用光敏生物素标记鸡传染性支气管炎病毒cDNA探针及其应用的研究

应用光敏生物素标记鸡传染性支气管炎病毒ｃＤＮＡ，制备核酸探针、经斑点杂交法和碱性磷酸酶显色后，探针同以ｃＤＮＡ为模板合成的ＰＣＲ产物及其重组子ｐＳＸＩＢＶＳ１均呈现强阳性的蓝色斑点，而与正常尿囊液、新城疫病毒和鸡败血霉形体无杂交。一个初诊为ＩＢ感染的田间病料与探针杂交阳性结果相符合。试验表明该ｃＤＮＡ探针是敏感和特异的检测方法。     

生物素标记犬瘟热病毒DNA探针的制备与纯化

用以选择犬瘟热病毒ＲＮＡ的有关碱基顺序，设计ＤＮＡ探针，并在５＇末端偶关一个氨基连接分子：５×ＡＧＧＧＣＴＣＡ－ＧＧＴＡＧＴＣＣＡＧＣＡＡＴＧ３＇，共２３个碱基和一个氨基连接分子。ＮＨ２－ＤＮＡ探针在ＤＮＡ合成仪上合成。合成产物同生物素酰氨基已酸盐Ｎ－羟琥珀酰亚胺酯反应，反应物经高效硅胶薄层板纯化，得到生物素标记犬温热病毒ＤＮＡ探针。     

光敏生物素标记IgG检测农产品重金属污染

重金属污染的植物体内会产生较高的金属硫蛋白(MT),实验以光敏生物素标记用MT免疫家兔产生的抗体,用碱性磷酸酶标记亲和素,对MT进行免疫印迹检测,方法简单准确,标记的IgG最低检出量为1 ng/mL。通过对天水秦城区不同地域采集到的16种农产品样本进行检测,其检测结果与样本中金属硫蛋白的含量测定结果一致。     

马立克氏病毒光敏生物素核酸探针的刺备及应用

鸡胚成纤维细胞培养ＨＶＴ，蔗糖梯度垫层纯化病毒颗粒，抽提病毒ＤＮＡ，经ＢａｍＨＩ降解，光敏生物标记制备成ＨＶＴＤＡＮ生物素探针，经斑点印迹杂交试验，生物素ＨＶＴＤＮＡ探针具有较高的灵敏性，可检测出３１ｐｇ水平的同源ＤＮＡ序列。     

导入外源DNA的大豆根瘤菌22—10基因工程菌株的构建与分析

通过三亲本杂交,分别将紫云英根瘤菌7635R的基因文库和慢生型大豆根瘤菌22-10的基因文库引入到慢生型大豆根瘤菌22-10中,获得了大量的含有外源DNA片段的转移接合子。以结瘤试验作选择标准,从中筛选到3株具有较高固氮效率的基因工程菌株HN5-1、HN5-2和HN22-2。采用反向杂交,将接合子HN5-2中的外源重组质粒转回到大肠杆菌中,提取质粒作EcoRI酶切。表明pLAFR1质粒载体上携带有大约20 kb大小的DNA片段。实验还证明,在含有从根瘤菌转移而来的pLAFR1质粒的大肠杆菌细胞中,常伴随有辅助性质粒pRK2013的存在,用四环素和卡那霉素两种选择性抗性可淘汰其中的pRK2013质粒而仅保留有来自根瘤菌的pLAFR1重组质粒。     

大豆根瘤菌元素分析的研究

大豆的共生体有3个类群。用新近发展起来的细胞成分N、C分析技术分类大豆根瘤菌发现,快生型大豆根瘤菌的N含量为2.74 - 4.33%,C含量为50.82 - 52.73%,N/C比值＜10;慢生型大豆根瘤菌N含量为5.41 - 9.71%,C含量为43.59 - 50.32%,N/C比值为11.43 - 20.94;超慢型大豆根瘤菌N含量为9.19 - 11.53%,C含量为42.56 - 46.10%,N/C比值为20.56 - 25.46%。3个类群有较大差异。细胞成分N、C含量分析可作为大豆根瘤菌分类上的一个重要指标。     

快生型大豆根瘤菌G+Cmol%测定及与其它根瘤菌之间的DNA同源性

用热变性温度法测定了快生型大豆根瘤菌DNA中G+Cmol%,结果表明其C+Cmol%为58.4-65.6,菌株间差为7%,提示了不同种的存在。以液相复性速率法测定了快生型大豆根瘤菌与其它根瘤菌种之间的DNA同源水平,测定证明它们之间的同源水平很低。快生型大豆根瘤菌与慢生型大豆根瘤菌三个DNA同源组间的同源率分别力15,10和25%,表明其亲缘关系很远。同源水平的测定为进一步研究奠定了基础。     

异羟基洋地黄毒甙元核酸探针对马立克氏病毒DNA的检测

应用异羟基泣地黄毒甙元标记的ＤＮＡ探针，检测了细胞培养物和鸡羽髓中提取的马立克氏病毒核酸。结果发现，异羟基洋地黄毒甙元标记的马立克氏病毒血清Ⅰ型（ＧＡ株）核酸的ＢａｍＨＩ－Ｌ片段探针，只与马立克氏病毒Ⅰ型核酸发生杂交，而不与Ⅱ型（ＳＢ－１）或Ⅲ型（ＨＶＴ）发生杂交。对３６份鸡羽髓病料提取的病毒核酸的杂交检测与琼扩试验相比较，前阳性率为９４．４％。后仅为８６．１％。由此说明，Ⅰ型病毒的核酸探针可     

大豆花叶病毒（SMV）侵染大豆种胚的研究

采用大豆、健株正反交和病、健株自交的方法，以间接ＥＬＩＳＡ检测其后代种胚的带毒率。试验结果表明：♀（Ｓ）×、♀（Ｓ）×♂（Ｈ）两组合子代的种胚毒率较高，在结荚初期均超过６０％；♀（Ｈ）×♂（Ｓ）子代种胚带毒率较低，仅２５％左右；在自交组组合中未检测到病毒。说明胚珠在发育早期受到病毒的侵染可能是种子带毒的主要因素，而带毒的花粉使种胚受到的病毒侵染的作用较小。对大豆花前期病、健株子房组织进行免疫胶体金     

微肥对大豆的增产效应

通过对891钛肥，活力素等微肥对大豆增产效应的研究，明确了各种微肥对大豆的肥效及其经济效益。试验结果表明：891钛肥对大豆的增产效果最好，比CK增产12.9%，经济效益最高，投产比可达1：13.1。活力素、北丰牌液肥及特多收也表现出较好的经济效益。     

硅酸盐菌剂对大豆的增产效应

盆栽及田间试验结果表明,硅酸盐菌剂对土壤钾的释放、大豆对钾的吸收具有一定的促进作用,田间小区试验硅酸盐菌剂２２．５ｋｇ／ｈｍ＾２用量大豆增产效果较好,比不施硅酸盐菌剂增产８．０％,硅酸盐菌剂配合肥料钾增产效果更佳。     

大豆抗胞囊线虫鉴定方法及3号小种的抗性遗传分析

本文利用黄种皮大豆作胞囊线虫抗源和当地感病栽培大豆杂交,分析盆栽鉴定方法及3号小种抗性遗传。结果表明,在高密度起始胞囊情况下,不同大小的盆不影响品种胞囊数表现,小盆便于观察和区分鉴定株的抗性;在当地大豆生育期间连续3次盆栽鉴定,各期品种抗性表现一致,胞囊线虫侵染力相似;后代 F_1抗性表现隐性 F_2,代分离抗性表现为受3对隐性基因控制,此代是盆栽鉴定抗性的重点。     

大豆自花授粉后外源DNA导入技术

以花生为DNA供体,以大豆为DNA受体。在大豆白花授粉后,采用液滴法和注射法导入花生DNA。在受体大豆植株后代中获得了大豆多种变异类型.本文较详细地介绍了大豆自花授粉后外源DNA的导入技术,并提出液滴法和注射法的具体操作细则。     

一种豆奶生产的新工艺

为了寻求一种既能提高豆奶品质又较为简便的豆奶生产工艺；在豆奶生产过程中采用不同磨浆方法和浸泡方法对比试验，结果表明：大豆经０．５％碳酸氢钠浸泡、１２０ｍｇ／Ｌ某物质处理后，磨浆分离，加入６％白砂糖，０．２０％自配复合稳定剂等调配，９０℃预煮５ｍｉｎ，过滤，均质，可得到颜色风味口感俱佳的豆奶，并可简化传统的豆奶生产工艺。