RAPD技术在烤烟品种资源鉴定及纯度分析中的应用

以３１外优良烤烟品种为材料,从干叶中提取ＤＮＡ,进行ＲＡＰＤ扩增,探索利用ＲＡＰＤ标记鉴定烤烟品种和纯度分析的可能性,结果表明,烤烟品种间有明显差异,利用多个引物可将３１个材料完全分析。     

用聚合酶链式反应技术鉴定杂交稻种子纯度的初步研究

应用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）技术,对３个杂交稻组合及其相应亲本的核ＤＮＡ进行了分析,筛选出９个随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）随机引物和１对简单重复序列（ＳＳＲ）引物,可对供试材料进行真伪和纯度鉴定,该技术具有快速,简便,准确的特点,每人每天可测定１８０份样品,适用于杂交稻种子的商业化鉴定。     

利用RAPD技术进行辣椒杂种纯度鉴定的研究

为了建立一套快速，受外界环境影响小，结果准确可靠的辣椒杂种纯度鉴定技术，以２个辣椒杂种湘研５号，湘研１０号及其父母本为材料，使用ＭＪ／ＰＴＣ－２００型ＰＣＲ仪及ＧＤＳ－８０００型凝胶成像分析系统，建立了适合辣椒ＲａｎｄｏｍｌｙＡｍｐｌｉｆｉｅｄＰｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃＤＮＡ（ＲＡＰＤ）分析了ＰＣＲ扩增反应的实验体系，从３９个随机引物中找到了２个可用于鉴定湘研５号，４个可用于鉴定湘研１０号杂种纯度的引     

DNA分子标记鉴定蔬菜作物种子纯度的原理分析

对ＤＮＡ分子标记鉴定蔬菜作物种子纯度的原理进行了分析。结果认为,鉴定种子纯度以ＲＡＰＤ技术为宜。ＲＡＰＤ标记鉴定常规品种种子纯度研究中,应选择目标品种Ａ的ＲＡＰＤ图谱中出现而其它常规品种（一般５￣１０个为宜）中不出现的ＤＡＮ谱带作为鉴定纯度用的特异谱带;鉴定杂交Ｆ１品种时,应将母本有,父本无、,Ｆ１有的ＤＮＡ谱带和母本元,父本有,Ｆ１有的ＤＮＡ谱带作为特异谱带,并且在实践鉴定中二者必须联合使用。     

RAPD标记在日本兵库县20个酒米品种类群划分中的应用

应用ＲＡＰＤ分子标记对日本兵库县２０个酒米品种的类群进行了研究。筛选出对不同基因型酒米品种ＤＮＡ扩增具有较好多态性的引物１１个,它们分别是Ａ０２、Ａ０８、Ｂ１８、Ｃ１５、Ｄ０３、Ｄ０８、Ｇ０５、Ｍ１１、Ｑ１６、Ｓ１３和Ｔ０６。根据这些随机引物对不同品种总ＤＮＡ具有特性性的扩增谱带,建立不同品种的ＲＡＰＤ多态性标准模式图,可以快速鉴别品种和进行纯度分析;依据扩增谱带建立０、１型数据,计算２０个酒米品     

四川主栽小麦品种RAPD标记遗传差异研究

采用随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ） 标记,对四川近５０ 年来年推广面积６－６７ 万ｈｍ２（１００万亩）以上的４０ 个小麦主栽品种遗传差异进行了初步探讨。结果表明,５５ 个随机引物中,有３２个引物（ 占５８－２％ ） 扩增产物具有多态性。３２ 个引物共扩增出１８５ 条带,其中９３ 条带（ 占５０％ ）具有多态性,每个引物可扩增出１ ～１１ 条多态性带,平均２－９ 条。４０ 个品种ＲＡＰＤ 标记遗传距离（ＧＤ） 变异为０－０１９ ～０－４７５ ,平均ＧＤ 值为０－２２１。聚类分析表明,在ＧＤ 值０－２３ 水平上,４０ 个品种可聚为５ 类。一些随机引物对有些品种能进行特异性扩增。引物ＯＰＮ１４ 对小麦１ＢＳ 扩增能产生特异性ＤＮＡ 片段,能完全鉴定出４０ 个供试品种中的９ 个１ＢＬ／１ＲＳ小麦－ 黑麦易位系品种。据此认为,ＲＡＰＤ标记可以作为小麦品种鉴定的指纹图谱。     

RAPD标记在大豆品种鉴定中的应用初探

以十六烷基溴化铵（ＣＴＡＢ）选择性沉淀ＤＮＡ的方法，提取大豆种子、新鲜叶片或冷冻干燥叶片的总ＤＮＡ，所得ＤＮＡ纯度好，降解少，分子量大，完全可以用于ＲＡＰＤ分析。本文就ＲＡＰＤ标记手段在大豆品种鉴定中的应用作一简报，仅ＯＰＡ－０４就能将供试的１７份大豆品种区分开，表明ＲＡＰＤ用于种子纯度鉴定及品种鉴定是可行的。     

利用RPAD技术进行辣椒杂种纯度鉴定的研究

为了建立一套快速,受外界环境影响小,结果准确可靠的辣椒杂种纯度鉴定技术,以湘研５号,湘研１０号２个辣椒杂种及其父母本为材料,使用ＭＪ／ＰＴＣ－２００型ＰＣＲ仪及ＧＤＳ－８０００型凝胶成像分析系统,建立适合辣椒Ｒａｎｄｏｍｌｙ Ａｍｐｌｉｆｉｅｄ Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ ＤＮＡ分析的ＰＣＲ扩增反应的实验体系,从３９个随机引物中找到了２个可用于鉴定湘研５号,４个可用于鉴定湘研１０号杂种纯度的引物。     

甘薯体细胞胚胎发生遗传变异的RAPD分析

以“郑红５”等６个甘薯品种为材料,通过离体培养诱导体细胞胚胎发生与植株再生。利用ＲＡＰＤ分子标记方法,在ＤＮＡ水平上分析甘薯品种间遗传差异以及体细胞胚胎无性系的遗传变异。筛选了４５个随机引物,其中７个引物ＰＣＲ扩增后在品种间和体细胞胚胎无性系中表现ＲＡＰＤ多态性,并在相应胚性愈伤组织中检测到少数ＲＡＰＤ变异位点。证明利用ＲＡＰＤ分子标记方法鉴定甘薯体细胞胚胎发生遗传变异的可行性,以及为通过离体培养     

草鱼和鲤RAPD引物筛选及鱼种特异性分子标记

以草鱼和鲤为材料,提取基因组ＤＮＡ,制备ＲＡＰＤ－ＰＣＲ模板,对３个随机引物盒共６０个１０－ｍｅｒ引物进行了ＰＣＲ扩增,共筛选出７个较理想的可用于鱼种内或鱼种间群体遗传分析的随机引物．用这７个引物所获得的草鱼和鲤的ＲＡＰＤ指纹图谱平均带纹总数分别为４．２８±１．８９和６．７１±４．１９,多态性带纹总数分别为１．７１±１．６０和５．１４±４．７４．ＲＡＰＤ指纹图谱特征反映出草鱼比鲤具有更高的遗传纯度．７个引物共扩增出草鱼特异性带纹１８条,鲤特异性带纹３２条．大量特异性带纹的检出表明,两个鱼种间存在较大的遗传差异,同时也为鱼种间基因转移（特别是全基因组ＤＮＡ导入）提供了分子检测的候选遗传标记     

番茄品种渝粉109的DNA指纹图谱构建

用SDS法提取番茄杂一代品种"渝粉109"及其亲本的基因组DNA,通过RAPD-PCR分子标记方法,构建其DNA指纹图谱,用于种子纯度鉴定。利用200个RAPD随机引物,以杂一代品种及其亲本的基因组DNA为模板组进行筛选,结果显示:8个RAPD引物的DNA条带表现出多态性,其中R3能稳定地在亲本之间扩增出互补的特异条带。经定向验证、种子真伪鉴定、纯度鉴定,表明构建的渝粉109指纹图谱有效。     

西瓜和甜瓜杂种一代种子纯度的RAPD鉴定

选用100条随机引物(S71-S190)对西瓜、甜瓜杂种一代和其父、母本的种子进行随机扩增多态性DNA(RAPD)分析,探索西瓜和甜瓜杂交品种种子纯度鉴定的便捷途径.结果表明:在100条引物中筛选出4条有特征条带的引物,其中S92号引物能使甜籽一号、白兰蜜和黄河蜜6号与其母本有效区分开来;S162号、S181号引物能使甜籽一号与其母本区分开来;S175号引物能使白兰蜜与其母本区分开来;但未发现使T×14E与其母本区分开来的引物.     

RAPD方法在向日葵品种鉴定及杂交种纯度鉴定上的应用

利用100个随机引物分别对油葵品种——康地4号、5号、6号、7号及G101的父母本和杂交种进行了分析研究，最后筛选出3个特异引物可分别用以鉴定康地4号、6号、7号及G101杂交种，用此结果计算出的品种纯度与田间检测结果基本一致。     

应用RAPD标记鉴定胡萝卜杂交种的研究

利用RAPD标记技术对以"Pt"型雄性不育育成的胡萝卜杂交种"金红四号"及其父、母本进行DNA多态性分析,从分子水平上探寻鉴定胡萝卜杂交种的方法.结果表明,从40条随机引物中筛选出具有特异性扩增带的引物4条,利用这些特异性扩增带能有效的区分和鉴定"金红四号"及其父、母本.说明利用RAPD方法对"金红四号"胡萝卜杂交种及其父、母本进行快速、准确的鉴定是可行的.     

白杂1号种子纯度的RAPD鉴定技术研究

以白菜型油菜新品种“白杂1号”父母本及F1代种子为研究材料,用238个10-mer随机引物对它们进行了RAPD分析鉴定,结果显示共有68个随机引物出现多态性扩增,DNA片断大小在0.17~1.8 kb之间。经多次重复验证,引物S24、S83和S104条带稳定,并且杂交种条带为双亲互补型;引物S176为偏父型,在母本中扩增出350 bp特征带,而其在父本中呈阴性。选取S104(GGAAGTCGCC)对两个亲本及F1建立指纹图谱,共检测出6条强带,其中380 bp是母本特征带,1 600 bp是父本特征带。人为掺杂构建“白杂1号”F1代测试群体,用S104对其进行了纯度检测,结果与预期结果基本一致。对RAPD方法在鉴定种子纯度中的有关双引物混合扩增和条带判断取舍问题进行了讨论。     

RAPD标记鉴定番茄杂交种子纯度的研究

 应用RAPD标记鉴定番茄杂交种子纯度,从160条随机引物上筛选出BS273引物,能在杂交一代父母本中各自产生特异的RAPD标记,并且父母本的特异标记能在杂交一代中同时表现,从而利用一个引物便可将杂交一代及其父本、母本三者清楚地区分开,同时也能鉴别其它混杂种子。结果表明:利用RAPD标记技术鉴定番茄杂交种子纯度有着快速和准确的优势,对于杂交种子生产具有广阔的应用前景。     

应用RAPD标记鉴定苦瓜杂种纯度

以苦瓜杂交种“闽研2号”及其亲本为材料,利用RAPD标记技术对苦瓜杂交种的多态性进行分析.结果表明:在供试的200条RAPD引物中,筛选出1个引物S115能区分杂交种及其亲本种子.利用互补型RAPD引物S115对苦瓜杂交种“闽研2号”的纯度进行了快速鉴定,结果与田间鉴定结果一致.     

辣椒一代杂种广椒6号种子纯度的RAPD鉴定

[目的]为利用RAPD技术进行作物种子的纯度检测奠定基础。[方法]利用RAPD技术对辣椒一代杂种广椒6号的种子纯度进行检测,研究RAPD反应体系中的模板DNA和引物的用量对PCR扩增效果的影响。[结果]在25μl反应体系中,加入10~400 ng模板DNA,均可获得一致产物,而且条带亮度无明显差异。从340个RAPD随机引物中筛选出15个具有良好稳定性的差异引物,其中偏母型引物5个,偏父型6个,互补型4个。利用筛选出的3个多态性引物F05、F15和I05对广椒6号的纯度进行检测,3个引物的检测结果一致,且与田间形态学鉴定结果吻合。[结论]RAPD技术是鉴定辣椒一代杂种纯度的有效方法,具有准确、可靠、快速和经济的特点。     

利用EST-SSR标记鉴定大白菜杂交种纯度的研究

利用EST-SSR分子标记技术,选用自主开发的3对EST-SSR引物,对13个大白菜品种的总DNA进行了PCR扩增。结果表明:EST-SSR标记可以体现品种内的一致性、亲本间以及品种间的多态性,具有共显性、稳定性和可重复性的特点;EST-SSR标记可以快速、准确地鉴别大白菜品种的真实性和杂交种纯度,为大白菜种子质量的高效检测提供科学依据。