醇化烟叶表面细菌筛选及增香效应研究

为明确烤烟醇化过程中烟叶表面增香微生物对其品质的作用,以6个不同产地的烟叶为试材,通过菌株分离和产酶能力筛选,对筛选出的细菌进行16S rDNA测序分析,将烟丝发酵样进行感官质量评吸、常规化学成分和多酚化合物分析。结果表明,菌株GY99处理样的感官评吸质量提升最为明显,能有效增加烟叶香气和甜感,其处理后的牡丹江、庆阳烟叶总分分别增加了2.26、2.03分,舒适度提升,香气质和香气量分别增加0.44、0.33分,刺激性和杂气降低。本研究筛选出1株可同时产蛋白酶、淀粉酶和纤维素酶的芽孢杆菌属(Bacillus sp.)菌株GY99。同时还筛选到3株可明显改善烟草品质的菌株,分别是芽孢杆菌属(Bacillus sp.)菌株GY96、假单胞菌属(Pseudomonas)菌株GY72和微球菌属(Micrococcus)菌株GY67。     

梨酒酿造酵母的筛选

从梨的自然发酵液中分离得到的酵母,通过一级果汁鉴别平板初筛,得到长势较好的10株菌。再通过试管发酵二级筛选,得到酒精能力较强和产香较好的4株菌,最后通过三角瓶发酵复筛得到发酵能力强的酵母菌株FL-9。该酵母在梨汁中的发酵能力强,产生酒度较高,残糖较低,产香较好,完全可以作为独立的发酵菌株使用。     

菠萝皮渣生产优质高菌体蛋白饲料发酵菌种的筛选及发酵条件的优化

分别以热带假丝酵母、产朊假丝酵母、绿色木霉、黑曲霉为出发菌株对菠萝皮渣生产优质高菌体蛋白饲料进行发酵优良菌种的筛选试验,以发酵产物中的粗蛋白含量为考核指标,筛选出1~2株优势菌株;将筛选出的优势菌株按一定比例混合使用,对菠萝皮渣进行固态发酵生产菌体蛋白饲料,研究了接种量、料液比、温度、发酵时间等对发酵产物理化品质及感官指标的影响。结果表明,绿色木霉和产朊假丝酵母为试验的较优菌种;将绿色木霉与产朊假丝酵母1∶1体积比混合种子液使用对菠萝皮渣进行固态发酵:混合菌种总接种量10%,料液比1∶3,发酵温度30℃,发酵时间96 h为最优发酵条件。此工艺条件下,菠萝皮渣发酵所得的蛋白饲料产物的粗蛋白质含量最高、气味也比较好。     

造纸法再造烟叶储存过程品质变化研究

为研究造纸法再造烟叶储存过程中的品质变化,选择两种再造烟叶产品,分析其在一年储存期内外观颜色、致香成分和感官评吸质量等指标随储存时间的变化规律;选用X-rite Color i5色差仪,测定样品L*、a*、b*值,并计算?E,考察颜色变化,用同时蒸馏萃取方法测定样品中的致香成分,按醛酮类、醇类等六大类进行综合分析,同时按广东中烟工业有限责任公司采用的打分方法对所有样品的感官评吸质量进行评定;结果表明：①两种再造烟叶产品外观颜色ΔE值随储存时间的延长明显升高,致香成分结果呈现“升高-降低-升高-降低”的趋势,感官评吸质量评价结果呈现先上升后下降的趋势;②一年储存期内,再造烟叶在2-8月期间品质较好;本研究成果表明：适宜的储存期,能够有效稳定或提升卷烟产品的感官评吸质量水平。     

移栽期对冬季烤烟上部烟叶致香成分和质量评价的影响

为揭示冬季烤烟烟叶生长后期致香成分的生成规律,改善冬季烤烟香气品质,以‘KRK26’上部烟叶(B₂F)为材料,采用SDE（同时蒸馏萃取）-GC/MSD气质联用法对同一产区4个不同移栽期的相同栽培及初考条件下的烟叶致香成分及相对含量进行检测。结果表明,致香成分总量与感官评吸结果吻合度较好,可能对冬烟烟叶整体香气质量起基础作用;次年1月15日移栽处理(K3)新植二烯含量显著高于其他3个处理,且烤后烟叶评吸质量较优,显示新植二烯含量可能对冬烟烟叶整体香气质量起主导作用;类胡萝卜素降解产物中的大马士酮、香叶基丙酮、3-羟基大马酮及芳樟醇;类西柏烷类致香物质中的茄酮;美拉德反应产物中的糠醛、2,3-二氢呋喃、5-甲基-2-糠醛、3-甲基-2-(5H)-呋喃酮和2,3-二氢苯并呋喃;苯丙氨酸类降解产物中的苯甲醛、苯甲醇、苯乙醛、苯乙醇和吲哚;其他类致香物质中的2-乙酰呋喃、杜烯、棕榈酸甲酯、香叶基香叶基焦磷酸、棕榈酸等,可能是影响冬烟烤后烟叶香气质量的重要成分。研究结果可为云南冬烟栽培技术优化,改善冬烟烟叶香气品质及提高上部烟叶可利用性提供科学依据。     

密集烘烤38℃和46℃不同稳温时间对豫中上六片烟叶品质的影响

为进一步提高豫中上六片烟叶烤后质量,以中烟100上部烟叶为供试材料,研究变黄及定色阶段稳温时间对烤后烟叶品质的影响。结果表明,与常规烘烤工艺相比,变黄阶段38℃延长12 h,可提高上等烟占比和均价,改善外观油分、结构、色度、嗅香等及化学成分协调性,并改善感官评吸香气量、杂气、余味、燃烧性等指标,大幅增加中性致香物质总量;定色阶段46℃延长12 h,可提高上等烟占比和均价,改善外观结构、色度、嗅香等及化学成分协调性,明显增加中性致香物质总量,但不利于感官质量改善,香气质、香气量等指标略有下降;变黄阶段38℃和定色阶段46℃均延长12 h,可明显提高上等烟占比和均价,改善化学成分协调性,改善感官评吸香气质、香气量、杂气、余味、燃烧性等指标,大幅增加中性致香物质总量。综上,38℃延长12 h处理及38℃、46℃均延长12 h处理,其烤后烟叶整体表现较好,以38℃、46℃均延长12 h效果最好。     

产β-胡萝卜素红酵母的筛选及其发酵废糖蜜的研究

从自然环境中分离出8株产β-胡萝卜素的红酵母(Rhodotorula),通过自然筛选的方法得到1株产β-胡萝卜素较高的菌株H3。在实验室条件下,对该菌株的摇瓶发酵培养基和发酵条件进行了研究,结果很理想,各项指标达到了大规模发酵生产的要求,为实现产业化奠定了坚实的基础。     

馒头酵母的分离与筛选

从27种不同馒头发酵剂中分离出了21株酵母菌,经产酒精能力筛选,获得了11株酵母,进一步研究酵母的产气能力以及发酵速度,获得3株较好的菌株Y3,Y12和Y16,对这3株酵母的抗高温能力、耐酸能力以及面团发酵能力进行了研究。     

抗真菌乳酸菌的筛选及菌种鉴定

采用双层培养基法从中国传统发酵食品(发酵乳、泡菜、发酵肉)中筛选到20株对真菌有拮抗作用的乳酸菌菌株。对其中7株具有明显拮抗作用菌株的抑菌谱进行了初步研究,这7株菌对啤酒酵母、汉逊酵母、枯草芽胞杆菌等有明显的抑制作用,对黑曲霉可明显抑制其孢子的成熟。对其中2株菌进行了常规生理生化及16SrRNA分子鉴定,鉴定结果为干酪乳杆菌鼠李糖亚种。     

微生物对烤烟叶片烟碱含量的影响

此项研究用微生物菌株培养液喷洒烤烟采收后上、中部烟叶，烘烤结束后测定烟叶化学成分及内在品质的变化情况。结果表明，供试菌株对烟叶化学成分和评吸品质均有一定的影响。各菌株对不同部位的烟碱含量影响显著，中部烟叶1~6号菌株处理以4号菌株效果最好，烟碱降解率达36.9%；上部烟叶1~11号菌株处理以9号菌株效果最好，烟碱降解率达37.25%，其次依次为10号、4号菌株，烟碱降解率分别为22.80%、19.86%；就4号、9号、10号菌株处理的烤烟单体烟叶感官质量评吸结果表明，4#、9#菌株处理综合得分均高于CK，处理后香气量有所提高，香气质有改善，劲头明显下降，刺激性明显减弱，杂气明显减轻，余味好于CK。     

襄阳地区花生茬土壤不产毒黄曲霉菌的筛选及其特性分析

通过对襄阳花生茬土壤中黄曲霉菌进行初筛,并对筛选出的菌种进行特性分析和测序鉴定,最终确定为黄曲霉菌种,通过液体发酵培养,测定土壤中黄曲霉毒素（AFT）含量,同时筛选不产黄曲霉毒素的黄曲霉菌株,通过平板初筛到几株抑菌效果较好的黄曲霉菌株,将标准产毒菌株与非产毒菌株进行共生培养,测定AFT含量。结果显示,有4株非产毒黄曲霉共生菌株的黄曲霉素毒素含量较对照菌株降低80%以上,其中XZ38抑制产毒率达99.49%,说明非产毒黄曲霉菌株在抑制产毒黄曲霉生长、降低或消除AFT方面有很大作用,可作为田间生物防治黄曲霉污染的备选菌株。     

移栽期对五指山雪茄烟品质及主要经济性状的影响

为探明雪茄烟在海南五指山地区较为适宜的移栽期,研究了2016年1月11日、1月26日、2月10日、2月25日4个移栽期烟株的农艺性状、常规化学成分、烟叶中性致香成分的变化,并进行感官评价及经济性状评估。结果表明,在五指山地区的自然气候环境下移栽期对雪茄烟生长发育前期农艺性状的影响明显,对后期影响不显著;各中性香气物质含量随移栽期推迟呈先增加后减少趋势,2月10日移栽的雪茄烟农艺性状各指标及致香物质关键指标均表现最好,常规化学成分最为协调;感官评吸结果表明2月10日移栽的雪茄烟烟叶香气量大,余味好,整体质量较好;主要经济性状表明2月25日移栽产量最大,但2月10日移栽雪茄烟产值最高。由此可知,五指山雪茄烟于2月10日左右移栽可使雪茄烟在适宜的气候条件下生长发育,充分发挥其特性。     

黑曲霉和产朊假丝酵母联合发酵生产单细胞蛋白工艺参数的研究

为利用黑曲霉和产朊假丝酵母联合发酵玉米秸秆生产单细胞蛋白,笔者利用经航天诱变筛选的高产纤维素酶活菌株黑曲霉ZM-8和产朊假丝酵母SJ2,采用混菌固态发酵方式,研究产朊假丝酵母SJ2接种量、接种时间和联合发酵时间等因素在玉米秸秆为主要原料的培养基中对发酵产物中单细胞蛋白(SCP)含量的影响。结果表明最优发酵条件为先接入1:30黑曲霉,24h后接种5%的产朊假丝酵母,黑曲霉和产朊假丝酵母联合发酵36h。在最优发酵工艺条件下,发酵产物中SCP的含量达到了25.44%。     

纤维素热解产物内醚糖的微生物同化与乙醇发酵测试

以纤维素的热解产物1,6-缩水-β-D-吡喃葡萄糖（Levoglucosan,简称内醚糖）为唯一碳源对89株微生物（大部分为产酒菌株）进行了同化和乙醇发酵测试,并对319份土样进行了分离纯化培养。筛选结果表明,在89株微生物中,一株Sporobolomyces酵母、一株Rhodotorula酵母、4株Rhizopus霉菌、2株Monascus霉菌有同化内醚糖的能力,但它们利用内醚糖的能力都较弱,在培养3天后,2%内醚糖的利用率低于30%;在319份土样中,发现77份土样有微生物生长,并从中分离到70株酵母和10株细菌。通过内醚糖同化比较测试,发现Y215号菌的同化能力最强,在培养3天后,2%内醚糖的利用率达到了64.12%,经鉴定为斯达油脂酵母（Lipomyces starkeyi）。然而,在所有测试和分离的微生物中,没有发现既能同化又能发酵内醚糖为乙醇的菌株。本研究为通过遗传工程方法构建发酵内醚糖为乙醇的工程菌株提供了较好的菌种资源。     

响应面法优化木糖发酵产乙醇酵母发酵条件的研究

以诱变筛选的季也蒙毕赤酵母突变菌株C3-10为研究对象,对其发酵培养条件进行研究。采用响应面法研究了木糖发酵产乙醇酵母突变株不同温度、起始pH值、接种量的影响。结果表明,最佳发酵条件为:温度29℃,起始pH值5.6,接种量5%,在此优化条件下乙醇产量达到15.01%。     

黔西南州烟区烤烟高可用性上部叶适宜采收期研究

为探明黔西南州烟区烤烟上部叶的适宜采收期,确定最适于当地产质量提升的成熟采收标准,以云烟87为试验材料,研究上6片烟叶采收期（提前4d,正常和延迟4、8、12d采收）对烤后烟叶外观品质、化学成分、经济性状和感官品质的影响。结果表明,随着采收时间的延迟,烟叶的成熟度增加,烟碱含量升高,相对叶绿素含量（SPAD值）和糖碱比降低。适当延迟采收能改善上6片烟叶的品质,叶片厚度减小、疏松度提高、油分增多、香气量增加、刺激性降低,感官品质好,经济效益高。通过对经济性状和感官评吸模拟回归方程得出,上部烟叶延迟3.03d采收产值最高,延迟6.95d采收评吸总分最高。综合经济效益和感官质量,黔西南州烟区上部烟叶应适当延迟5~7d,在上3片烟叶SPAD值10.36~12.79、下3片SPAD值11.82~13.82的区间进行采收,且按照先下3片、后上3片分类采收后编杆装炕较适宜,可获得产量和质量均较好且可用性高的优质上部烟叶。     

格瓦斯低醇酵母菌株的筛选

以秋林面包团为原料,采用液态发酵工艺,通过试验测定与数据评价分离出酵母菌株的产醇能力、产气能力、产香能力,获得1株适用于面包格瓦斯饮料发酵生产的产醇量低(最低产醇量为0.54%)、产气量高、产面包香最为突出且菌株凝聚性较好的酵母菌菌种。     

高产木糖醇酵母菌的筛选与鉴定

为了获得1株高效转化木糖为木糖醇的酵母菌株,利用从土壤中筛选的酵母菌株转化玉米芯水解液生产木糖醇,经HPLC测得木糖醇产量,对筛选的具有产木糖醇能力的酵母菌株DQ11进行形态学的初步鉴定及26S rDNA序列分析,并以序列同源性为基础构建相关属种的系统发育树。结果表明,该菌株发酵48 h后木糖醇产量为3.34 g/L。同源性分析结果表明,分离株DQ11与季也蒙毕赤酵母菌处于同一进化分支中,相似性达99%以上,因此将筛选的高产木糖醇分离株DQ11鉴定为季也蒙毕赤酵母菌。     

高产木糖醇酵母菌的筛选与鉴定

为了获得1株高效转化木糖为木糖醇的酵母菌株,利用从土壤中筛选的酵母菌株转化玉米芯水解液生产木糖醇,经HPLC测得木糖醇产量,对筛选的具有产木糖醇能力的酵母菌株DQ11进行形态学的初步鉴定及26S rDNA序列分析,并以序列同源性为基础构建相关属种的系统发育树。结果表明,该菌株发酵48 h后木糖醇产量为3.34 g/L。同源性分析结果表明,分离株DQ11与季也蒙毕赤酵母菌处于同一进化分支中,相似性达99%以上,因此将筛选的高产木糖醇分离株DQ11鉴定为季也蒙毕赤酵母菌。     

基于烟叶致香成分建立烤烟香型分类模型方法研究

为筛选出基于烟叶致香成分数据建立烤烟香型分类的最优模型,以便于较好地对烤烟的香型进行正确分类。首先对142 个烤烟烟叶样品中的45 个指标采用行业标准进行检测,然后采用逐步回归法筛选出14 个烟叶致香成分,依据这14 个指标采用判别分析法、Logistic 回归、高斯混合模型、分类树、K最邻近法、人工神经网络和支持向量机7种方法进行建模。通过对不同方法建立的模型采用100次随机抽取训练集样本和测试样本计算错误分类率,选择错误分类率较低的模型作为优选模型。结果表明,线性判别法和高斯混和模型建立的2 种香型函数能较好地对未知样品的香型进行正确分类,且效果较好（正确率可达90%以上）。研究筛选出的2种优选模型对于烤烟香型分类研究具有一定的应用价值。