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猪是戊型肝炎病毒fHEVl的储存器,最近研究表明该病毒从猪到人跨物种传染。HEV大多通过未煮熟的肉或者内脏传播,本研究建立了一步RT—LAMP快速检测猪戊型肝炎病毒。设计ORF3基因特异性的引物,RT—LAMP的检测敏感性为101拷贝/txLRNA模板,比RT—nPCR检测方法敏感10倍。 相似文献
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江西部分地区猪粪便戊型肝炎病毒核酸检测及序列分析 总被引:1,自引:0,他引:1
采集江西省A猪场2~3月龄猪粪便40份,B猪场2~3月龄猪粪便40份,利用反转录套式聚合酶链方法(RT-nPCR),检测戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)RNA,结果表明,A猪场7份样品为阳性,阳性率17.5%.B猪场10份样品为阳性,阳性率25.0%.总阳性率21.3%.对4份PCR扩增阳性产物进行纯化并测序,利用生物学软件进行序列分析和进化树绘制,4个分离株ORF2 348 bp同源性为92.1%~97.5%,为同一基因型,与HEV1、HEV2、HEV3同源性分别为70.7%~77.4%、72.5%~75.7%和71.6%~76.8%,与HEV4型的同源性79.2%~83.9%.4个分离株与HEV4型的代表株T1在同一分支上,属基因4型.与中国大陆6株猪源HEV比较,同源性为79.0%~87.3%,提示中国大陆猪源HEV的基因型比较一致,同属HEV 4型. 相似文献
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为了解广西猪群中戊型肝炎病毒(HEV)基因型,利用套式RT-PCR用对南宁周边猪场采集到的104份新鲜猪粪便进行HEV检测、分离并成功扩增和克隆了11株阳性毒株的ORF2基因部分保守片段.序列测定结果表明,11株HEV ORF2序列自身核苷酸同源性为97.7%~100%,推导编码的氨基酸同源性为97.9%~100%;与4型HEV代表毒株Ch-S-1、Ch-T11、swGX40等的核苷酸同源性为84.6%~90.6%,而与其他各型之间的同源性较低.系统发育进化树结果表明,11株HEV广西株为基因4型,其中,10株HEV为4a亚型,1株毒株为4e亚型.结果表明,广西猪群中流行的HEV均为基因4型,且以4a亚型为优势流行毒株. 相似文献
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《中国兽医学报》2017,(1):54-59
为了了解吉林地区HEV分子背景和流行特征,对2013年采自吉林地区养殖场的毒株编号为Ch-S-1的Ⅳ型戊型肝炎病毒(HEV)的全基因序列进行了分析。通过提取病毒RNA,采用RT-PCR方法分段扩增HEV全长基因,两端采用RACE法扩增,经过序列测定和拼接,利用ClusterX1.81、MEGA3.0、Phylop win 3.0软件分析基因序列。最终得到了HEV Ch-S-1全长基因组(GenBank登录号EF077630,7 261bp),其中ORF1、ORF2和ORF3分别编码1 706,674,114个氨基酸。与人源及猪源各基因型HEV相比,Ch-S-1与基因Ⅰ~Ⅲ型的ORF1片段同源性在78.8%~86.9%之间,而与基因Ⅳ型的ORF1片段同源性在93.7%~97.6%。Ch-S-1与基因Ⅰ~Ⅲ型的ORF2片段同源性在87.5%~92.4%之间,而与基因Ⅳ型的ORF2片段同源性在95.9~98.2%。Ch-S-1与基因Ⅰ~Ⅲ型的ORF3片段同源性在75.2%~84.0%之间,而与基因Ⅳ型的ORF3片段同源性在97.5%~99.2%。结果表明:HEV Ch-S-1全序列的基因结构特征与HEVⅣ型基本一致。 相似文献
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建立针对戊型肝炎病毒(HEV)感染的具有较高敏感性、特异性和稳定性的检验方法,对戊型肝炎(HE)患者和患畜的早期诊断和治疗,以及控制食源性戊肝病毒感染具有重要意义。本文针对目前检测HE病毒及其特异性抗体的不同方法和特点作了综述。 相似文献
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瑞士屠宰场健康猪戊型肝炎和沙门氏菌抗体的血清阳性率调查戊型肝炎病毒(HEV)和沙门氏菌可通过被污染的食物传染给人,猪是它们的储存器。本研究的目标是检测瑞士屠宰场健康猪抗HEVIgG和抗沙门氏菌的抗体血清阳性率(瑞士与其他欧洲国家相比猪群健康情况要好的多,已经根除了地方性肺炎,而且瑞士的活猪进口率很低——低于1%)。基于对200个肉汁样品(每个生产商饲养的3~5个动物的膈肌肌肉制作一个肉汁样品)的检测,抗HEVIgG和抗沙门氏菌抗体阳性样品分别为120个(60%)和8个(4%)。从结果可以看出HEV在瑞士的育肥猪群中高度流行,而沙门氏菌的抗 相似文献
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戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus, HEV)是一种单链、非包膜的RNA病毒,目前可分为8个基因型。作为一种人兽共患病原体,HEV能引起人的急性病毒性肝炎和动物的感染,其主要的传播途径为粪-口传播,也可通过输血和母婴传播。HEV主要在发展中国家流行,而欧美等发达国家也有散发的病例。目前,检测HEV的常用方法是实时荧光定量RT-PCR和酶联免疫吸附试验(ELISA),也有学者利用反转录重组酶聚合酶扩增(RT-RPA)和CRISPR系统等新型检测方法进行HEV检测。在药物治疗方面,可用利巴韦林、干扰素或多烯磷脂酰胆碱(PPC)等化合物治疗HEV引起的感染,也可使用中药单味或复方改善临床症状并作协同治疗。接种疫苗被认为是预防和控制HEV感染的有效手段,但目前仍无有效的HEV体外细胞培养系统,传统的灭活苗和减毒苗无法批量制备。当前HEV疫苗的研究方向主要有基因重组蛋白疫苗、DNA疫苗、联合疫苗和口服疫苗等。接种疫苗是预防戊型肝炎的重要措施,采用切断传播途径为主的综合性预防措施也可控制该病的流行。笔者主要通过对HEV的检测方法、药物治疗和疫苗免疫等方面的研究进展进行归纳和总结,并对... 相似文献
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"绿色壁垒"给我们的提示 总被引:2,自引:0,他引:2
凡事预则立 ,不预则废。这是古已有之的经验之谈。近两年来 ,随着我国加入世贸组织的临近和实现 ,对于“入世”后的机遇和挑战 ,以及如何应对等问题 ,从上到下都在议论 ,都在研究。广泛的谋划 ,对于如何适应新形势 ,在新形势下如何更好地发展经济贸易 ,无疑是很必要、很有益的。但是 ,事物的发展不可能完全按照人们事前的谋划去进行 ,时常会出现始料不及的情况 ,因此 ,需要时时关注新动态 ,研究新事物 ,解决新问题。在“入世”之前 ,人们普遍认为 :劳动密集型产业 ,如农产品加工业 ,将有更大的发展空间。尤其是我国的畜产品、水产品 ,在国际… 相似文献
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Technical aspects of immunohistochemistry 总被引:1,自引:0,他引:1
Ramos-Vara JA 《Veterinary pathology》2005,42(4):405-426
Immunohistochemistry is an integral technique in many veterinary laboratories for diagnostic and research purposes. In the last decade, the ability to detect antigens (Ags) in tissue sections has improved dramatically, mainly by countering the deleterious effects of formaldehyde with antigen retrieval (AR) and increasing sensitivity of the detection systems. In this review, I address these topics and provide an overview of technical aspects of immunohistochemistry, including those related to antibodies (Abs) and Ags, fixation, AR, detection methods, background, and troubleshooting. Microarray technology and the use of rabbit monoclonal Abs in immunohistochemistry are also discussed. 相似文献
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酶联免疫吸附测定技术新进展 总被引:4,自引:0,他引:4
酶联免疫吸附测定(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)技术是1971年由Engvall等建立的一种生物活性物质微量测定新技术,以其灵敏度高、特异性好等优点,在生命科学各领域得到广泛应用。在实际应用过程中,该技术得到不断改进,形成了多种分析方法,并且在检测的灵敏度、特异性、操作简单化以及实时、高效等方面都有很大提高,可以说ELISA是当前应用最广、发展最快的一项技术。本文仅就近几年ELISA的发展情况作一综述。 1 常规ELISA常规ELISA试验方法如间接法、双抗夹心法及竞争法或阻断法仍然被广泛用于诊断各种病毒、… 相似文献
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