番木瓜体胚间接发生方式的研究

 为了建立小果型番木瓜(Carica papaya L.)高效外源基因遗传转化体系，以小果型番木瓜'美中红'的幼胚(授粉受精后90~120 d)为材料,通过组织切片和电镜观察了体胚发生方式。结果表明，培养8~12 d，愈伤组织首先发生于幼胚的胚根端；培养26 d，整个幼胚的胚轴愈伤化，愈伤组织分为粘性透明和干性两大类，组织切片分为明显的两层，外层疏松易脱落，内层结构紧密；培养38 d，淡黄色的体胚前体发生于幼胚的胚芽端。番木瓜体胚的形态各异，大多数是形态正常的体胚，少数体胚的形态发生变异。     

番木瓜体胚发生及植株再生研究

研究了外植体类型及培养基的不同激素配比等因素对番木瓜愈伤组织诱导和体胚发生的影响。结果表明,番木瓜的子叶和幼胚两种不同的外植体均能诱导愈伤组织、体胚发生和实现植株再生,但在愈伤组织诱导上存在差异,在MS+2,4-D1.00mg/L+BA0.30mg/L+NAA0.05mg/L培养基上诱导的愈伤组织较好。添加一定浓度的硫酸腺嘌呤(ADS)、水解酪蛋白(CH)可以促进番木瓜体胚发生,在生根培养基上生根后,可移栽成活。     

番木瓜茎尖超低温保存过程中的细胞超微结构

 采用透射电子显微镜对番木瓜(Carica papaya L. ) 茎尖超低温保存过程中细胞超微结构变化进行观察。结果表明: 细胞在经过预培养、60% PVS₂ 预处理和PVS₂ 脱水处理, 细胞质壁分离程度逐渐加重,细胞的抗冻力增加。细胞严重伤害主要发生在液氮保存的降温及解冻的过程中, 一部分细胞的细胞壁、细胞膜以及细胞核膜均有不可逆的损伤, 可能是导致部分细胞致死的原因之一。也有部分细胞结构完整, 虽然细胞结构发生了变化, 但是程度不深, 是可逆的伤害, 在恢复培养3 d时可自动修复, 然后再生出植株。     

CPPU对番木瓜干旱胁迫的保护作用

干旱胁迫下,番木瓜叶片水势、可溶性蛋白质、叶绿素含量和SOD活性明显下降,而电导率、POD活性、MDA和H2O2含量则显著上升。分别用10、30、50mg/L的CPPU预处理有效地降低了干旱条件下番木瓜叶片细胞的MDA、电导率和H2O2含量的增加程度,并能减缓叶片叶绿素总含量和可溶性蛋白质含量的降低。试验表明CPPU是通过减轻干旱对番木瓜引起的自由基伤害来提高番木瓜的抗旱能力,其中以30mg/L浓度的CPPU处理效果最好。     

番木瓜茎尖的玻璃化法超低温保存及其植株再生

 研究了番木瓜( Carica papaya L. ) 茎尖玻璃化法超低温保存的一些影响因素。结果表明: 无菌试管苗在MS + BA 0.5 mg/L + NAA 0.1 mg/L + GA₃ 1.0 mg/L 的培养基上生长较好。番木瓜茎尖超低温保存较佳体系是: 3～5 cm的茎尖在含有5 %二甲基亚砜(DMSO) 培养基上预培养3 d , 解剖镜下剥取含1～2 个叶原基的茎尖(1.5～2.5 mm长) , 先在室温下于60 %的玻璃化溶液(PVS2) 中装载40～50 min , 再用PVS2于0 ℃下处理30 min , 换1 次PVS2 溶液后迅速投入液氮。保存24 h 后, 在40 ℃水浴中化冻, 用1.2 mol/L 的蔗糖培养液洗涤两次, 转入继代培养基上再培养, 成活率和再生率分别达53.7 %和52.6 %。再生植株生根后可移栽成活。     

番木瓜ERF家族与果实成熟相关成员的分析

通过比较分析番木瓜ERF家族成员的系统进化关系、基本理化性质、保守基序、启动子顺式元件,结合分析番木瓜在乙烯利和乙烯抑制剂1–甲基环丙烯(1-MCP)处理下以及不同成熟期果肉的RNA-seq数据,筛选出22个ERF家族成员进行表达差异分析,最终比较得出两个处理数据中显著差异表达基因有18个,推测这些基因可能在番木瓜果实成熟过程中起重要作用。     

番木瓜果实成熟相关基因的cDNA-AFLP分析及克隆

 为了探讨番木瓜果实成熟机理,利用cDNA-AFLP技术对破色期和半黄期的番木瓜果实进行基因差异表达分析,获得了50个与果实成熟相关的差异基因片段,其中28个与GenBank数据库中的功能基因同源,分别参与了果实成熟过程中基因表达调控,DNA与蛋白质合成及运输,蛋白质降解,能量代谢,营养物质代谢和逆境胁迫反应等过程。在差异片段序列基础上设计特异引物,采用cDNA末端快速扩增（RACE）技术成功克隆了4条差异基因cDNA全长,分别命名为CpGMP、CpPAA1、CpPOD和CpMYB。半定量RT-PCR分析结果表明,随着果实的成熟衰老,4个基因的表达量相应变化,说明其可能参与果实的成熟过程。     

番木瓜半胱氨酸蛋白酶基因CpCP的分离及表达分析

采用cDNA-AFLP技术分离了一个与番木瓜果实成熟衰老相关的差异片段,经生物信息学分析证实该片段属于半胱氨酸蛋白酶（Cysteine Protease,CP）基因。将差异片段序列在NCBI中的番木瓜基因组序列中搜索,获得了半胱氨酸蛋白酶基因DNA序列。设计开放型阅读框上、下游引物,以木瓜果肉RNA逆转录的cDNA为模板扩增该基因全长cDNA序列,命名为CpCP（登录号：JN689334）。该基因属于C1肽酶家族中的C1A亚家族,编码471个氨基酸,含有家族特有的催化三联体：Cys166-His302-Asn322。Real-time PCR结果显示CpCP在果实中大量表达,是根、茎、叶、花中表达量的几十倍;CpCP受乙烯处理诱导,受1-MCP处理抑制,表达模式与番木瓜果实成熟衰老进程一致,说明CpCP参与了番木瓜果实成熟衰老进程。     

番木瓜四倍体的诱导及形态学分析

在离体培养条件下,将二倍体穗中红番木瓜无菌试管苗茎尖浸入0.05%、0.1%、0.2%、0.4%秋水仙素水溶液中处理1、2、3、4、5d,诱导多倍体,对照用无菌水处理2d。结果表明0.2%的秋水仙素溶液浸泡处理3d效果最好,诱导率为36.7%。通过体细胞染色体数目检测,变异芽为四倍体或嵌合体,四倍体染色体数目为36(2n=4x=36)。对获得的四倍体和二倍体进行了形态及气孔特征的比较,结果表明四倍体与二倍体植株在叶长、叶宽、叶厚、气孔大小、气孔密度、气孔保卫细胞大小及叶绿体数目等方面存在明显的差异,其中叶片厚度、气孔密度和保卫细胞内叶绿体数目可作为鉴别四倍体与二倍体的重要性状。     

番木瓜凝乳蛋白酶基因启动子的克隆及功能研究

 采用 PCR技术从番木瓜品种‘穗中红’克隆了木瓜凝乳蛋白酶基因的部分序列及其5'侧翼序列,构建含有两种长度启动子片段的植物表达载体,并用基因枪轰击番木瓜叶组织和农杆菌转化烟草叶盘。结果表明,克隆产物长719 bp,163 bp 3'侧翼序列与 GenBank中的番木瓜凝乳蛋白酶基因序列同源性为99%,556 bp的 5'侧翼序列有基础启动子区,转录起始位点位于ATG上游38bp的T。序列登录号为 AY803756。预测在启动子区存在 TATA-box、CAAT-box、WUN和HSE等顺式作用元件。两种启动子片段驱动的GUS基因瞬时表达和稳定表达结果表明,该启动子片段具有乳管特异表达活性。     

保存条件对西瓜花粉生活力的影响

西瓜花为半日花,西瓜花粉的生活力在田间条件下开花几小时后即完全丧失。为了延长花粉的生活力,以二倍体西瓜B99品种为试材,研究了不同保存条件对西瓜花粉生活力的影响,结果表明:常温干燥条件下可延长花粉保存时间;低温(4℃)干燥(RH25%)条件下保存花粉,花粉生活力4d内降低较慢,4d后降低稍快,但到第9天仍有1/3以上的花粉具有生活力;前8d的坐果率可达到自然状态(用新鲜花粉授粉)的73%,这在实践中完全可以利用,尤其是对4、5d之内的短期保存更有利用价值。     

惠州优质高产番木瓜的栽培技术研究

文章研究和总结在惠州引种优质高产的番木瓜的经验:番木瓜生产过程中选用早结、丰产、优质、抗病毒病强的优良品种是前题,培育壮苗是基础,早结丰产栽培技术是关键;番木瓜1年生栽培方式有利于避开冬季霜冻危害,同时,能最大限度地减轻特别是番木瓜环斑病毒病的发生,降低防治成本.     

Physiological and physico-chemical changes in green papaya (Carica papaya L. ‘Kaek Noul’) shreds taken from the outer or inner mesocarp

This study compared physiological and physico-chemical changes in shreds of green papaya (Carica papaya L. ‘Kaek Noul’), taken from inner and outer mesocarp tissues, during storage at 7ºC for up to 8 d. Reductions in the flesh firmness of shreds, microstructure, colouration, dry matter content (DMC), and fresh weight (FW) loss, and in the rates of respiration, ethylene production, and enzyme activities were measured. The rapid loss of firmness of green papaya ‘Kaek Noul’ shreds taken from the inner mesocarp was attributed to the larger and more loosely arranged cells of the inner mesocarp compared to the smaller and compact cells of the outer mesocarp. Shreds taken from the outer mesocarp had a higher DMC [6.21–6.77% (w/w)] than those from the inner mesocarp [5.83–6.34% (w/w)] during storage at 7ºC. FW loss was higher for shreds from the inner mesocarp than from the outer mesocarp (0.89–1.12% vs. 0.39–1.00%, respectively). Colour values (h°) were lower at the end of storage for shreds from the inner mesocarp than shreds from the outer mesocarp (104.38° and 111.94°, respectively). Moreover, scanning electron micrographs of shreds from inner mesocarp and outer mesocarp tissues showed that the slower loss of firmness in shreds from the outer mesocarp could be attributed to having smaller and more compact cells, as well as to lower ethylene production by the outer mesocarp. However, this was not related to cellulase activity. This study indicated why processors prefer to use shreds from the outer mesocarp of green papaya.     

Fructose inhibits pear pollen germination on agar medium without loss of viability

Pollen of Japanese pear (Pyrus pyrifolia Nakai) germinated well on agar medium containing 10% sucrose or glucose, but not on agar containing fructose. The inhibitory effect of fructose was dose-dependent. Sucrose enhanced pollen tube growth much more effectively than glucose. Addition of 5% fructose to 5% or 10% sucrose or glucose media suppressed germination completely. Ungerminated pollen, however, showed similar respiration rate and stainability against acetocarmine dye as germinated pollen. When pollen was transferred onto fructose medium after culturing it on glucose or sucrose medium for 1–2 h, germination was completely impeded. Reversely, pollen transferred to sucrose or glucose medium from fructose medium germinated at almost the same ratio as pollen on sucrose or glucose medium without transfer. Thus, pollen inhibition by fructose is reversible. Compared with uncultured pollen, cultured pollen contained less than half amount of total sugars, even if failed in germination on fructose medium. Germinated pollen on sucrose and glucose media contained sucrose and glucose, but ungerminated pollen on fructose medium contained only trace levels of these sugars, suggests that pollen on fructose medium predominantly uses sucrose and glucose as respiration substrates and cannot maintain the constant levels of these sugars. However, as pollen germination occurred on agar medium without any sugar, fructose may impede a physiological factor that triggers germination, and once the trigger is impeded, many physiological pathways including sugar biosynthesis may be blocked.     

曹州木瓜的观赏特性与园林应用

曹州木瓜具有很高的园林应用价值,现就树形、树干、叶、花、果等方面介绍曹州木瓜的观赏特性,并探讨其在园林中的应用。     

番木瓜的核型分析

 分析比较了‘穗中红’、‘日升’和‘美中红’3个品种的核型, 发现3个品种均具有1对中部或中间随体, 但前两个品种的随体位于第6对染色体上, 而‘美中红’位于第7对染色体上。根据前两个品种中发现存在的异形染色体, 推测番木瓜性染色体的存在。3个品种的核型公式分别表示为: ‘穗中红’2n = 2x = 18 = 16m (2SAT) + 2 sm, ‘日升’2n = 2x = 18 = 14m (2SAT) + 4 sm, ‘美中红’2n = 2x = 18 =16m (2SAT) + 2 sm。3个品种均属于“2A”核型, 但核型有一定的区别。     

番木瓜雄性性别的RAPD和SCAR标记

利用RAPD标记技术鉴定番木瓜雄性性状。在214条随机引物中,用引物Z18扩增得到1条雄性多态性片段,此片段存在于试验所用材料的所有雄株中而两性株和雌株没有,将其命名为Z18-1000。根据对该片段的序列分析结果重新设计了2对引物将RAPD标记成功转化成了SCAR标记,并命名为SD-1000。     

木瓜籽油超临界CO_2提取及其成分分析

为有效提取木瓜籽中的油脂,采用超临界CO2萃取木瓜籽油,并对其油脂成分进行气质联用分析。结果表明:在CO2流量15kg/h、萃取压力35MPa、萃取温度35℃条件下萃取130min,其油脂得率为21.8%;油脂中含有5种脂肪酸成分,其中油酸含量65.2%。     

1-甲基环丙烯对沂州木瓜果实贮藏品质的影响

试验以0.05、0.15、0.25、0.35μL/L的1-MCP处理沂州木瓜果实,研究其对沂州木瓜果实品质的影响。结果表明:以0.25μL/L的1-甲基环丙烯处理沂州木瓜果实贮藏品质保持好;8d左右,可滴定酸、可溶性固形物含量以及维生素C含量变化小,软化不明显,失重小。     

番木瓜开花相关基因CpFT1及启动子的克隆与表达分析

以番木瓜（Carica papaya L.）花为材料,利用番木瓜基因组序列设计番木瓜CpFT1和启动子扩增引物,通过PCR获得了该基因长度为525 bp的基因组DNA序列和1 500 bp的上游调控序列。通过生物信息学分析,发现CpFT1编码174个氨基酸。经序列对比及进化分析发现,番木瓜FT基因与山毛榉FT基因同源性最高。亚细胞定位显示CpFT1蛋白定位于细胞核。进一步分析CpFT1的启动子序列,脱落酸、赤霉素、水杨酸等激素调控相关的元件位于CpFT1上游1 500 bp的序列上。利用实时荧光定量PCR检测了CpFT1在不同性别花器官、花不同发育阶段以及不同激素处理下花中的表达差异,结果表明CpFT1的表达可能受到脱落酸、水杨酸等激素的调控。