不同产地蜂胶HPLC指纹图谱测定及真伪判定

对不同产地来源的62个蜂胶样品用Venusil MP C184．6mm×250mm,5μm为色谱柱,甲醇：0．4％H3PO4=60：40为流动相,在360nm波长下进行了HPLC的指纹图谱测定。将蜂胶HPLC指纹图谱分为六个区域,提出了以第四区的1号峰、2号峰、5号峰为蜂胶鉴别的主要依据,结合六个区域的指纹图谱进行真伪鉴别。采用本文研究的方法,进行了长期的蜂胶真伪判定实践,证明该方法具有可操作性强、准确度高的特点。     

藏药刺柏HPLC指纹图谱及穗花杉双黄酮含量测定

试验旨在建立藏药刺柏的HPLC指纹图谱,运用2种统计方法分析不同产区的刺柏药材质量差异。采用HPLC-DAD技术,色谱柱为Agilent Eclipse Plus C18色谱柱,以乙腈为流动相A,0.1%磷酸为流动相B,梯度洗脱,建立刺柏药材的指纹图谱并对指标性成分进行测定含量。对6批不同藏药刺柏进行相似度评价,并运用聚类分析(CA)、主成分分析(PCA)对HPLC指纹图谱进行分类分析。结果表明,刺柏药材HPLC指纹图谱共有峰16个,对14号峰进行指认为穗花杉双黄酮;6批刺柏药材的相似度均0.90;CA将不同产地刺柏药材分为3类,反映了6个不同产区刺柏药材的质量特征;PCA结果显示前4个主成分的累积贡献率达到96.13%,6个化学成分代表刺柏药材质量。说明建立的HPLC指纹图谱结合含量测定、CA、PCA方法可有效控制刺柏的质量,为药材质量控制提供科学依据。     

HPLC指纹图谱法评价市售僵蚕的品质

为了科学评价僵蚕的品质,建立了僵蚕的高效液相色谱指纹图谱分析方法,并对市售13个批次僵蚕药材的指纹图谱进行比较分析。结果发现这13批僵蚕的HPLC指纹图谱上共有11个明显的色谱峰,通过与标准品比对确定其中4个色谱峰分别为芦丁、紫云英苷、槲皮素和山奈酚; 13个批次僵蚕药材的指纹图谱具有显著差异,仅有5个共有特征峰,而且共有峰峰面积相差较大,相对标准偏差(RSD)分布在43. 31%~90. 62%之间。以共有模式R为基准,对市售僵蚕药材特征指纹图谱进行相似度计算,结果显示13个样品中相似度大于0. 90的有8个样品,相似度在0. 85~0. 90之间的有1个样品,相似度低于0. 85的有4个样品。结果表明,建立的僵蚕HPLC指纹图谱专属性强、稳定性好,能较真实、全面地反映僵蚕的特征;所测市售僵蚕药材品质参差不齐,在化学成分组成和含量上均有显著差异。     

气相色谱-质谱法分析蜂胶和杨树胶的化学成分

利用GC-MS分析方法分别对蜂胶和杨树胶进行了分离鉴定,两种物质各鉴定出80多种化合物。蜂胶中芳香酸、醇及酯类物质明显高于杨树胶中的含量,杨树胶中总黄酮和萜烯类化合物的含量略高于蜂胶中总黄酮和萜烯类化合物的含量。另外,可以初步确定苯甲醇、3,4-甲氧基肉桂酸、3-苯基-2,3-二甲基环丙烯、2,6-二羟基-4-甲氧基查耳酮和柯因等几种物质在蜂胶和杨树胶中的含量有较大的差异。因此,可以把它们作为蜂胶中的标志性物质进行检测、辨别。     

2013年国内外蜂胶研究概况(二)

<正>(接2014年第3期)2.2.3蜂胶质量控制研究杨树胶冒充蜂胶现象一直是影响蜂胶质量、破坏蜂胶市场的严重问题。Xu等[51]利用傅里叶变换近红外光谱(FT-NIR)法对中国蜂胶中掺入的杨树胶进行检测。他们首先针对树胶掺假建立了偏最小二乘数     

蜂胶与杨树胶鉴别的研究概况

中国蜂胶的主要来源是杨属植物,近年来出现了以杨树胶冒充蜂胶的现象,严重影响了我国蜂胶行业的健康发展。该文对蜂胶与杨树胶鉴别的研究进展进行综述,为蜂胶质量控制及相关标准的制定提供参考。     

白头翁汤剂的HPLC指纹图谱研究

为了研究70%乙醇提取白头翁汤剂的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,进一步验证提取工艺的稳定性,为其质量控制提供依据,为后续成分分析及表征奠定试验基础,试验采用8倍处方量70%乙醇,回流1.5 h,提取2次;采用HPLC法,检测波长为205 nm,以小檗碱(15号峰)为参照峰,测定10批白头翁汤的色谱图。共标定了16个共有峰,10批白头翁汤与对照指纹图谱的相似度均大于0.98,通过对照品指认了5个共有峰。结果表明:建立的白头翁汤剂的HPLC指纹图谱方法稳定、可行。说明该方法可用于70%乙醇提取白头翁汤剂的质量控制。     

2018版蜂胶国家标准解读

近日,蜂胶国标起草组对2019年2月1日实施的2018版蜂胶国家标准进行了解读。其中,新国标与2009版国标的不同和亮点有两个:一、在蜂胶真实性要求中,增加了蜂胶真实性的鉴别方法。采用国家标准《蜂胶中杨树胶的鉴别方法》(GB/T34782)和行业标准《蜂胶真实性鉴别方法》(GH/1087),这两个方法能够有效的检测出是否用杨树胶冒充蜂胶或掺入蜂胶,以及是否在蜂胶中掺入非蜂胶物质。     

甜叶菊提取物高效液相色谱法（HPLC）特征图谱研究

试验旨在建立甜叶菊提取物高效液相色谱（HPLC）特征图谱。采用HPLC法测定21批甜叶菊提取物中的化学成分。结果显示,在甜叶菊提取物的HPLC特征图谱中共标记和确定6个特征峰,经对照品比对确定特征峰1～6分别为新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸B、异绿原酸A和异绿原酸C。以异绿原酸B为参照峰（S峰）,特征峰1～6的相对保留时间的规定值分别为0.388、0.520、0.534、1.000、1.042、1.091。研究表明,建立的甜叶菊提取物HPLC特征图谱具有良好的精密度、稳定性和重复性,可为甜叶菊提取物的质量控制提供参考。     

湖北油菜蜂蜜的指纹图谱研究

本文采用高效液相色谱(HPLC)技术,分析了湖北省不同产地油菜蜂蜜中的微量特征成分,得到5个稳定的共有峰.与湖北产洋槐蜜和荆条蜜图谱相比较,进一步确定了所得5个共有峰是湖北油菜蜜特有的指纹图谱峰,并通过LC/MS分析得到各峰对应物质的分子量.同时,通过比较掺假蜜与纯蜜的色谱图还发现,借助蜂蜜中微量特征成分分析来控制蜂蜜质量是可行的.     

蜂胶与杨树叶和杨树芽中叶绿素含量的比较研究

目的:研究蜂胶与杨树叶和杨树芽中叶绿素含量的差别,为蜂胶质量评价和质量控制提供基础数据。方法:用紫外可见分光光度法测定蜂胶、杨树叶和杨树芽中的叶绿素含量。结果:测定了11个蜂胶、1个假蜂胶、杨树叶和芽的95%和50%乙醇提取物的紫外可见吸收光谱。结论:所有蜂胶样品中均不含叶绿素;杨树叶提取物中叶绿素含量较高;杨树芽低极性溶剂提取物中含叶绿素,但含量很低;杨树芽高极性溶剂提取物中未能检出叶绿素。本方法可应用于鉴别直接掺入杨树叶或杨树芽粉末的掺假蜂胶,以及各种含叶绿素杂质的掺假蜂胶。     

蜂胶与杨树胶中八种黄酮与肉桂酸含量的测定

目的:建立区分蜂胶与杨树胶的一种方法。方法:采用高效液相色谱法分析测定不同蜂胶样品中八种黄酮和肉桂酸为考察指标,进行含量比较。结论:真假蜂胶中肉桂酸含量存在一些差异。     

新疆阿勒泰地区罗布麻锈病发生动态及影响因子

由罗布麻栅锈菌(Melampsora apocyni)引致的锈病是影响罗布麻(Apocynum venetum)产业化的主要因素之一。本研究于2016年调查了新疆阿勒泰地区盐湖、红沟两个野生罗布麻和6龄、7龄栽培罗布麻锈病的发生动态,分析了野生和栽培罗布麻锈病发生与气象因子和生境等的相关性。结果表明,锈病均随罗布麻生长期的延伸而加重,其中盐湖、红沟罗布麻锈病分别在7月18日、8月3日达到发病高峰,发病率分别为86.47%和87.60%,随后发病率逐渐下降,生长末期下降至75.97%和53.78%;6龄、7龄栽培区锈病发病率分别在8月7日、7月23日达到发病高峰,发病率分别为25.52%和31.49%。野生罗布麻锈病病情指数和病害曲线下面积(AUDPC)分别为31.39~46.18和651.74~1 522.31,较栽培罗布麻相应指标高6.51~6.95倍及4.37~9.69倍。野生区罗布麻锈病的发生与降水量和植被总盖度显著正相关(P0.05),与物种多样性指数显著负相关(P0.05);栽培区罗布麻锈病的发生与罗布麻盖度显著正相关(P0.05),与物种多样性显著负相关(P0.05)。     

影响荷斯坦牛产奶量差的因素分析

产奶量差是奶牛个体同一胎次前后2个泌乳月产奶量的差值,可准确反映产奶量变化情况。为探究影响荷斯坦牛产奶量差的因素,本研究收集整理了江苏省某大型奶牛场2015-2018年55 193头次荷斯坦牛生产性能测定记录,并利用最小二乘法分析胎次、测定年度、产犊季节、泌乳月4个因素对荷斯坦牛产奶量差的影响。结果显示:胎次、测定年度、产犊季节、泌乳月及其交互作用对产奶量和产奶量差均有极显著影响(P<0.01)。其中,不同胎次、测定年度和产犊季节的荷斯坦牛总产奶量在第2个泌乳月增加最快,产奶量差为8.79kg;头胎第6泌乳月、二胎第7泌乳月和三胎及以上第6泌乳月产奶量下降最大,产奶量差分别为-2.86kg、-4.59kg和-6.13kg;2015-2018年4个测定年度中,第10、第6、第7、第6泌乳月产奶量降低最大,产奶量差分别为-2.26kg、-4.98kg、-4.44kg和-3.56kg;春季产犊的荷斯坦牛第4泌乳月、夏季产犊的荷斯坦牛第12泌乳月、秋季产犊的荷斯坦牛第9泌乳月、冬季产犊的荷斯坦牛第6或第7泌乳月产奶量下降最大,产奶量差分别是-4.34kg、-4.71kg、-5.36kg和-5.40kg。此外,产奶量差与泌乳持续力呈极显著正相关(P<0.01),与产犊间隔呈显著正相关(P<0.05),与泌乳天数、高峰奶、乳脂率、蛋白率、305d产奶量呈极显著负相关(P<0.01)。因此,产奶量差作为衡量奶牛产奶量变化的指标之一,可为牧场进行科学饲养管理提供参考。     

基于HPLC特征图谱结合化学计量学方法评价不同产地角倍和肚倍的质量

目的：采用高效液相色谱法（HPLC）测定对不同来源五倍子两种形态肚倍和角倍进行HPLC特征指纹图谱研究,并通过聚类分析和主成分分析深入研究五倍子药材不同形态中有效成分差异,为五倍子的质量控制及评价提供参考。方法：采用HPLC梯度洗脱法对肚倍和角倍样品进行测定,并记录色谱图,按《中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012 版）》对色谱图进行匹配生成肚倍和角倍的特征图谱,进行相似度分析。采用化学计量学软件origin 2018对肚倍和角倍进行聚类分析、主成分分析（PCA）研究。结果：分别建立了肚倍和角倍的 HPLC 特征指纹图谱共有模式,标识了没食子酸、没食子酸甲酯、1,2,3,6-四-O-没食子酰葡萄糖、1,2,3,4,6-五-O-没食子酰葡萄糖4个特征峰。角倍与肚倍相似度低,可通过聚类分析、主成分分析将其分为 2 大类从两者的HPLC特征指纹图谱相比,肚倍比角倍多了5个峰,保留时间为20.3 min、26.0min、27.6min、54.6min、75.9min,同时少了49.1 min相对位置的保留峰。结论：通过分析不同产地的五倍子角倍和肚倍中特征性化学成分,表明肚倍的有效成分多于角倍。利用相似度研究、聚类分析技术及主成分分析,可有效区分二者,为五倍子药材质量综合评价和利用提供参考。     

Direct MS-MS identification of isoxsuprine-glucuronide in post-administration equine urine.

Isoxsuprine is routinely recovered from enzymatically-hydrolyzed, post-administration urine samples as parent isoxsuprine in equine forensic science. However, the specific identity of the material in horse urine from which isoxsuprine is recovered has never been established, although it has long been assumed to be a glucuronide conjugate (or conjugates) of isoxsuprine. Using ESI/MS/MS positive mode as an analytical tool, urine samples collected 4-8 h after isoxsuprine administration yielded a major peak at m/z 554 that was absent from control samples and resisted fragmentation to daughter ions. Titration of this material with increasing concentrations of sodium acetate yielded m/z peaks consistent with the presence of monosodium and disodium isoxsuprine-glucuronide complexes, suggesting that the starting material was a dipotassium-isoxsuprine-glucuronide complex. Electrospray ionization mass spectrometry negative mode disclosed the presence of a m/z 476 peak that declined following enzymatic hydrolysis and resulted in the concomitant appearance of peaks at m/z 300 and 175. The resulting peaks were consistent with the presence of isoxsuprine (m/z 300) and a glucuronic acid residue (m/z 175). Examination of the daughter ion spectrum of this putative isoxsuprine-glucuronide m/z 476 peak showed overlap of many peaks with those of similar spectra of authentic morphine-3- and morphine-6-glucuronides, suggesting they were derived from glucuronic acid conjugation. These data suggest that isoxsuprine occurs in post-administration urine samples as an isoxsuprine-glucuronide conjugate and also, under some circumstances, as an isoxsuprine-glucuronide-dipotassium complex.     

蜂胶黄酮的超声波提取工艺研究

通过单因素实验研究了蜂胶黄酮的超声波提取工艺,并对蜂胶中黄酮类化合物的清除活性氧自由基的能力进行测定。结果表明蜂胶黄酮的最佳提取工艺为：75％乙醇作为溶剂,料液比为1：10,提取时间为20min,超声波提取2次,温度为60cc,此时黄酮提取含量最高,达到5．046mg／g。蜂胶中黄酮提取液稀释100倍后对DPPH活性氧自由基的清除能力和Vc的清除能力相当,蜂胶黄酮是比较有开发潜力的抗氧化剂。