3种鸡免疫抑制性疫病对禽流感疫苗免疫效果的影响

以H5N1亚型高致病性禽流感灭活疫苗,对16个规模肉鸡养殖场、11个种禽场、6个放养鸡场,按7日龄首免0.3 mL,40日龄二免0.5 mL进行注射免疫,同时开展禽网状内皮增生症病毒(REV)、白血病病毒(ALV)J亚型和传染性贫血病毒(CAV)3种免疫抑制病血清学调查。结果发现肉鸡场禽流感平均抗体滴度为5.90 log2,REV、ALV-J、CAV血清学阳性率分别为69.8%,20.1%和83.6%;种禽场禽流感平均抗体滴度为6.05 log2,REV、ALV-J、CAV血清学阳性率分别为54.3%,5.7%和82.8%;放养鸡场禽流感平均抗体滴度为6.86 log2,REV、ALV-J、CAV血清学阳性率分别为35.7%,3.6%和83.9%,表明3种免疫抑制病对禽流感抗体水平有协同抑制作用。     

重组禽流感病毒H5+H7亚型三价灭活疫苗(H5 N1Re-11株、Re-12株+H7N9Re-2)对黄羽肉鸡免疫效果抗体监测试验

试验通过对重组禽流感病毒(H5+H7)三价灭活疫苗(H5N1Re-11株+Re-12株+H7N9 H7Re-2株)在慢速型黄羽肉鸡上接种后产生抗体效价值的情况,来评价重组禽流感病毒(H5+H7)三价灭活疫苗(H5N1Re-11株+Re-12株+H7N9 Re-2株)对黄羽肉鸡预防高致病性禽流感疫病的效果。结果表明黄羽肉鸡在15日龄接种重组禽流感病毒(H5+H7)三价灭活疫苗(H5N1Re-11株+Re-12株+H7N9 H7Re2株),45日龄进行二次免疫,75日龄进行三免,产生H5N1Re-11株抗体滴度、H5N1Re-12株抗体滴度、H7N9 Re-2株抗体滴度都较高,从抗体消长规律来看对慢速型黄羽肉鸡出栏前都有很好的保护力。试验在黄羽肉鸡上接种重组禽流感病毒(H5+H7)三价灭活疫苗(H5N1Re-11株+Re-12株+H7N9 H7Re2株)首次免疫后14 d产生抗体有保护力,二免后28日龄抗体滴度达到高峰,对慢速型黄羽肉鸡有很好的保护力。     

商品肉鸡抗体消长规律及免疫程序的探讨

通过对商品肉鸡新城疫(ND)抗体的全程检测发现,ND的免疫程序不尽合理,在3周末抗体滴度仅为2 5左右,出现了一定时期的低抗体区段,对鸡群是不安全的,应加强消毒,采取严格与外界隔离的措施,调整免疫程序,改进免疫状况。禽流感(H9)的母源抗体在两周的时间内基本消失;在免疫23天后,有90%的鸡测不到抗体,抗体的产生较慢。     

免疫程序对肉鸡新城疫·禽流感(H5亚型)HI抗体消长规律的影响

[目的]为制定商品肉鸡新城疫(ND)、禽流感(AI)的免疫程序提供理论依据。[方法]在调查不同规模化养殖场免疫程序的基础上,制定商品肉鸡的免疫程序,分析不同免疫程序下ND和AI(H5亚型)HI抗体消长规律。[结果]1~7日龄商品肉鸡ND和AI的母源抗体均维持在免疫保护临界值之上。用ND疫苗免疫后,鸡群抗体水平不断下降,各免疫组均在24日龄最低。使用ND活疫苗和灭活苗的免疫组中ND抗体滴度比其他免疫组高。非免疫组AI(H5亚型)抗体滴度均随日龄的增加而逐渐下降,而免疫组24日龄后缓慢上升,38日龄达到免疫保护临界值。[结论]禽流感(H5亚型)灭活苗对商品肉鸡的免疫效果较差,应从免疫佐剂、抗原浓缩等方面进行新型商品肉鸡禽流感疫苗研究。     

抗新城疫、禽流感(H5、H9)多价二联卵黄抗体的研制及应用

采用新城疫一禽流感(H9)二联油乳剂灭活苗和禽流感(H5)油苗免疫健康高产蛋鸡制备抗新城疫、禽流感(H5、H9)多价二联卵黄抗体,应用该卵黄抗体开展了鸡新城设和禽流感预防免疫和治疗试验.结果表明,该制剂对新城疫、禽流感预防保护率分别达90%～100%、95%～100%.治愈率分别达75%和80%;在45家规模化肉鸡场推广使用,对防治鸡新城疫、禽流感发挥了良好的作用.     

抗新城疫-禽流感二联卵黄抗体冻干粉剂的制备及应用

采用新城疫-禽流感(H9)二联灭活苗和重组禽流感病毒(H5+H7)二价灭活疫苗(H5N1 Re-8株+H7N9 H7-Re1株)免疫健康蛋鸡,制备新城疫-禽流感(H5、H7、H9)多价二联高免Yolk antibodies against lyophi lized powder卵黄抗体冻干粉剂,应用该抗体开展了新城疫和禽流感预防和治疗试验。结果表明:临床上以饮水或拌料方式添加使用,安全有效,发病初期鸡新城疫和禽流感治愈率均在95%以上、发病中期治愈率为85%以上、发病晚期治疗效果不明显。使用剂量为0.10 g^0.25 g之间。试验表明:新城疫-禽流感(H5、H7、H9)多价二联高免卵黄抗体冻干粉剂对防治ND、AI具有良好的效果。     

重组禽流感病毒H5+H7亚型三价灭活疫苗（H5N1Re-11株、Re-12株+H7N9Re-2）对蛋鸡免疫效果抗体监测以及安全性试验评估

试验通过对重组禽流感病毒(H5+H7)三价灭活疫苗(H5N1Re-11株+Re-12株+H7N9 H7Re2株)在接种蛋鸡后产生抗体效价值的情况,评价重组禽流感病毒(H5+H7)三价灭活疫苗(H5N1Re-11株+Re-12株+H7N9 Re-2株)对蛋鸡预防高致病性禽流感疫病的效果。同时进行安全性试验。结果表明,蛋鸡在15日龄接种重组禽流感病毒(H5+H7)三价灭活疫苗(H5N1Re-11株+Re-12株+H7N9 H7Re2株),45日龄进行二次免疫,75日龄进行三免,产生H5N1Re-11株抗体滴度、H5N1Re-12株抗体滴度、H7N9 Re-2株抗体滴度都较高,从抗体消长规律来看,对产蛋前的蛋鸡都有较好的保护力,疫苗接种后未对鸡群造成应激反应。通过本试验在蛋鸡上接种重组禽流感病毒(H5+H7)三价灭活疫苗(H5N1Re-11株+Re-12株+H7N9 H7Re2株)首次免疫后14 d产生抗体有保护力,二免后14 d抗体滴度达到高峰,对蛋鸡有很好的保护力,为预防蛋鸡高致病性禽流感疫病提供临床依据。     

肉鸡与蛋鸡H5、H7、H9亚型禽流感病毒抗体水平调查

为了解养殖场家禽中H5、H7、H9亚型禽流感病毒抗体水平,通过血清学调查,应用血凝抑制试验(HI)的方法,对四川内江、山东济南、河南鹤壁、江苏扬州4个定点实验观测站负责的养殖场的鸡血液样本进行禽流感病毒抗体分析,其中包含2个肉鸡场和3个蛋鸡场。研究发现蛋鸡场通常免疫了H5、H7、H9(或H5与H9)亚型禽流感疫苗,而肉鸡场只免疫了H9亚型禽流感疫苗;蛋鸡场和肉鸡场都存在免疫禽流感疫苗后抗体水平低和无抗体产生的情况,从而导致免疫不合格或免疫失败。以上结果表明,应加强家禽养殖场对不同亚型禽流感疫苗的免疫以及免疫后的禽流感病毒抗体水平监测,以防免疫失败,从而预防禽流感的发生和流行。     

家禽密切接触人群禽流感和新城疫血清学调查

为了评估家禽密切接触人群感染新城疫和禽流感病毒的风险,分别采集21份规模化养禽场和20份从事禽产品加工的屠宰场工作人员血清样品,采用微量中和试验检测人血清样品中新城疫和禽流感(H5和H9亚型)病毒抗体。结果发现,养禽场工作人员新城疫病毒抗体阳性率为33.3%,禽流感(H5和H9亚型)病毒抗体均为阴性;屠宰场工作人员新城疫病毒抗体阳性率为5%,禽流感(H5和H9亚型)病毒抗体均为阴性。结果表明新城疫病毒能够感染人,而目前国内流行的禽流感病毒感染人群的可能性较小。但是,由于禽流感病毒很容易发生变异和持续进化,有必要对家禽密切接触人群进行血清学监测。     

江苏地区H3亚型禽流感的流行病学调查分析

H3亚型禽流感具有很强的宿主适应性,且发生继发感染或混合感染时危害较大,随着其感染性和毒力不断增强,加强H3亚型禽流感的流行病学调查具有重要的公共卫生学意义。为掌握江苏地区H3亚型禽流感的发生及流行情况提供依据,针对江苏部分地区疑似H3亚型禽流感发病情况,在盐城市和南通市两地各选择1个具有一定规模,且经临床诊断发现疑似H3亚型禽流感发病的蛋鸡养殖场为调查点,对其正常鸡群血清样本的H5、H7、H9、H3亚型禽流感病毒抗体滴度进行检测。结果表明：盐城市调查点正常鸡群的H5、H7、H9亚型禽流感病毒抗体滴度平均值分别为6.9、7.0、7.2,南通市调查点正常鸡群的同类型抗体滴度平均值分别为9.2、9.2、9.0,二者正常鸡群H5、H7、H9亚型禽流感病毒的平均抗体水平较正常。在无疫苗免疫情况下,两个蛋鸡养殖场正常鸡群的H3亚型禽流感病毒抗体滴度平均值分别为4.5、4.3,且变异系数较大,分别为39.9%、46.8%。结合对病死鸡的临床观察及解剖结果表明,两个蛋鸡养殖场可能存在H3亚型禽流感病毒感染并导致蛋鸡发病死亡。     

2013—2016年宁海县畜禽重大传染病免疫状况监测分析

为监测2013—2016年浙江省宁海县畜禽重大传染病免疫状况,按照国家推荐的标准诊断方法对宁海县养殖的猪、牛、羊、鸡、鸭进行重大传染病抗体检测。检测结果显示,2013—2016年宁海县畜禽免疫状况整体良好。这4年:猪O型口蹄疫、猪瘟和猪繁殖与呼吸综合征抗体年均阳性率分别为76.27%、75.84%和79.88%;牛O型、A型和亚Ⅰ型口蹄疫病毒抗体阳性率均>90%;羊O型、亚Ⅰ型口蹄疫抗体年均阳性率分别是65.37%、67.52%,须加强免疫;家禽(鸡和鸭)H7N9亚型禽流感抗体阳性率为0,鸡、鸭的H5N1亚型禽流感抗体年均阳性率分别为98.67%、95.60%;鸡新城疫抗体年均阳性率为62.86%,受季节影响较大,夏季抗体阳性率最低(季平均54.64%),仍须加强免疫。本研究获得的2013—2016年宁海县重大传染病的免疫效果可为国家强制性免疫计划的制定和效果评估提供基础数据。     

某粉壳蛋鸡场禽流感、新城疫免疫抗体检测及禽流感H7亚型病原学调查

禽流感和新城疫是严重危害养禽业发展的疫病,为了解平阳地区某粉壳蛋鸡养殖场禽流感和新城疫免疫效果及禽流感H7亚型病毒感染状况,于2018—2020年每3个月对该规模蛋鸡场进行采样,共采集10个批次的血清样品和鸡喉肛棉拭子样品各329份,并进行血清学和病原学检测。结果显示:禽流感H5亚型10个批次免疫抗体合格率在83%以上,禽流感H7亚型9个批次免疫抗体合格率在83%以上,仅1个批次的合格率低于70%,新城疫10个批次免疫抗体合格率在94%以上;禽流感H7亚型病原学检测结果均为阴性。说明该养殖场禽流感和新城疫的免疫效果良好,无禽流感H7亚型病毒感染的情况。     

黄芪超微粉对肉鸡疫苗抗体效价和生产性能的影响

为研究黄芪超微粉对肉鸡新城疫和禽流感H抗体效价和生产性能的影响,该研究选取1日龄罗斯308肉鸡4500只,随机分为3组,及对照组、试验一组、试验二组分别在基础日粮中添加0, 0.1%和0.4%的黄芪超微粉。结果表明,28和35日龄肉鸡血液中新城疫抗体效价和禽流感H9试验二组显著高于对照组(P<0.05),对照组和试验一组无显著差异(P>0.05)。试验二组成活率显著高于对照组,料肉比显著低于试验一组和对照组(P<0.05)。试验二组肉鸡的欧洲效益指数为391,大于优秀水平370。可见,日粮中添加0.4%的黄芪超微粉能提高肉鸡新城疫和禽流感H抗体效价及生产性能。     

VA5免疫增强剂对鸡新支流三联疫苗免疫效力及肉鸡生产性能的影响

将VA5复方免疫增强剂与市售鸡新城疫–传染性支气管炎–禽流感(H9亚型)三联油乳剂灭活疫苗(以下简称“新支流三联疫苗”)合用免疫黄羽肉鸡,检测免疫后肉鸡的抗体效价、细胞因子及生产性能变化,评价VA5对鸡新支流三联疫苗的免疫增强作用及对肉鸡生产性能的影响。结果表明：黄羽肉鸡免疫含VA5的新支流三联疫苗后,在相同免疫剂量和免疫时间,血清和支气管肺泡冲洗液中针对新城疫病毒(NDV)、传染性支气管炎病毒(IBV)和H9亚型禽流感病毒(AIV(H9))的血凝抑制(HI)抗体效价均显著高于无VA5疫苗组的;泪液及小肠黏液中针对NDV、IBV和AIV(H9)的IgA抗体效价均高于无VA5疫苗组的;血清中IFN–γ和IL–4质量浓度均极显著高于无VA5疫苗组的;肉鸡出栏前,免疫含VA5的新支流三联疫苗组针对NDV和AIV(H9)的HI抗体合格率高于无VA5疫苗组的;添加VA5,提高了肉鸡平均成活率和上市率,同时降低了平均料肉比、呼吸道致病发病率和死淘率,增加了鸡只均质量,只均综合经济效益增幅达11.67%。综上所述,VA5免疫增强剂能提高新支流三联疫苗对黄羽肉鸡的免疫效力,同时提高了生产性能。     

重组禽流感病毒(H5+H7)二价灭活疫苗免疫SPF鸭免疫持续期试验

试验对重组禽流感病毒(H5+H7)二价灭活疫苗免疫SPF鸭后的免疫持续期进行了研究。选用14日龄SPF鸭20只,其中10只鸭的腿部肌肉接种免疫灭活疫苗,剂量为0.5 m L·只-1,另10只不接种的鸭作为对照组。结果表明,免疫后14 d可以产生较高的免疫力,H5N1 Re-8株的抗体效价平均增值为5.6 log2,H7N9 H7-Re-1株的抗体效价平均增值为6.6 log2。到35 d产生的HI抗体效价平均值达到高峰,H5N1 Re-8株的抗体效价平均增值为8.6 log2,H7N9 H7-Re-1株的抗体效价平均增值为9.5 log2。第120天H5N1 Re-8株抗体效价平均值为4 log2,H7N9 H7-Re-1株的抗体效价平均值均为5 log2,为抗体的保护临界值。根据此数据分析,一次免疫的免疫保护期约为120 d。     

高致病性禽流感免疫程序

一、种鸡、蛋鸡免疫雏鸡7～14日龄时,用H5N1亚型禽流感灭活疫苗进行初免,3～4周可再进行1次加强免疫。开产前再用H5N1亚型禽流感灭活疫苗进行强化免疫,以后根据免疫抗体检测结果,每隔4～6个月用H5N1亚型禽流感灭活苗免疫1次。二、商品代肉鸡免疫(推荐程序)7～14日龄时,用H5N1亚型禽流感灭活疫苗免疫1次。三、种鸭、蛋鸭、种鹅、蛋鹅免疫雏鸭或雏鹅14～21日龄时,用H5N1亚型禽流感灭活疫苗进行初免。间隔3～4周,再用H5N1亚型禽流感灭活疫苗进行1次加强免疫。以后根据     

鸡注射外源卵黄抗体后血清抗体衰减规律的研究

通过研究鸡注射卵黄抗体后血清中抗体衰减的规律,为临床利用卵黄抗体治疗疾病提供理论指导。选取母源抗体衰减至近消失的60d龄海兰灰公鸡随机分成对照组和试验组。试验组每只肌注2mL含有新城疫、禽流感H5亚型和H9亚型3种抗体成分的卵黄抗体,对照组注射等量生理盐水。在注射后不同时间检测血清中3种抗体滴度的变化。结果显示试验组新城疫抗体在1～8d均极显著高于对照组(P<0.01);试验组禽流感H5亚型抗体滴度在1～11d极显著高于对照组(P<0.01),注射抗体组禽流感H9亚型抗体滴度在1～14d极显著高于对照组(P<0.01)。注射卵黄抗体后1d血清抗体即显著升高,5～6d内抗体效价维持较高水平,然后逐步衰减。试验表明肌注卵黄抗体能够极显著提高鸡血清抗体滴度,注射后5d内抗体维持较高水平,半衰期大约为5d,之后随时间推移抗体滴度逐渐降低。证明肌注卵黄抗体治疗疾病具有起效快作用可靠的优点,值得临床推广应用。     

吉林市部分地区绿壳蛋鸡新城疫和禽流感抗体检测与分析

本试验从25个绿壳蛋鸡场进行样本的采集,每个鸡场随机采集24枚鸡蛋,总计采集600份样本,通过HA-HI试验方法进行新城疫和禽流感抗体的检测,结果显示,所检测的25个养殖场中,新城疫(ND)的抗体效价合格率为80%(20/25);禽流感(AI)H9亚型的抗体效价合格率为68%(16/25),H7亚型的抗体效价合格率为52%(13/25),H5Re-11和H5Re-12亚型的抗体效价合格率都较低,说明本地区的绿壳蛋鸡新城疫的免疫情况较好,而禽流感的免疫情况不理想。     

不同禽流感疫苗免疫蛋鸡后抗体效价变化和消长规律研究

应用H5、H9禽流感灭活油乳剂苗,按不同方案免疫蛋鸡,应用进口ELISA诊断试剂盒监测免疫后蛋鸡的禽流感抗体水平.结果发现,蛋鸡对H5亚型禽流感疫苗免疫应答较强,免疫后30 d抗体水平即达峰值,高滴度抗体持续3个月,首免后7 d加强免疫组抗体水平更高,持续时间更长.相应禽流感疫苗再次免疫后,H5亚型疫苗组抗体水平升高更快,免疫有效期达150 d左右;蛋鸡对H9亚型禽流感疫苗应答能力较弱,抗体峰值和持续时间也较低,再次免疫后抗体水平未见明显升高.     

H9N2禽流感病毒纳米抗体酵母双杂交文库的构建

【目的】构建H9N2禽流感病毒（AIV）纳米抗体（Nbs）酵母双杂交文库,为后期筛选H9N2 AIV Nbs奠定基础。【方法】以H9亚型禽流感疫苗（F株）免疫双峰驼,当血凝抑制（HI）抗体滴度大于1∶2⁴时,颈静脉采集血液,分离淋巴细胞并提取淋巴细胞总RNA,用反转录试剂盒合成第一链cDNA,再以此为模板,通过巢式PCR扩增Nbs基因片段。将Nbs基因与pGADT7-Rec载体共转至Y187酵母感受态细胞,转化产物涂布SD/-Leu平板,30 ℃倒置培养约4 d,收集平板上的全部菌落,构建H9N2 AIV Nbs酵母双杂交文库,并对文库库容、滴度、重组效率和多样性进行鉴定。【结果】经H9亚型禽流感疫苗连续免疫4次后,双峰驼HI抗体滴度可达1∶2⁹;通过巢式PCR成功扩增出400 bp的Nbs基因。对构建的H9N2AIV Nbs酵母双杂交文库的鉴定表明,其库容为2.4×10⁸,滴度为4.2×10⁹ CFU/mL,插入重组率为95.6%;随机挑取10个克隆测序,结果显示均符合Nbs序列特征,且为独立克隆,表明文库多样性良好。【结论】成功构建了H9N2 AIV Nbs酵母双杂交文库,且文库各项指标均达到了要求。