枯草芽孢杆菌抑菌成分研究进展

枯草芽孢杆菌因其分布广泛和对环境无公害,在农业、工业、医药卫生等行业有着广泛的应用。近年来,国内外对枯草芽孢杆菌进行了探索,其菌体在新型抑菌生物制剂中有所应用,但以其分泌的抑菌成分作为原材料的抑菌制剂目前还处在理论阶段。本文主要从四方面对枯草芽孢杆菌抑菌成分进行综述,分别为抑菌成分的分类、抑菌机制、未来可能的应用和提取方法的优化。同时,为了使枯草芽孢杆菌抑菌成分能广泛应用于食品防腐技术、食品杀菌技术等多个方面,生产大剂量、高纯度的抑菌成分成为亟待解决的问题,这需要进一步提高抑菌成分的纯度与产量的相关研究。最后,为枯草芽孢杆菌抑菌成分的未来探索提供了可行的方向。     

枯草芽孢杆菌抑菌强度比较试验研究

本实验室从不同来源分离鉴定16株枯草芽孢杆菌,应用滤纸片方法进行抑菌强度的试验比较.试验分析结果表明:枯草芽孢杆菌菌株抑菌强度不同,从16株中比较筛选出4株抑菌性较强的枯草芽孢杆菌.芽孢杆菌的抑菌作用强度主要取决于产生抗菌肽的性质和产生量.本试验比较筛选出的4株枯草芽孢杆菌所产生的抗菌肽的性质,如何优化培养条件、培养基...     

瘤胃源枯草芽孢杆菌BX1-12的筛选鉴定及其产酶抑菌活性

本试验通过筛选瘤胃环境中具产酶抑菌活性的芽孢杆菌,为开发功能型饲用微生态制剂奠定基础。采用可培养的方法从健康高产奶牛瘤胃液中分离芽孢杆菌,并测定其产酶能力及抑菌活性,同时对筛选到的功能菌株进行生理生化和分子生物学鉴定。结果显示：从健康高产奶牛瘤胃液中筛选出一株芽孢杆菌BX1-12,其产纤维素酶、蛋白酶及α-淀粉酶活力分别为27.33、137.54 U/mL和1450.53 U/100 m L,同时该菌具广谱抑菌效果,对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和伤寒沙门氏菌的抑菌圈直径分别为13.62、23.21 mm和25.97 mm。结合Biolog生理生化实验及16S rRNA序列分析,鉴定该菌为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）。综上,从健康高产奶牛瘤胃液中分离得到的这株枯草芽孢杆菌BX1-12,具有产多种酶活及广谱抑菌的能力,是一株良好的用于奶牛微生态制剂的候选菌株。     

枯草芽孢杆菌MA139类细菌素抑菌活性的研究

为测定枯草芽孢杆菌MA139产生的类细菌素的抑菌活性。本试验采用管碟法对枯草芽孢杆菌MA139产生的类细菌素对多株革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌和真菌的抑菌活性进行测定。结果表明:类细菌素不但对芽孢杆菌属的其他菌种有抗菌活性,对病原菌和霉菌也有拮抗作用;不同指示菌对类细菌素的敏感性不一样,其中金黄色葡萄球菌对其最敏感。该类细菌素具有广谱抗菌作用,有作为畜禽饲料添加剂的潜力。     

枯草芽孢杆菌BSPE2501对草坪炭疽病菌的抑制作用

测定了枯草芽孢杆菌BSPE2501菌体和在不同培养时间、培养基、培养基量、转速条件下获得的发酵液对草坪炭疽菌的抑制作用。结果表明：BSPE2501菌体对病原菌菌丝生长和孢子萌发均有明显抑制作用;在NB和BPY中培养获得的发酵液的抑制作用高于在LB和PD中的抑制作用,其1倍发酵液对菌丝生长的抑制率分别达到66．2％和65．5％,明显高于LB（53．5％）、PD（45．8％）的抑制率;其孢子萌发抑制率分别为44．6％、43．1％,高于LB（35．2％）、PD（28．6％）的抑制率;在NB中培养72h、培养基量为100ml、培养转速为150r／min等条件下获得的发酵液的抑菌效果最好,在此条件下获得的1倍发酵液对菌丝生长和孢子萌发的抑制率分别为85．3％和46．9％、75．7％和43．1％、67．2％和43．4％。     

两种益生芽孢杆菌体外抑菌活性及其耐药性研究

试验分别采用牛津杯法和微量肉汤稀释法进行益生芽孢杆菌体外抑菌活性及耐药性研究,结果显示,枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌对大肠埃希菌C83901、C83917和沙门菌有中、低度抑制作用;对抗敌素、硫酸黏菌素、喹乙醇有一定耐药性．而吉他霉素和硫酸新霉素对这2种杆菌抑制作用较强,不宜联用。     

奶牛阴道分泌物中枯草芽孢杆菌的分离鉴定及抑菌效果分析

从奶牛阴道分泌物中分离出一株细菌,经过菌落形态特征、生理生化鉴定初步判定为芽孢杆菌属;根据16S rRNA基因序列及其同源性分析结果,证实分离得到的Y4菌株是枯草芽孢杆菌,与GenBank上的枯草芽孢杆菌16S rRNA基因序列同源性为99.6%。对此菌株进行抑菌试验,发现该菌株对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和链球菌有较好的抑菌效果。该研究为将来研制益生菌制剂防治奶牛生殖道疾病提供了物质基础。     

饲用枯草芽孢杆菌抑菌性能的研究进展

文章综述枯草芽孢杆菌在体内、体外的抑菌性能,旨在保障枯草芽孢杆菌的饲用效果,重点总结3方面：其一,枯草芽孢杆菌抑菌性能评估方法;其二,枯草芽孢杆菌的体外抑菌作用（牛津杯法体外抑菌试验评估）;其三,饲用枯草芽孢杆菌对畜禽肠道菌群的调控效果（体内抑菌试验评估）。体外试验文献显示,枯草芽孢杆菌对肠道有害菌和饲料源有害菌的抑菌报道较多,对肠道有益菌和其他商业益生菌的抑制研究很少,且不同菌株的抑菌性能差异较大,这与饲用枯草芽孢杆菌对畜禽肠道有益菌及个别有害菌调控出现差异化结果相符。文章建议完善枯草芽孢杆菌体外抑菌评估的体系,这有助于筛选安全的菌株及高效地研制单一和复合饲用枯草芽孢杆菌制剂。     

枯草芽孢杆菌源抗生素研究进展

枯草芽孢杆菌为革兰阳性菌,其基因组结构复杂,能产生多种抗生素,主要包括肽类物质和非肽类物质。肽类物质可分为两类,一类由核糖体途径合成,另一类由非核糖体途径合成;非肽类物质包括聚酮化合物、氨基糖和磷脂。论文介绍了已知的枯草芽孢杆菌抗生素的结构和生物合成过程,给出一些抗生素的调控途径。概述了枯草芽孢杆菌抗生素除抗菌活性以外其他的生物学活性,为枯草芽孢杆菌抗生素的研究提供参考。     

枯草芽孢杆菌对肉鸡的影响

文章综述了枯草芽孢杆菌对肉鸡肠道菌群、肠黏膜结构、肠道酶活性、生产性能、对养分的吸收利用率以及对鸡舍有害气体含量的等的影响,以期为枯草芽孢杆菌饲料添加剂在肉鸡生产中的合理应用提供参考.     

抗香蕉枯萎病病原菌中药材的筛选

通过研究22种中药材的水提与醇提液对引起香蕉枯萎病的尖镰孢菌古巴专化型4号生理小种菌丝生长的影响,发现丁香和大蒜对其具有显著的生长抑制作用,姜黄与黄连只有水提液对其具有较好的抑制作用;青皮、苍术、紫草和茜草等中药材对其生长具有明显的促进作用;黄连、姜黄、厚朴、黄苓、鱼腥草、续断、地肤子、穿心莲等对其蒽醌类色素的合成具有抑制作用,且这种抑制表现出科内的一致性。在对尖镰孢菌4号生理小种孢子萌发的抑制方面,只有丁香和大蒜具有明显的效果。实验结果表明,丁香、大蒜、姜黄和黄连具有开发成为香蕉枯萎病防治药品的潜能。     

香蕉枯萎病生防细菌ZJ6-6的盆栽防治效果及其生防基因分析

通过病原菌和生防菌人工接种方法测定生防细菌ZJ6-6对香蕉枯萎病的盆栽防治效果,扩增和序列分析ZJ6-6的生防基因。结果表明：ZJ6-6处理香蕉的萎缩指数和导管褪色指数比对照香蕉分别降低40.5%和43.9%,其对香蕉枯萎病具有显著防治效果;ZJ6-6至少含有6个生防基因ituD、lpa-14、bmyB、fenD、srfAA、srfAB,理论上具有合成脂肽抗生素的能力,这可能是其能防治香蕉枯萎病的原因。本研究结果对ZJ6-6合成分泌的抗菌物质鉴定及其生防机理研究具有重要意义。     

香蕉枯萎病拮抗放线菌的分离鉴定及抑菌机理分析

为丰富香蕉枯萎病生防菌资源,探究其抑菌机理,从润楠树（Machilus pingii ）根系土壤中分离筛选对香蕉枯萎病具有拮抗作用的放线菌,基于16S rRNA序列进化分析和生理生化特征,鉴定其种属。利用激光共聚焦显微镜评测盆栽试验的防控效果,并通过扫描电镜、透射电镜分析其对孢子形态结构及超微结构的影响。筛选出一株拮抗效果较好的放线菌,鉴定为链霉菌属,命名为JRGG-11,该菌对枯萎病四号生理小种（Foc 4）的抑菌率为80.48±1. 49%,发酵液的抑菌率为58.77±1.31%。盆栽试验显示JRGG-11发酵液对Foc 4的防控指数为83.1%。菌株JRGG-11提取物对Foc 4菌丝生长抑制的EC50为18.70 μg/ml。当用4×EC50处理时,Foc 4菌丝形态和细胞完整性被严重破坏,孢子萌发完全被抑制。结果表明,链霉菌JRGG-11具有较好的生防潜能。     

生防芽孢杆菌对芒果镰刀菌的抑菌效果评价

为探索芒果镰刀菌病害生物防治的有效途径,开展了4株生防芽孢杆菌对芒果上镰刀菌的平板对峙和分生孢子萌发等室内生物测定实验。结果表明,供试生防菌发酵液对芒果镰刀菌菌丝生长及分生孢子萌发有明显的抑制作用,其中菌株FCK抑菌活性最强,最高达66.10%,抑菌带达0.85 cM,菌株5a-9、6c-5次之,菌株6a-3抑菌率最弱;菌株FCK对分生孢子萌发的最高抑菌率达56.80%,菌株6a-3次之,菌株6c-5最低;生防菌的发酵灭菌液热稳定性差,高温灭菌后抑菌活性显著下降,对部分镰刀菌分生孢子萌发起到一定的促生作用;发酵灭菌液对分生孢子萌发的促生作用强于发酵滤液。本研究表明,供试芽孢杆菌可以作为芒果镰刀菌病害的生防材料,具有良好的应用前景。     

生防芽孢杆菌与化学杀菌剂混配对香蕉枯萎病菌的室内毒力测定

香蕉枯萎病是毁灭性土传病害,引入生物防治技术可有效降低目前化学杀菌剂的用量,保护生态环境和人类健康。通过平板抑菌试验,研究了2株香蕉枯萎病生防芽孢杆菌C10-1和A5-6对尖孢镰刀菌古巴专化型(Fusarium oxyporum f. sp. cubense)的平板抑制效果以及对化学杀菌剂的适应性,在此基础上,将生防芽胞杆菌与杀菌剂复配,进一步研究其对枯萎病菌的室内抑制效果。结果表明,C10-1菌株对病原菌的抑制效果和对杀菌剂的适应性均优于A5-6菌株,与0.1mg/L咪鲜胺复配后,其抑菌效果显著增强,可达94.96%。     

枯草芽孢杆菌木聚糖酶Xyn B在毕赤酵母中的表达

编码枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis strain GD3b)木聚糖酶(Xylanse B,Xyn B)基因从重组载体pUC-XynB中切割,并克隆到pPICZa A载体中,经酶切和测序鉴定,成功构建了分泌型毕赤酵母表达载体pPICZa-Xyn B。载体经线性化后转入毕赤酵母X-33,并筛选获得可通过甲醇诱导分泌表达Xyn B重组蛋白的毕赤酵母工程菌X-33/Xyn B。     

拮抗菌JKJ-23菌株诱导香蕉抵抗枯萎病机理的初探

摘要：以巴西蕉盆栽苗为试材,通过接种病原菌和灌根拮抗菌菌悬液等4个处理,探索不同的处理下香蕉苗防御酶活性、叶绿素含量及根系活力的差异,从而探究生防菌抗病机理。结果表明：JKJ-23菌悬液处理香蕉苗CAT、PPO、SOD、POD活性明显提高,各处理最大峰值分别是对应时间对照的3.72、2.03、1.72、2.61倍;JKJ-23菌悬液能够很好的抑制病原菌对香蕉苗叶绿素的破坏;无论有无病原菌的存在,JKJ-23拮抗菌菌悬液能够明显地提高香蕉苗根系活力。     

枯草芽孢杆菌B10对饲喂高脂日粮小鼠抗氧化功能的影响

将45只体质量（35±1）g的普通ICR小鼠随机分为对照组（基础日粮）、高脂组（高脂日粮）、处理组（添加0．1％芽孢杆菌B10的高脂日粮）。每组3个重复,每个重复5只。结果显示,高脂日粮组小鼠的试验末期体质量和平均日增重高于对照组和处理组。与对照组相比,高脂组小鼠肠黏膜总抗氧化能力显著降低了28．34％（P〈0．01）;肝脏中TrxR、SOD、GSH—Px和CAT活力分别降低了36．42％（P〈0．05）、22．91％（P〈0．05）、37．34％（P〈0．01）和47．47％（P〈0．01）,血清中抗超氧阴离子、GSH含量、GSH—Px活性分别下降8．206％（P〈0．05）、30．73％（P〈0．05）、47．26％（P〈0．01）。与高脂组相比,处理组肝脏的抗氧化能力显著改善,GSH—Px活力提高了141．35％（P〈0．01）,MDA含量降低了26．85％（P〈0．01）。血清中总抗氧化能力、GSH含量、GSH—Px活力分别提高9．46％（P〈0．05）、28．50％（P〈0．05）、39．95％（P〈0．01）。结果表明,枯草芽孢杆菌B10能够显著提高不同组织中部分抗氧化酶活力,缓解高脂日粮引起的小鼠氧化应激,在肝脏组织中尤为明显。     

Protection activity of a novel probiotic strain of Bacillus subtilis against Salmonella Enteritidis infection

The activity of 240 bacterial isolates screened from the gastrointestinal tracts of native chickens were evaluated for use as a potential probiotic in food animal production in order to protect against animal diseases and reduce pathogenic contamination of human food products. In observing the antagonistic activity of 117 bacilli isolates, 10 of these isolates exhibited higher growth inhibition of seven foodborne pathogens, including Salmonella Enteritidis, Salmonella Typhimurium, Escherichia coli, Bacillus cereus, Staphylococcus aureus, Listeria monocytogenes, and Vibrio cholerae. Beneficial probiotic criteria from these isolates - which included non-pathogenicity, acid and bile salt tolerance, hydrophobicity, and adhesion to intestinal epithelial cells - exhibited that one isolate of NC11 had the most potential as a probiotic. 16S rRNA gene sequencing showed that this NC11 isolate was Bacillus subtilis. This B. subtilis NC11 was sensitive to all antibiotics and was not cytotoxic to intestinal epithelial cells. Reduction of S. Enteritidis attachment to the surfaces of intestinal epithelial cells via action of a cultured medium from B. subtilis NC11 was observed by scanning electron microscopy. B. subtilis NC11 cells, as well as the bacterial cultured medium or the cultured medium adjusted to pH 7, significantly inhibited S. Enteritidis invasion (P<0.01) of intestinal epithelial cells. This study indicates that B. subtilis NC11 has characteristics of a potential probiotic, and exhibits strong inhibition activity against S. Enteritidis infection to intestinal epithelial cells.     

枯草芽孢杆菌B1对饲喂高脂饲粮小鼠抗氧化功能的影响

本试验旨在研究枯草芽孢杆菌B1对饲喂高脂饲粮小鼠抗氧化功能的影响。将45只体重相近[(35±1)g]的普通ICR小鼠随机分为对照组(基础饲粮)、高脂组(高脂饲粮)、试验组[添加质量分数为0.1%枯草芽孢杆菌B1的高脂饲粮],每组3个重复,每个重复5只,饲养30 d。观察枯草芽孢杆菌B1对高脂饲粮小鼠肠黏膜、肝脏和血清的抗氧化能力、氧化应激状态的影响。结果表明:1)与对照组相比,高脂组小鼠的肠黏膜总抗氧化能力(T-AOC)显著减少了28.34%(P<0.01),肝脏超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)和硫氧还蛋白还原酶活性分别显著降低了22.91%(P<0.05)、37.35%(P<0.01)、47.47%(P<0.01)和36.42%(P<0.05);血清还原型谷胱甘肽(GSH)含量、GSH-Px和抗超氧阴离子自由基(O2-.)活性分别显著下降了30.73%(P<0.01)、47.26%(P<0.01)和8.02%(P<0.01);肝脏8-羟基脱氧鸟苷(8-OhdG)含量显著增加了67.87%(P<0.01)。2)与高脂组相比,试验组小鼠的肠黏膜T-AOC显著增加了32.44%(P<0.05),肝脏GSH含量和CAT活性分别显著上升了38.27%(P<0.05)和53.01%(P<0.05);血清T-AOC、GSH含量、GSH-Px和抗O2-.活性分别显著提高了10.72%(P<0.05)、38.01%(P<0.05)、51.98%(P<0.01)和13.45%(P<0.01);肝脏丙二醛、8-OHdG含量和黄嘌呤氧化酶活性分别显著下降了16.01%(P<0.05)、37.52%(P<0.01)和16.25%(P<0.05)。由此可见,高脂饲粮降低了小鼠肠黏膜、肝脏和血清的抗氧化功能;添加枯草芽孢杆菌B1对饲喂高脂饲粮小鼠的抗氧化功能具有一定的增强作用,并能减少机体的氧化应激状态,较好地保护组织细胞,免受氧化损伤。