Effect of Temperature on Bovine Sperm Associated Antigen 11D Gene

To explore the influence of heat stress on the expression level of bovine sperm associated antigen 11D (SPAG11D),which was sperm membrane protein,the mRNA and protein expression levels of SPAG11D were tested in primary bovine testicular cells and sperm. The normal sperm and low activity sperm were collected from Jersey cattle, Bos bubalus and Simmental cattle. The results showed that mRNA and protein expression levels of SPAG11D were highest at 36℃ than others (32, 34, 38 and 40℃) after primary bovine testicular cells cultured for 24 h. And the mRNA and protein expression levels were higher in high temperature groups than low temperature groups. The mRNA expression of SPAG11D in 48 h was consistent with 24 h, but the protein expression levels decreased at high temperature (38 and 40℃). In addition, the protein expression of SPAG11D was lower in low activity sperm than in normal sperm (Jersey cattle and Bos bubalus), and there was no significant change in Simmental cattle sperm.     

牛“细管冻精”不同解冻温度的精子活力对比试验

青海省种畜冷冻精液站１９９９年从法国卡苏公司引进了“细管冻精”设备并投入生产。生产一年多来，用户曾多次咨询细管冻精的解冻温度及解冻方法，因为卡苏公司介绍的３５－３７℃的解冻温度不适应地处高寒的青海省实际情况，不能使解冻后的冻精精子活力达到最高值，针对这一课题，笔者先后经过在不同温度下的１００多次解冻对比试验，暂选定了青海省高原气候条件下的最佳解冻方法和解冻温度。１ 解冻方法１．１ 根据青海省实际，一般采用“水浴”和“手搓”两种解冻方法。１．１．１ 水浴法：先将细管冻精从贮精罐内取出迅速投入已准备好…     

精子相关抗原11(SPAG11)基因研究进展

SPAG11基因是由两个相互独立的β-防御素基因通过通读转录连接到一起。SPAG11基因的表达受通读转录、启动子选择和物种特异性外显子招募机制的控制,在不同的物种、同一物种不同组织中存在多种SPAG11剪切体。SPAG11主要在雄性生殖道中表达,同β-防御素一样,除具有很强的抗菌活性外,还在雄性生殖方面发挥重要作用,如牛SPAG11D能够提高附睾中不成熟精子的运动能力。     

解冻温度对精子活力的影响

[目的]为了获得较为理想的解冻效果.[方法]采用不同温度,不同解冻时间,通过镜检解冻后活力的方法.[结果]发现:不同解冻温度对牛冷冻精子复苏的影响,用39.5℃温水解冻30 s精子的活力最高,冷冻精液解冻后精子活力达O.53.用40.O℃温水解冻10s、39.0℃温水解冻30 s精子的活力也较高,冷冻精液解冻后精子活力...     

不同抗氧化剂对牛精子体外获能效果的影响

为探讨褪黑素、亚牛磺酸、左旋肉毒碱三种抗氧化剂对牛精子体外获能效果的影响,将荷斯坦牛细管冻精解冻后,各取200μL精液分别添加在含10~(-4) M褪黑素(MLT)、20μM亚牛磺酸(HT)、10 mM左旋肉毒碱(LC)的获能液中,经上游处理45 min,采用目测法、金霉素(CTC)染色法评估三种抗氧化剂对牛精子活力、精子获能状态的影响。结果表明:添加10~(-4) M MLT、20μM HT、10 mM LC经上游法获能处理后的牛精子活力(83.67%、80.65%、75.00%vs 66.67%)均显著高于对照组(P0.05),而顶体反应率(9.87%、10.09%、14.30%vs 18.73%)均显著低于对照组(P0.05)。另外,添加10 mM LC、10~(-4) M MLT组获能处理后B型精子所占比率(37.26%、29.84%vs 16.26%)均显著高于对照组(P0.05),且10 mM LC组精子获能率最高;而20μM HT组与对照组无明显差异(22.80%vs 16.26%,P0.05)。因此,添加10 mM LC、10~(-4) M MLT可改善精子体外获能效果,有助于提高体外受精的受精率及早期胚胎的质量。     

不同温度解冻对冻后精子活力及生存时间的影响

不同温度解冻对冻后精子活力及生存时间的影响郝爱玲阿淑艳李淑坤（黑龙江省家畜繁育指导站哈尔滨１５００６０）牛冷冻精液质量的好坏,直接影响受胎率,影响着养牛户的经济效益。而冻后精子活力及生存时间（解冻后３７℃保存４小时精子活力）又是冷冻精液质量中最重要的...     

孕酮对牛精子体外受精及胚胎发育的影响

通过在牛精子获能液中添加不同浓度的孕酮,应用体外培养技术对牛精子体外获能及早期胚胎发育进行了研究。通过对顶体反应、超激活、早期胚胎发育率及其与精子孵育时间对精子活率的观察,筛选出获能液中最适孕酮浓度及其有利于牛早期胚胎发育的最佳浓度。结果表明,单独添加孕酮不能诱导牛精子体外获能;孕酮只能诱导获能精子发生顶体反应,而且有一个剂量依赖关系,以1μg/mL的添加效果最好。当浓度超过1μg/mL、作用时间超过4h时,精子活率下降;获能液中添加孕酮,无论剂量多少,对胚胎体外发育无明显的促进作用。     

解冻温度和时间对牛精子活力的影响试验

[目的]为了找到较为理想的解冻温度与时间,为基层黄牛改良工作提供技术参考。在不同温度区、不同时间解冻牛细管冷冻精液,对解冻后的精子活力进行检测。[方法]采用50~90℃每隔10℃设一个温区解冻牛细管冻精,检测解冻后精液的活力。[结果]在50~90℃5个温度梯度下快速解冻不同时间后的精子活力均在0.35以上,其中90℃解冻3~4s,80℃解冻4~5s,70℃解冻4~6s,60℃解冻8~9s后的精子活力均大于0.4,显著高于其他时间解冻后的精子活力。[结论]不同温度、时间解冻后精子活力各异,其最佳解冻温度和时间为90℃解冻3~4s,80℃解冻4~5s,70℃解冻4~6s,60℃解冻8~9s。     

四季气温变化对皮埃蒙特牛精液品质的影响

环境温度对精子活力、密度等对有较大程度的影响。本文比较了南阳地区四季气温变化对皮埃蒙特牛精液量、精液色泽、活力,密度等的影响,指出了为保证精液质量在控制环境温度方面应做的工作。     

添加咖啡因、亚牛磺酸对牛精子功能的影响

为研究获能液中添加咖啡因和亚牛磺酸对牛精子功能的影响,本研究将荷斯坦牛冻精解冻后分别添加在含不同浓度咖啡因（0、2.5、5.0、7.5 mmol/L）或亚牛磺酸（0、5、10、20、40 μmol/L）的获能处理液中,且每个处理组加入约200 μL的精液,在CO₂培养箱里经上游处理45 min,以评估咖啡因和亚牛磺酸对牛精子活力、顶体及质膜完整性的影响,进而探讨在获能液中亚牛磺酸替代咖啡因的效果。结果显示,添加2.5、5.0 mmol/L咖啡因组经上游法获能处理后的牛精子活力和顶体完整率均显著高于对照组（P<0.05）,且2.5 mmol/L咖啡因组精子活力最高;添加10、20 μmol/L亚牛磺酸组经上游法获能处理后的牛精子活力、顶体完整率和质膜完整率均显著高于对照组（P<0.05）,且20 μmol/L亚牛磺酸组的精子功能参数值最高;将筛选的最佳浓度2.5 mmol/L咖啡因和20 μmol/L亚牛磺酸采用同样的方法处理,发现20 μmol/L亚牛磺酸组的精子顶体完整率和质膜完整率均显著高于2.5 mmol/L咖啡因组和对照组（P<0.05）。因此,20 μmol/L亚牛磺酸可以替代2.5 mmol/L咖啡因用于体外受精体系中的精子获能处理,有助于提高精子功能参数。     

牛精子体外获能的研究进展

文章从精子体外获能的分子机制和体外获能的影响因素等两个方面对牛精子体外获能的发展现状作了比较全面的概括.同时指出了各种处理精子方法的优缺点.并指出了牛精子体外获能的研究价值和意义.     

长时间现地保存解冻牛细管冻精检测研究

[目的]本文为了对条件差的养牛场(现地)解冻的细管冻精能长时间保存。[方法]做了2方面的实验研究:实验1:建立对解冻后的精子活力和细菌数2个关键检测指标方法的建立研究;实验2:设计冰水混合物及室温2种保存环境在不同时间对解冻后精子活力和菌落数的影响。[结果]表明:在室温保存2h精子活力差异不显著,2h后差异显著;解冻后精子在冰水混合物里保存4h活力和细菌数差异不显著,4h后细菌数增多,活力下降,差异显著。[结论]牛场要将解冻后精液保存在放到有冰袋的水里效果更好。     

SPAG6基因多态性对种公鸡精液品质和性发育相关性状的影响

本研究旨在筛选北京油鸡SPAG6基因的SNPs位点,探讨其与种公鸡精液品质和性发育相关性状之间的关系。选择89只35周龄北京油鸡种公鸡,采用质谱SNP技术进行基因分型,利用Phase软件和Haploview软件进行单倍型分析并构建线性模型,对单个位点、单倍型与精液品质和性发育相关性状进行关联分析。结果表明:SPAG6基因内含子区域共有5个SNPs,其中C29756T和T23041C与精液量、精子活率和精子畸形率显著相关(P0.05);不同单倍型组合与精液量、精子畸形率显著相关(P0.05);H4H4单倍型组合精液量显著高于H2H3和H3H3组合(P0.05),精子畸形率显著低于H2H3和H3H3等组合(P0.05)。综合分析,SPAG6基因是影响鸡精液品质的候选基因;其单个位点SNP突变C29756T、T23041C和H4H4单倍型组合可作为高精液品质鸡群选择的分子标记。     

一株牦牛源G6P[11]型牛轮状病毒的分离鉴定及部分基因的序列分析

本研究的目的是分离、鉴定牦牛源牛轮状病毒(bovine rotavirus, BRV)。将经RT-PCR检测BRV阳性的牦牛腹泻粪便样本接种MA-104细胞,进行病毒分离和鉴定,并对其VP4、VP6和VP7完整基因进行测序,分析其分子特征。结果显示:病毒盲传3代后出现细胞病变,至第7代后出现细胞病变的时间稳定,经蚀斑纯化后测得病毒滴度为10^8.39TCID₅₀·mL^-1。分离株经RT-PCR、间接免疫荧光和电镜观察证实为BRV,命名为HY-1株;扩增HY-1株VP4、VP6和VP7完整基因序列,分析表明HY-1株为G6P[11]I2型;系统发育树显示,HY-1株VP4、VP6和VP7节段分别与中国牛源DQ-75株和印度牛源M-1和RUBV319株遗传演化关系最近,可能为重配毒株。与国内的G6型和P[11]型BRV毒株相比,HY-1株的VP4和VP7蛋白重要氨基酸位点变化较大。成功分离得到一株牦牛源BRV,基因型为G6P[11]型,为我国首次报道。     

基因表达差异对牛胚胎发育潜能的影响

随着牛胚胎体外生产(IVP)技术的不断成熟,体外胚胎生产在一些国家已进入商业化运营阶段.但与体内胚胎相比其移植受体妊娠率、产犊率及胎儿的后天发育能力均较差.因此,开发一种既可靠又实用的检测胚胎发育潜能的技术显得尤为重要.应用实时荧光定量PCR技术检测早期胚胎基因表达,通过分析mRNA的表达丰度来评价卵母细胞成熟情况和胚...     

不同温度对马鹿精子活力的影响

为优选马鹿精子在流式分选前保存的方法,对6头种用马鹿麻醉电刺激采精,用改良的TRIS液稀释至精子含量为109个/mL,均分成两份,一份降温到19℃并保存18 h,另一份降温至0℃,在该温度下保存16 h,每隔2 h检测精子活率。结果表明:4 h内19℃保存条件下精子活率显著高于在0℃的,而4 h以后,在0℃保存条件下精子活率显著高于19℃的。