嗜热毛壳菌纤维素酶活力测定及稳定性研究

本试验用绵羊瘤胃液分别处理嗜热毛壳菌纤维素酶和对照酶,对其稳定性进行研究。试验结果表明,经绵羊瘤胃液处理1h和6h后,嗜热毛壳菌纤维素酶酶活力分别为原活力的88.41%和74.04%,而对照酶酶活力分别为原活力的58.30%和46.64%。从整体来说,嗜热毛壳菌纤维素酶在绵羊瘤胃中稳定性优于对照酶。     

嗜热毛壳菌纤维素酶活力测定及稳定性研究

本试验用绵羊瘤胃液分别处理嗜热毛壳菌纤维素酶和对照酶,对其稳定性进行研究。试验结果表明,经绵羊瘤胃液处理1h和6h后,嗜热毛壳菌纤维素酶酶活力分别为原活力的88．41％和74．04%,而对照酶酶活力分别为原活力的58．30％和46．64％。从整体来说,嗜热毛壳菌纤维素酶在绵羊瘤胃中稳定性优于对照酶。     

添加赖氨酸对小尾寒羊瘤胃消化代谢的影响

试验选用5只1.5岁左右装有永久性瘤胃瘘管的小尾寒羊公羊(体重约45 kg),按照5×5拉丁方试验设计(对照组、低尿素对照(等氮)组、低赖氨酸组、高尿素对照(等氮)组、高赖氨酸组),研究添加未经任何处理的市售赖氨酸对成年小尾寒羊瘤胃微生物群落、瘤胃消化代谢和整体消化代谢的影响。赖氨酸盐酸盐添喂量分别为0、4.0和8.0 g/kg日粮(干物质计)。结果表明,绵羊添加4.0和8.0 g/kg赖氨酸盐酸盐日粮,自由采食量分别比对照组增加5.5%(P>0.05)和11.8%(P<0.05),瘤胃细菌总数分别增加18.9%(P<0.01)和23.9%(P<0.01),其中球菌分别增加21.2%(P<0.01)和30.1%(P<0.01),大杆菌数量减少16.7%(P<0.05)和33.3%(P<0.01),瘤胃液总挥发性脂肪酸分别比对照组增加9.6%(P<0.05)和12.2%(P<0.01),其中丁酸分别增加12.8%(P>0.05)和20.2%(P<0.01),有机物表观消化率分别增加6.4%(P>0.05)和10.0%(P<0.05),粗蛋白质表观消化率分别比对照组增加7.0%(P>0.05)和18.3%(P<0.01),氮保留率分别增加46.4%(P>0.05)和110.7%(P<0.01)。然而,添加赖氨酸对绵羊瘤胃原虫和真菌数量、瘤胃液氨态氮浓度均无显著影响(P>0.05)。由本试验得出结论,给成年小尾寒羊添加一定量的未经任何处理的市售赖氨酸,可提高小尾寒羊的日粮自由采食量和消化率,增加氮保留率;可调控瘤胃微生物群落的组成,增加瘤胃细菌总数,主要是瘤胃球菌数量;以上这些添加赖氨酸的作用是添加等氮量尿素所不能完全替代的。     

嗜热毛壳菌纤维素酶对肉兔生长性能和消化性能的影响

24只新西兰肉兔分为4组,每组6只,研究日粮中添加5、10、15g/d·只纤维素酶与不加酶对其生长性能和消化性能的影响。结果表明:添加5、10、15g/d纤维素酶组平均日增重比对照组分别提高7.2%(P<0.01)、14.47%(P<0.01)、19.45%(P<0.01);兔粪中粗蛋白质含量比对照组分别减少了7.68%(P<0.05)、3.80%(P<0.05)、1.62%(P>0.05);中性洗涤纤维(NDF)、酸性洗涤纤维(ADF)的含量较对照组分别降低28.22%(P<0.01)、19.86%(P<0.01)、17.93%(P<0.01)和2.69%(P>0.05)、14.19%(P<0.05)、19.40%(P<0.05);经济效益以添加10g为最好,每千克增重节省成本0.59元。     

异位酸影响反刍动物瘤胃代谢的研究进展

异位酸是异丁酸、2-甲基丁酸、异戊酸和戊酸的总称,是反刍动物瘤胃微生物发酵过程中通过支链氨基酸(缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸和脯氨酸等)进行氧化脱氨基和脱羧基后产生的支链脂肪酸.它是瘤胃纤维分解茵正常生长和活动所需的特殊营养物质,并且对瘤胃微生物发酵起重要作用.     

瘤胃纤维分解菌多纤维素酶体及其类似物的研究进展

反刍动物瘤胃微生物能够有效地降解粗饲料,瘤胃细菌特别是纤维分解菌在此过程发挥了特别重要的作用。近年来的研究表明,只有与饲料颗粒相黏附的细菌才直接负责纤维物质的降解,可见黏附是瘤胃细菌降解纤维物质的关键步骤。多纤维素酶体是某些厌氧细菌和真菌产生的、能使微生物细胞与纤维物质发生黏附并高效降解纤维物质的多酶复合体。本文综述了多纤维素酶体的分子结构、瘤胃中主要纤维分解菌的多纤维素酶体及其类似物等方面的研究进展。     

不同种类纤维素酶对人工瘤胃发酵的影响

本试验瘤胃液来自3只安装永久性瘤胃瘘管的荷斯坦阉公牛，体外人工瘤胃试验按不同纤维素酶的添加量分为6个组。分别是复合纤维素酶组（66．7、200、100mg／kg）和单一纤维素酶组（66．7、200、100mg／kg），人工瘤胃培养96h，测定产气量、瘤胃液PH值、干物质消失率、培养液中的NH3-N、TVFA产量及乙酸、丙酸、丁酸的产量，用以确定人工瘤胃内添加纤维素酶对瘤胃发酵的影响、试验结果表明：从产气量上看，复合纤维素酶100mg／kg组的产气量最大，96h时比对照组多产气23．7％（P〈0．05），产气量最小的是单一纤维素酶66．7mg／kg组，与对照组相比差异不显著（p〉0．05）：从pH值看．96h除复合纤维素酶3组比对照组低0．2，其余各组差异均不显著（P〉0.05））；96h复合纤维素酶100mg／kg组的干物质消失率比对照组高7．57％，其次是复合纤维素酶200mg／kg组比对照组高5．6％；NH3-N含量从0h～24h逐渐下降24h时最低，24h～96hNH3-N含量逐渐上升。12h～96h复合纤维素酶3组的NH3-N浓度在各组中均最高。分别比对照组高0．92、2．74、3、6、4．3mg／100ml，其余各组差异均不显著；96h，复合纤维素酶3的乙酸和TVFA含量最大．比对照组高7．62和9．16mmol／L（p〈0．05）结论：复合纤维素酶效果优于单一纤维素酶，其中复合纤维素酶100mg／kg组试验效果最好。     

一株瘤胃兼性厌氧纤维素酶产生菌的筛选

试验通过选择性培养基初筛、纤维素刚果红培养基鉴别和固体发酵培养复筛,旨在从瘤胃内容物中筛选出一株产纤维素酶活性较高的细菌。结果表明,试验共分离得到19株有纤维降解作用的菌株,其中R2、R3、R4、R5、R7、R14及R197株的降解作用显著,通过刚果红染色及对纤维素酶活、干物质(DM)消失率的测定,最终以R3效果最佳,其透明斑直径/菌落直径为6.27、羧甲基纤维素酶活(CMCase)为5.94 U/g,滤纸糖酶活(FPase)为1.12 U/g、DM消失率达到23.73%。结果提示,筛选出的瘤胃菌中以R3对稻草秸秆的降解作用效果最佳。     

酵母培养物对山羊瘤胃纤维素酶活及挥发性脂肪酸的影响

在高精料日粮条件下,以4头装有永久性瘤胃瘘管的本地山羊为试验动物,采用4×4拉丁方设计,研究酵母培养物(0、20、30、和40g/d)对山羊瘤胃纤维素酶活及挥发性脂肪酸(VFA)的影响。结果表明:日粮中添加酵母培养物有提高瘤胃中性洗涤纤维(NDF)、酸性洗涤纤维(ADF)消失率及羧甲基纤维素酶活、木聚糖酶活的趋势,但差异均不显著(P>0.05)。日粮中添加酵母培养物能够提高瘤胃乙酸、丙酸、丁酸、TVFA浓度及乙酸丙酸比。与对照组相比,早饲后4h时,20g/d处理组乙酸浓度提高22%(P<0.05),TVFA浓度提高21%(P<0.05),30g/d处理组的丙酸浓度提高11%(P>0.05);18h时,30g/d处理组乙酸浓度和TVFA浓度较对照组分别提高32%(P<0.05)和28%(P<0.05)。     

硒在瘤胃内的代谢及其对瘤胃发酵的影响

早在1818年,硒就作为一种矿物元素被发现,但是之后的几十年里一直被视为一种有毒元素,直到1957年硒的生物学作用首次在小鼠中发现之后,其生物学功能才引起重视。动物体内的硒主要以含硒氨基酸(硒半胱氨酸和硒蛋氨酸)的形式结合在硒蛋白(酶)中,并通过硒蛋白(酶)调节动物机体的自由基代谢、抗氧化、免疫、生殖、细胞凋亡和内分泌等功能。反刍动物日粮中的硒和瘤胃微生物代谢之间存在着相互作用,对硒的生物利用效率和瘤胃发酵产生影响,本文将对此进行综述。1瘤胃内硒的代谢1.1瘤胃微生物对硒的代谢作用1.1.1含硒蛋白的合成瘤胃微生物对硒的代谢…     

复方中草药添加剂对南江黄羊瘤胃代谢和细菌数量的影响

对8只10月龄南江黄羊母羊(平均体重30.16 kg),安装永久性瘤胃瘘管。采用对比试验设计,对照组饲喂基础日粮,试验Ⅰ组、试验Ⅱ组和试验Ⅲ组在精料中分别添加1%、2%、3%中草药。采集瘤胃液测定pH值、氨氮浓度和细菌数量。试验结果表明:试羊瘤胃液平均pH值在6.44⁷.10范围内变动。随中草药添加水平的提高,pH值上升(P<0.01)。瘤胃液平均氨氮质量浓度的变化范围为12.737.10范围内变动。随中草药添加水平的提高,pH值上升(P<0.01)。瘤胃液平均氨氮质量浓度的变化范围为12.73³9.84 mg/100mL,随中草药添加水平的提高,氨氮浓度增加(P<0.01)。添加中草药后,瘤胃中乳酸杆菌和淀粉分解菌数量增加,差异显著(P<0.05),但中草药添加水平对细菌数量无显著影响。以上结果说明,复方中草药添加剂可以改善瘤胃发酵功能,并促进乳酸杆菌和淀粉分解菌数量增加。     

不同物候期牧草对放牧绵羊瘤胃发酵指标的影响

本试验旨在研究不同物候期天然牧草中所含的营养成分对放牧绵羊瘤胃内环境的影响。分别在牧草生长的不同时期（绿草期、盛草期和枯草期）选择不同的样方测定其混合牧草的营养成分,同时段选择6只放牧绵羊测定其瘤胃pH,氨态氮（NH₃-N）及挥发性脂肪酸（VFA）含量。结果显示：①牧草中粗蛋白质（CP）含量在绿草期含量最高（13.95%）,显著高于其他阶段（P < 0.05）,而枯草期最低,为5.14%;中性洗涤纤维（NDF）随着牧草的生长不断增加,酸性洗涤纤维（ADF）在绿草期含量最少。②瘤胃内环境参数随着不同物候期牧草中营养成分的变化而变化,瘤胃pH在盛草期显著低于其他阶段（P < 0.05）,NH₃-N含量在枯草期显著低于其他两个阶段（P < 0.05）,VFA含量在枯草期最低,盛草期显著高于绿草期（P < 0.05）。综上所述,放牧绵羊在枯草期由于摄入的CP含量减少,NDF增加,导致消化率降低,不能满足放牧绵羊的营养需要,故在枯草期到绿草期这一阶段应对其进行合理补饲,调控瘤胃发酵,以改善瘤胃内环境,提高其对营养物质的吸收。     

日粮能量水平对湖羊瘤胃发酵特性和微生物组成的影响

本试验旨在探究不同能量水平对湖羊瘤胃发酵特性和微生物组成的影响。选取湖羊公羊48只（体重为（17.77±1.15） kg）随机分为2组：1）对照组（C组）,代谢能ME=8.83 MJ·kg^-1;2）高能组（H组）,ME=10.84 MJ·kg^-1。每组6个重复,每个重复4只羊。试验期105 d,其中预试期15 d,正试期90 d。试验结束后,采集瘤胃液测定瘤胃发酵参数,同时对微生物细菌V3-V4区进行16S rRNA高通量测序以检测瘤胃微生物组成。结果显示：1） H组和C组在瘤胃pH、总挥发性脂肪酸、乙酸、丙酸、异丁酸、丁酸、异戊酸、戊酸及乙丙比、氨态氮和微生物菌体蛋白浓度差异均不显著（P>0.05）;2）物种多样性结果显示,H组的Chao 1、Observed species、PD whole tree和Shannon指数均显著低于C组（P<0.05）;3）物种注释发现,拟杆菌门（Bacteroidetes）和厚壁菌门（Firmicutes）占比最高,但两者的相对丰度在H组和C组间差异均不显著（P>0.05）,H组的瘤胃球菌属（Ruminococcus）和厌氧弧菌属（Anaerovibrio）相对丰度均显著高于C组（P<0.05）。在本试验条件下,提高日粮能量水平对瘤胃发酵特性影响不显著,但是会降低瘤胃微生物的丰富度和均匀度,并改变部分菌属的相对丰度。     

不同酵母培养物对绵羊瘤胃体外发酵参数的影响

为验证不同类型及比例的酵母培养物(YC)对绵羊瘤胃体外发酵参数的影响。采用全因子试验设计,在发酵底物条件下分别添加不同类型及比例的YC,一个对照组、4个试验组,测定体外发酵参数浓度;发现YC-3能极显著降低培养液pH和丙酸浓度,显著增加异丁酸浓度和乙丙比。在体外条件下添加1%、2%YC均能显著增加培养液中乙酸浓度,添加4%YC能极显著降低异戊酸的浓度。YC不同来源和不同水平影响绵羊瘤胃体外发酵pH、丙酸及乙丙比等发酵参数,用于指导畜牧生产实际。     

非纤维性碳水化合物水平对活体外瘤胃发酵和产生共轭亚油酸的影响

在底物粗蛋白质和粗脂肪水平相同的条件下,研究非纤维性碳水化合物(NFC)水平(20%、40%、60%和80%)对活体外瘤胃发酵24h后的发酵参数和发酵液中共轭亚油酸(CLA)浓度的影响。结果表明:底物不同的NFC水平影响活体外瘤胃发酵和CLA的产生。随底物NFC水平的提高,瘤胃微生物的活体外发酵程度提高;同时发酵液中CLA的浓度随底物NFC水平的提高呈线性增加(L,P<0.0001)的变化趋势。     

灌注果寡糖对生长绵羊瘤胃发酵功能的影响

采用营养灌注技术研究了果寡糖对生长绵羊瘤胃发酵功能的影响。试验选取6只安装有永久性瘤胃瘘管的内蒙古半细毛羯羊，随机分为两组，试验组一灌注1．00％果寡糖，试验组二灌注2．00％果寡糖。结果表明：灌注果寡糖可以显著（P〈0．05）降低试羊的瘤胃液相pH和瘤胃内的NH3-N浓度，显著提高（P〈0．05）瘤胃内的VFA含量和MCP含量。两个灌注水平都可以提高生长绵羊的瘤胃发酵功能。但2．00％的灌注水平仅在瘤胃NH3-N浓度的降幅方面比1．00％的灌注水平显著增大（P〈0．05），在对瘤胃液相pH值、VFA含量和MCP含量的影响方面两个灌注水平没有显著差异（P〉0．05）。     

丝兰皂甙对绵羊瘤胃发酵及血液生化指标的影响

选用12只装有永久性瘤胃瘘管的成年雄性东北细毛羊，采用随机区组试验设计，分别饲喂0、100、200、300mg／kg水平丝兰皂甙，研究其对瘤胃发酵及血液生化指标的影响。对试羊采食后的0、2、4、6、8h瘤胃内环境指标进行测定，各组在同一时间点pH无显著差异（P〉0．05），但总体上随着丝兰皂甙添加水平的上升，pH随时间变化有变缓趋势；300mg／kg组较对照组4h和6h乙酸浓度下降15．1％和19．8％，丙酸浓度则提高22．7％和22．9％，差异显著（P〈0．05），各组总挥发性脂肪酸浓度差异不显著（P〉0．05）；100、200、300mg／kg组对氨的抑制率分别为17．17％、29．84％和27．12％，200mg／kg组较对照组差异显著（P〈0．05）；28d后，测定试羊血液生化指标，各组均处正常生理范围内且差异不显著（P〉0．05）。     

不同蛋白源日粮添加乳酸链球菌素对育肥湖羊瘤胃发酵及微生物菌群结构的影响

本试验旨在探究不同蛋白源日粮条件下添加乳酸链球菌素（nisin）对育肥湖羊瘤胃发酵及微生物菌群结构的影响。试验采用2×2因子设计,两因子分别为蛋白源[豆粕（SBM）、干玉米酒精糟及其可溶物（DDGS）]和nisin （添加水平为0或30.5 mg·kg^-1 DM）,两两组合,配制4种等氮等能日粮。选取32只体重（23±2） kg的断奶湖羊公羔,按照随机区组设计,根据体重分为2个区组（低体重组,16只;高体重组,16只）,每个区组的湖羊随机分配到4个组并分别饲喂对应日粮,单栏饲喂。试验预饲期1周,正式期9周,试验期结束时每组从高、低体重区组中各随机选取3只湖羊（共24只）进行屠宰,采集瘤胃内容物,提取微生物基因组DNA,利用Illumina MiSeq测序和Real-time qPCR方法分析瘤胃微生物菌群结构。研究结果表明,除Ruminococcaceae NK4A214 group和Unclassified Bacteroidetes相对丰度外,日粮蛋白源与nisin对其他所有测定指标（瘤胃发酵参数、瘤胃菌群数量、瘤胃细菌多样性及相对丰度等）均不存在交互作用（P>0.05）。日粮添加nisin对所有测定指标均无显著影响（P>0.05）。与饲喂豆粕湖羊相比,饲喂DDGS湖羊瘤胃乙酸、氨态氮浓度及总支链脂肪酸（BCVFA）浓度显著降低（P<0.05）。qPCR结果显示,饲喂不同蛋白源日粮湖羊瘤胃总菌、真菌及甲烷菌数量均无显著差异（P≥0.053）,但相对于饲喂豆粕湖羊而言,饲喂DDGS湖羊瘤胃内原虫和嗜氨梭菌（C.aminophilum）数量显著降低（P<0.05）。Illumina-MiSeq测序结果表明,饲喂DDGS湖羊瘤胃内细菌Chao1指数和ACE指数显著升高（P<0.05）。不同日粮处理组在门水平上的优势菌门均为Bacteroidetes及Firmicutes;在属水平各处理组的主要优势菌属为Prevotella 1、Christensenellaceae R-7 group和Ruminococcaceae NK4A214 group。饲喂不同蛋白源湖羊瘤胃细菌在门水平上并未产生显著影响（P≥0.14）;在属水平上,饲喂DDGS湖羊瘤胃Pseudobutyrivibrio和Roseburia丰度均显著高于饲喂豆粕湖羊（P<0.05）,而Butyrivibrio 2以及Ruminococcaceae UCG-005的相对丰度显著低于饲喂豆粕湖羊（P<0.05）。综上所述,使用DDGS作为日粮蛋白源改变了湖羊瘤胃发酵参数及微生物菌群结构,原虫和C.aminophilum数量的降低可能是导致瘤胃氨态氮浓度显著降低的主要原因;日粮添加30.5 mg·kg^-1 DM的nisin对育肥期湖羊瘤胃发酵参数及微生物菌群结构均无显著影响。     

饲粮中添加复合益生菌对奶牛瘤胃发酵及纤维素酶活的影响

本文旨在研究不同荆量的复合益生菌制剂对荷斯坦奶牛瘤胃发酵及纤维素酶活的影响.选用3头装有永久性瘤胃瘘管,体况相近的荷斯坦奶牛,饲喂不同剂量复合益生菌,分为对照组(0 cfu/d)、低剂量组(0.6×1011 cfu/d)与高剂量组(1.2×1011 cfu/d),采用3×3拉丁方试验设计,试验分为3期,每期18 d.结...     

Effect of Particle Size of Feed on Rumen Fermentation of Sheep Using the Rumen Simulation Technique (Rusitec)

This experiment was aimed to investigate the effects of different particle sizes of feeds on rumen fermentation using the rumen simulation technique (Rusitec). There were two treatments (5 and 0.45 mm) with 4 replicates per group. After 10 days'adaptations,the fermentation parameters were determined for 2 days,and the total gas production,methane production and fermentation parameters were determined. The results showed that the total gas production of 5 nm group was extremely significantly higher than that of 0.45 nm group (P <0.01),while methane production of the two group was no significant difference (P >0.05).The ruminal fluid pH at 6 h,acetic acid at 6 and 9 h, isobutyric acid at 6 h, acetic acid to propionic acid ratio at 12 h,butyric acid at 6 h,total volatile fatty acids at 0,12 h and total nitrogen at 6 and 9 h in 5 mm group were significantly or extremely significantly greater than those in 0.45 mm group (P <0.05;P <0.01). While propionic acid at 12 h and valeric acid at 3,6,9 and 12 h in 5 mm group were significantly or extremely significantly lower than that in 0.45 mm group (P <0.05;P <0.01).Other parameters were not significantly affected by particle size (P >0.05). These results certified that the particle size of feeds in Rusitec did affected the rumen fermentation. Large size improved the gas production,acetic acid to propionic acid ratio,total volatile fatty acids and total nitrogen cotents.