分别在10和20日龄,每组选取6头进行屠宰,采集空肠样品。通过Solexa高通量测序技术检测空肠miRNA的表达谱,利用生物信息学技术进行靶基因预测和功能分析。结果显示：1）试验构建了8个文库,共获得187 103 840条纯净reads序列,其中22 nt长度序列占的比例最大;2）10和20日龄分别鉴定出354和352个已知的miRNAs,其中有329个miRNAs共表达;3）灌喂罗伊氏乳杆菌组仔猪空肠miRNA差异表达,10和20日龄分别获得7和9个差异显著的miRNAs,ssc-miR-218在两个日龄中都差异表达;4）对差异表达的miRNAs进行靶基因预测和KEGG通路分析,发现有10 221个靶基因富集到293条通路上,有66条通路显著富集（P<0.05）,包括与肠道发育及免疫调控相关的MAPK和PI3K-Akt信号通路;5）随机挑选6个差异表达miRNAs进行荧光定量PCR验证,验证结果与测序结果基本一致。本研究表明,罗伊氏乳杆菌可能通过影响空肠miRNAs表达来调控有关肠道健康的信号通路。     

虾源罗伊氏黏液乳杆菌的分离鉴定及其性质研究

本试验旨筛选一株防治水产致病菌能力强的虾源乳酸菌,并对其抑制水产致病菌的性质进行研究。以健康南美白对虾的不同肠段菌群为菌株分离来源,采用CaCO3-MRS固体培养基分离纯化乳酸菌,再通过抑菌能力试验和溶血试验复筛获得安全菌株。对筛选的乳酸菌菌株进行16S rRNA测序鉴定,并评价其生长特性、耐受性、抗生素敏感性及不同处理的发酵上清液对水产病原菌的抑菌能力。结果显示：对常见水产致病菌抑菌能力最强的安全菌株经16S rRNA测序鉴定为罗伊氏黏液乳杆菌SAMMRS-1G。在菌株的生长特性上,罗伊氏黏液乳杆菌SAMMRS-1G的最适培养pH为5.0,最适培养温度为39℃,4～14 h为其对数生长期;从耐受性上看,罗伊氏黏液乳杆菌SAMMRS-1G对人工胃肠液和渗透压均具有一定的耐受性,在pH 3.0条件下静置培养4 h存活率为90.7%,3.0 g/L的胆盐浓度下培养4 h存活率为85.3%,60‰高盐度条件下静置培养4 h存活率为98.7%;在不同处理对罗伊氏黏液乳杆菌SAMMRS-1G发酵上清液抑菌能力影响方面,发酵上清液对致病菌的抑菌能力为创伤弧菌>金黄色葡萄球菌>副溶血弧菌...     

酵母甘露聚糖肽对致病性大肠杆菌感染小鼠的保护作用

本试验旨在研究酵母甘露聚糖肽（MTY）对致病性大肠杆菌（PEC）感染小鼠的保护作用。选取无特定病原体（SPF级）昆明小鼠40只,随机分为4组,分别为空白组、模型组、阳性药物组、MTY组（每组10个重复,每个重复1只小鼠）,其中,空白组和模型组灌服生理盐水,阳性药物组灌服抗生素阿莫西林,MTY组灌服酵母甘露聚糖肽。4周后,对模型组、阳性药物组、MTY组昆明小鼠进行致病性大肠杆菌（PEC）攻毒试验,通过对攻毒试验前小鼠肠道微生物分析以及PEC感染后小鼠死亡率、脏器指数、肠道组织以及各器官切片组织病理分析,同时观察体内试验过程小鼠体质变化,综合评价MTY对PEC感染小鼠的保护效果。结果表明,MTY对PEC有抑制作用。与空白组相比,MTY组小鼠肠道微生物菌群有显著性差异（P<0.05）,主要表现为有益菌丰度增加,菌群多样性增加;与模型组相比,MTY处理能有效降低小鼠感染PEC后的死亡率;MTY显著提高了小鼠胸腺指数（P<0.05）,降低脾指数（P>0.05）,并极显著降低肝指数（P<0.01）;MTY抑制了小鼠空肠杯状细胞的减少（P>0.05）;MTY抑制了小鼠肠道中MUC2及ZO-1表达下调（P<0.05）;MTY对感染PEC后的小鼠肠道、肝、脾和肺等器官均起显著的保护作用。由此可见,灌服酵母甘露聚糖肽能减轻PEC对机体的损害,进而对小鼠起保护作用。     

鸡源致病性大肠埃希菌菌毛基因研究进展

菌毛是鸡大肠埃希菌的重要致病因子之一。文章对鸡源致病性大肠埃希菌菌毛的特点及分类,各型菌毛亚单位基因结构及其功能与控制,鸡源致病性与其他动物源大肠埃希菌菌毛之间的同源性进行了综述。这对了解菌毛亚单位基因结构与致病力的关系,探讨鸡源大肠埃希菌的致病力与分布有重要意义。     

鸡致病性大肠埃希氏菌耐氧氟沙星质粒的检测

对分离的２０株鸡致病性大肠杆菌进行了药敏实验,筛选出１３株耐氧量沙星（ＯＦＬ）的菌株。经质粒提取,电泳和转化实验,获得一株 粒倡导 的耐煌多重耐药菌株。该菌株对参试的１１种抗生素全部耐药菌株其中ＯＦＬＭＩＣＭ〉５０μｇ／ｍｌ。该菌Ｒ质粒电泳可见６条带,转化大肠杆菌ＤＨ５α,在２０μｇ／ｍｌＯＦＬ的ＬＢ学板筛选得到的转化子,该转化子含有原菌株中２．７ｋｂ的质粒,获得原菌株部分耐药性。连续转化５次,均     

西藏地区牦牛致病性大肠杆菌的分离鉴定

从西藏地区牦牛自然病例中分离出5株大肠杆菌，通过形态观察、生化试验、血清学鉴定及动物致病性试验，表明5株分离菌是培养特性和生化特性基本一致、具有很强致病力、血清型不同的致病性大肠杆菌。     

中药对鸡致病性大肠埃希菌的体外抑菌试验

为研究25种中药对秦皇岛地区鸡致病性大肠埃希菌(Escherichia coli)地方流行株QH1(O78)、QH2(O89)、QH4(O1)的体外抑菌效果,以E.coli标准株ATCC25922作为质控菌株。利用水提法制备中药药液,使终浓度为1g/mL;用平板琼脂打孔法和改良微量二倍稀释-平板法分别测定25种中药的抑菌圈直径和最小抑菌浓度(MIC)。结果表明,金银花、黄连、乌梅、五味子4种中药对鸡致病性E.coli地方株极度敏感,抑菌圈直径在20.3mm~22.7mm之间,其MIC在15.65mg/mL~31.25mg/mL之间;其他药物对鸡致病性E.coli地方株有不同程度的敏感性,为鸡致病性E.coli地方株中药防治提供理论基础。     

酸马奶源发酵乳杆菌对致病性大肠杆菌O8的体外抑菌研究

为了探究天然发酵酸马奶中发酵乳杆菌对致病性大肠杆菌O₈（E.coli O₈）的抑菌机理,本试验从酸马奶中分离筛选出抑菌效果最佳的菌株,对其进行16S rDNA序列鉴定,经NCBI网站BLAST对比鉴定菌种;对菌株进行培养发酵,制备无细胞发酵上清液（CFS）;通过排酸、排过氧化氢（H₂O₂）、不同蛋白酶处理等方法初步确定CFS中的抑菌活性物质性质及其含量;采用牛津杯法和二倍稀释法确定CFS对致病性E.coli O₈ 24 h生长曲线的最佳抑菌浓度;试剂盒法测定CFS对致病性E.coli O₈的细胞膜和细胞壁通透性的影响。结果显示,从酸马奶中分离出22株对致病性E.coli O₈有抑制作用的菌株,对抑菌作用最好的菌株进行16S rDNA序列鉴定及系统进化树分析后确定其为发酵乳杆菌属;CFS中主要的抑菌物质为蛋白,含量为399.5 μg/mL;最低抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度（MBC）分别为25.0和49.9 μg/mL;CFS能使致病性E.coli O₈的碱性磷酸酶（AKP）含量在1 h内快速升高,之后呈缓慢增长趋势,且使致病菌培养液中的蛋白含量明显升高。综上所述,发酵乳杆菌CFS的主要抑菌物质为蛋白,蛋白浓度越高抑菌能力越强;CFS通过破坏或改变致病性E.coli O₈细胞膜和细胞壁的通透性,使其释放出AKP和胞内蛋白,从而在短时间内起到抑制致病性E.coli O₈生长的作用。     

罗伊氏乳酸杆菌LR1对猪蛋白消化酶基因表达、肌肉抗氧化指标及氨基酸组成的影响

试验旨在研究长期饲喂罗伊氏乳酸杆菌LR1（Lactobacillus reuteri 1）对猪胃及胰腺蛋白消化相关酶的基因表达、肌肉抗氧化指标及冰鲜肉氨基酸谱的影响。选用144头（杜×长×大）21日龄断奶仔猪（平均体重6.49 kg±0.04 kg）,随机分为3组。对照组饲粮为基础饲粮,抗生素组饲粮为添加抗生素的基础饲粮（仔猪阶段添加100 mg/kg喹乙醇和75 mg/kg金霉素,生长肥育猪阶段添加75 mg/kg金霉素）,LR1组饲粮为添加5×10¹⁰ CFU/kg LR1的基础饲粮,试验期175 d。结果表明：与对照组相比,①抗生素组猪胰腺中弹性蛋白酶的表达降低（P<0.05）;LR1组胃窦、胃贲门及胃底黏膜中胃蛋白酶A的表达提高（P<0.05）,同时也高于抗生素组（P<0.05）。②抗生素组猪背最长肌（longissimus dorsis muscle,LDM）总抗氧化能力（total antioxidant capacity,T-AOC）及总超氧化物歧化酶（total superoxide dismutase,T-SOD）活力增加（P<0.05）;LR1不影响LDM中丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量,T-AOC、T-SOD及谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）活力（P>0.05）。③饲粮添加抗生素及LR1不影响冰鲜肉水解氨基酸含量及组成（P>0.05）;抗生素组24 h冰鲜肉中甲硫氨酸（苦味氨基酸）含量、甜味氨基酸总量及游离氨基酸总量降低（P<0.05）,而LR1降低24 h冰鲜肉中甲硫氨酸含量（P<0.05）;饲粮中添加抗生素及LR1均降低48 h冰鲜肉中甜味氨基酸、苦味氨基酸、必需氨基酸及总游离氨基酸（P<0.05）,同时,抗生素组48 h冰鲜肉中鲜味氨基酸含量降低（P<0.05）。综上,与对照组相比,长期饲喂LR1可提高猪胃对蛋白质的消化功能,改善24 h冰鲜肉的风味;而长期饲喂抗生素降低猪胰腺的消化功能,提高肌肉抗氧化能力,但降低24及48 h冰鲜肉的风味。     

1株感染多种致病性大肠杆菌噬菌体的生物学特性研究

旨在测定此前从断奶前仔猪粪样中分离得到的1株大肠杆菌噬菌体C6在致病性大肠杆菌上的生物学特性,并比较该噬菌体在不同致病菌上的感染特性.利用电镜形态观察和基因组测序确定其分类,用点滴法和双层平板法测定其在致病性大肠杆菌上的宿主谱,通过噬菌斑形态、最佳感染复数(MOI)、成斑率(EOP)、吸附率、一步生长曲线以及抑菌曲线等...     

阿如拉-7味散对感染致病性E.coli O_1大鼠肠黏膜屏障的影响

作者旨在研究阿如拉-7味散对感染致病性E.coli O1大鼠肠黏膜机械屏障、免疫屏障和化学屏障的影响。选用60只6～8周龄SD大鼠进行试验,分为空白对照组、未治疗组、环丙沙星组和阿如拉-7味散高(1.08g·kg^-1)、中(0.54g·kg^-1)、低(0.27g·kg^-1)剂量组,共6组,每组10只。试验结束时,计算其保护率,并采集小肠各段进行HE染色,测定小肠黏膜形态指标;同时采集血清和回肠组织,ELISA试剂盒法检测血清中的D-乳酸和二胺氧化酶(DAO)含量以及回肠黏膜中的分泌型免疫球蛋白(sIgA)和肠三叶因子(ITF)含量。结果表明:(1)阿如拉-7味散中剂量对感染致病性E.coli O_1大鼠的保护率最好,为50%;且对小肠黏膜形态有一定的改善和修复作用,其效果与环丙沙星相当;(2)环丙沙星组与空白对照组相比D-乳酸含量无显著差异(P>0.05);阿如拉-7味散高、中剂量组DAO含量与空白对照组相比无显著差异(P>0.05);(3)除阿如拉-7味散低剂量组外,其余各组与未治疗组相比回肠黏膜sIgA含量显著提高(P<0.05);未治疗组大鼠回肠黏膜ITF含量与其余各组相比显著降低(P<0.05)。结果提示,阿如拉-7味散对感染致病性E.coli O_1大鼠引起的肠黏膜损伤有一定的修复作用,其中中剂量(0.54g·kg^-1)效果最佳,与抗生素环丙沙星的修复效果相当。