柠檬酸、Ca2+及其联合对小鼠血清谷草转氨酶、谷丙转氨酶活性的影响

通过测定小鼠血清谷草转氨酶(GOT)、谷丙转氨酶(GPT)的活性,探讨柠檬酸、Ca²⁺及二者联合对小鼠肝脏潜在毒性。将体重(20±2)g的昆明系小鼠100只,随机分为对照组,柠檬酸低、中、高剂量组,Ca²⁺低、中、高剂量组,柠檬酸联合Ca²⁺低、中、高剂量组,每组10只。分别经腹腔注射途径作相应处理,0.2 mL/只,对照组注射等量的生理盐水,注射2次,第2次注射7 d后,眼球取血,分离血清,分别测定血清中GOT和GPT的活性。结果显示,各组GOT活性均无显著差异(P>0.05)。与对照组GPT活性相比,钙高剂量组GPT活性升高51.66%,差异显著(P<0.05);钙中剂量组GPT活性升高42.63%,差异显著(P<0.05);联合高剂量组GPT活性升高35.32%,差异显著(P<0.05)。本研究结果表明,一定剂量的Ca²⁺能引起肝脏细胞损伤,与柠檬酸联合后,降低了其对肝脏的毒性。     

荷斯坦牛红细胞Na+ -K+ -ATP酶的研究进展

作者对荷斯坦牛红细胞Na⁺ -K⁺ -ATP酶的分子结构和基本特征、分布、作用机制、调控机制、生理功能、影响因素及其与热应激的关系进行了综述。     

朊病毒病及朊病毒的研究进展（一）

简要介绍了朊病毒病的基本特征、疾病谱、新发现的几种朊病毒病（致死性家族性失眠症、牛海绵状状脑病、新型克、雅二氏病等）及现毒病的诊断和防治方法,详细了阐述了现毒的基本概念、异常特性、支持朊病毒假说的语气及有特研究解决的问题等。     

朊蛋白生理功能的研究进展

朊蛋白（prion protein,PrPC）作为朊病的主要相关致病因子而受到广泛关注,虽然PrPC在疾病过程中的作用已有很多了解,但关于PrPC的正常生理功能还不是很清楚。就目前的研究而言,PrPC存在细胞核亚型和细胞质亚型两种形式,可与相应的配体及铜离子作用,并且通过细胞内吞或内陷方式被细胞膜获取;主要生理功能表现为保护神经系统,协助细胞的凋亡和分化、黏附,以及参与信号转导等。因此,文章对朊蛋白的生理功能作一总结,为朊病的治疗和朊蛋白的进一步研究提供了理论基础。     

朊病毒病治疗的研究进展

世界卫生组织曾预言,到2040年,最常见的致死性疾病中,神经退行性疾病将会攀升至第二位,仅次于癌症。在这类疾病中,朊病毒病是惟一能通过动物模型直接探寻体内病理学机理的一种。朊病毒病是由朊病毒引起人和动物出现以中枢神经系统退行性病变为特征的一类疾病,主要包括人的库鲁病、     

牛朊蛋白和酵母朊毒体结构域融合蛋白的原核表达及其单克隆抗体的制备

利用DNA重组技术将酵母Ure2p朊蛋白结构域(UPD)基因插入牛朊蛋白(BPrP)表达质粒pET-PrP中,构建原核表达载体pET-PrP-UPD.阳性质粒转化宿主菌BL21 (DE3),在IPTG诱导下获得高效表达.Westernblot检测表明表达的重组蛋白与单克隆抗体6H4呈现特异性反应,且纯化的PrP-UPD融合蛋白在体外具有聚集成淀粉样纤维、抵抗蛋白酶K消化等朊毒体的结构特点.利用纯化的PrP-UPD免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞融合,经克隆和筛选,获得3株稳定分泌抗重组PrP单抗的杂交瘤细胞,分别命名为1G3、3A4、4D1,其中1G3分泌的单抗能识别细胞型牛朊蛋白,其Ig亚类为IgG2b,腹水ELISA效价为1×105,Western blot表明该单抗具有较强的特异性.     

朊蛋白在癌症发生中的作用

<正>常细胞型朊蛋白(PrPC)是一种高度保守、在所有哺乳动物体内广泛表达的细胞表面糖蛋白,人类PrPC在胚胎发育早期即已表达。研究表明,PrP在多种癌症中表达,包括胃癌、胰腺癌、大肠癌、乳腺癌、前列腺癌、肝癌(HCC)、口腔鳞状细胞癌(OSCC)等,影响这些癌症的发生与侵袭,并在多药耐性(MDR)获得中起重要作用。因此,朊蛋白有望成为治疗多种癌症的新靶标。论文就PrP的结构、功能及其在细胞功能和疾病发生发展中的作用,以及PrP在多种肿瘤发生发展、耐药性的作用等研究进行概述,并对PrP在癌症新型疗法未来发展中的潜在影响进行分析讨论,以期为PrP相关肿瘤病的防治方面做出贡献。     

处理重组牛朊蛋白对接种金黄地鼠脑组织朊蛋白的效应

将纯化的重组牛朊蛋白经理化因子处理后,脑内接种金黄地鼠。临床观察200天后,对大脑、小脑和脑干,进行蛋白酶抗性朊蛋白的WesternBlot检测和朊蛋白基因表达绝对定量。结果表明,处理的重组牛朊蛋白对金黄地鼠脑组织检测部位的基因表达有特定的影响;接种后在检测时间内处理重组牛朊蛋白没有导致金黄地鼠脑内酶抗性朊蛋白的出现。研究结果为重组朊蛋白的生物学提供了基础数据。     

朊蛋白基因家族在畜牧兽医中的研究进展

朊蛋白基因PRNP作为朊蛋白基因家族的一员,其编码的异常朊蛋白(prion)导致传染性海绵样脑病(TSEs)的发生。PRNP基因在定位、结构、表达和编码产物上与朊蛋白基因家族其他3个基因(PRND,PRNT和SPRN)存在很多相似之处,且该基因家族在不同种属之间十分保守,朊蛋白基因家族因此被称为"朊蛋白基因复合体"(prion gene complex)。已有资料表明,朊蛋白基因家族除了与TSEs的发生密切相关,其还对畜牧生产和兽医预防有着重要影响。论文介绍了朊蛋白基因家族的4个基因及其编码产物,而后依次阐述了该基因家族对畜牧生产的影响以及在兽医预防中的研究进展,以期为畜牧生产和兽医预防提供参考。     

朊蛋白构象改变和种属突破机制的研究进展

异常朊蛋白(P rP sc)是一种可引起人和动物传染性脑退化病的不含核酸的蛋白因子。P rP c是一个正常的蛋白,有正常的生理功能,主要分布于神经元表面,属于肌醇磷脂锚蛋白类。由P rP c向P rP sc转变即产生疾病。作者简单介绍了正常和异常朊蛋白结构、功能、构象改变及朊病毒种属屏障的研究进展,并提出了目前尚待研究的问题。     

饲料中添加铁、铜、锰和锌对异育银鲫生理机能的影响

为研究铁(Fe)、铜(Cu)、锰(Mn)和锌(Zn)4种微量元素对鲫鱼生理机能的影响,试验采用正交设计L9(34),添加Fe、Cu、Mn和Zn4种微量元素,配制9种试验饲料饲喂异育银鲫当年鱼种,进行为期8周的饲养试验。结果表明,在4种微量元素中,Zn对血清溶菌酶、黏液溶菌酶、肝胰总SOD酶(T-SOD)和血红蛋白的影响最大,Mn对血清T-SOD酶、黏液T-SOD酶、肝胰CuZnSOD酶和肝胰谷丙转氨酶(GPT)的影响最大,Cu对血清CuZnSOD酶的影响最大,而Fe对血清谷丙转氨酶影响最大。     

内蒙古锡林浩特地区土壤-牧草-家畜系统中Cu、Fe、Zn、Mn、Mg、Se六种元素含量的分析

对内蒙古锡林浩特地区土壤，牧草，家畜（羊）被毛中6种元素含量进行了测定。结果表明：土壤硒含量于缺乏的临界水平；尖草，羊草及针草中锌含量低于羊正常生长对锌的需求数量，兔毛草及羊草中的硒的含量很低，不能满足其正常生长需要，被毛中硒含量低于临界值，提示羊群缺硒。     

奶牛隐性乳房炎与被毛中Zn、Cu、Mn含量的关系

分别用火焰原子吸收光谱法检测了健康对照组奶牛和 CMT/BMT 法检验为阳性的奶牛的被毛中 Zn、Cu、Mn 的含量,研究奶牛隐性乳房炎与被毛微量元素 Zn、Cu、Mn的关系。试验选择 1 个乳区患隐性乳房炎组(Ⅰ组)、2 个乳区患隐性乳房炎组(Ⅱ组)、3个乳区患隐性乳房炎组(Ⅲ组)、4个乳区患隐性乳房炎组(Ⅳ组)和健康对照组(Ⅴ组)。结果表明,Ⅰ组的Cu、Mn含量与Ⅲ组的差异显著(P<0.05),其他各组间的差异均不显著(P>0.05)。     

奶牛血浆钙离子浓度及胎儿胎盘eNOS表达的研究

通过对血浆中Ca2+浓度的检测及胎儿胎盘内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达量的研究,探讨奶牛胎衣不下的发生与这些物质变化的关系。采用终点法检测血浆中Ca2+浓度变化;分别采用免疫组织化学SP法及荧光定量PCR法检测奶牛胎儿胎盘eNOS蛋白及其mRNA的表达。结果表明,胎衣不下组奶牛血浆中Ca2+浓度在分娩前后均低于正常组;两组eNOS蛋白均在胎盘绒毛滋养层细胞和内皮细胞胞浆内表达,蛋白的表达量差异显著(P0.05);两组胎儿胎盘eNOS mRNA表达量差异显著(P0.05)。说明分娩前后血浆中Ca2+水平对奶牛胎衣不下的发生有重要的调节作用,低浓度的Ca2+容易导致子宫收缩无力,同时影响eNOS在胎儿胎盘绒毛中的表达。     

奶牛血浆钙离子浓度及胎儿胎盘eNOS表达的研究

本试验采用终点法检测血浆中Ca2+浓度变化,分别采用免疫组织化学SP法及荧光定量PCR法检测奶牛胎儿胎盘eNOS蛋白及其mRNA的表达。通过对血浆中Ca2+浓度的检测及胎儿胎盘内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达量的研究,探讨奶牛胎衣不下的发生与这些物质变化的关系。结果表明,胎衣不下组奶牛血浆中Ca2+浓度在分娩前后均低于正常组;两组eNOS蛋白均在胎盘绒毛滋养层细胞和内皮细胞胞浆内表达,蛋白的表达量差异显著(P0.05);两组胎儿胎盘eNOS mRNA表达量差异显著(P0.05)。本研究证明分娩前后血浆中Ca2+水平对奶牛胎衣不下的发生有重要的调节作用,低浓度的Ca2+容易导致子宫收缩无力,同时影响eNOS在胎儿胎盘绒毛中的表达。     

The impact of feeding supplemental chelated trace minerals on shell quality,tibia breaking strength,and immune response in laying hens

The objective of this study was to investigate the impact of long-term inclusion of the trace elements zinc, copper, and manganese chelated with the hydroxy analogue of methionine on layer performance, eggshell quality, tibia breaking strength, and immune response. A total of 216 Hy-Line W-36 laying hens were allocated to 6 treatments with 36 pens/treatment and 1 hen/cage using a randomized complete block design. There were 6 treatments with supplemental Zn-Cu-Mn, as follows: T1 0-0-0 ppm, T2 20-5-20 ppm as sulfates, T3 20-5-20 ppm as chelates, T4 40-10-40 ppm as sulfates, T5 40-10-40 ppm as chelates, and T6 80-10-80 as sulfates. The feeding of dietary treatments started at wk 24 pullet age and measurements of the key parameters were made from wk 44 to 80. Overall results (one-way ANOVA) indicated a significant treatment effect (P < 0.05) for shell thickness (at wk 74). Hens fed either no supplemental trace minerals (T1) or lower levels of supplemental inorganic trace minerals (ITM) (T2) had lower (P < 0.05) shell thickness when compared to high levels of sulfates (T6). Supplemental minerals as chelates at lower levels (T3) resulted in comparable (P > 0.05) response to T1 and T6 but different (P < 0.05) from T2. Factorial analysis of the data showed an improvement in shell breaking strength (P < 0.05 at wk 68), shell thickness (P = 0.08 at wk 68; P = 0.03 at wk 74), tibia breaking strength (P = 0.07) and antibody (Ab) titers to SRBCs (P < 0.05 at wk 63; 1 wk after secondary antigen challenge) in hens fed chelated trace mineral when compared to inorganic trace minerals. In summary, feeding laying hens’ diets containing supplemental chelated trace minerals showed improvements in eggshell thickness and immune response when compared to inorganic salts at specific time points measured during the latter part of the laying cycle.     

铜、镉、铅对7种豆科牧草种子萌发和幼苗生长的影响

以蒸馏水为对照,研究了重金属铜、镉、铅离子对7种豆科植物种子萌发和幼苗生长的影响。结果表明,随着Cu²⁺,Cd²⁺和Pb²⁺浓度的增大,毛苕子(Vicia villosa)、红三叶(Trifolium pratense)、苜蓿(Medicago varia)、小冠花(Coronilla varia)、扁蓿豆(Medicago ruthenica)和百脉根(Lotus corniculatus)种子的发芽率、发芽指数、幼苗的根长和芽长均呈不同程度的降低趋势;但毛苕子的降低趋势相对较缓。经300 mg·L^-1的Cu²⁺处理后,红豆草种子发芽率显著高于对照(P <0.05),在200,300和400 mg·L^-1浓度的Cu²⁺下红豆草种子的发芽指数均显著高于对照;经150 mg·L^-1的Cd²⁺浓度处理下红豆草种子的发芽指数显著高于对照;在500和1000 mg·L^-1 的Pb²⁺处理下红豆草种子的发芽指数显著高于对照和2000 mg·L^-1 的Pb²⁺处理(P <0.05)。随着Cu²⁺,Cd²⁺和Pb²⁺离子浓度的增大,红豆草种子萌发后形成的幼苗的根长和芽长都呈降低趋势。采用模糊数学隶属函数法,对供试7种豆科植物种子相对发芽率、相对发芽指数、相对芽长和相对根长进行隶属函数值计算,得出种子萌发期耐重金属胁迫的隶属函数总平均值,耐Cu²⁺的强弱顺序为:红豆草 >毛苕子 >红三叶 >百脉根 >苜蓿 >扁蓿豆 >小冠花;耐Cd²⁺的强弱顺序为:红豆草 >毛苕子 >红三叶 >百脉根 >扁蓿豆 >苜蓿 >小冠花;耐Pb²⁺的强弱顺序为:红豆草 >毛苕子 >扁蓿豆 >红三叶 >小冠花 >苜蓿 >百脉根。综合分析,红豆草和毛苕子种子在萌发期对重金属Cu²⁺,Cd²⁺和Pb²⁺的耐性较好。     

玻璃化冷冻对哺乳动物卵母细胞Ca2+的影响机制

卵母细胞冷冻保存是胚胎生物技术(如体外受精、胞浆内单精子注射、体细胞克隆)的重要组成部分,对优良种畜和濒危动物种质资源保存,加速家畜品种改良进程都具有重要意义。与常规冷冻法相比,玻璃化冷冻具有操作简单、降温速率快、耗时短、冷冻效率高等优点,被越来越广泛地应用于家畜卵母细胞的冷冻保存。然而,与新鲜卵母细胞相比,玻璃化冷冻卵母细胞的受精率及发育能力仍不理想,这严重影响了玻璃化冷冻卵母细胞的应用潜力。玻璃化冷冻会引起卵母细胞Ca²⁺浓度升高及钙振荡模式异常,导致其透明带硬化、受精信号紊乱等问题。综合前人研究进展,作者分析了玻璃化冷冻对胞内Ca²⁺浓度、钙振荡模式的影响和作用机制,并指出胞外Ca²⁺内流和胞内钙库Ca²⁺释放是导致冷冻卵母细胞胞内Ca²⁺浓度升高的主要原因,1,4,5-三磷酸肌醇(IP3)Ⅰ型受体分布异常和线粒体损伤可能是导致冷冻卵母细胞钙振荡模式异常的重要原因,以期为正向调控冷冻卵母细胞Ca²⁺浓度及钙振荡模式提供技术参考,从而进一步提高玻璃化冷冻卵母细胞的受精和后续的发育能力。     

22～42日龄肉鸡铜、铁、锌、锰不同用量组合的研究

本试验旨在研究饲粮中铜、铁、锌、锰含量对22~42日龄肉鸡生长性能和粪中铜、铁、锌、锰排泄量的影响,进而对微量元素的平衡模式进行探讨。选取940只1日龄爱拔益加(AA)肉公鸡,1~21日龄统一饲喂铜、铁、锌、锰含量分别为16.96、166.66、46.01、60.26 mg/kg的玉米-豆粕型饲粮。试验选用22日龄、体况良好、体重接近的AA肉公鸡900只,随机分为15组,每组6个重复,每个重复10只鸡。对照组饲喂基础饲粮,基础饲粮中铜、铁、锌、锰含量分别为8、125、40、60 mg/kg,试验组饲喂在基础饲粮中按照均匀设计原则添加2~8 mg/kg铜、10~35 mg/kg铁、10~40 mg/kg锌、15~60 mg/kg锰组成的14种试验饲粮。测定肉鸡试验期生长性能,并于38~42日龄时采集粪样测定铜、铁、锌、锰含量。结果表明:1)饲粮铜、铁、锌、锰含量在NRC推荐量至2倍NRC推荐量范围时,对22~42日龄肉鸡的平均日增重(ADG)和料重比(F/G)无显著影响(P0.05)。2)由最优解分析得出,粪中铜排泄量最低为23.11 mg/kg时,饲粮铜、铁、锌、锰含量分别为7.15、116.28、82.82、60.95 mg/kg;铁排泄量最低为438.34 mg/kg时,饲粮铜、铁、锌、锰含量分别为14.78、116.81、38.15、63.72 mg/kg;锌排泄量最低为102.60 mg/kg时,饲粮铜、铁、锌、锰含量分别为7.69、127.40、40.70、133.26 mg/kg;锰排泄量最低为159.37 mg/kg时,饲粮铜、铁、锌、锰含量分别为11.07、136.97、46.13、59.05 mg/kg;粪中铜、铁、锌、锰总排泄量最低为218.94 mg/kg时,饲粮铜、铁、锌、锰含量分别为7.36、125.74、38.23、62.76 mg/kg。综上所述,饲粮铜、铁、锌、锰含量在NRC推荐量至2倍NRC推荐量范围时对22~42日龄肉鸡的生长性能无显著影响;粪中铜、铁、锌、锰任一元素的排泄量均受饲粮中其他微量元素添加量的影响,且针对不同元素最低排泄量存在不同的最佳组合;饲粮铜、铁、锌、锰的含量分别为7.36、125.74、38.23、62.76 mg/kg时,能够满足肉鸡微量元素需要量,同时粪中铜、铁、锌、锰总排泄量最小。     

不同处理小麦麸对雏鸡肝脏和胫骨锌,铁,铜和锰沉积的影响

试验研究了用膨化、纤维素酶解、碱化和酸化处理的小麦麸对雏鸡饲粮中锌、铁、铜和锰在肝脏及胫骨中沉积的影响。结果表明,酸化处理使肝脏及胫骨锌、肝脏铁含量显著高于对照组(P<0.05),胫骨锌及肝脏铁的沉积率显著高于对照组(P<0.05);碱化处理使胫骨锌及肝脏铁含量显著高于对照组,肝脏铁的沉积率显著高于对照组(P<0.05);纤维素酶解处理使肝脏铁含量显著高于对照组;膨化处理与对照组相比,锌、铁、铜及锰在肝脏和胫骨中的沉积都有增加的趋势,但统计结果不显著。