白三叶草高频率植株再生系统的研究

通过对白三叶草子叶和下胚轴植株再生系统的研究发现 ,白三叶草胚轴生长点的再生能力最强 ,子叶和下胚轴再生能力极低 ;胚轴生长点直接再生频率在 6 6 %以上 ,以 6BA 3mg/L时再生频率最高 ,达 95 % ;再生植株的快速繁殖以 6BA 1～ 2mg/L ,NAA0 .5～ 0 .8mg/L较适宜 ;生根培养以IBA0 .1～ 0 .3mg/L ,NAA0 .1～ 0 .2mg/L较适宜     

高加索三叶草ISSR-PCR反应体系的建立与优化

高加索三叶草(Trifolium ambiguum Bieb.)是许多干旱和寒冷地区可以种植并在各方面表现优良的三叶草种,建立适用于高加索三叶草的ISSR反应体系,将为ISSR标记技术在三叶草属品种资源研究中的应用提供参考.本试验通过优化影响高加索三叶草ISSR-PCR的主要参数,建立适于高加索三叶草的ISSR反应体系和扩增程序.在25μL体系中各反应物的最适含量为:20 ng模板DNA,0.2 mmol/L dNTP,0.8μmol/L ISSR引物,1.0 U TaqDNA聚合酶,2.5μL 10×PCR Buffer,2.0mmol/L MgC12.PCR扩增程序为:94℃预变性2 min,94℃变性30s,55℃退火45s,72℃延伸1 min,共30个循环;72℃延伸7min,4℃保温.     

豇豆再生体系的建立

以丰产2号豆角下胚轴、上胚轴、茎段、真叶和顶芽作外植体进行了豇豆再生体系研究,结果表明,豇豆组织培养以愈伤组织诱导培养基和继代培养基为MS 6-BA 2.0 mg/L NAA 2.0 mg/L,不定芽诱导培养基为MS 6-BA2.0 mg/L NAA 0.2 mg/L,生根培养基为1/2MS 6-BA 0.2 mg/L 2,4-D 2.0 mg/L较适宜。     

玉米不同外植体愈伤组织的诱导及植株再生的研究

以玉米自交系18红和18白为材料，取其幼胚、茎尖、成熟胚和下胚轴为外植体，对愈伤组织的诱导和植株再生进行了研究。结果表明：上述4种外植体均可诱导出愈伤，但仅从幼胚和茎尖诱导出胚性愈伤组织．转入分化培养基后获得了再生植株，而成熟胚和下胚轴不能获得再生植株。     

丰花月季再生体系的建立

分别以丰花月季叶片、叶柄和茎段为外植体,进行了愈伤组织的诱导及植株再生的研究。结果表明,丰花月季诱导愈伤组织最佳激素浓度配比是1/2MS+2,4D 5 mg.L-1+BA 1 mg.L-1;所得到的愈伤组织在MS+6-BA1 mg.L-1+2,4D 2.5 mg.L-1+GA3 1 mg.L-1的培养基上继代保存两个月后于MS+NAA 0.02 mg.L-1+TDZ 1.8 mg.L-1+KT1 mg.L-1上分化出不定芽;不定芽在1/2MS+IBA 0.5 mg.L-1上的生根率为91.25%。     

魔芋愈伤组织诱导、分化及植株再生的初步研究

采用白魔芋(Amorphophallusalbus)块茎为外植体,以MS培养基为基本培养基,在不同生长调节剂组合的诱导培养基和分化培养基上进行培养。试验结果显示,在MS+0.5mg·L-16 BA+0.5mg·L-1NAA、MS+0.5mg·L-16 BA+0.5mg·L-12,4 D及MS+1.0mg·L-16-BA+1.0mg·L-12,4 D的培养基上容易诱导愈伤组织(诱导效率分别为92%、96%和93%),且愈伤组织容易分化;在分化培养基MS+1.0mg·L-16 BA+0.1mg·L-1NAA及MS+1.0mg·L-16 BA+0.5mg·L-1NAA上,愈伤组织容易分化(分化效率分别为86%和52%)。将在MS+1.0mg·L-16 BA+0.1mg·L-1NAA培养基上分化出的不定根和不定芽转至MS培养基上,30d后培养出完整植株。     

苦瓜离体再生体系建立的研究

[目的]研究影响苦瓜离体再生体系建立的条件,为苦瓜遗传转化体系的建立奠定基础。[方法]以碧绿二号、丰绿、共和、早绿和大顶苦瓜品种无菌实生苗为试材,探讨了不同前处理、不同激素组合及培养条件对苦瓜离体形态发生的影响。[结果]播种前对苦瓜种子进行预处理能明显提高发芽率和发芽势,苦瓜愈伤组织的诱导率比较高,不受基因型和外植体种类的限制;选用上胚轴为外植体的愈伤组织发生效果较其他外植体好;12种外源激素组合中,较强分裂素类物质ZT与激动素KT组合,对愈伤组织的分化有促进作用,以MS+ZT4 mg/L+KT1 mg/L分化培养基为最佳;苦瓜愈伤组织的再分化用琼脂固化的MS培养基比液态MS培养基效果好;pH值过低或过高都不适宜愈伤组织分化,以5.8为最适。[结论]该研究为苦瓜离体再生体系的建立提供了理论基础。     

紫花苜蓿愈伤成苗高频再生体系的建立及其影响因子的研究

 对秘鲁苜蓿等品种的子叶和下胚轴愈伤再生植株过程进行了系统研究。经筛选获得了以改良的SH大量元素 +MS微量元素及铁盐 +水解酪蛋白 +VB19.9mg·L-1+VB69.5mg·L-1+尼克酸 4 .5mg·L-1+琼脂 8g·L-1为基本成分的愈伤成苗高频再生体系。其中 ,诱导愈伤和保持愈伤的培养基加 2 .0mg·L-12 ,4 -D +0 .0 2 5mg·L-1KT ;诱导再生植株分化的培养基加 0 .4mg·L-1KT +2 0g·L-1的蔗糖 ;诱导生根的培养基为 1/ 2MS ,其中蔗糖浓度为 10 g·L-1。秘鲁苜蓿子叶愈伤组织分化率达 10 0 % ,下胚轴愈伤组织分化率达 92 %以上。以该体系完成苜蓿愈伤植株再生具有高效、快速的特点 ,完成植株再生仅需 6 0～ 70d。     

菊花叶片离体高效再生体系的建立

本文报道了以菊花叶片为外植体，诱导植株再生，建立高效植株再生体系。获得诱导愈伤组织、芽和根的最佳培养基。在有6-BA、NAA的MS培养基上获得较高的愈伤组织诱导率，在有2，4-D的培养基上其愈伤组织诱导率很低。带有愈伤组织的外植体转移到有6-BA、NAA的MS培养基上催化芽的产生，并筛选出能直接诱导芽再生的培养基(MS 6-BA(3mg／L) NAA(1mg／L))。AgNO3可明显提高芽的再生率。茎段在1／2MS和有IBA或NAA的1／2MS培养基上诱导生根。生根的小苗在温室里生长良好。     

高加索三叶草和白三叶幼苗期抗旱性生理研究

试验在模拟干旱的条件下，测定了幼苗期高加索三叶草和白三叶在干旱胁迫下的抗旱生理指标，通过观测在干旱条件下的存活时间、叶片细胞质膜透性、游离脯氨酸含量、过氧化物酶活性等生理指标的变化，并与同期正常浇水组相比较。根据各指标的变化动态对幼苗期高加索三叶草和白三叶的抗旱性能进行了初步的研究和探讨。试验表明，高加索三叶草幼苗比白三叶表现了更强的抗旱性。     

马铃薯再生体系的建立

马铃薯再生体系的建立是进行马铃薯遗传转化的前提条件.本研究以马铃薯克新1号为植物材料,对马铃薯愈伤组织的诱导、不定芽的分化进行了最佳培养基优化.结果表明,马铃薯诱导愈伤组织的最佳培养基激素浓度是2.5mg/L 6-BA、0.2mg/L NAA,且茎段的诱导率要高于叶片的诱导率.不定芽分化的最佳培养基激素浓度为2.0mg/L 6-BA、0.1 mg/L NAA、5.0 mg/L GA3,诱导率为30％,诱导的不定芽在0.2 mg/L NAA生根培养基中可以正常生根.本研究初步建立了马铃薯再生体系,为后续的金黄色葡萄球菌奶牛乳腺炎转基因马铃薯疫苗的制备奠定了基础.     

青花菜高效离体再生体系的建立

以青花菜为试验材料,探讨了影响离体再生的一些因素,结果表明：取用4～5d龄无菌苗的带柄子叶和下胚轴,分别培养在MSB＋NAA0．2mg／L＋6-BA2mg／L和MSB＋NAA0．2mg／L＋6-BA1．0mg／L＋AgNO3 2．5mg／L培养基上,获得了较高的分化率（80％）;再生芽插入MS＋IBA0．2mg／L培养基,生根率达100％。     

影响草莓叶片植株再生因素的研究

目前建立草莓的再生体系大多采用TDZ作为主要激素，本研究以广泛栽培的四个草莓品种为材料，系统地研究了不同基因型、叶龄、褐化、暗培养、基本培养基、不同激素组合、Ag^ 等诸多因素对叶片再生的影响，建立了不依赖于TDZ的弗吉尼亚草莓叶片外植体的不定芽再生体系。研究结果表明Ag^ 并不能促进草莓弗吉尼亚植株的再生，反而起到了抑制作用。以顶部充分伸展的18～21d叶龄的无菌苗叶片为外植体，再生效果最好，将此类叶片放在以MS为基本培养基、附加1．6～1．8mg/L6-BA，0．1mg／L NAA，0．4-0．5mg／L KT，O．1mg/L2，4-D的分化培养基上，14d后便可见到不定芽，经过愈伤组织阶段从叶片上分化产生，出现的高峰期在接种后的20—30d，芽分化率高达60％以上。该再生体系可作为基因转化的受体系统。     

甘薯组织培养高效植株再生体系的建立

以甘薯的叶片和茎段为外植体,建立了甘薯组织培养高效植抹再生体系.愈伤组织诱导的最适培养基为MS+0.1 mg/L NAA+1.0 mg/LBA,最适的芽诱导培养基为MS+1.0mg/L NAA.在该培养基上芽直接由外植体上产生,有的单生,有的簇生,芽最高诱导率为88.9%.不同基因型问以及同一基因型不同外植体间芽诱导率不同.诱导出的不定根转入新的培养基中,仍能分化出芽.诱导出的芽转入不合任何激素的MS培养基中,20天后长成7～10cm高的小苗,移入无菌土盆中,成苗率达100%.     

青花菜高效离体再生体系的建立

以青花菜为试验材料,探讨了影响离体再生的一些因素,结果表明:取用4～5 d龄无菌苗的带柄子叶和下胚轴,分别培养在MSB+NAA 0.2 mg/L+6-BA 2 mg/L和MSB+NAA 0.2 mg/L+6-BA 1.0 mg/L+AgNO3 2.5 mg/L培养基上,获得了较高的分化率(80%);再生芽插入MS+IBA 0.2 mg/L培养基,生根率达100%.     

白三叶草和多年生黑麦草根系间钾和钙的转移

设计并运用两段培养基方法研究了白三叶草和多年生黑麦草根系间钾和钙的转移.结果证实这2种牧草混生时,根系生长在一起,可以通过“根-根接触”和“外流-再吸收”等方式进行养分转移.介质中钾浓度为0.1mmol/L 时,2种牧草钾转移量差别不大;钾浓度为1.0mmol/L 时,白三叶草接受转移的钾高于多年生黑麦草.介质中钙浓度1.0～5.0mmol/L 时,白叶三草接受转移的钙量都高于多年生黑麦草.     

黄秋葵子叶离体再生体系的建立

以带子叶和部分下胚轴的顶芽为外植体,建立再生体系。结果表明,下胚轴长度为2 mm时有利于不定芽的形 成,7-10 d苗龄的外植体最易诱导出不定芽,芽分化和生长的最适温度为25±1℃。6-BA<1 mg／L不定芽难以发 生,6-BA 6+NAA 0.1有利于不定芽形成;CA3 2.0可以提高不定芽的诱导率。