还原型谷胱甘肽对氟中毒小鼠附睾的影响

试验旨在研究还原型谷胱甘肽（reduced glutathione,GSH）对氟中毒小鼠附睾的影响。将50只3周龄ICR雄性小鼠随机分为5组,分别为对照组和4组染氟组。对照组饮用蒸馏水,染氟组分别供给含100 mg/L NaF的蒸馏水,自由饮水30 d。之后在染氟组中选择3组每日分别灌胃200、400和800 mg/（kg·只）GSH,同时各组小鼠再自由饮含氟水30 d。试验结束后,摘取小鼠附睾进行活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）、GSH含量及谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）、谷胱甘肽硫转移酶（GSTs）和谷胱甘肽还原酶（GR）活性检测,同时制作石蜡切片,HE染色后进行组织形态结构分析。结果显示,与对照组相比,100 mg/L NaF组精子密度、精子活力、GSH含量、GPx和GR活性均显著下降（P<0.05）,而GSH添加组较100 mg/L NaF组均有所升高;100 mg/L NaF组精子畸形率、ROS和MDA含量较对照组均显著升高（P<0.05）,而GSH添加组较100 mg/L NaF组均降低,其中800 mg/kg GSH组效果明显。与对照组相比,100 mg/L NaF组附睾头、附睾体及附睾尾管腔厚度升高,管腔内精子数量下降;GSH添加组附睾头、附睾体及附睾尾的管腔厚度与管腔内精子数量都有所恢复,其中800 mg/kg GSH组效果较好。综上所述,添加GSH后氟中毒小鼠谷胱甘肽抗氧化系统酶活性有所升高,附睾组织形态结构一定程度上有所恢复,对附睾有一定的改善作用。     

还原型谷胱甘肽对氟中毒小鼠附睾的影响

试验旨在研究还原型谷胱甘肽(reduced glutathione,GSH)对氟中毒小鼠附睾的影响。将50只3周龄ICR雄性小鼠随机分为5组,分别为对照组和4组染氟组。对照组饮用蒸馏水,染氟组分别供给含100mg/L NaF的蒸馏水,自由饮水30d。之后在染氟组中选择3组每日分别灌胃200、400和800mg/(kg·只)GSH,同时各组小鼠再自由饮含氟水30d。试验结束后,摘取小鼠附睾进行活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、GSH含量及谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、谷胱甘肽硫转移酶(GSTs)和谷胱甘肽还原酶(GR)活性检测,同时制作石蜡切片,HE染色后进行组织形态结构分析。结果显示,与对照组相比,100mg/L NaF组精子密度、精子活力、GSH含量、GPx和GR活性均显著下降(P0.05),而GSH添加组较100 mg/L NaF组均有所升高;100 mg/L NaF组精子畸形率、ROS和MDA含量较对照组均显著升高(P0.05),而GSH添加组较100mg/L NaF组均降低,其中800mg/kg GSH组效果明显。与对照组相比,100mg/L NaF组附睾头、附睾体及附睾尾管腔厚度升高,管腔内精子数量下降;GSH添加组附睾头、附睾体及附睾尾的管腔厚度与管腔内精子数量都有所恢复,其中800mg/kg GSH组效果较好。综上所述,添加GSH后氟中毒小鼠谷胱甘肽抗氧化系统酶活性有所升高,附睾组织形态结构一定程度上有所恢复,对附睾有一定的改善作用。     

还原型谷胱甘肽对氟中毒小鼠睾丸的影响

研究不同剂量还原型谷胱甘肽(GSH)对氟中毒小鼠睾丸的影响。将50只3周龄ICR雄性小鼠随机分为5组,其中1组为对照组,其余4组为高氟组。对照组给予蒸馏水,染氟组给含100mg/L NaF的蒸馏水,自由饮用30d。在染氟组中选取3组分成100mg/L NaF+200mg/kg GSH组、100mg/L NaF+400mg/kg GSH组和100mg/L NaF+800mg/kg GSH组,这3组小鼠每只每日分别以200、400、800mg/kg GSH的剂量进行灌胃,同时这5组小鼠再自由饮含氟水30d。饲养结束后,摘取小鼠睾丸进行活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、GSH含量及谷胱甘肽过氧化氢酶(GPx)、谷胱甘肽硫转移酶(GSTs)、谷胱甘肽还原酶(GR)的活性检测;制作石蜡切片,HE染色进行组织形态结构分析。结果显示,与对照组相比,100mg/L NaF组ROS和MDA含量显著升高,GSTs和GR活性显著降低;与100mg/L NaF组相比,添加GSH组100mg/L NaF+800mg/kg GSH组GR活性显著升高。与对照组相比,100mg/L NaF组曲细精管结构稀疏,细胞壁细胞层厚度变小,各级生精细胞排列紊乱,还有部分生精细胞脱落,管腔半径变大且管腔中央精子数量明显减少;随着GSH浓度的增加,100mg/L NaF+800mg/kg GSH组得到最大程度的恢复。添加GSH后氟中毒小鼠谷胱甘肽抗氧化系统酶活性有所升高,睾丸组织形态结构一定程度上有所恢复,对睾丸功能有一定的改善作用。     

牛磺鹅去氧胆酸对小鼠脾脏中白介素-2基因表达的影响

探讨牛磺鹅去氧胆酸（taurochenodeoxycholic acid, TCDCA）的抗炎和免疫调节作用机理。采用实时定量RT-PCR技术检测正常小鼠和免疫抑制模型小鼠脾脏内白介素-2（IL-2）基因mRNA水平表达量的变化。高剂量TCDCA组（0.2 g/kg体重）和低剂量TCDCA组（0.1 g/kg体重）小鼠脾脏组织内IL-2基因mRNA水平的表达量极显著地高于蒸馏水组（P<0.01）;免疫抑制模型高剂量TCDCA和低剂量TCDCA组的小鼠脾脏组织内IL-2基因mRNA水平的表达量均极显著（P<0.01）高于免疫抑制模型,且免疫抑制模型低剂量TCDCA组显著（P<0.05）高于蒸馏水组。TCDCA的抗炎和免疫调节作用与其提高IL-2基因mRNA水平的表达量有关。     

氟对雄性小鼠生长发育及性腺中氟含量的影响

本试验旨在研究氟对性成熟期雄性小鼠生长发育及性腺中氟含量的影响。将40只健康昆明雄性小鼠随机分为4组,即低、中、高3个染氟组和对照组,其中染氟组分别饮水摄入氟化钠30、70和150 mg/L,对照组饮用蒸馏水,染氟期间,观察动物的一般状况,每周记录小鼠体重,49 d后,收集血液、股骨、睾丸、附睾和精囊腺,测定其氟含量。与对照组相比,各染氟组体重均无显著差异(P＞0.05),高氟组小鼠体增重显著低于对照组(P＜0.05);各染氟组股骨氟含量均显著高于对照组(P＜0.05),睾丸和附睾中氟含量随摄氟剂量的增加呈剂量依赖性,且高氟组显著升高(P＜0.05),血清与精囊腺中氟含量与对照组相比无显著差异(P＞0.05)。结果表明,高氟对性成熟期雄性小鼠生长发育有抑制作用,且突破了血睾屏障和血-附睾屏障进而对生殖系统产生影响。     

围产期氟摄入对子代小鼠肝功能的影响

为研究围产期氟摄入对子代小鼠肝脏功能的影响，试验将48只怀孕昆明小鼠随机分成4组饲养。饲养期间饮水如下：对照组（饮用蒸馏水），低氟组（氟化钠浓度为25 mg/L的蒸馏水），中氟组（氟化钠浓度为50 mg/L的蒸馏水），高氟组（氟化钠浓度为100 mg/L的蒸馏水）。母鼠分娩21 d后，每组选取雄性仔鼠6只，断颈处死，采血，摘取肝脏。通过HE染色观察肝组织结构，ELISA法检测血清中天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）的含量。结果表明，与对照组相比，低氟组局部区域肝细胞坏死，肝窦有充血肿胀且空腔变大，胞浆结构疏松；中氟组和高氟组肝细胞局部坏死、细胞核溶解，肝窦叶间静脉淤血，细胞排列紊乱；中氟组和高氟组血清AST、ALT极显著升高（P<0.01）。说明围产期氟摄入可造成子代小鼠肝脏功能损伤。     

母鼠围产期氟暴露对仔鼠肾脏病理变化的研究

本文以昆明小鼠建立动物模型,按照雌∶雄=2∶1将小鼠随机分为四组,分别为对照组、低氟组（含25mg/L NaF去离子水）、中氟组（含50mg/L NaF去离子水）、高氟组（含100mg/L NaF去离子水）,在围产期经水攻毒,待小鼠断奶后处死,摘取肾脏做石蜡组织切片,HE染色后观察肾脏的病理变化.研究结果表明：仔鼠接受氟暴露后,肾小球出血,肾小管上皮细胞水肿,排列紊乱,核固缩,并且随着染氟剂量的增加,病变程度也逐渐加重.     

聚乙二醇修饰猪胰高血糖素样肽-2对试验性结肠炎小鼠肠道紧密连接蛋白和炎性因子基因表达的影响

本试验旨在研究聚乙二醇(PEG)修饰猪胰高血糖素样肽-2(pGLP-2)对结肠炎小鼠肠道紧密连接蛋白和炎性因子基因表达的影响.试验选取24只BALB/C小鼠,随机分为4组,葡聚糖硫酸钠(DSS)组小鼠饮用3％ DSS建立小鼠结肠炎模型,DSS +pGLP-2组和DSS+ PEG-pGLP-2组饮用3％ DSS且在试验第8天腹腔分别注射pGLP-2和PEG-pGLP-2,饮水组小鼠正常饮水.试验期10 d.结果表明:与饮水组相比,DSS组小鼠结肠紧密连接闭锁小带基因(ZO-1)的mRNA相对表达量极显著降低(P＜0.01);与DSS组相比,注射pGLP-2对ZO-1的mRNA相对表达量没有改善(P＞0.05),而注射PEG-pGLP-2可极显著增加ZO-1的mRNA相对表达量(P＜0.01).与饮水组相比,DSS组小鼠结肠白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)和干扰素-γ基因(INF-γ)的mRNA相对表达量极显著增加(P＜0.01);与DSS组相比,注射pGLP-2和PEG-pGLP-2可极显著降低IL-6、IL-10和IFN-γ的mRNA相对表达量(P＜0.01).结果提示,PEG-pGLP-2通过增加肠道紧密连接蛋白的表达、降低结肠炎小鼠炎性细胞因子的表达抑制其炎性病变,且作用效果优于pGLP-2.     

氟对小鼠附睾中成熟精子超微结构的影响

本试验探讨了氟对小鼠附睾中成熟精子超微结构的影响,为氟的生殖毒性研究与检测提供依据。选取8周龄性成熟雄性昆明小鼠20只,随机分为4组,对照组小鼠饮用蒸馏水,低、中和高氟组小鼠分别饮用含25、50和100 mg/L氟化钠的蒸馏水,于45 d后断颈处死小鼠,取小鼠附睾尾,经2.5%戊二醛固定后,采用透射电镜观察小鼠附睾中成熟精子的超微结构变化。与对照组相比,低氟组小鼠精子头部质膜断裂,部分脱落,个别线粒体肿胀、形态模糊;中氟组精子头部质膜脱落,顶体部分缺失,线粒体形状不规则,嵴间腔扩大;高氟组精子头部质膜脱落,线粒体排列不规则,出现空泡化,嵴结构模糊。结果表明,氟暴露小鼠附睾中成熟精子头、尾部中段均有不同程度的结构改变,尤以线粒体出现较明显的异常,且氟浓度越高,精子超微结构损伤越严重。     

氟中毒对小鼠肾脏ROS、MDA和GSH含量的影响

为了研究氟中毒对小鼠肾脏活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)和还原型谷胱甘肽(GSH)含量的影响,并研究添加GSH后是否有缓解作用,试验建立氟化钠(NaF)+GSH模型,将50只小鼠分为对照组、100 mg/L NaF组、100 mg/L NaF+200 mg/kg GSH组、100 mg/L NaF+400 mg/kg GSH组和100 mg/L Na F+800 mg/kg GSH组,饲养结束后断颈处死小鼠,采集肾脏测定ROS、MDA和GSH含量。结果表明:与对照组比较,100 mg/L Na F可极显著增加肾脏MDA含量,降低GSH含量(P 0. 01);加入GSH后,与100 mg/L NaF组比较,100 mg/L NaF+800 mg/kg GSH组的GSH含量显著增多(P0. 05);而对于ROS,氟摄入和添加GSH均未发现明显变化(P0. 05)。说明添加GSH可以缓解氟中毒引起的肾脏损伤。     

Effects of Sodium Fluoride on the Morphological Structure of the Epididymis and the Expression of Tight Junction Genes

The purpose of this study was to examine the effects of fluoride on epididymal morphological structure and mRNA expression of tight junction genes.60 healthy male mice were divided into four groups randomly, including control group (distilled water) and 25,50,100 mg NaF/L groups, respectively. After 60 days, the thighbones were collected and fluoride contents were determined by fluorine ion selective electrode method. Paraffin slides of right epididymis with HE stain were produced to evaluate epididymal morphological structure under light microscope. The left epididymis were collected to isolate total RNA and detect the mRNA expression of tight junction genes by qRT-PCR. The results showed that the fluoride contents of thighbones increased in a dose-dependent manner, and were extremely significantly higher in 50 and 100 mg/L groups than those in control group (P<0.01).NaF extremely significantly increased the thickness of cauda epididymal pipe wall in fluoride groups (P<0.01) and the Claudin-2 mRNA expressions in fluoride groups were extremely significantly decreased (P<0.01) and the ZO-1 mRNA expression in 100 mg/L group was significantly decreased (P<0.05) as compared with control group. In conclusion, excessive NaF ingestion adversely affected epididymal morphological structure and mRNA expressions of Claudin-2 and>ZO-1,which might contribute to the damage of blood-epididymal barrier.     

黄芩苷对脂多糖诱导后仔猪的血管紧密连接蛋白表达量和MLCK-MLC的影响

本研究利用脂多糖（LPS）诱导建立仔猪免疫损伤模型，研究黄芩苷对LPS诱导的仔猪血管紧密连接蛋白表达量和MLCK-MLC信号通路变化的影响，并探讨其保护机制。试验选取42头健康仔猪，分为空白对照组（A组）、LPS模型组（B组）、LPS+丙酮酸乙酯处理组（C组）、LPS+氟尼辛葡甲胺处理组（D）和LPS+黄芩苷处理组（剂量分别为25、50和100 mg/kg，E、F、G组）。饲喂7 d后，攻毒前0.5 h进行药物处理，处理组及模型组腹腔注射LPS，空白对照组注射等量生理盐水，LPS诱导6 h后再次给药。试验1 d后，采集主动脉血管样品2份，通过免疫组化及免疫荧光观察血管中紧密连接蛋白（闭锁小带蛋白-1（ZO-1）、密封蛋白-1（Claudin-1）和闭合蛋白（Occludin））的表达变化；Western blotting法测定血管MLCK-MLC信号通路相关蛋白（肌球蛋白轻链激酶（MLCK）、肌球蛋白轻链2（MLC2）和磷酸化肌球蛋白轻链2（p-MLC2））的表达量。结果表明，LPS诱导后，仔猪血管中ZO-1、Claudin-1和Occludin蛋白表达量均极显著降低（P<0.01），黄芩苷处理能明显提高仔猪血管紧密连接蛋白的表达量。LPS模型组MLCK和p-MLC2蛋白表达量均极显著升高（P<0.01），黄芩苷能显著下调MLCK和p-MLC2表达量（P<0.05），各组间MLC2表达量差异不显著（P>0.05）。综上所述，LPS能引起仔猪的血管损伤，激活MLCK-MLC信号通路，影响紧密连接蛋白表达量及功能，黄芩苷对LPS诱导的仔猪血管紧密连接损伤具有保护作用。本试验结果为黄芩苷用于治疗猪的炎性血管损伤提供了科学依据。     

胰高血糖素样肽-2对断奶仔猪肠上皮紧密连接蛋白相关基因表达的影响

本文旨在研究胰高血糖素样肽-2(GLP-2)对离体培养的断奶仔猪空肠上皮紧密连接蛋白相关基因表达的影响,探讨GLP-2调节肠道黏膜屏障的可能机制。将断奶仔猪空肠组织块置于含0、1×10-8、1×10-7mol/L的GLP-2的细胞培养液中进行培养,考察不同GLP-2添加水平对断奶仔猪空肠上皮丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路细胞外调节蛋白激酶丝裂原活化蛋白激酶激酶1/2(MEK1/2)、p90核糖体S6蛋白激酶(p90RSK)以及紧密连接蛋白ZO-1、Oc-cludin、Claudin-1基因表达的影响,待确定出GLP-2能有效促进紧密连接蛋白相关基因表达的剂量后,再向培养液中添加MEK1/2的特异性阻断剂U0126,考察阻断MAPK经典通路后紧密连接蛋白ZO-1、Occludin、Claudin-1的基因表达的变化。结果表明,与对照组相比,将空肠组织块置于含1×10-7和1×10-8mol/L GLP-2的培养液中培养72 h均能显著促进MEK1/2、p90RSK以及紧密连接蛋白ZO-1、Occludin、Claudin-1的基因mRNA相对表达量(P<0.05),除ZO-1的基因之外,上述各蛋白的基因mRNA相对表达量还随着GLP-2浓度的增高而升高(P<0.05);向1×10-7mol/L的GLP-2组添加U0126阻断p90RSK、ERK1/2的基因表达后,紧密连接蛋白ZO-1、Occludin、Claudin-1的基因mRNA相对表达量也显著下降(P<0.05)。由此可知,GLP-2能够促进断奶仔猪空肠上皮紧密连接蛋白ZO-1、Occludin、Claudin-1的基因表达,而MAPK通路可能是GLP-2调控肠道紧密连接蛋白基因表达的重要信号通路之一。     

腹水综合征肉鸡空肠黏膜组织结构及相关基因表达分析

试验旨在研究肉鸡腹水综合征发生发展过程中空肠核因子κB （NF-κB）及紧密连接蛋白（闭合蛋白（occludin）、紧密连接蛋白-1（claudin-1）和胞质紧密黏连蛋白1（zonula occluden 1,ZO-1）） mRNA相对表达量,以及绒毛长度、隐窝深度和绒隐比的变化,为肉鸡腹水综合征的防治提供理论依据。选取40羽1日龄罗斯肉鸡常规饲养7 d后,随机分为对照组和模型组（饲料添加3%猪油和4%鱼粉,饮水添加0.12% NaCl,9~11℃低温饲养）,35日龄检测体重,并取心脏组织测腹水心脏指数,取空肠组织以HE染色切片测量绒毛长度和隐窝深度,实时荧光定量PCR检测空肠NF-κB和紧密连接蛋白的基因表达量。结果表明,与对照组相比,模型组肉鸡体重极显著下降（P<0.01）,腹水心脏指数极显著升高（P<0.01）,空肠绒毛长度、绒隐比极显著下降（P<0.01）,隐窝深度极显著升高（P<0.01）,NF-κB mRNA相对表达量极显著升高（P<0.01）,occludin、claudin-1和ZO-1 mRNA相对表达量极显著下降（P<0.01）。表明肠道黏膜结构与功能异常及肠通透性增高促进了肉鸡腹水综合征的发生发展。     

黄芪多糖对肠炎雏鸡小肠黏膜损伤的保护作用

【目的】探究黄芪多糖(Astragalus polysaccharide, APS)对雏鸡肠道形态和局部黏膜免疫的影响,阐明APS减轻肠炎雏鸡肠黏膜损伤的作用机制。【方法】在构建LPS诱导肠炎模型试验中,选取15只14日龄SPF雏鸡随机分为3组：对照组(Con)、低剂量脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)模型组(D_L)和高剂量脂多糖模型组(D_H),每组5只。对照组灌喂生理盐水,D_L和D_H组分别灌喂1和2 mg/kg BW LPS,连续处理3 d,取小肠组织,采用HE染色法观察小肠病理变化,采用实时荧光定量PCR检测白介素-1β(interleukin 1β,IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor α,TNF-α)mRNA表达量,筛选构建肠炎模型的最佳LPS剂量。在APS对肠黏膜损伤的保护试验中,将20只7日龄雏鸡分为4组：对照组(C)、脂多糖炎症组(L)、黄芪多糖组(A)和黄芪多糖抑制炎症组(A+L),每组5只。A和A+L组从7日龄到试验结束每...     

植物精油和柠檬酸复合物对肉鸡肠道屏障功能及炎症反应的影响

本试验通过研究饲粮中添加不同水平植物精油和柠檬酸复合物对肉鸡肠道屏障功能、血清细胞因子含量和关键免疫蛋白基因表达的影响,旨在探索植物精油和柠檬酸复合物在肉鸡生产上的适宜添加剂量。选用1日龄健康科宝肉鸡1 344只,随机分为4组（每组12个重复,每个重复28只鸡）,对照组饲喂基础饲粮,3个试验组（T1、T2、T3）分别饲喂添加0.8、1.0和1.5 kg/t的包被植物精油和柠檬酸复合物试验饲粮,试验期为42 d。试验结束当天,每个重复选取6只接近平均体重的肉鸡翅静脉采血,然后屠宰并取空肠、脾脏、肠系膜淋巴结（MLNs）。分别测定血清中D-乳酸（D-LA）、细胞因子的含量及二胺氧化酶（DAO）活性;并对空肠黏膜紧密连接蛋白以及脾脏和MLNs中Toll样受体（TLRs）的mRNA表达量进行测定。结果表明：与对照组相比,T2组肉鸡血清中D-LA含量和DAO活性均极显著降低（P<0.01）;T3组肉鸡血清中D-LA含量和DAO活性均显著降低（P<0.05）。T2和T3组肉鸡空肠封闭蛋白1（Claudin-1）的mRNA相对表达量均显著升高（P<0.05）,T2组闭合小环蛋白1（ZO-1）的mRNA相对表达量显著升高（P<0.05）。T1组血清中IL-1β含量显著降低（P<0.05）,MLNs中TLR4 mRNA表达量显著降低（P<0.05）;T2组血清中IL-1β含量极显著降低（P<0.01）,IL-2含量显著提高（P<0.05）,脾脏和MLNs中TLR4 mRNA相对表达量极显著或显著降低（P<0.01;P<0.05）;T3组血清中IL-1β含量极显著降低（P<0.01）,TNF-α含量显著降低（P<0.05）,IL-2含量显著升高（P<0.05）,脾脏和MLNs中TLR4 mRNA相对表达量极显著降低（P<0.01）。与T1组相比,T2组血清中D-LA含量和DAO活性均显著降低（P<0.05）,TNF-α含量显著降低（P<0.05）;T3组血清中IL-1β含量显著降低（P<0.05）。综上所述,饲粮中添加植物精油和柠檬酸复合物能够提高肉鸡肠道紧密连接蛋白的表达,降低肠道通透性,下调促炎细胞因子的表达,进而增强肠道屏障功能,缓解机体炎症。根据本试验结果,推荐科宝肉鸡饲粮植物精油和柠檬酸复合物适宜添加量为1.0 kg/t。     

獭兔氟中毒模型的建立及各器官氟含量测定

为研究不同剂量氟化钠对獭兔的影响,试验建立獭兔氟中毒模型并对獭兔血液、骨骼、肝脏、肾脏等器官氟含量进行测定。试验獭兔日龄（30±5） d,体重（1.1±0.2） kg,数量24只,分为3组：对照组、试验Ⅰ组（10 mg/（kg·d）氟化钠组）和试验Ⅱ组（20 mg/（kg·d）氟化钠组）,试验共100 d。结果表明,试验第100天测定的骨骼和牙齿氟含量在各组之间均差异显著（P<0.05）,且骨骼和牙齿的含氟量随时间和摄入氟剂量的增加而递增;肾脏和肝脏氟含量在各组之间均差异不显著（P>0.05）;试验Ⅰ、Ⅱ组间血液氟含量差异不显著（P>0.05）,但都与对照组差异显著（P<0.05）。氟化钠作为氟化物来源可用来建立獭兔自然状态氟中毒症,骨骼和牙齿累积氟能力强,血液、肝脏和肾脏累积氟能力弱。本试验为进一步研究獭兔氟中毒及其防制提供了理论参考。