影响无菌苗体系建立因素的研究进展

综述无菌苗体系建立过程中外植体选择、外植体消毒、内生菌污染控制等关键因素的研究进展,并对存在问题进行探讨。     

加拿大一枝黄花无菌苗培养体系建立方法研究

、4-D浓度的变化对其影响最大,IAA次之;基于对无菌苗生长叶片数这个指标分析可以看出,IAA浓度的变化对其影响最大,NAA 次之.添加6-BA 5.0mg/L、NAA 0.5 mg/L、2、4-D 1.0 mg/L、IAA 0.1mg/L的培养基在36～30℃的变温条件下培养无菌苗表现茎粗壮,叶片较多,生长速率快,可为研究加拿大一枝黄花入侵过程的化学生态机制项目工作提供较好的实验材料.     

应用正交设计建立杜仲无菌苗快速繁育体系

以杜仲种子为材料,采用L9（34）正交设计,快速建立杜仲无菌苗繁育体系.3因素为种子浸泡时间（A）、0.1%HgCl2表面消毒时间（B）和赤霉素（C）;各因素设3水平,A分别为24,36,48h,B分别为6,10,12min,C分别为0,0.4,1.0mg/L.种子接种在MS培养基上,于（25±1）℃、2000lx光照、12h/d培养,40d后统计萌发率.试验结果表明：最优水平组合为A2B2C3,C对试验结果的影响达显著水平（p〈0.05）,C不同水平间差异显著（p〈0.05）.     

应用正交设计建立杜仲无菌苗快速繁育体系

以杜仲种子为材料,采用L9(34)正交设计,快速建立杜仲无菌苗繁育体系.3因素为种子浸泡时间(A)、0.1%HgCl2表面消毒时间(B)和赤霉素(C);各因素设3水平,A分别为24,36,48 h,B分别为6,10,12 min,C分别为0,0.4,1.0 mg/L.种子接种在MS培养基上,于(25±1) ℃、2 000 lx光照、12 h/d培养,40 d后统计萌发率.试验结果表明:最优水平组合为A2B2C3,C对试验结果的影响达显著水平(p＜0.05),C不同水平间差异显著(p＜0.05).     

龟背竹组培再生体系建立

以茎段为外植体,进行龟背竹组培再生技术研究.结果表明,诱导芽分化最佳培养基为1/2MS+BA 2.0 mg.L-1+NAA 0.7 mg.L-1,适宜龟背竹芽增殖的培养基为:1/2MS+BA 1.2mg.L-1+NAA 1.1 mg.L-1+KT 0.3 mg.L-1,增殖系数达4.6;试管苗的生根培养基以1/2MS+NAA 1.0 nag.L-1+0.1 96AC组合生根效果最高,生根率达96%.     

利用无菌苗叶片建立黑果枸杞高效繁殖体系

试验在对单粒黑果枸杞(Lycium ruthenicum Murr.)花青素测定的基础上,以黑果枸杞无菌苗为外植体,利用响应面设计Design-Expert软件就激素浓度及C源组合对诱导响应率、愈伤诱导率及植株形成率的影响进行了研究.结果表明,诱导及愈伤诱导的最佳条件为6-BA 0.92 mg/L、NAA 0.45 m...     

无病毒百合组培种球快速繁殖体系的建立立

以铁炮百合(Lilium Longiflorum)感病种球为材料,对热处理后的种球进行了培养基附加物和移栽基质的优化,建立了无病毒组培种球快速繁殖体系.结果表明:以MS为基本培养基,当附加植物激素N从和KT时能促进子球再生,再生率达86%以上,在0.2mg,LN从和0.4mg/LKT的培养基中平均再生子球数显著增多;附加5 mg/L多效唑培养基能促进子球增大,3 mg/L多效唑有利于子球再分化;活性炭对子球增大无明显影响,但适当浓度的活性炭能提高培养子球的品质;高浓度蔗糖能促进子球增大,但对子球再分化有抑制影响.蛭石:土、珍珠岩以及珍珠岩:土作为基质时,均能达到较高的成活率和株高,但在珍珠岩:土为3:1作为基质移栽组培球,其成活率和生长状况最佳.37℃热处理随着处理天数的增加,处理后培养鳞片的成活率和子球再生率显著下降,但处理20天子球再生率只能达40%左右,但LSV检出率明显低于未处理的种球,脱毒率达95%以上.     

白芨种子萌发形态学观察及组培快繁体系的建立

为了建立白芨的组培快繁体系,在实验室条件下,利用显微镜对白芨种子的萌发过程进行了观察,同时针对白芨无菌种子萌发、丛生芽增殖和壮苗生根各阶段,筛选较适宜的培养基类型、激素种类和含量、添加剂种类和用量。结果表明,白芨种子萌发和原球茎发育被划分为5个阶段,以1/2 MS为基础培养基,添加0.5 mg·L~(-1) 6-BA、0.2 mg·L~(-1)NAA及200 g·L~(-1)土豆泥,萌发率可达83.47%±3.11%;基本培养基中添加10 g·L~(-1)蔗糖、0.5 mg·L~(-1)NAA、75 g·L~(-1)香蕉泥和100 m L·L~(-1)椰子汁,适合白芨幼苗壮苗生根。     

2001杨组培再生体系建立

以2001杨的春季新发嫩枝茎段、叶柄、叶片为外植体,尝试在MS和WPM基本培养基中添加多种组合激素,探索不定芽诱导、丛生芽伸长和生根最优条件,建立组织培养与植株再生系统。结果表明:MS培养基的诱导分化效果比WPM好;在MS+TDZ 0.025 mg·L^-1+6-BA 0.05 mg·L^-1+NAA 0.05 mg·L^-1+蔗糖30.00 g·L^-1的培养基上,不定芽诱导分化效果最好,茎段和叶柄诱导分化率可达90%,叶片诱导分化率 60%;丛生芽转入MS+KT 0.25 mg·L^-1+GA3 1.00 mg·L^-1+果糖30.00 g·L^-1的培养基中茎伸长效果最佳;每个叶片外植体诱导茎伸长的芽平均达6.4个,芽数量最多;不定芽在1/2MS+IAA 0.02 mg·L^-1+IBA 0.02 mg·L^-1+AC 3.00 g·L^-1+蔗糖30.00 g·L^-1培养基上形成的根条数多,生根率达90%。     

铁皮石斛组培体系的建立

铁皮石斛作为一种重要的抗癌抑癌药物,在全民养生的今天越来越多的成为了人们消费的热点。然而,由于野生的铁皮石斛非常稀少而且非常昂贵,不适合大众消费。所以建立一套适合工业化生产的组培体系成为了发展的趋势。以幼嫩的铁皮石斛带节茎段为原材料,1/2MS作为培养基,探究了不同激素浓度及其他因素对铁皮石斛快繁和组培的影响。再以组培出的幼苗为原材料,研究了温度、水质、培养基质及浇水方式等对铁皮石斛炼苗的影响。结果表明,铁皮石斛快繁的最佳激素浓度为6-BA,1.0 mg/L和NAA,1.0 mg/L,及1%的活性炭,诱导率为12.5%;组培的最佳激素浓度为6-BA,1.5 mg/L及NAA,2.0 mg/L或6-BA,0.5 mg/L,NAA,0.5 mg/L和2,4-D,1.5 mg/L,诱导率都在80%以上。铁皮石斛的最优炼苗条件为25℃,光照过的自来水浇灌;最适合的培养基质为水苔+直径约为0.5~1.0cm的树皮。     

菘蓝组培再生体系的建立

以菘蓝(Isatis indigotica)无菌苗的叶片和叶柄为外植体,分别接种到添加不同生长调节剂浓度的MS培养基上,研究不同生长调节剂配比对菘蓝愈伤组织诱导与分化的影响,建立菘蓝组培再生体系。结果表明,叶片是菘蓝愈伤组织形成的最佳外植体,菘蓝愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L,愈伤组织分化的最佳培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L。以1/2MS培养基添加0.1 mg/L NAA可使再生植株的生根率达到92.3%。     

云南龙竹种子无菌苗丛芽诱导培养研究

以云南龙竹种子无菌苗为试验材料,探究不同浓度的细胞分裂素6-BA对其丛芽诱导培养的影响。试验在MS培养基中设置了6-BA 4个浓度梯度的处理,分别为1.0、1.5、2.0、2.5 mg/L。结果表明,云南龙竹种子无菌苗丛芽诱导初代培养较适宜的6-BA浓度为2.0 mg/L。在此培养基中培养40 d后,其芽的增殖倍数可达到4.9倍,苗长势也较好。     

蓬莱松组培无菌体系的建立

为了建立蓬莱松组培无菌体系,比较了不同消毒时间、外植体类型、启动和继代培养基配方等对蓬莱松无菌体系建立的影响。结果表明,外植体宜选用蓬莱松幼嫩的茎段,采用0.1%升汞消毒8 -10min即可;启动培养基配方为MS + 6-BA 0.5mg/L + IBA1.0mg/L + 蔗糖30g/L + 琼脂4.5g/L,其腋芽诱导率可达60%。继代培养基最适配方为MS + 6-BA 0.6mg/L + IBA1.0mg/L + 蔗糖30g/L + 琼脂4.5g/L,启动培养基上诱导出的芽可在该培养基上正常生长,培养90天后,可形成丛生芽。组培无菌体系的建立可为后续蓬莱松组培快繁体系的完善提供前期基础。     

马占相思开放式组培体系的建立

【目的】研究基本培养基和不同质量浓度植物生长调节剂在开放组培条件下对马占相思(Acacia mangium)芽诱导、增殖和生根的影响,为建立马占相思开放式组培体系提供技术支持。【方法】以马占相思含饱满腋芽的带叶茎段作为外植体,研究MS、1/2 MS、1/4 MS和1/8 MS培养基加入不同质量浓度6-BA(0.5,1.0,1.5 mg/L)对马占相思芽诱导的影响;采用L₉(3⁴)正交试验设计,探讨不同质量浓度6-BA (1.5,2.0,2.5 mg/L)、IBA (0.1,0.5,1.0 mg/L)和IAA (0.10,0.25,0.50 mg/L)组合对马占相思芽增殖的影响;同时,研究不同质量浓度IBA (0.5,1.0,1.5, 2.0 mg/L)和NAA (0.1,0.5,1.0 mg/L)组合对马占相思组培苗生根的影响。【结果】马占相思最佳芽诱导培养基为1/8 MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 g/L百菌清,芽诱导率为91.87%;影响马占相思增殖的生长调节剂主次顺序为6-BA>IAA >IBA,最佳增殖培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IBA+0.25 mg/L IAA+0.2 g/L百菌清,增殖倍数为3.38;马占相思最佳生根培养基为2.0 mg/L IBA+1.0 mg/L NAA+0.2 g/L百菌清,生根率为80.00%。【结论】初步建立了马占相思开放式组培技术体系,为马占相思无性系产业化扩繁提供了一种新方法。     

刺榆组培快繁体系建立

通过初步建立刺榆的组培快繁体系,发现6-苄氨基嘌呤(6-BA)、吲哚丁酸(IBA)、硝酸铵3种物质对提高刺榆的平均出芽数均有促进作用,IBA可促进刺榆外植体分化,硝酸铵可提高芽的平均高度,并促使组培苗生长旺盛.刺榆外植体最佳启动培养基为DKW培养基+6-BA0.2mg/L+IBA0.05mg/L+蔗糖20g/L+琼脂6.0g/L,可有效提高平均出芽数.     

海南本地油茶组培体系的建立

以海南本地油茶优良品种热研2号的嫩芽为外植体,开展了油茶组培体系建立的研究。结果表明,促进愈伤组织分化形成的最优条件是以WPM为基本培养基,其他因子组合为6-BA 2.0 mg/L+NAA 1.5 mg/L+Silwet L-77 0.05%;促进发芽及生根的最优条件是以WPM为基本培养基,其他因子组合为6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.8 mg/L+蔗糖3%。     

文冠果组培快繁体系的建立

为了建立高效稳定的文冠果无性快繁体系,以4周苗龄的文冠果实生苗嫩茎为外植体分别进行了外植体的消毒、不定芽诱导和生根诱导试验。结果表明:70%酒精振荡消毒30 s后用0.1%HgCl_2振荡消毒7 min时,消毒效果最佳,茎段染菌率为6.67%,而且茎段无死亡;WPM+6-BA1.0 mg·L~(-1)+IBA1.0 mg·L~(-1)+IAA2.0 mg·L~(-1)最适于芽的诱导,出芽率为94.44%,经生根诱导可产生健壮的根系。本研究对文冠果的规模化快速繁殖有重要的参考意义。     

拂子茅组培再生体系的建立

为建立拂子茅植株再生体系,以茎尖为外植体,对拂子茅花叶灭菌方式以及愈伤组织诱导和植株再生培养条件进行分析与筛选。结果表明:用75%乙醇灭菌30 s,再用0.1%升汞灭菌12 min,灭菌效果最佳,去污染率达到90%;在MS+6-BA 0.2 mg/L+2,4-D 4 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L的培养基上进行愈伤组织诱导,诱导率达33.4%;用MS+6-BA 2mg/L+NAA 0.2 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L培养基诱导不定芽再生,诱导率最高、可达76.9%;用MS基本培养基诱导不定芽生根,生根率达到100%。     

半夏叶片开放式组培体系初步建立

开放式组培较传统组培具有成本低、操作简单的优点,本文以半夏叶片为外植体,以期建立半夏的开放式组培体系.结果 表明,培养基抑菌剂采用0.1 mg/L多菌灵、0.1 mg/L链霉素以及0.1％次氯酸钠的组合,培养基无污染,对外植体影响较小.培养基配方以MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+TDZ 0....     

蝴蝶兰组培再生体系的建立初探

本试验通过对影响蝴蝶兰组织培养中培养基、原球茎诱导及增殖、培养条件、抑制褐变等几个关键因素进行试验比较,建立蝴蝶兰离体培养再生体系。结果表明,H培养基比MS、VW培养基更适合于蝴蝶兰的培养;叶片较根尖易诱导出原球茎;在温度24℃、光照时间为12小时/天的培养条件下利于原球茎的生长;BA2.0mg/L的浓度利于原球茎的增值;适量的活性炭可有效地抑制褐变的产生;BA0.5mg/L、NAA0.1mg/L有利于试管苗生成;NAA1.0mg/L利于试管苗瓶内生根。