小型猪动物模型在医学领域中的研究应用

猪在解剖学和生理学等方面与人极其相似。小型猪作为实验动物模型应用于医学研究领域,其优点是:体型小,饲料消耗低,管理操作方便,特别是经过人工培育的各品系小型猪能够配合试验,应激小,基因纯合度较高,成为理想的动物模型。作者综述了小型猪的国内外品种、品系,及其作为动物模型在心血管系统领域、消化系统领域、皮肤整形领域、外科领域、器官移植领域、口腔系统领域的研究与应用。     

普通级巴马小型猪部分血液学指标的测定

为测定普通级巴马小型猪部分血液学指标,比较其性别间差异,试验选用3月龄～4月龄小型猪,测定其16项血清生化指标、15项血液学指标和3项血凝指标,并根据测定结果对雌、雄小型猪的测定值进行比较.结果表明巴马小型猪的所有检测指标雌雄间差异均不显著(P＞0.05).普通级巴马小型猪的16项血清生化指标、15项血液学指标和3项血...     

巴马小型猪疥螨病的诊断与防治

对新引进的24头巴马小型猪疑似感染的猪疥螨病进行确诊:临床观察可见体表出现红点、龟裂,奇痒;血常规检查结果轻微贫血;猪群在饲喂约2 h后观察,其蹭痒指数为0.46(11/24);显微镜检查发现大量猪疥螨虫体和虫卵,借助于计算机软件系统对其形态特征进行鉴定。用伊维菌素进行体内驱虫,用辛硫磷浇泼溶液进行猪体表和外环境虫体的杀灭,对个别患病严重的猪注射伊维菌素针剂,效果显著;猪舍加强通风与除湿。通过诊断和治疗,确定引进的巴马小型猪患疥螨病。     

巴马小型香猪皮肤比较生物学研究

目的:分析巴马小型香猪皮肤解剖结构,为巴马香猪用于人类创伤修复和药物渗透可行性提供相应参考;方法:运用切片、染色、解剖以及免疫组分以及分子生物学技术对巴马香猪皮肤进行分析,并与人类皮肤研究结果相比较;结果:巴马香猪皮肤的厚度、分层、光镜结构、超微结构以及皮肤胞外基质免疫学反应特效与人类皮肤相似,其真皮的主要胞外基质-I型胶原的高效液相色谱与人类皮肤极为相似;结论:巴马小型香猪的皮肤与人类皮肤组织十分接近,是人类皮肤研究理想的动物模型,同时也可作为人类皮肤良好的创伤修复材料应用于临床治疗中.     

巴马小型猪和贵州小型猪封闭群的遗传结构分析

巴马小型猪(Bama,BM)和贵州小型猪(Guizhou,GZ)是我国自行培育的2个重要的小型猪封闭群,但长期以来对其群体遗传结构状况并不十分清楚。本试验应用本实验室筛选的32个微卫星位点组合对这2个小型猪封闭群进行了遗传结构分析。结果显示:BM封闭群的平均观察等位基因数和有效等位基因数分别是5.750 0和2.572 7,GZ封闭群的相应参数为6.187 5和3.783 7;2个猪群的平均杂合度分别是0.542 8(BM)和0.697 8(GZ),多态信息含量分别是0.546 9(BM)和0.729 6(GZ)。结果表明:GZ猪群的遗传变异程度略高于BM猪群,但它们都是比较好的封闭群群体,符合封闭群小型猪的遗传要求。     

中国巴马小型猪内源性反转录病毒的检测

目的 :对我国特有巴马小型猪内源性反转录病毒 ( porcine endogenous retrovirus,PERV)的存在与 m RNA的表达情况进行检测 ,了解巴马小型猪内源性反转录病毒的携带情况。方法 :根据以往建立的 PCR、RT-PCR检测方法 ,对来自于巴马小型猪外周血淋巴细胞的 DNA和RNA样品进行 PERV核心蛋白基因 ( gag)、多聚酶基因 ( pol)及囊膜基因 ( env)的存在与表达进行检测 ;同时 ,根据目前通用的 env基因分型方法检测 PERV env-A、env-B、env-C的存在与表达。结果 :在 1 2个被检的 DNA样品中均检出了PERV特异性 DNA的存在 ;同样 ,在 1 2个被检的 RNA样品中均有 PERV特异性 RNA的表达 ,且所表达的 PERV均为 A型和 B型 ;其中有9个 DNA样品检测出 PERV-C型的存在 ,所有样品中均未检出 C型 PERV的表达。结论 :检测结果表明 1 2个被检巴马小型猪基因组中存在着内源性反转录病毒序列 ,且能以 m RNA的形式表达 ,这一结果为我国特有小型猪的开发、利用及其病毒安全性评价奠定了基础。     

巴马小型猪在达芬奇机器人手术系统中的麻醉管理

为探讨巴马小型猪在达芬奇机器人微创手术中的麻醉管理策略,以丙泊酚麻醉作诱导,异氟醚维持麻醉的复合麻醉方法对巴马小型猪进行全身麻醉,同时用达芬奇机器人对其分别进行心脏、肺脏、肝脏和胃的微创手术,于术前、术中及术后监测巴马小型猪动脉血气和血流动力学变化。结果各组试验猪均顺利完成手术,手术平均时间(166±34)min,麻醉时间(181±38)min,气胸(气腹)时间(122±33)min,在整个麻醉过程及苏醒过程中,各组试验猪安全平稳,未出现体动表现。由此可见,该麻醉方法可用于达芬奇机器人手术系统,且为人医临床应用中的麻醉管理奠定基础。     

广西巴马小型猪动脉粥样硬化模型的制作

本试验旨在制作广西巴马小型猪动脉粥样硬化模型,初步判断猪发生动脉粥样硬化时的指数值,以期为今后建立相关模型提供依据。试验选取广西巴马小型猪试验组和对照组各10头,通过饲喂高脂高胆固醇饲料建立动脉粥样硬化模型,检测建模过程中血液生化指标,将动脉粥样硬化指数与血管切片作关联分析,初步拟定发生动脉粥样硬化时的指数值。屠宰后血管切片结果显示,试验组有2头广西巴马小型猪发生动脉粥样硬化,对照组均正常。2头广西巴马小型猪的血管切片结果与动脉粥样硬化指数进行关联分析后,初步拟定的动脉粥样硬化指数值在3.8以上,并持续3个月以上。     

实验用巴马小型猪的遗传多样性研究

为了研究屏障环境下小规模保存实验用巴马小型猪的遗传学背景,试验运用19个微卫星基因座,对长期在屏障环境下封闭饲养的同世代、同父本但不同母本的3窝巴马小型猪(BM/HVRI猪)进行分子群体遗传学检测,计算平均等位基因数(Na)、平均观察杂合度(Ho)和平均期望杂合度(He),检验Hardy-Weinberg平衡并进行遗传分化分析。结果表明:该群体的Na、Ho和He分别为3.05±0.71,0.703 7±0.019 2和0.574 6±0.023 1,3窝仔猪的He分别为0.558 3±0.029 3,0.552 0±0.037 3和0.549 2±0.030 8,且差异不显著(P>0.05);经完全枚举法检验,A窝和C窝分别有3个和5个基因座偏离Hardy-Weinberg平衡;经U检验,A窝和C窝分别有4个和6个基因座存在杂合子过剩,仅C窝1个基因座表现出杂合子缺失现象。说明该猪群遗传多样性较低,处于低度杂合状态,窝系之间不存在遗传分化。     

巴马小型猪主要细胞因子的克隆及序列分析

为了丰富广西巴马小型猪细胞因子生物学数据,本试验采取广西巴马小型猪的外周血,分离淋巴细胞,提取总RNA,利用设计的引物进行RT-PCR扩增,将克隆出的与目的基因大小相符的片段回收,再与T载体连接,转化到大肠杆菌DH5α中,筛选阳性克隆,将重组菌测序后提交NCBI,比较克隆序列与已知序列的同源性,并利用软件对克隆序列进行分析。结果表明,已克隆出的巴马小型猪细胞因子IL-2、IL-12、IFN-γ、TNF-α基因序列长度分别为338、377、380、402 bp,测序结果均与目的基因预期估计值吻合。序列分析结果发现与已知的家猪或野猪的相应基因同源性较高,IL-2、IL-12、IFN-γ、TNF-α序列同源性分别为98.9%、99.5%、99.2%、100%。研究巴马小型猪细胞因子基因序列不仅丰富了生物学数据,而且为细胞因子的功能研究提供了依据,也为细胞因子的定量检测奠定了基础。     

Research Progress on Animal Models of Bama Miniature Pigs in the Field of Medicine

Bama miniature pigs, which are local high-quality species of China, have the advantages of genetic stability, ideal hair distribution, microsomatia, prolificacy, low fodder demand, strong disease resistance, and they are similar to human beings in aspects of physiology, anatomical structure, drug metabolism, biochemical indicators, disease mechanism, etc. Bama miniature pigs have been used in the wide fields of medical research, such as cardiovascular system, skin plastic, endocrine and metabolism, digestive system, oral medicine, heterograft, Chinese medicine, anesthesiology, nervous system, etc., and been applied to establish the animal models which are similar to human diseases, such as myocardial ischemia, coronary micro-embolization, atrial septal defect, atherosclerosis, skin injury, transdermal drug, metabolic syndrome, diabetes mellitus and complications, obstructive jaundice, chronic pancreatitis, liver cirrhosis, liver radiofrequency ablation, periodontal tissue inflammation, mandibular defect, heterogeneous organ/cell transplantation, syndrome of Chinese medicine, anesthesia, cerebral ischemia, stent implantation, shock, etc. Bama miniature pigs, as an ideal experimental animal, have broad application prospects in biomedical research.In this article,we mainly summarized the progress of Bama miniature pigs in the field of medicine, to understand the types, construction methods and pathological characteristics of Bama miniature pigs disease models, which contribute to further explore the specific etiology, pathogenesis, complications, prevention and control measures, etc., and laid the scientific foundation for expanding the research scope and improving the medical level.     

广西陆川猪和巴马香猪的分子生物学研究进展

陆川猪和巴马香猪均为产于广西被列入国家级地方品种遗传资源名录的具有优良性能的品种。近年来,深入开展地方品种猪的分子生物学基础研究已成为重点。作者现对广西陆川猪的遗传与繁殖、猪支原体肺炎病原分子致病机制,以及巴马香猪的遗传与繁殖、疾病模型方面的分子生物学研究作一综述。     

巴马香猪杂交后代胴体品质效果分析

本文以纯种巴马香猪、野公猪与巴马香猪的杂交1代猪和大约克夏公猪与巴马香猪的杂交1代猪为研究对象,饲养至8月龄达45 kg左右屠宰,对比分析了不同猪种与巴马香猪的杂交1代商品猪的胴体品质和肉质性状相关指标。结果表明,不同猪种与巴马香猪杂交后代与纯种巴马香猪的屠宰性能相关指标差异不显著（P>0.05）;肉质性状相关指标除眼肌面积存在显著差异（P<0.05）外,其他指标均呈现差异不显著（P>0.05）;大约克夏公猪与巴马香猪杂交1代猪的肉色C值显著低于野公猪与巴马香猪杂交1代猪和纯种巴马香猪（P<0.05）。综合分析发现,采用杂交方式繁殖商品猪,对巴马香猪的胴体品质（如背膘厚）和肉质（眼肌面积）有一定的改良作用。     

巴马香猪精液冷冻保存研究

利用甘油和二甲基亚砜（DMSO）作为冷冻保护剂,以精子存活率为评价指标,研究了冷冻保护剂对香猪精液冷冻保存效果的影响。试验分工、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ4个试验组和1个对照组。以解冻后的精子活力、活率为判断标准,比较了4种冷冻保护液对香猪精液冷冻保存的影响。结果表明,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ组精子活率显著高于Ⅲ组（含5％甘油）（P〈0．05）;试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ组之间差异不显著（P〉0．05）;Ⅰ组精子活率最高,达到53．10％。     

UCP3基因在巴马猪和藏猪脂肪组织中的表达和甲基化分析

为探究解偶联蛋白3（uncoupling protein 3,UCP3）基因在巴马猪和藏猪皮下脂肪组织中的表达和甲基化水平,试验采用实时荧光定量PCR技术检测UCP3基因在巴马猪和藏猪皮下脂肪组织中的mRNA表达水平;针对猪UCP3基因启动子区域（-3 580~+920 bp）,利用在线软件MethPrimer对该区域进行CpG岛预测,并采用亚硫酸氢盐测序法（bisulfite sequencing PCR,BSP）检测其甲基化水平,探究UCP3基因甲基化水平在巴马猪和藏猪中的差异。结果显示,巴马猪皮下脂肪组织UCP3基因表达量显著高于藏猪（P<0.05）;在UCP3基因启动子区预测到3个CpG甲基化岛,分别是CpG island1（-3 171~-2 928 bp）、CpG island2（-154~-2 bp）和CpG island3（+648~+806 bp）,其中CpG island1和CpG island3的甲基化水平在巴马猪和藏猪中差异较小,而藏猪CpG island2的甲基化水平（42.61%）高于巴马猪（24.49%）。本研究绘制了2个猪种CpG island2甲基化水平的黑白点图,其中CpG位点为4、8、9、10、11、12、15,藏猪甲基化频率分别比巴马猪高28.26%、17.39%、26.09%、26.09%、26.09%、23.91%和34.78%。在CpG island2处预测到3个转录因子结合位点（SP2、PPARγ和EGR1）。结果表明,巴马猪和藏猪皮下脂肪组织中UCP3基因mRNA水平的表达差异可能是由于CpG island2的甲基化水平不同所导致,藏猪DNA甲基化水平在一定程度上阻碍了转录因子与启动子调控区域的结合,从而抑制了UCP3基因的表达。     

广西巴马小型猪近交群体的遗传结构分析

本研究以33头广西巴马小型猪为研究对象,利用19个微卫星标记,通过估算其等位基因数(N)、多态信息含量(PIC )和近交系数(F)等参数,对广西巴马小型猪近交群F10~F15世代进行了遗传学检测。试验结果显示,19个微卫星座位上共检测到31个等位基因,其中F10~F15分别具有27、29、28、27、26和25个等位基因,平均每个位点分别仅有1.42、1.53、1.47、1.42、1.37和1.32个等位基因;6个世代群体平均多态信息含量为0.1044。广西巴马小型猪F10~F15世代的平均近交系数分别为0.8070、0.8263、0.8491、0.8710、0.8904、0.9118。结果表明,广西巴马小型猪近交群体的基因多态性低、近交程度高,是一个遗传性稳定的群体。     

硬皮病动物模型及其应用研究进展

硬皮病是一种以组织纤维化、闭塞性血管炎和产生大量自身抗体为特征的结缔组织病,病因及发病机制至今尚未完全明了,尚无理想的治疗药物和方法。该文对建立硬皮病模型动物的选择进行了比较,介绍了应用博来霉素诱导Balb/c小鼠产生硬皮病样病变以及应用V型胶原重塑新西兰兔硬皮病样改变等建立硬皮病模型的方法,对应用这两种动物模型研究硬皮病发病机制和中药临床治疗研究概况进行了综述。     

巴马香猪产活仔数性状全基因组关联分析

为寻找与巴马香猪产活仔数相关的分子标记,试验利用全基因组关联分析（GWAS）定位并筛选了影响产活仔数性状的候选基因,采集297头具有多胎产仔记录的巴马香猪耳组织样品,提取DNA并利用猪50K SNP芯片进行基因分型,分型结果经质控与基因型填充后,使用Tassel软件对巴马香猪产活仔数性状进行全基因组关联分析。结果显示,巴马香猪平均窝产活仔数在1~9胎内随着胎次增加逐渐升高;经质控过滤后共获得32 816个SNPs位点,利用全基因组关联分析共筛选到8个与巴马香猪产活仔数相关的SNPs位点,分别在基因组或染色体水平达到显著;对关联显著SNP位点上下游500 kb内的编码基因进行富集分析,并依据猪繁殖性状相关QTL区域及基因功能,最终筛选到4个基因（CAPZB、MSH3、CITED2和HSD17B7）作为影响巴马香猪产活仔数的候选基因。