组织培养在苎麻多倍体研究中的应用初报

研究了组织培养结合秋水仙素不同浓度和处理时间对苎麻试管苗的诱导效果，发现组织培养可以明显提高处理株的成活率，０．１％秋水仙素处理６ｄ仍有３０％左右的植株成活。首次采用不定芽技术稳定苎麻多倍体，获得了四倍体细胞达９４％的单株，并发现了三倍体和非整倍体细胞，同时对处理过的试管苗进行了气孔鉴定和染色体检查，发现试管苗的气孔鉴定可靠性大。     

多倍体萱草的组织培养与快速繁殖技术

以多倍体萱草的芽和花蕾为外植体,以MS为基本培养基,进行组织培养与快速繁殖的研究。结果表明,MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L为最佳诱导培养基,MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.01 mg/L为较好的增殖培养基。1/2 MS+NAA0.02 mg/L为较好的生根培养基,用腐叶土和珍珠岩4∶1比例做基质移栽苗成活率可达80%以上。     

类番茄茄与番茄属间杂种异源多倍体的诱导与鉴定

经2 g/L秋水仙碱羊毛乳剂处理、细胞染色体倍性鉴定,分别得到了栽培番茄粤农二号×类番茄茄F1、(栽培番茄粤农二号×类番茄茄)×多腺番茄F1(编号为98-5-3-1)的16个、4个异源四倍体植株及(栽培番茄粤农二号×类番茄茄)×(栽培番茄粤农二号×秘鲁番茄)F1(编号为1-6-1)的9个异源四倍体植株、1个八倍体植株.     

秋水仙碱诱导番茄多倍体的研究

以巨宝金冠和毛粉802的种子和幼苗为试材,以秋水仙碱为诱变剂诱导多倍体。结果表明:处理番茄种子,以秋水仙碱浓度0.4%处理12 h效果最好,巨宝金冠和毛粉802的诱导率分别为26.7%和30%;处理番茄幼苗,以秋水仙碱浓度为0.03%处理8 h效果最好,巨宝金冠和毛粉802的诱导率分别为46.7%和50%。变异材料的细胞染色体(2n=4x=48)为2倍体材料的二倍。此外,四倍体变异材料均表现出叶长、叶宽、叶面积增大,叶形指数减少等特征。     

虹鳟(Oncorhynchus mykiss)多倍体的倍性鉴定

采用红细胞核体积测量法检测虹鳟多倍体的倍性,并用流式细胞术对其准确性进行验证,统计二倍体、三倍体与四倍体的核质比和微核率。结果显示,红细胞核体积测量法检测的三倍体诱导组(109尾)中有81尾三倍体,四倍体诱导组(154尾)中有26尾四倍体;流式细胞术鉴定结果显示,三倍体诱导组(109尾)中有79尾三倍体,四倍体诱导组(154尾)中有25尾四倍体,并且全部是红细胞核体积测量法所确定的三倍体和四倍体,测量法的准确率分别达到97.5%和96.2%;二倍体、三倍体和四倍体的核体积分别为51.87±6.79,78.32±2.72,99.07±9.85μm3,质体积分别为614.88±50.77、1 088.33±93.97、1 415.72±507.55!m3,核质比分别为0.084±0.024、0.072±0.014、0.070±0.010,统计表明三者的核质比无显著差异(P>0.05);三个倍性红细胞均未发现微核现象;三倍体和四倍体血液中有细胞核形态异常的红细胞,其出现率分别为0.07%和0.08%,二者无显著差异(P>0.05)。     

园艺植物多倍体育种中组织培养技术应用现状及展望

利用组织培养技术可提高人工诱导多倍体的诱导成功率，并能解决嵌合体问题和同源多倍体结籽率低的问题。本文简要介绍了当前园艺植物利用组织培养技术诱导多倍体研究现状。探讨了多倍体育种中应用组织培养技术的前景。     

福建金线兰多倍体的诱导和倍性鉴定

[目的]对福建金线兰多倍体进行诱导和倍性鉴定。[方法]以福建金线兰为材料,以秋水仙素为诱变剂,分别用浸泡法和涂抹法处理福建金线兰试管苗不定芽,进行多倍体诱导,并在显微镜下观察鉴定其染色体的倍性。[结果]以浓度0.05%秋水仙素为诱变剂,用涂抹法处理72 h的效果较佳,加倍率为35%;对多倍体材料进行染色体鉴定发现,二倍体染色体为2n=40条,四倍体为4n=80条。[结论]该方法可以培育福建金线兰多倍体,能提高其移栽成活率和亩产量。     

红掌的多倍体诱导与倍性分析

[目的]为诱导红掌多倍体提供参考。[方法]以红掌气生根再生团块和幼苗为材料,以秋水仙素为诱导药液,采用浸泡法、培养基培养法和穿线法3种方法对再生团块和红掌幼苗进行多倍体诱导,研究不同诱导方法、秋水仙素浓度和诱导时间对多倍体诱导率的影响。[结果]3种诱导方法都能得到多倍体细胞。秋水仙素处理浓度在0.1%~0.3%范围内时,多倍体诱导率随着诱导剂量的升高和诱导时间的延长而增加。使用浸泡法处理气生根再生团块时,多倍体诱导效果最好,0.3%的秋水仙素处理再生团块7 h,诱导率可达63.3%。[结论]红掌多倍体诱导的最佳条件为:0.3%的秋水仙素浸泡气生根再生团块7 h。     

组织培养结合秋水仙素诱导滇杨多倍体的研究

 利用组织培养结合秋水仙素对滇杨进行多倍体诱导,以期获得滇杨多倍体植株。结果表明：组织培养结合秋水仙素诱导滇杨产生多倍体的较优组合为秋水仙素浓度为80mg/L下处理30d或在90mg/L下处理20～30d,此时,多倍化诱导率最高可达186%。对滇杨多倍体植株与正常植株进行外部形态、染色体数目及单位叶面积内气孔数目的观察,发现多倍体植株与正常株形态差异明显,染色体数目增加为76条,叶表皮气孔变大,同时,叶片中叶绿素含量约为二倍体的1.5倍。     

不结球白菜游离小孢子培养及再生植株的倍性鉴定

对影响不结球白菜小孢子培养和植株再生的几个因素及再生植株的倍性进行分析.结果表明:基因型是影响小孢子胚诱导率的最重要因子,正反交材料的胚诱导率无显著差异;供体植株开花后6～10 d培养可获得高的胚诱导率;琼脂在8～12 g·L-1范围内,随着质量浓度的提高可显著提高小孢子胚再生率.结合流式细胞仪和植株形态鉴定,不结球白菜小孢子再生植株自然加倍率总体水平较高,有的高达90%,但不同基因型间有明显差异.     

兔眼蓝莓组培体系建立及多倍体诱导研究

蓝莓具有较高的营养价值和经济价值,但其繁殖速度慢、果实较小、采摘成本高,优化现有的蓝莓品种具有良好的发展前景。本文以兔眼蓝莓灿烂幼嫩茎段为试验材料开展组织培养研究,采用不同的培养基配比激素以及设置不同浓度用以研究出最适合兔眼蓝莓灿烂生长的、稳定的、可重复性强的培养基配方,建立叶片再生体系,并采用秋水仙素培养基添加法对其进行诱导。在无菌条件下切取由叶片再生形成的长势较好苗的带叶茎尖(长约0.5 cm),接种到秋水仙素浓度为10、20、30、40、50、60 mg/L的6种培养基中。结果表明,最适兔眼蓝莓灿烂腋芽启动培养基是配方WPM+0.005 mg/L NAA+2.0 mg/L ZT+20 g/L蔗糖+6 g/L琼脂,诱导效果最佳,发芽率高达93%以上;取离体叶片再生芽苗的茎尖进行共培养诱导多倍体,50 mg/L秋水仙素处理50 d和60 mg/L秋水仙素处理30 d或40 d时,诱导植株变异的效果最佳,变异率均达30%以上。     

同源四倍体黑皮冬瓜的诱导与倍性鉴定

【目的】探索高效的同源四倍体黑皮冬瓜Benincasa hispida诱变方法组合和寻求简便、快速、大通量、准确的倍性鉴定方法。【方法】以二倍体自交系幼苗为材料,利用不同浓度的秋水仙素和Oryzalin在06:00—07:00、12:00—13:00、17:00—18:00共3个时间段"剥滴"处理幼苗生长点来诱变产生同源四倍体黑皮冬瓜,利用植株形态学、细胞学及流式细胞术鉴定法与根尖染色体计数鉴定法对变异株进行倍性鉴定。【结果】不同浓度的秋水仙素和Oryzalin在不同时间段处理幼苗,均有一定的诱变效果,但秋水仙素的诱变率整体高于Oryzalin处理,且以2 g·L~(-1)的秋水仙素在06:00—07:00处理的诱变率最高,达32.18%;集成植株形态学、细胞学及流式细胞术鉴定的结果与根尖染色体计数法倍性鉴定的结果一致。【结论】2 g·L~(-1)的秋水仙素在06:00—07:00"剥滴"处理为最高效的诱变组合方法;集成植株形态学、细胞学及流式细胞术鉴定方法能简便、快速、大通量、准确地进行倍性鉴定。     

大岩桐的组织培养

以大岩桐的叶片为外植体进行组织培养。结果表明:叶片可诱导形成愈伤组织。经实验筛选出各培养阶段最适宜的培养基:(1)诱导、继代培养基为Ms+BA2mg·L-1+NAA0.2mg·L-1;(2)生根培养基为1/2Ms+IBA0.2mg·L-1+AC1g·L-1。     

朱顶红的组织培养

取朱顶红 (Hippeastrum)幼鳞茎盘切块接种于加不同激素配比的MS基本培养基上进行组织培养 ,结果表明 :最适不定芽诱导培养基为MS 0 .5mg LKT 0 .5mg L 6 BA ,不定芽增殖培养基为MS 1.5mg LKT 0 .0 5mg L 6 BA ,不定根培养基为MS 0 .3mg LNAA。试管苗不经过生根可以直接出瓶 ,移栽于壤土∶腐叶土∶河沙为 5∶3∶1(体积比 )基质中 ,成活率可达 98%。     

利用流式细胞仪检测草莓倍性方法的优化

[目的]建立一套利用流式细胞仪快速鉴定草莓倍性的方法,为草莓新品种选育提供技术支持.[方法]以二倍体森林草莓、四倍体东方草莓、六倍体智利草莓和八倍体凤梨草莓为试材,通过改良提取液、增加离心和过滤次数等,应用流式细胞仪对大田生长的草莓植株根尖、茎尖和幼叶进行倍性检定.[结果]不同部位材料检测峰值有所不同,其中匍匐茎茎尖和根尖的细胞检测效果优于幼叶;在提取液中加入巯基乙醇,可使荧光通道值峰形更饱满;增加离心次数和上机前再过滤,可使峰值更清晰.[结论]利用流式细胞仪检测草莓倍性的优化条件为:采用匍匐茎茎尖或根尖的细胞为检测试材,在常规提取液中添加巯基乙醇来制备DNA悬浮液,DNA悬浮液离心漂洗3次后经300目尼龙网过滤再上机检测.     

番茄无土栽培与土培对比试验

对番茄进行无土栽培（水培和基质培）与土壤栽培对比试验。结果显示：定植后６０ｄ，水培和基质培的番茄株高、开展度、根颈粗均优于土壤栽培，产量分别比增６０．４％和５１．５％，单果重增加，早疫病、晚疫病、叶霉病、病毒病发病率降低１０．３～２１．１个百分点，并能避免土传病害青枯病的发生。     

葡萄离体培养及快速繁殖

取“无核白鸡心”“美人指”“甬优一号”等3个葡萄品种0．5cm长的单芽嫩茎作为外植体，接种于不同配方的培养基上。结果表明“无核白鸡心”“美人指”接种于GS分别附加6－BA1．0mg.L^-1和2．0mg.L^-1的培养基，“甬优一号”接种MS附加6－BA1．0mg.L^-1培养基诱导芽，芽的诱导率分别达100％，100％和86％。当芽伸长至1．0－1．5cm时，3个品种种均转接于MS‘附加IAA0．05mg.L^-1，6－BA1．0mg.L^-1和GA32．0mg.L^-1的分化培养基，芽的分化最佳，分化率达80％－865，增殖4．2倍左右，苗生长健壮。将“无核白鸡心”转入1／2MS附加IBA1．0mg.L^-1，“美人指”“甬优一号”转入1／2MS附加IBA2．0mg.L^-1的培养基，生根率达84％－96％，平均根数在5－7之间，根生长良好，表6参10     

芦荟的叶片组织培养

以美国库拉索芦荟叶片为外植体直接诱导不定芽的产生，诱导培养基为MS BA4mg/L 香蕉汁10%，不定芽诱导率为42%；增殖培养基为MS BA3mg/L，继代周期20天，增殖倍数10倍以上；生根培养基为MS NAA0.5mg/L 多效唑（MET）1mg/L或MS IBA1mg/L MET1mg/L,试管苗的移栽成活率达95%以上。