斑点金标免疫渗滤新技术检测家畜血吸虫病的效果试验

采用血吸虫病斑点金标免疫渗滤诊断技术在永胜县做了动物血吸虫病感染符合率、特异性试验,共检测2 800份牛血纸,结果检出阳性78头;检测755份牛血清,检出阳性72头;再对被检查的2 800头牛采用粪便毛蚴孵化法检出阳性74头。免疫学诊断结果与病原检查结果阳性符合率血纸达94.8%,血清达97.3%。同时在县内非疫区乡(镇)做了阴性符合率试验,符合率达100%。血吸虫病斑点金标免疫渗滤诊断技术在永胜县6个血防区试验运用,取得了成功。     

斑点金标免疫渗滤法诊断家畜血吸虫病的效果

我县从2005-2006年推广应用斑点金标免疫渗滤法(DIGFA)诊断家畜血吸虫病新技术,该项新技术具有快速、简便、准确、省时、省力等优点,使阳性病畜得到及时治疗,取得了满意的效果。1材料与方法1.1诊断试剂DIGFA诊断试剂及Dot-ELISA诊断试剂均由浙江省农业科学院畜牧兽医研究所提供     

斑点酶标法与斑点金标免疫渗滤法检测牛血吸虫病初探

目的比较宽点酶标法与癍点金标免疫渗滤法检测牛血吸虫病的效果。方法选择疫区水牛,耳静脉取血制备血纸,作为待检样品。分别采用斑点金标免疫渗滤法与癍点酶标法检测,比较检测结果。结果癍点金标渗滤法检测仅需30min,而斑点酶标法则需160min。结论疵点金标免疫渗滤法检测牛血吸虫病,操作简便易行、快捷,省时、省工,工作效率成倍提高。     

斑点金标免疫渗滤法快速检测牛血吸虫病抗体的效果观察

目的观察斑点金标免疫渗滤法检测牛血吸虫病抗体的效果。方法使用斑点金标免疫渗滤诊断试剂盒检测粪检血吸虫病牛血清(血纸)146头份,疫区耕牛血清(血纸)562头份,并用间接血凝法(indirect haem aggluti-nation assay,IHA)法作对比。结果146头份粪检阳性血清(血纸)检测为阳性者140头份,阳性检出率95.9%,IHA法检测为阳性者141头份,阳性检出率96.6%。结论斑点金标免疫渗滤法检测牛血吸虫病具有快速、简便、灵敏度高、特异性强等优点,但仍有一定漏检,有待于进一步研究提高。     

斑点金免疫渗滤测定法检测耕牛血吸虫病

免疫胶体金技术是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术，没有潜在致癌物质的酶显色底物。斑点金免疫渗滤测定法是将斑点酶标与免疫胶体金结合起来的一种新型的免疫标记技术。将被检抗体（血清或血纸浸出液）直接点样在硝酸纤维素膜上，滴加胶体金标记的血吸虫抗原，特异性抗原与抗体很快结合，在反应处发生金颗粒聚集，1min左右形成肉眼可见的红色斑点。     

斑点金免疫渗滤测定法检测耕牛血吸虫病的效果观察

免疫胶体金技术是以胶体作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型免疫标记技术，没有潜在致癌物质的酶显色底物。斑点金免疫渗滤测定法是将斑点酶标与免疫胶体金结合起来的一种新型免疫标记技术。该测定方法是将被检抗体（血清或血纸浸出液）直接点样在硝酸纤维素膜上，滴加胶体金标记的血吸虫抗原，特异性抗原与抗体很快结合，在反应处发生金颗粒聚集，1min左右形成肉眼可见的红色斑点，判定检测效果。     

大理州试验推广斑点金标免疫渗滤诊断技术

大理州是全国、全省血吸虫病重疫区，12县（市）中历史疫区有11个，经过几十年的艰苦努力，2008年实现了以行政村为单位达血吸虫病传播控制标准，取得了显著的成效。但离达血吸虫病传播阻断标准仍有较大距离，洱源、巍山、大理、南涧、鹤庆、弥渡等6个县（市）局部地区的流行态势依然严峻。     

斑点免疫金渗滤法检测片形吸虫病试验

片形吸虫病是一种常见的寄生虫病,对畜牧生产造成较大损失,同时又是一种人畜共患病,对人的健康造成威胁。传统诊断方法一般靠检查宿主粪便中虫卵,而虫体成熟排卵要在感染后3～4个月,因此不能早期治疗和有效控制此病传播。近些年发展起来的血清学诊断方法可以在感染早期查出特异性抗体,从而揭示出感染的存在。为此,寻找一种准确,敏感而又方便快捷的检测方法一直是各国研究者的目标。继间接血凝试验,酶联免疫吸附试验（ELISA）及斑点酶联免疫吸附试验（DOt－ELISA）之后,本试验是首次将斑点兔疫金渗滤法（DIGFA）用于片形吸…     

用斑点金免疫渗滤试验检测牛结核分枝杆菌IgG抗体

用牛结核分枝杆菌制备牛结核菌糖脂抗原，并固定在NC膜上，将牛IgG单克隆技体与胶体金连接。通过临床检验，在结核菌素皮肤试验99例阳性牛中，斑点金免疫渗滤试验阳性60例；皮肤试验139例阴性牛中，金标阴性111例。该法简便快速，可作为皮肤试验的辅助试验。     

检测家畜血吸虫抗体的二步金标免疫渗滤法研究

将待检家畜血纸浸出液点在硝酸纤维素膜上，以金标记的血吸虫虫卵可溶性抗原为探针（以下简称血吸虫抗原胶体金），建立了检测家畜血吸虫抗体的二步金标免疫渗滤法（Two-step Dot Immunogold Filtration Assay，T—DIGFA）。家畜血吸虫病阳性血样在50-90S形成肉眼可观察的红色斑点，可进行快速诊断。该法可以检测出人工感染血吸虫尾蚴7d和7d以上的阳性牛和兔血纸抗体，与肝片吸虫、锥虫、蛔虫病之间无交叉反应。T—DIGFA检测粪孵血吸虫毛蚴阳性牛血纸139份、阴性牛血纸130份，与粪孵法阳性符合率为100％，阴性符合率为99．2％；T—DIGFA与斑点酶联SPA法阳性符合率和阴性符合率完全相同。血吸虫抗原胶体金在4～8℃保存期可达6个月、室温保存期为3个月。试验证实，T-DIGFA有很高的敏感性、特异性、重复性和稳定性，适合于基层单位和现场进行家畜血吸虫病抗体的快速诊断、普查和检疫。     

斑点免疫金渗滤法检测赤羽病抗体的研究

以亲和层析原理为基础,将提纯的AKAV抗原包被在硝酸纤维膜上,利用胶体金标记SPA显色,建立了斑点免疫金渗滤法诊断赤羽病抗体的方法。其中最佳点样抗原质量浓度是0.099mg/mL,封闭液选择含1%BSA,0.5%Tween-20的0.01mol/LpH7.2的PBS缓冲液,SPA胶体金最佳稀释度为1∶4。特异性试验表明,该方法特异性好,与牛病毒性腹泻病毒、牛传染性鼻气管炎、牛白血病、口蹄疫、蓝舌病等阳性血清不发生交叉反应。将DIGFA与ELISA进行对比,差异不显著。研究结果表明,该方法操作简单,结果易于判断,适用于赤羽病的临床诊断和流行病学调查。     

应用斑点免疫金渗滤法诊断犬弓首蛔虫病

根据免疫渗滤原理,采用犬弓首蛔虫抗原蛋白和胶体金标记SPA,建立抗犬弓首蛔虫抗体的斑点免疫金渗滤法(D IGFA)检测200份犬血清样本。结果:阳性检出率为8.00%(16/200);血清样本对应犬粪便用饱和盐水漂浮法检查虫卵,阳性检出率为2.0%(4/200)。结论:斑点免疫金渗滤法具有操作简便、灵敏度高、特异性强的优点,可用于犬弓首蛔虫病的早期、快速检测。     

斑点免疫金渗滤法检测猪瘟抗体的研究

以猪瘟抗原包被硝酸纤维素膜，然后用胶体金标记SPA，建立检测猪瘟抗体水平的斑点免疫金渗滤法检测试纸盒。通过胶体金标记金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)直接显色，阳性者出现红色斑点，结果易于判断。整个试验过程仅需5min，操作简单，与猪兰耳病、猪伪狂犬病、猪细小病毒、新城疫和禽流感等阳性血清不发生交叉反应。同时将该法与目前猪瘟的常规检测方法Dot—ELISA法和间接血凝试验同时对200份猪血清进行猪瘟抗体检测比较，符合率达98．4％和98．9％。说明该法微量、特异、敏感可靠，检测时间短，效果直观，非常适用于猪瘟的早期诊断和普查以及疫苗免疫效果后抗体水平的检测。     

猪乙型脑炎血清抗体DIGFA检测方法的建立与应用

本试验建立了一种以固相滤膜为载体，以红色胶体金颗粒标记的免抗猪IgG作为探针，特异性地检测猪流行性乙型脑炎病毒抗体的斑点金免疫渗滤测定法（DIGFA）。与血凝抑制试验（HI）对比检测了54份猪血清临床样本，两法的阳性符合率为71.4%、阴性符合率为65.5%、总符合率为81.4%。本法中抗原抗体通过渗滤在膜上进行反应，数分钟内即可用肉眼观查结果，具有快速，操作简单，敏感性高，特异性强，重复性好，易于判读等优点，特别适合于猪流行性乙型脑炎快速诊断和大规模血清流行病学调查。     

斑点免疫结合试验对蓝氏贾第鞭毛虫感染者粪中特异性抗原的检测

应用蔗糖密度梯度离心技术从蓝氏贾第鞭毛虫感染者的粪便中分离纯化贾第虫包囊，以此包囊免疫家兔，获得免疫血清，经大肠杆茵吸收后建立斑点免疫结合试验，检测粪中贾第虫特异性抗原。以此法检测３９例贾第虫感染者粪便，有３６例出现阳性斑点，阳性检出率为９２．３％。以超声粉碎的贾第虫包囊抗原为标准，３６例阳性标本中，有３５例标本贾第虫特异性抗原蛋白含量分布在３９～６９ｎｇ／ｍＬ范围内，１例为１３８ｎｇ／ｍＬ。     

应用斑点免疫金渗滤法检测羊东毕吸虫病的研究

应用自行研制的胶体金探针标记ＳＰＡ，建立了诊断羊东毕吸现的新方法－斑点免疫金渗滤法（ＤＩＧＦＡ），该法与ＥＬＩＳＡ法具有良好的相符性，将抗原、等检血清滴加于膜上进行反应，数分钟内即可用肉眼进行结果判定。     

Assay for endogenous heparin in plasma of livestock using a synthetic chromogenic substrate

The levels of endogenous heparin in the plasmas of horses, cows, sheep and pigs were determined with the use of synthetic chromogenic substrate benzoyl-isoleucyl-glutamyl-glycyl-arginyl-p-nitroanilide (S-2222). The lowest heparin concentrations were stated in cattle plasma, the highest ones in the plasma of pigs.     

Detection of Toxoplasma gondii in free-range chickens in China based on circulating antigens and antibodies

Toxoplasma gondii is widely distributed in humans and other animals including domestic poultry throughout the world, but the data on prevalence of T. gondii in free-ranged (FR) chickens in People's Republic of China (PRC) are limited. In the present study, the seroprevalence of T. gondii infection in FR chickens was investigated in 13 provinces/municipalities of China during the period from January to June 2010. A total of 1173 serum samples were collected and assayed for T. gondii circulating antigens (TCA) and antibodies (TCAb) using enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) technique. Out of this number, 199 samples were TCA positive (16.97%), 226 samples were TCAb positive (19.27%), 69 samples were positive for both TCA and TCAb (5.88%), and the total seropositive rate was found in 356 of 1173 (30.36%). The results of the present survey indicated that infection with T. gondii in FR chickens is widely spread in China.